学术投稿

人血浆中特异识别脑钠肽前体N端片段位点的探讨

陈晓燕;曾玲;林茴

关键词:人血浆, N端脑钠肽前体, 多克隆抗体, 酶联免疫法
摘要:目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均<0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
现代检验医学杂志相关文献
  • 朊病毒病与尿制品传播研究进展

    可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)也称为朊病毒病(prion diseases),是一类可感染人类和多种动物罕见的致死性的神经系统退行性疾病[1].根据疾病的来源不同,朊病毒病可分为自发性、遗传性和医源性三种形式.目前,Prion疾病以每年1~1.5例/百万人口的速度在全球迅速扩展,自从英国国家克雅氏病监测组织(NCJDSU)1996年首次报告新型变异型克雅氏病(variant creutzfeldt-iakob disease,vCJD),并通过病原学和流行病学研究证实vCJD极有可能是由于食用了被疯牛病(BSE)污染的产品而引起的,医学界关于vCJD是否通过尿制品传播的问题一直在争论.2007年Gregori和Murayama首次证明羊瘙痒症仓鼠的尿液含有检测水平的PrPSc,进一步经颅内接种裸鼠可诱导其产生TSEs症状.随着全球确诊的vCJD患者的增加以及临床上尿源性促性腺激素制剂的大量应用,经尿制品传播朊病毒病的可能性越来越大.

    作者:景媛媛 刊期: 2011年第06期

  • 乙型肝炎疫苗接种无弱应答原因与机制研究进展

    乙型肝炎疫苗接种后不同个体的应答效果有差异性,其应答特征与遗传和免疫机制关系尤为密切,明确其具体的作用机制,提高乙肝疫苗的应答率对于有效防护乙型肝炎意义重大.现就近年来国内外对于此方面的研究现状和进展作一综述.

    作者:李旭华;陈月;吴文苑 刊期: 2011年第06期

  • 血清cystatin C,IgA/C3及IgA/C3检测在IgA肾病诊断及预后评估中的临床价值

    目的 探讨IgA肾病患者血清cystatin C,IgA和IgA/C3比值在IgA肾病(IgAN)的诊断及预后中的临床价值.方法 应用乳胶增强散射比浊法测定62例IgAN患者和58例非IgAN患者血清cystatin C,IgA及C3含量,同时对检测结果进行分析.结果 ①IgAN患者血清cystatin C水平[(1.26±0.46)mg/L] 与非IgAN患者血清cystatin C[(1.66±1.17)mg/L] 水平比较,差异有统计学意义(t=-2.50,P<0.05);IgAN患者血清IgA/C3比值(2.59±1.41)显著高于非IgAN患者(2.07±1.03),差异亦有统计学意义(t=2.33,P<0.05);而血清IgA含量[(2.44±1.04)g/L]和C3 含量[(1.07±0.27)g/L] 与非IgAN患者比较差异均无统计学显著性意义;② Lee氏分级为Ⅲ,Ⅳ,V级的IgAN患者血清IgA水平及IgA/C3比值均显著高于Lee氏I和Ⅱ级,差异有统计学意义(t=-2.21,P<0.05;t=-2.04,P<0.05);③IgAN患者IgA水平>3.0 g/L和IgA/C3比值≥2时诊断IgAN的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及Youden指数YI分别为68.42%,51.48%,20.97%,89.66%,0.20和59.68%,56.90%,59.68%,56.90%,0.17.结论 血清IgA/C3比值联合IgA及cystatin C水平可作为IgAN鉴别诊断、病情判断、预后评估的参考指标;血清cystatin C可能是反映IgA肾病中肾小球滤过功能更为敏感的指标.

    作者:彭道荣;王菁;邢瑞青;杨玉琪;张涛;吴永昌;程晓东;张小宁 刊期: 2011年第06期

  • 家蝇胚胎细胞抗菌肽对黑色素瘤细胞A375抑制作用的实验研究

    目的 研究家蝇胚胎细胞MDEC-07114抗菌肽对黑色素瘤细胞A375的抑制作用.方法 利用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞MDEC-07114提取抗菌肽.将家蝇胚胎细胞抗菌肽分为40,80,160,320和640 μg/ml五个实验组,同时以PBS和培养基作为正常对照组.采用MTT比色法测定不同浓度抗菌肽作用下细胞生长曲线,流式细胞术观察抗菌肽对黑色素瘤细胞A375周期及凋亡的影响.结果 ①在不同浓度家蝇胚胎细胞抗菌肽作用下,黑色素瘤细胞A375的生长受到明显的抑制,药物浓度越高、作用时间越长,对细胞的抑制作用越强.②各浓度组抗菌肽引起A375细胞的G2/M期升高,高浓度组(>160 μg/ml)可引起G0/G1期降低,PI明显升高,与正常对照组相比差异具有统计学显著性意义(F=214.89,P<0.05).与正常对照组相比,各实验组引起的A375细胞凋亡率差异无统计学显著性意义(F=14.17,P>0.05).结论 家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强.家蝇胚胎细胞抗菌肽对A375细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育.

    作者:张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠 刊期: 2011年第06期

  • 化学发光免疫法检测B型利钠肽的分析性能评价

    目的 验证西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的精密度及判断准确度性能的可接受性,以及探讨BNP的分析灵敏度及BNP的适血液标本类型.方法 参照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件和相关文献,对ADVIA Centaur 240 检测BNP的精密度和准确度进行评价.分别采用肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和干燥血清管进行抽血,样本在不同时间进行BNP检测,比较BNP的测定值与变化趋势,判断BNP的适血液标本类型.通过EP17-A文件确定BNP检测的空白限(limit of blank,LoB)、检测低限(limit of detection,LoD)和功能灵敏度(functional sensitivity,FS).结果 ADVIA Centaur 240 化学发光免疫检测系统检测BNP精密度的批内CV和总CV均为>3.5%,准确度与定值校准品的偏差为1.1%~2.6%,BNP检测的适血液标本类型为EDTA抗凝血浆,LoB,LoD及FS分别为0.86,3.61和4.64 pg/ml.结论 西门子ADVIA Centaur 240化学发光检测系统检测BNP的主要分析性能均达到了厂商声明的性能和有关的质量要求.佳血液标本类型的选择及建立临床实验室的LoB,LoD和FS可为临床提供更加准确可信的检测值.

    作者:李飞;王伟佳;温冬梅;索明环;欧阳能良;严海忠;阚丽娟;张秀明 刊期: 2011年第06期

  • 老年人肺部感染支气管肺泡灌洗液细菌培养及药敏的意义

    目的 探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 细菌培养及药敏试验在老年人肺部感染病原诊断和指导抗生素治疗的价值.方法 常规方法分离培养2010~2011年度91例住院的肺部感染老年患者痰和BALF病原菌,应用半自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行.结果 91例肺部感染老年患者痰和BALF标本共分离出71株铜绿假单胞菌、21株肺炎克雷伯菌、15株大肠埃希菌和14株鲍曼不动杆菌.BALF病原菌检出率为92.3%,明显高于痰培养(76.9%,χ2=10.90,P<0.01).药敏结果显示铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南、头孢吡肟和左氧氟沙星耐药,耐药率分别为81.1%,64.9%,86.5%和75.0%,66.7%,75.0%;铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素敏感;肺炎克雷伯菌对替卡西林/克拉维酸、阿米卡星和亚胺培南敏感.28例病原菌检出阳性结果患者根据药敏结果指导抗生素治疗后BALF和痰培养阳性率分别下降到35.7%和21.4%.结论 BALF细菌培养和药敏试验可明显提高老年肺部感染患者病原诊断率,可更好地指导临床选择有效抗菌药物.

    作者:彭旭;倪小勤 刊期: 2011年第06期

  • 人血浆中特异识别脑钠肽前体N端片段位点的探讨

    目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均<0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.

    作者:陈晓燕;曾玲;林茴 刊期: 2011年第06期

  • 血清HE4,CA125与TSGF联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断中的应用研究

    目的 通过检测血清HE4(人血清附睾分泌蛋白4),CA125及TSGF(肿瘤特异性生长因子)的表达水平,探讨其在卵巢恶性肿瘤诊断中的应用价值.方法 对46例卵巢恶性肿瘤,62例卵巢良性肿瘤及80例健康体检对照者血清同时应用ELISA法检测HE4,化学发光法检测CA125,全自动生化法检测TSGF水平,分析比较各项标志物单项和联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断中的应用价值.结果 卵巢恶性肿瘤组血清中HE4,CA125和TSGF表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组和健康对照组(卵巢恶性肿瘤组HE4 205.1±186.8 pmol/L,CA125 369±231 U/ml和TSGF98.6±22.5 U/ml;卵巢良性肿瘤组HE4 31.3±16.6 pmol/L,CA125 34.5±23.0 U/ml和TSGF 61.8±13.0 U/ml;健康对照组HE4 29.0±16.3 pmol/L,CA125 12.5±8.9 U/ml和TSGF 60.5±9.1 U/L;P<0.01).卵巢恶性肿瘤组与卵巢良性肿瘤组相比,三项指标的t值分别为2.86,2.78和2.70,差异有统计学意义(P值均<0.01);而良性肿瘤组与健康对照组相比,HE4和TSGF差异无统计学意义(t值分别为0.65和0.58,P值均>0.05),而CA125差异有统计学意义(t=2.19,P<0.05).HE4,CA125和TSGF在卵巢恶性肿瘤组的阳性检出率分别为76.1%,63.0%和82.6%,与卵巢良性肿瘤组和健康对照组相比差异有统计学意义(P值均<0.01);HE4,CA125及TSGF联检,诊断卵巢恶性肿瘤的灵敏度为89.5%,特异度为86.0%,阴性预测值为85.6%,均显著高于各指标的单项检测;对于卵巢恶性肿瘤单项标志物检测,TSGF灵敏度(81.0%)优于HE4(78.5%)及CA125(72.5%),而HE4特异度高(84.5%).结论 HE4与CA125,TSGF联检显著提高了卵巢恶性肿瘤检测的灵敏度和阴性预测值,提高了临床对卵巢恶性肿瘤的诊断能力.

    作者:高自颖;甄拴平;刘婷;张树琪;朱海鹏;赵秋剑 刊期: 2011年第06期

  • 临床常见革兰阳性球菌的耐药状况分析

    目的 了解革兰阳性球菌在临床标本中的分离与耐药情况,指导临床合理用药.方法 收集送检标本中分离的病原菌是革兰阳性球菌的菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,药敏试验采用K-B法,利用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离革兰阳性球菌445株,葡萄球菌占主导地位,其中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)133株(29.9%);肠球菌呈多重耐药状态,并且出现屎肠球菌的万古霉素耐药菌株;替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺对革兰阳性球菌均显示出强大的抗菌活性.结论 细菌耐药性严重,耐万古霉素的肠球菌也已经出现,临床医生和药师应重视耐药监控,预防耐药菌株的产生及流行.

    作者:蔡璇;施菁玲;李从荣;孙端阳;李娟 刊期: 2011年第06期

  • 可溶性转铁蛋白受体对功能性缺铁代谢的鉴别应用

    目的 评价可溶性转铁蛋白受体(sTfR)在诊断和鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和慢性疾病性贫血(ACD)及慢性疾病性贫血(ACD)伴缺铁性贫血(IDA)中的应用.方法 比较30例缺铁性贫血患者、20例慢性疾病性贫血患者和20例非贫血的表面健康体检者血清sTfR,血清铁(SI),总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白饱和度(TS)水平,分析IDA的诊断符合率,观察不同贫血患者铁代谢状态.结果 IDA患者sTfR和TIBC明显高于ACD患者,分别为20.12±10.08 μmol/L和3.86±3.01 μmol/L(t=16.27,P<0.01),77.01±13.98 μmol/L和33.78±6.33 μmol/L(t=43.23,P<0.01),SI和TS明显减低,分别为3.16±1.10 μmol/L和11.64±5.82 μmol/L(t=8.48,P<0.01),4.25%±1.76%和34.11%±14.07%(t=29.86,P<0.01);ACD患者sTfR与表面健康的非贫血对照人群无明显差异(t=1.125,P>0.05),但其SI,TIBC和TS则有明显差异(t分别为4.26,27.85,8.21,P<0.01).使用TS和sTfR在IDA诊断中的阳性符合率优于常规使用的SI和TIBC指标.根据ROC曲线分析,sTfR有很高的诊断价值.结论 运用可溶性转铁蛋白受体、血清铁、总铁结合力和转铁蛋白饱和度四项铁状态观察指标,对缺铁性贫血和慢性疾病性贫血的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义,同时sTfR是提示功能性缺铁状态的敏感指标.

    作者:杜振东;徐晓萍;彭凤;林炜炜;徐磊 刊期: 2011年第06期

  • 流式细胞术细胞周期分析小鼠肺组织样本制备方法的优化研究

    目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法(剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法)制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测.

    作者:贾宇臣;王利;郑源强;赵凯;陈琦 刊期: 2011年第06期

  • LIAISON Diasorin化学发光仪检测甲状腺激素的性能验证

    目的 评价化学发光仪测定甲状腺激素进行仪器性能验证.方法 用LIAISON Diasorin化学发光仪测定甲状腺激素T3,T4,FT3,FT4和TSH的含量,分别计算批内精密度、批间精密度和携带污染率.结果 T3,T4,FT3,FT4和TSH的批内精密度分别是6.49%,4.07%,3.02%,3.70%和5.39%;批间精密度分别是7.32%,6.88%,7.32%,5.74%和10.95%;携带污染率分别是-4.20%,-4.04%,0.21%,-0.65%和0.05%.结论 LIAISON Diasorin化学发光仪检测系统测定甲状腺功能具有重复性好、携带污染率低等优点,符合厂家声明的结果.

    作者:贾淑芬 刊期: 2011年第06期

  • 微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体能力的研究

    目的 研究微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体的能力.方法 采用微柱凝胶抗球蛋白技术对127例含有红细胞同种抗体的样本进行检测,使用经典的试管抗球蛋白法平行检测,比对两种方法的检测结果.结果 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率为98.4%,试管抗球蛋白法的检出率为80.3%.其中,试管抗球蛋白法对抗-D,-E,-C,-c,-e,-C+e,-E+c,-Mur,-Dia,-Dib,-Fyb,-Jka,-Jkb,-Lea和-P1抗体均能检出,但对于MNS血型系统抗M抗体的检出率仅为36.4%,对未知抗体特异性的冷抗体检出率为57.7%;而微柱凝胶抗球蛋白法对所有样本包含的红细胞同种抗体均能检出,除了Kidd血型系统,漏检率为33.3%.结论 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率高于试管抗球蛋白法,但是可能会漏检Kidd血型系统同种抗体,建议实验室在使用微柱凝胶抗球蛋白法的同时,应结合试管抗球蛋白方法,可以更有效地检出抗体,特别是输血前相容性试验.

    作者:苏宇清;喻琼;梁延连 刊期: 2011年第06期

  • 凝血传感器检测血浆凝血因子Ⅷ的影响因素分析及临床应用研究

    目的 研究凝血传感器在检测血浆凝血因子Ⅷ过程中的影响因素,确立佳的检测条件并应用于临床研究.方法 ①用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;②观察在相对湿度50%±2%,缓冲稀释液放置室温29±2℃,缓冲稀释液4℃冰箱内放置5 min,缓冲稀释液37℃水浴箱内放置5 min,标准血浆1∶20稀释的频率变化;③分别观察室温20±2℃,相对湿度61%±2%和38%±2%,标准血浆1∶20稀释的频率变化;④整个检测系统置于室温34±2℃,相对温度48%±2%的环境中用压电石英晶体凝血传感器检测缓冲稀释液配制的1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30和1∶40标准血浆,观察凝集反应的全部过程;⑤随机抽取西京医院住院病人凝血功能检查的常规标本50例,一份用压电石英晶体凝血传感器检测血浆FⅧ活性,另一份用STAGO全自动凝血分析仪同时做平行检测.结果 ①结果显示温度决定反应时间的长短,反应时间由于温度上升而缩短;反应环境湿度大,反应过程充分,反应频率稳定;反应环境湿度小,反应过程不充分导致反应时间缩短.反应时间随着血浆浓度增大而缩短,且随着FⅧ的活性降低而增加,反应过程中因血浆浓度的不同,频率的变化也各不相同.②将检测系统放置室温为34±2℃、相对湿度48%±2%的环境,检测池加入乏Ⅷ血浆、活化部分凝血活酶时间试剂、待测血浆混匀,待频率稳定后,加入CaCl2于检测池,观察反应频率,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点T1,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点T2,计算两点的时间即为反应时间T=T2-T1,查标准曲线得血浆凝血因子Ⅷ的活性.③用该方法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为107.4%,STAGO磁珠检测法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为102.0%,该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r=0.948).结论 凝血传感器检测血浆凝血因子的适温度为34±2℃、相对湿度48%±2%,压电石英晶体传感器检测血浆凝血因子Ⅷ是一种实时在线检测的方法,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确,并可用于临床检测.

    作者:屈玲;郝晓柯;府伟灵 刊期: 2011年第06期

  • 肝素锂抗凝血浆与血清测定ASO的结果分析

    目的 探讨抗凝血浆代替血清测定ASO的可行性.方法 随机抽取142例患者静脉血标本,将每例标本3 ml分别注入市售普通试管和肝素锂抗凝管中,于同一仪器上采用免疫散射比浊法对ASO进行检测,并对结果进行统计学分析.结果 肝素锂抗凝血浆与血清两组间结果比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 可用肝素锂抗凝血浆代替血清测定ASO.

    作者:杨萍 刊期: 2011年第06期

  • 乌鲁木齐地区高血糖人群相关检验项目结果分析

    目的 探讨高血糖人群相关项目如全血黏度、三酰甘油(TG )、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与血糖(GLU)之间的关系.方法 采用椎板式血液流变仪测血液黏度,用酶法试剂盒在全自动生化分析仪测定GLU,TG,TC,HDL-C和LDL-C.结果 1 613名人员中高血糖者83人,占体检人数的5.15%,其中男性51人占高血糖者的66.3%,女性32人占高血糖者的33.7%.高血糖组与对照组比较全血黏度低切值(t=6.38 P<0.05),全血黏度中切值(t=4.8 P<0.05),TG(t=5.86 P<0.05),TC(t=6.81 P<0.05)差异有统计学意义;LDL-C(t= 6.0 P<0.05),全血黏度高切值(t=1.51 P>0.05),血浆黏度(t=1.51 P>0.05)和HDL-C(t=1.12 P>0.05)差异无统计学意义.血糖与全血黏度低切值回归方程为Y=0.935X+15.78,r=0.979,与TG回归方程为Y=0.544X-1.765,r=0.801.结论 该次研究的高血糖人群全血黏度低切值、全血黏度中切值,TG,TC和LDL-C值与对照组有差异,而全血黏度高切值、血浆黏度、HDL-C与对照组无差异,且GLU与全血黏度低切值及TG呈正相关,与全血黏度中切值、全血黏度高切值、血液黏度、TC,HDL-C,LDL-C无相关性.

    作者:刘艳;郝万鹏 刊期: 2011年第06期

  • 大鼠脑缺血后脑红蛋白对Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA表达的影响

    目的 观察脑缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)后缺血半暗区脑红蛋白(neuroglobin,NGB)表达与细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)及细胞凋亡蛋白酶3(Caspase-3)的相关性,以阐明NGB在脑缺血早期是否通过Cyt-C途径抑制Caspase-3发挥脑保护作用.方法 大鼠随机分为假手术对照(sham)组(n=6)、CIR组、干预(IV)组和干预对照(IVC)组(n=6).其中CIR组制作左侧局灶性脑缺血模型(MCAO)后2 h再灌注,然后按断头时程不同又分为再灌注后1,6,12,24h和72 h五个亚组(n=6).IV组采用立体定向技术将重组人NGB注入左侧尾壳核30 min后制作模型,方法同CIR组,按断头时程不同又分为再灌注后1,6,12,24 h和72 h五个亚组(n=6),sham和IVC于24 h断头.制作脑组织匀浆和标本,测定NGBmRNA,Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA含量并行HE染色.结果 ①CIR组梗死灶体积随着时间逐步增大,24h~72h达大(F=6.771,P=0.001),经重组人NGB干预后,IV组各亚组梗死体积均增大(t检验比较,P值均<0.05).②CIR组在大脑皮质及尾壳核部NGBmRNA于再灌注损伤1 h后逐步升高,24 h达高峰,然后逐步下降(F=85.578,P=0.000),而Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA在再灌注损伤1h后已经增多,12 h~24 h增高达到高峰,然后逐步下降(Cyt-CmRNA:F=27.378,P=0.000,Caspase-3mRNA:F=47.622,P=0.000).重组人NGB注入尾壳核区后,再灌注损伤早期Cyt-CmRNA明显减少(1 h:t=3.773,P=0.013;6 h:t=6.037,P=0.002;12 h:t=4.972,P=0.004;24 h:t=-1.249,P=0.267;72 h:t=-1.724,P=0.166);Caspase-3 mRNA表达亦明显减少(1 h:t=2.964,P=0.031;6 h:t=3.053,P=0.028;12 h:t=4.508,P=0.006;24 h:t=5.859,P=0.002;72 h:t=-1.139,P=0.306).结论 脑缺血后NGB在缺血半暗区早期升高,然后逐步下降,可能通过细胞色素C途径抑制Caspase-3的表达,发挥脑保护作用.

    作者:李明;储照虎;马领松;周曾;胡成伍;赵守才 刊期: 2011年第06期

  • 乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8测定的临床价值

    目的 为乳腺癌诊断提供血清学新尝试.方法 60例乳腺癌患者均来自于2009年3月~2010年3月南通市肿瘤医院病例,均为女性,年龄27~78岁,平均年龄57岁.所有患者均经手术病理证实且术前未经过化疗、放疗、内分泌及生物治疗.乳腺良性患者女性30例,年龄21~63岁,平均年龄36岁.对照组:健康体检者女性40例,年龄19~47岁,平均年龄33岁.所有研究对象近半年内未服用过免疫调节剂和激素类药物.采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8.结果 对照组、乳腺良性患者组以及乳腺癌组三者之间差异有统计学显著性意义(P<0.05);乳腺癌血清IL-6和IL-8水平与分期以及预后有一定的关系(P<0.05).结论 IL-6和IL-8可能参与了乳腺癌发生、发展的全过程,它的变化可间接反映乳腺癌的生物学行为和预后,对其监测具有重要的临床意义.

    作者:李明;张金业;林兰;刘继斌 刊期: 2011年第06期

  • 丙肝患者血清HCV RNA与TNF-α之间的关系及其与肝损伤程度相关性的研究

    目的 研究不同临床分型HCV感染者血清中HCV RNA与TNF-α之间的差异,探讨HCV RNA和TNF-α含量与肝损伤程度的关系.方法 收集HCV感染者45例,其中慢性肝炎轻度组11例,慢性肝炎重度组14例,肝硬化组11例,肝癌组9例,健康对照组20例.用ELISA法检测HCV IgG和TNF-α,制作标准曲线计算TNF-α含量.荧光定量PCR方法检测HCV RNA含量.血清ALT水平用HITACHI 7600型全自动生化分析仪采用速率法进行检测.HCV感染者血清HCV-RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT水平与正常对照组比较用t检验,各组之间的TNF-α含量和ALT水平及lg HCV RNA比较用方差分析,HCV RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT之间的相关性用直线相关性分析,用相关系数(r)表示.结果 丙肝患者各组之间ALT水平和TNF-α含量差异有统计学意义,F值分别为9.75和14.69,P<0.001;用t检验得出:各组丙肝患者血清TNF-α水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为6.596,9.857,6.673和8.358;各组患者血清ALT水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为12.031,6.61,3.971和6.857;慢性肝炎重度组、肝癌组与慢性肝炎轻度组之间ALT含量比较,差异有统计学意义(P<0.05),t值分别为3.242和3.246;慢性肝炎重度组和肝癌组HCV RNA的对数值分别为6.05±0.8和5.76±1.05,均低于慢性肝炎轻度组,t值分别为2.573和2.393,差异有统计学意义(P<0.05).ALT水平与TNF-α含量之间呈正相关,r=0.341,P<0.05.结论 不同临床类型HCV感染者血清中TNF-α和ALT含量存在差异,慢性肝炎轻度HCV感染者ALT水平明显低于其他临床类型组,HCV感染者血清ALT水平和TNF-α含量之间呈正相关.

    作者:董西华;周霞;周立平;郑莹 刊期: 2011年第06期

  • 血细胞分析仪白细胞分类计数量值溯源性的建立

    目的 应用参考方法[1]对血细胞分析仪白细胞分类计数(DIFF)进行校准,建立其量值溯源性.方法 采用手工目视显微镜法作为白细胞分类计数的参考方法对新鲜全血进行定值,以确定靶值;用该手工定值的新鲜全血对五台血液分析仪的DIFF参数进行校准,建立白细胞分类计数量值溯源性;校准完毕后进行新鲜全血比对试验.结果 DIFF参数手工分类靶值:NEUT,LYMPH,MONO,EOS和BASO分别为67.25%,26.58%,3.92%,2.00%和0.25%,五台仪器检测结果与手工分类靶值相比较,均在可信允许范围内;新鲜全血比对结果符合标准要求.结论 应用参考方法校准血细胞分析仪白细胞分类计数,可以实现其检测结果具有溯源性和准确性,同时可促进不同临床实验室DIFF检测结果互认.白细胞手工分类计数的准确性直接影响仪器分类参数校准的效果,实验室应定期进行人员手工分类能力比对.

    作者:李明勇;李焱鑫;陈梅;张春平;李玉芹;李慧;王仁胜;周玉 刊期: 2011年第06期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院