于培红；李爱红；白雪梅；崔虹霞；赵蕊；毕晓郁
目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRNA及蛋白水平的干扰效应.结果 转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB mRNA表达量分别是阴性对照组的27.2%,45.6%和29.4%;空白对照组的23.7%,39.7%和25.6%;转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB/β-actin灰度值比值分别是阴性对照组的27.4%,39.4%和30.1%;空白对照组的26.9%,38.7%和29.5%.构建的shRNA表达载体可以使MCF-7细胞中prohibitin基因的mRNA及其蛋白含量降低.结论 构建的针对prohibitin基因的shRNA表达载体,转染MCF-7细胞后可有效抑制细胞中prohibitin的表达,证实构建有效.
作者：赵丽华；何谦；张淑群；安哲；张磊 刊期： 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者：桂俊豪；刘鸿春；王瑞；周瑾；袁兰；杨柳；黄国香；邹红云；余伍忠 刊期： 2011年第06期
目的 通过检测血清HE4(人血清附睾分泌蛋白4),CA125及TSGF(肿瘤特异性生长因子)的表达水平,探讨其在卵巢恶性肿瘤诊断中的应用价值.方法 对46例卵巢恶性肿瘤,62例卵巢良性肿瘤及80例健康体检对照者血清同时应用ELISA法检测HE4,化学发光法检测CA125,全自动生化法检测TSGF水平,分析比较各项标志物单项和联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断中的应用价值.结果 卵巢恶性肿瘤组血清中HE4,CA125和TSGF表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组和健康对照组(卵巢恶性肿瘤组HE4 205.1±186.8 pmol/L,CA125 369±231 U/ml和TSGF98.6±22.5 U/ml;卵巢良性肿瘤组HE4 31.3±16.6 pmol/L,CA125 34.5±23.0 U/ml和TSGF 61.8±13.0 U/ml;健康对照组HE4 29.0±16.3 pmol/L,CA125 12.5±8.9 U/ml和TSGF 60.5±9.1 U/L;P<0.01).卵巢恶性肿瘤组与卵巢良性肿瘤组相比,三项指标的t值分别为2.86,2.78和2.70,差异有统计学意义(P值均<0.01);而良性肿瘤组与健康对照组相比,HE4和TSGF差异无统计学意义(t值分别为0.65和0.58,P值均>0.05),而CA125差异有统计学意义(t=2.19,P<0.05).HE4,CA125和TSGF在卵巢恶性肿瘤组的阳性检出率分别为76.1%,63.0%和82.6%,与卵巢良性肿瘤组和健康对照组相比差异有统计学意义(P值均<0.01);HE4,CA125及TSGF联检,诊断卵巢恶性肿瘤的灵敏度为89.5%,特异度为86.0%,阴性预测值为85.6%,均显著高于各指标的单项检测;对于卵巢恶性肿瘤单项标志物检测,TSGF灵敏度(81.0%)优于HE4(78.5%)及CA125(72.5%),而HE4特异度高(84.5%).结论 HE4与CA125,TSGF联检显著提高了卵巢恶性肿瘤检测的灵敏度和阴性预测值,提高了临床对卵巢恶性肿瘤的诊断能力.
作者：高自颖；甄拴平；刘婷；张树琪；朱海鹏；赵秋剑 刊期： 2011年第06期
目的 研究PTEN蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及间质内微血管计数情况.方法 采用免疫组化S-P法检测50例乳腺浸润性导管癌和10例正常乳腺组织中的PTEN表达,以CD34标记血管内皮细胞,计数微血管密度.结果 浸润性导管癌组织中PTEN的高表达率为46%,与正常乳腺组织比较差异有统计学显著性意义(P<0.01).CD34表达在病理分级中Ⅲ级比较Ⅰ,Ⅱ级的差异有统计学显著性意义(P<0.05);临床分期中,Ⅲ期较Ⅰ,Ⅱ期差异显著(P<0.01).PTEN的表达与微血管密度呈负相关.结论 PTEN表达与微血管密度计数呈负相关,PTEN表达下调的侵袭性较强,易出现浸润和转移,检测PTEN表达在临床预后的评估中有重要作用.
作者：李瀚；张利红 刊期： 2011年第06期
目的 探讨全自动尿液分析仪UF-1000i的检测性能和检测结果的可信度,评估其在尿液标本检测中的应用.方法 选择批内精密度、批间精密度、准确度、携带污染、线性分析、参考区间验证和仪器间结果比对7个参数衡量UF-1000i的检测性能.结果 红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、上皮细胞(EC)、管型(CAST)和细菌(BACT)的批内精密度分别为5.28%～15.28%,2.2%～12.2%,24.4%～31.3%,34.1%～41.7%和4.7%～22.1%;批间精密度分别为3.8%～8.0%,2.0%～7.0%,8.7%～13.0%,14.0%～18.9%和3.4%～10.3%;准确度均值分别为40.1%～192%,36.2%～817.4%,11.5%～82.9%,4.58%～21.2%和200%～747.8%.RBC,WBC和BACT线性相关系数(r2)分别为0.988 8,0.988 8,0.962 7.RBC,BACT的携带污染率分别为0.1%和0.62%;参考区间的R值都>90%.仪器间比对结果RBC,CAST和BACT偏倚较大.结论 批内精密度高值、批间精密度、准确度、线性分析和参考区间验证等结果均符合ISO15189对仪器性能要求,而批内精密度低值、携带污染率和仪器间比对的结果均不符合ISO15189对仪器性能要求.全自动尿液分析仪UF-1000i可以用来进行临床标本的检测.
作者：潘莹；田瑶 刊期： 2011年第06期
目的 研究凝血传感器在检测血浆凝血因子Ⅷ过程中的影响因素,确立佳的检测条件并应用于临床研究.方法 ①用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;②观察在相对湿度50%±2%,缓冲稀释液放置室温29±2℃,缓冲稀释液4℃冰箱内放置5 min,缓冲稀释液37℃水浴箱内放置5 min,标准血浆1∶20稀释的频率变化;③分别观察室温20±2℃,相对湿度61%±2%和38%±2%,标准血浆1∶20稀释的频率变化;④整个检测系统置于室温34±2℃,相对温度48%±2%的环境中用压电石英晶体凝血传感器检测缓冲稀释液配制的1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30和1∶40标准血浆,观察凝集反应的全部过程;⑤随机抽取西京医院住院病人凝血功能检查的常规标本50例,一份用压电石英晶体凝血传感器检测血浆FⅧ活性,另一份用STAGO全自动凝血分析仪同时做平行检测.结果 ①结果显示温度决定反应时间的长短,反应时间由于温度上升而缩短;反应环境湿度大,反应过程充分,反应频率稳定;反应环境湿度小,反应过程不充分导致反应时间缩短.反应时间随着血浆浓度增大而缩短,且随着FⅧ的活性降低而增加,反应过程中因血浆浓度的不同,频率的变化也各不相同.②将检测系统放置室温为34±2℃、相对湿度48%±2%的环境,检测池加入乏Ⅷ血浆、活化部分凝血活酶时间试剂、待测血浆混匀,待频率稳定后,加入CaCl2于检测池,观察反应频率,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点T1,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点T2,计算两点的时间即为反应时间T=T2-T1,查标准曲线得血浆凝血因子Ⅷ的活性.③用该方法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为107.4%,STAGO磁珠检测法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为102.0%,该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r＝0.948).结论 凝血传感器检测血浆凝血因子的适温度为34±2℃、相对湿度48%±2%,压电石英晶体传感器检测血浆凝血因子Ⅷ是一种实时在线检测的方法,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确,并可用于临床检测.
作者：屈玲；郝晓柯；府伟灵 刊期： 2011年第06期
目的 比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在骨髓增生异常综合征(MDS)染色体异常检测中的灵敏度和特异度.方法 40例MDS患者,CCA法采用骨髓短期培养法,核型分析采用R带技术.FISH法采用间期FISH,选取4组探针组合检测-5/5q-和-7/7q-.结果 采用CCA法,5号和7号染色体异常检出率为17.5%,而利用FISH技术,阳性率为35.0%.5号,7号染色体异常检出率分别由7.5%,10.0%升至15.0%,20.0%.两种方法之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异.
作者：唐元艳；梁艳；熊涛；虞咏知；黄知平 刊期： 2011年第06期
乙型肝炎疫苗接种后不同个体的应答效果有差异性,其应答特征与遗传和免疫机制关系尤为密切,明确其具体的作用机制,提高乙肝疫苗的应答率对于有效防护乙型肝炎意义重大.现就近年来国内外对于此方面的研究现状和进展作一综述.
作者：李旭华；陈月；吴文苑 刊期： 2011年第06期
目的 探讨不同年龄、不同性别儿童全血中常量元素(钙、镁)和微量元素(铜、锌、铁)含量及年龄差异,为儿童合理补充常量和微量元素提供参考.方法 采用原子吸收光谱法测定北京地区2010年4 158例0～6岁儿童全血铜、锌、铁、钙、镁5种元素含量,对不同性别间的差异采用t检验进行分析,采用F分析比较年龄间的分布差异.结果 在检测的五项指标中,五个年龄组之间铜、锌、铁、钙、镁含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05),不同年龄组儿童锌、镁、铁含量随年龄增长而升高,钙含量随年龄增长而降低.在性别上铜含量(男性高于女性)差异具有统计学意义(P<0.05).结论 不同年龄组儿童5种元素含量不同,需要摄入量也不同,针对不同年龄段的儿童给予有针对性的营养指导.
作者：于培红；李爱红；白雪梅；崔虹霞；赵蕊；毕晓郁 刊期： 2011年第06期
可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)也称为朊病毒病(prion diseases),是一类可感染人类和多种动物罕见的致死性的神经系统退行性疾病[1].根据疾病的来源不同,朊病毒病可分为自发性、遗传性和医源性三种形式.目前,Prion疾病以每年1～1.5例/百万人口的速度在全球迅速扩展,自从英国国家克雅氏病监测组织(NCJDSU)1996年首次报告新型变异型克雅氏病(variant creutzfeldt-iakob disease,vCJD),并通过病原学和流行病学研究证实vCJD极有可能是由于食用了被疯牛病(BSE)污染的产品而引起的,医学界关于vCJD是否通过尿制品传播的问题一直在争论.2007年Gregori和Murayama首次证明羊瘙痒症仓鼠的尿液含有检测水平的PrPSc,进一步经颅内接种裸鼠可诱导其产生TSEs症状.随着全球确诊的vCJD患者的增加以及临床上尿源性促性腺激素制剂的大量应用,经尿制品传播朊病毒病的可能性越来越大.
作者：景媛媛 刊期： 2011年第06期
目的 探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及CA72-4水平检测对胃癌患者手术治疗前后的临床意义.方法 选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例.采用免疫比浊法检测血清hs-CRP及电化学发光免疫法检测CA72-4在胃癌患者手术治疗前后血清中的含量,并与健康对照组作对比.结果 手术前胃癌患者血清hs-CRP含量为35.90±15.69 mg/L,CA72-4含量为25.51±15.19 U/ml,均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值为8.31,6.65,P<0.01).手术后血清中两指标含量与术前比较差异有统计学意义(t值为6.12,6.23,P<0.01).结论血清hs-CRP及CA72-4水平检测对评估胃癌患者手术治疗前后的病情及观察预后均有重要的临床价值.对比组之间的差异有统计学意义.
作者：王云峰；侯云娇 刊期： 2011年第06期
肿瘤是当今社会影响人类健康的主要疾病之一,随着人们对肿瘤免疫、肿瘤病因及分子机制等研究的深入,肿瘤的基因治疗逐渐走向成熟,从多方面入手,建立个体化特定的肿瘤治疗方案和策略,合理选择基因治疗靶,使基因治疗广泛应用于临床,造福于肿瘤患者.
作者：黄红波；刘庚勋；李正贤 刊期： 2011年第06期
目的 评价可溶性转铁蛋白受体(sTfR)在诊断和鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和慢性疾病性贫血(ACD)及慢性疾病性贫血(ACD)伴缺铁性贫血(IDA)中的应用.方法 比较30例缺铁性贫血患者、20例慢性疾病性贫血患者和20例非贫血的表面健康体检者血清sTfR,血清铁(SI),总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白饱和度(TS)水平,分析IDA的诊断符合率,观察不同贫血患者铁代谢状态.结果 IDA患者sTfR和TIBC明显高于ACD患者,分别为20.12±10.08 μmol/L和3.86±3.01 μmol/L(t=16.27,P<0.01),77.01±13.98 μmol/L和33.78±6.33 μmol/L(t=43.23,P<0.01),SI和TS明显减低,分别为3.16±1.10 μmol/L和11.64±5.82 μmol/L(t=8.48,P<0.01),4.25%±1.76%和34.11%±14.07%(t=29.86,P<0.01);ACD患者sTfR与表面健康的非贫血对照人群无明显差异(t=1.125,P>0.05),但其SI,TIBC和TS则有明显差异(t分别为4.26,27.85,8.21,P<0.01).使用TS和sTfR在IDA诊断中的阳性符合率优于常规使用的SI和TIBC指标.根据ROC曲线分析,sTfR有很高的诊断价值.结论 运用可溶性转铁蛋白受体、血清铁、总铁结合力和转铁蛋白饱和度四项铁状态观察指标,对缺铁性贫血和慢性疾病性贫血的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义,同时sTfR是提示功能性缺铁状态的敏感指标.
作者：杜振东；徐晓萍；彭凤；林炜炜；徐磊 刊期： 2011年第06期
目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法(剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法)制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测.
作者：贾宇臣；王利；郑源强；赵凯；陈琦 刊期： 2011年第06期
目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均＜0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
作者：陈晓燕；曾玲；林茴 刊期： 2011年第06期
目的 探讨抗凝血浆代替血清测定ASO的可行性.方法 随机抽取142例患者静脉血标本,将每例标本3 ml分别注入市售普通试管和肝素锂抗凝管中,于同一仪器上采用免疫散射比浊法对ASO进行检测,并对结果进行统计学分析.结果 肝素锂抗凝血浆与血清两组间结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 可用肝素锂抗凝血浆代替血清测定ASO.
作者：杨萍 刊期： 2011年第06期
目的 探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 细菌培养及药敏试验在老年人肺部感染病原诊断和指导抗生素治疗的价值.方法 常规方法分离培养2010~2011年度91例住院的肺部感染老年患者痰和BALF病原菌,应用半自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行.结果 91例肺部感染老年患者痰和BALF标本共分离出71株铜绿假单胞菌、21株肺炎克雷伯菌、15株大肠埃希菌和14株鲍曼不动杆菌.BALF病原菌检出率为92.3%,明显高于痰培养(76.9%,χ2=10.90,P<0.01).药敏结果显示铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南、头孢吡肟和左氧氟沙星耐药,耐药率分别为81.1%,64.9%,86.5%和75.0%,66.7%,75.0%;铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素敏感;肺炎克雷伯菌对替卡西林/克拉维酸、阿米卡星和亚胺培南敏感.28例病原菌检出阳性结果患者根据药敏结果指导抗生素治疗后BALF和痰培养阳性率分别下降到35.7%和21.4%.结论 BALF细菌培养和药敏试验可明显提高老年肺部感染患者病原诊断率,可更好地指导临床选择有效抗菌药物.
作者：彭旭；倪小勤 刊期： 2011年第06期
目的 探讨全血制备冷沉淀过程中,保存温度、制备时间和融化终点对冷沉淀中Ⅷ因子含量的影响.方法 80例全血平均分4组,A组(4±2)℃温度保存6～8 h,B组室温保存6～8 h,C组(4±2)℃温度保存8～10 h,D组室温保存8～10 h,用希森美康CA-50自动血凝测试仪检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.另外随机选择40例全血制备冷沉淀,(4±2)℃温度保存6～8 h,分为E组(n=20)选择终点为冰块融化至直径4～5 cm、厚度约1 cm,F组(n=20)选择终点为冰块融化至基本无渣,同法检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.结果 A组冷沉淀中Ⅷ因子含量平均为76.45±15.65 IU,B组为52.55±12.54 IU,C组为58.52±17.84 IU,D组为42.26±10.32 IU,ABCD组采用SPSS11.0统计软件Student-Newman-Keuls方差分析比较,结果表明:A组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著高于其他组的含量(P值均<0.05),D组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著低于其他组的含量(P值均<0.05);E组为75.23±12.65 IU,F组为50.64±12.31 IU,EF组采用SPSS11.0统计软件独立样本t检验(Independent Samples t test)比较,结果表明E组冷沉淀中Ⅷ因子含量显著高于F组(t=2.76,P值<0.05).结论 原料血在(4±2)℃温度保存6～8 h制备冷沉淀,其Ⅷ因子含量高;终点为冰块融化至直径4~5 cm、厚度约1 cm时制备冷沉淀,冷沉淀中Ⅷ因子含量高.
作者：李炜华；漆云霞 刊期： 2011年第06期
目的 探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值.方法 对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较.结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均、多形性,而AA患者未见上述特征.Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血频率(87.5%,62.5%,37.5%)较AA患者(20.3%,0%,0%)明显增高(P<0.01).Hypo-MDS患者骨髓切片CD34+细胞(3.87±2.89)%明显高于AA患者(0.13±0.17)%(P<0.01).Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)亦较AA(3.57%)明显增高(P<0.01),且AA均为小克隆异常.结论 长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段.
作者：吕树文；程利梅；那春龙；郑俊；刘艳丛；谢守军 刊期： 2011年第06期
目的 探讨高血糖人群相关项目如全血黏度、三酰甘油(TG )、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与血糖(GLU)之间的关系.方法 采用椎板式血液流变仪测血液黏度,用酶法试剂盒在全自动生化分析仪测定GLU,TG,TC,HDL-C和LDL-C.结果 1 613名人员中高血糖者83人,占体检人数的5.15%,其中男性51人占高血糖者的66.3%,女性32人占高血糖者的33.7%.高血糖组与对照组比较全血黏度低切值(t=6.38 P<0.05),全血黏度中切值(t=4.8 P<0.05),TG(t=5.86 P<0.05),TC(t=6.81 P<0.05)差异有统计学意义;LDL-C(t= 6.0 P<0.05),全血黏度高切值(t=1.51 P>0.05),血浆黏度(t=1.51 P>0.05)和HDL-C(t=1.12 P>0.05)差异无统计学意义.血糖与全血黏度低切值回归方程为Y=0.935X+15.78,r=0.979,与TG回归方程为Y=0.544X-1.765,r=0.801.结论 该次研究的高血糖人群全血黏度低切值、全血黏度中切值,TG,TC和LDL-C值与对照组有差异,而全血黏度高切值、血浆黏度、HDL-C与对照组无差异,且GLU与全血黏度低切值及TG呈正相关,与全血黏度中切值、全血黏度高切值、血液黏度、TC,HDL-C,LDL-C无相关性.
作者：刘艳；郝万鹏 刊期： 2011年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
