董西华；周霞；周立平；郑莹
目的 通过建立37℃α-淀粉酶(α-Amy)参考方法,对酶校准物定值,探讨血清α-Amy测定结果的准确性与可比性.方法 依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考测量程序建立α-Amy酶催化活性参考方法,测定α-Amy有证参考物(CRM)IRMM-456,验证其准确性,并对其精密度进行评价.同时用参考方法对制备的酶校准物进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案留取40份不同α-Amy浓度范围的人血清,采用A~E五种临床常规检测组合在使用自制酶校准物校准前后测定α-Amy,分别与参考方法进行比较,计算这五种常规方法在使用自制酶校准物校准前后测定结果与参考方法的相对偏倚及相关系数.结果 用参考方法测定IRMM-456结果是547.2 U/L,在其给定的546±18 U/L范围内.所建立的37℃α-Amy参考方法总CV<0.5%.用制备的酶校准物校准前后的五种常规方法和参考方法进行比较,相关性均良好(r2>0.98),校准前后的相对偏倚A方法从30%变为10%以下;B方法从30%变为15%以下;C方法从35%变为10%以下;D方法从20%变为8%以下;E方法从35%变为10%以下.结论 所建立的37℃α-Amy参考方法准确可靠,采用参考方法为酶校准物定值后校准常规方法,可以提高血清α-Amy测定结果的准确度和可比性.
作者：高学慧；齐志宏；秦续珍；赵芳；叶阿里；徐二木；邱玲；宋耀虹 刊期： 2011年第06期
目的 综述基于高分辨熔解分析(HRM)的基因分型新技术.方法 介绍无标记探针、弹回引物、隐蔽探针、温度开关PCR、等位基因特异延伸PCR和低变性温度下共扩增PCR等技术的基本原理并评价其适用性.结果 这些新技术不仅避免了产物污染,提高了HRM基因分型的准确性和敏感度,而且拓展了HRM的应用范围.结论 基于HRM的基因分型新技术有望成为临床分子诊断的新方法.
作者：李菲菲；尤崇革 刊期： 2011年第06期
目的 观察异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell,Allo-HSCT)病人血清中碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)术前术后的变化及其与预后的关系.方法 检测45例中南大学湘雅医院异基因干细胞移植病人(即观察组)和65例该院体检正常者(即对照组)血清中AKP和γ-GT的水平,并与对照组比较,分析观察组术前、术后外周血清AKP和γ-GT水平的变化及与预后的相关性.结果 ①移植前,观察组的AKP平均浓度(88.93±48.09)u/L和γ-GT平均浓度(24.37±16.77)u/L与对照组的AKP平均浓度(83.25±14.36)u/L和γ-GT(24.08±9.78)u/L平均浓度均正常,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);②预后良好的观察组移植后的AKP平均浓度(80.11±17.62)u/L和γ-GT平均浓度(36.87±24.70)u/L均正常,与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05);③预后差的观察组移植后的AKP平均浓度(183.87±220.24)u/L和γ-GT平均浓度(154.39±208.01)u/L明显升高,与移植前比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 患者血清中AKP和γ-GT水平可作为异基因造血干细胞移植术后预后判断的生化指标,对临床治疗及指导用药有一定辅助意义.
作者：谢卫民；张婷婷；钟白云 刊期： 2011年第06期
临床实验室检验结果的固有分析变异分解为:分析前变异(sP),分析变异(sA),个体内生物学变异(s1).结合统计学原理计算各检验项目的 参考变化值(RCV),然后与实际变化差值比较判断患者一系列的检验结果间是否有显著改变.结合生物学变异探索评价患者一系列检验结果改变的显著性的方法,可以帮助临床正确解读患者的检验结果.临床实验室可以使用RCV和变化差值显著性概率为系列检验结果显著改变的临床监测提供客观的指南和帮助.
作者：胡丽涛；何法霖；王薇；王治国 刊期： 2011年第06期
目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRNA及蛋白水平的干扰效应.结果 转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB mRNA表达量分别是阴性对照组的27.2%,45.6%和29.4%;空白对照组的23.7%,39.7%和25.6%;转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB/β-actin灰度值比值分别是阴性对照组的27.4%,39.4%和30.1%;空白对照组的26.9%,38.7%和29.5%.构建的shRNA表达载体可以使MCF-7细胞中prohibitin基因的mRNA及其蛋白含量降低.结论 构建的针对prohibitin基因的shRNA表达载体,转染MCF-7细胞后可有效抑制细胞中prohibitin的表达,证实构建有效.
作者：赵丽华；何谦；张淑群；安哲；张磊 刊期： 2011年第06期
目的 通过比较各组人群血清胸苷激酶1(sTK1)和前列腺特异性抗原(PSA)浓度,评价血清胸苷激酶1在前列腺癌早期筛查和诊断中的价值.方法 应用增强发光免疫点印迹法和化学发光法检测60例正常人,50例前列腺增生(BPH)患者和30例前列腺癌(PCa)患者的sTK1,游离前列腺特异性抗原(fPSA)和总前列腺特异性抗原(tPSA)浓度,并计算fPSA/tPSA比值.结果 正常对照组、BPH组和PCa组的sTK1,tPSA和fPSA/tPSA比值分别为0.40±0.21 pmol/L,1.7±0.95 ng/ml,0.38±0.24;1.24±1.02 pmol/L,8.19±8.11 ng/ml,0.22±0.12和1.06±0.67 pmol/L,47.32±40.15 ng/ml,0.09±0.08.三组人群sTK1浓度总体差异有统计学意义(F=21.67,P<0.01),正常对照组与BPH组和PCa组比较,sTK1浓度差异均有统计学意义(P<0.01),BPH组和PCa组的sTK1浓度均较正常对照组升高,但BPH组与PCa组sTK1浓度差异无统计学意义(P>0.05).三组人群血清tPSA浓度及fPSA/tPSA比值差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.01),其中PCa组的血清tPSA浓度明显高于正常对照组和BPH组,而fPSA/tPSA比值则小于其他两组.结论 血清TK1在前列腺癌早期筛查和诊断中具有一定的警示作用,但其临床应用价值不如PSA.
作者：周建平；张新利；王春梅 刊期： 2011年第06期
目的 研究凝血传感器在检测血浆凝血因子Ⅷ过程中的影响因素,确立佳的检测条件并应用于临床研究.方法 ①用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;②观察在相对湿度50%±2%,缓冲稀释液放置室温29±2℃,缓冲稀释液4℃冰箱内放置5 min,缓冲稀释液37℃水浴箱内放置5 min,标准血浆1∶20稀释的频率变化;③分别观察室温20±2℃,相对湿度61%±2%和38%±2%,标准血浆1∶20稀释的频率变化;④整个检测系统置于室温34±2℃,相对温度48%±2%的环境中用压电石英晶体凝血传感器检测缓冲稀释液配制的1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30和1∶40标准血浆,观察凝集反应的全部过程;⑤随机抽取西京医院住院病人凝血功能检查的常规标本50例,一份用压电石英晶体凝血传感器检测血浆FⅧ活性,另一份用STAGO全自动凝血分析仪同时做平行检测.结果 ①结果显示温度决定反应时间的长短,反应时间由于温度上升而缩短;反应环境湿度大,反应过程充分,反应频率稳定;反应环境湿度小,反应过程不充分导致反应时间缩短.反应时间随着血浆浓度增大而缩短,且随着FⅧ的活性降低而增加,反应过程中因血浆浓度的不同,频率的变化也各不相同.②将检测系统放置室温为34±2℃、相对湿度48%±2%的环境,检测池加入乏Ⅷ血浆、活化部分凝血活酶时间试剂、待测血浆混匀,待频率稳定后,加入CaCl2于检测池,观察反应频率,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点T1,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点T2,计算两点的时间即为反应时间T=T2-T1,查标准曲线得血浆凝血因子Ⅷ的活性.③用该方法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为107.4%,STAGO磁珠检测法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为102.0%,该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r＝0.948).结论 凝血传感器检测血浆凝血因子的适温度为34±2℃、相对湿度48%±2%,压电石英晶体传感器检测血浆凝血因子Ⅷ是一种实时在线检测的方法,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确,并可用于临床检测.
作者：屈玲；郝晓柯；府伟灵 刊期： 2011年第06期
目的 研究胸腔积液细胞抑癌基因PTEN(phosphatase and tension homology deleted on chromosome ten,PTEN) 基因突变高发区外显子5,7,8突变率与肺癌临床分期、病理组织学分级和病理类型的相关性.方法 研究组为52例伴有胸腔积液的肺癌患者,对照组为40例伴有胸腔积液的结核性胸膜炎和其他胸膜炎患者,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,对胸腔积液细胞PTEN基因外显子5,7,8进行突变分析.结果 52例肺癌胸腔积液细胞中检测到PTEN基因突变7例,均为外显子5突变,突变率为13.5%(7/52);40例良性胸腔积液中未检测到PTEN基因突变,二者差异有统计学意义(P<0.05).52例肺癌患者不同临床分期中,Ⅲ期突变率为3.4%(1/29),Ⅳ期突变率为26%(6/23),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理组织学分级中,低分化癌突变率为31%(5/16),中、高分化癌突变率为5.6%(2/36),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理分型中,腺癌突变率为10.7%(3/28)、鳞癌突变率为14%(2/14)、小细胞肺癌突变率为20%(2/10),三者差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌胸腔积液细胞中存在PTEN基因突变,临床分期越晚、病理组织学分级越低,PTEN基因突变率越高,但与肺癌病理类型无关.PTEN基因突变可以作为有价值的肿瘤标记物用于恶性胸腔积液的诊断,可作为判断肺癌预后的一项指标.
作者：车德海；张华；魏海波；于雁 刊期： 2011年第06期
目的 探讨不同年龄、不同性别儿童全血中常量元素(钙、镁)和微量元素(铜、锌、铁)含量及年龄差异,为儿童合理补充常量和微量元素提供参考.方法 采用原子吸收光谱法测定北京地区2010年4 158例0～6岁儿童全血铜、锌、铁、钙、镁5种元素含量,对不同性别间的差异采用t检验进行分析,采用F分析比较年龄间的分布差异.结果 在检测的五项指标中,五个年龄组之间铜、锌、铁、钙、镁含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05),不同年龄组儿童锌、镁、铁含量随年龄增长而升高,钙含量随年龄增长而降低.在性别上铜含量(男性高于女性)差异具有统计学意义(P<0.05).结论 不同年龄组儿童5种元素含量不同,需要摄入量也不同,针对不同年龄段的儿童给予有针对性的营养指导.
作者：于培红；李爱红；白雪梅；崔虹霞；赵蕊；毕晓郁 刊期： 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者：桂俊豪；刘鸿春；王瑞；周瑾；袁兰；杨柳；黄国香；邹红云；余伍忠 刊期： 2011年第06期
目的 评价化学发光仪测定甲状腺激素进行仪器性能验证.方法 用LIAISON Diasorin化学发光仪测定甲状腺激素T3,T4,FT3,FT4和TSH的含量,分别计算批内精密度、批间精密度和携带污染率.结果 T3,T4,FT3,FT4和TSH的批内精密度分别是6.49%,4.07%,3.02%,3.70%和5.39%;批间精密度分别是7.32%,6.88%,7.32%,5.74%和10.95%;携带污染率分别是-4.20%,-4.04%,0.21%,-0.65%和0.05%.结论 LIAISON Diasorin化学发光仪检测系统测定甲状腺功能具有重复性好、携带污染率低等优点,符合厂家声明的结果.
作者：贾淑芬 刊期： 2011年第06期
目的 探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及CA72-4水平检测对胃癌患者手术治疗前后的临床意义.方法 选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例.采用免疫比浊法检测血清hs-CRP及电化学发光免疫法检测CA72-4在胃癌患者手术治疗前后血清中的含量,并与健康对照组作对比.结果 手术前胃癌患者血清hs-CRP含量为35.90±15.69 mg/L,CA72-4含量为25.51±15.19 U/ml,均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值为8.31,6.65,P<0.01).手术后血清中两指标含量与术前比较差异有统计学意义(t值为6.12,6.23,P<0.01).结论血清hs-CRP及CA72-4水平检测对评估胃癌患者手术治疗前后的病情及观察预后均有重要的临床价值.对比组之间的差异有统计学意义.
作者：王云峰；侯云娇 刊期： 2011年第06期
目前,全国绝大多数医院进行网织红细胞计数仍然采用的是煌焦油蓝染色手工计数法,正常情况下,采用干粉EDTA-K2子弹头离心管采集新鲜离体末梢血进行网织红细胞染色计数对结果是没影响的,但我院在更换了一新批号的干粉EDTA-K2子弹头离心管后,却发现每次进行煌焦油蓝染色网织红细胞计数时全都会失败,镜下均无网织红细胞,而换以前剩下的子弹头离心管同样染色,结果却很好.这一现象以前无人报道过,因此我们就围绕离心管、染液和干粉EDTA-K2这几个因素进行了一系列的试验,以探讨染色失败的原因.
作者：施迎春；金小军；王锋 刊期： 2011年第06期
目的 探讨全血制备冷沉淀过程中,保存温度、制备时间和融化终点对冷沉淀中Ⅷ因子含量的影响.方法 80例全血平均分4组,A组(4±2)℃温度保存6～8 h,B组室温保存6～8 h,C组(4±2)℃温度保存8～10 h,D组室温保存8～10 h,用希森美康CA-50自动血凝测试仪检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.另外随机选择40例全血制备冷沉淀,(4±2)℃温度保存6～8 h,分为E组(n=20)选择终点为冰块融化至直径4～5 cm、厚度约1 cm,F组(n=20)选择终点为冰块融化至基本无渣,同法检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.结果 A组冷沉淀中Ⅷ因子含量平均为76.45±15.65 IU,B组为52.55±12.54 IU,C组为58.52±17.84 IU,D组为42.26±10.32 IU,ABCD组采用SPSS11.0统计软件Student-Newman-Keuls方差分析比较,结果表明:A组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著高于其他组的含量(P值均<0.05),D组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著低于其他组的含量(P值均<0.05);E组为75.23±12.65 IU,F组为50.64±12.31 IU,EF组采用SPSS11.0统计软件独立样本t检验(Independent Samples t test)比较,结果表明E组冷沉淀中Ⅷ因子含量显著高于F组(t=2.76,P值<0.05).结论 原料血在(4±2)℃温度保存6～8 h制备冷沉淀,其Ⅷ因子含量高;终点为冰块融化至直径4~5 cm、厚度约1 cm时制备冷沉淀,冷沉淀中Ⅷ因子含量高.
作者：李炜华；漆云霞 刊期： 2011年第06期
目的 比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在骨髓增生异常综合征(MDS)染色体异常检测中的灵敏度和特异度.方法 40例MDS患者,CCA法采用骨髓短期培养法,核型分析采用R带技术.FISH法采用间期FISH,选取4组探针组合检测-5/5q-和-7/7q-.结果 采用CCA法,5号和7号染色体异常检出率为17.5%,而利用FISH技术,阳性率为35.0%.5号,7号染色体异常检出率分别由7.5%,10.0%升至15.0%,20.0%.两种方法之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异.
作者：唐元艳；梁艳；熊涛；虞咏知；黄知平 刊期： 2011年第06期
该文阐述了脑脊液漏的快速诊断,它涉及神经影像学检查、葡萄糖氧化酶试验、β2转铁蛋白试验及β-痕量蛋白试验.
作者：王继贵 刊期： 2011年第06期
可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)也称为朊病毒病(prion diseases),是一类可感染人类和多种动物罕见的致死性的神经系统退行性疾病[1].根据疾病的来源不同,朊病毒病可分为自发性、遗传性和医源性三种形式.目前,Prion疾病以每年1～1.5例/百万人口的速度在全球迅速扩展,自从英国国家克雅氏病监测组织(NCJDSU)1996年首次报告新型变异型克雅氏病(variant creutzfeldt-iakob disease,vCJD),并通过病原学和流行病学研究证实vCJD极有可能是由于食用了被疯牛病(BSE)污染的产品而引起的,医学界关于vCJD是否通过尿制品传播的问题一直在争论.2007年Gregori和Murayama首次证明羊瘙痒症仓鼠的尿液含有检测水平的PrPSc,进一步经颅内接种裸鼠可诱导其产生TSEs症状.随着全球确诊的vCJD患者的增加以及临床上尿源性促性腺激素制剂的大量应用,经尿制品传播朊病毒病的可能性越来越大.
作者：景媛媛 刊期： 2011年第06期
目的 研究膝关节痛风性关节炎患者关节液中尿酸浓度值的变化.方法 对118例膝关节痛风性关节炎患者抽取关节液进行尿酸含量检测,并对其中的31例患者治疗一段时间后再次抽取关节液进行尿酸检测.结果 118例患者其关节液中尿酸含量(男性99名,尿酸值555±160 μmol/L;女性19名,尿酸值461±42 μmol/L)均明显高于同期所有膝关节关节炎患者的平均水平(男性335±133 μmol/L,女性237±78 μmol/L).31例患者经治疗后有30例关节液中尿酸含量明显下降.结论 检测关节液中尿酸含量对膝关节痛风性关节炎患者的诊断和疗效观察均具有重要的临床意义.
作者：池继敏；邹明；张峰 刊期： 2011年第06期
目的 了解临床标本中铜绿假单胞菌感染分布的特点及对14种抗菌药物的耐药性,指导临床合理治疗铜绿假单胞菌的感染.方法 常规培养分离细菌,用美国DADE BEHRING MicroScan分析系统鉴定菌种,药敏试验采用K-B纸片扩散法,按美国NCCLS[1,2]规定标准执行.结果 183株铜绿假单胞菌主要来自呼吸道(68.9%)、伤口分泌物(18.0%),主要分布在神经外科(39.3%)、血液肿瘤科(27.7%)、呼吸科(16.9%).该菌对头孢曲松、头孢噻肟的耐药率高分别为82%和78.6%;对头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素和庆大霉素的耐药率分别为44.8%,36.1%,36.1%和36.1%;对其余八种抗菌药物的耐药率均≤18%.结论 阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和替卡西林/克拉维酸仍可作为铜绿假单胞菌的感染的经验用药.
作者：杨斌 刊期： 2011年第06期
目的 为乳腺癌诊断提供血清学新尝试.方法 60例乳腺癌患者均来自于2009年3月～2010年3月南通市肿瘤医院病例,均为女性,年龄27～78岁,平均年龄57岁.所有患者均经手术病理证实且术前未经过化疗、放疗、内分泌及生物治疗.乳腺良性患者女性30例,年龄21～63岁,平均年龄36岁.对照组:健康体检者女性40例,年龄19～47岁,平均年龄33岁.所有研究对象近半年内未服用过免疫调节剂和激素类药物.采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8.结果 对照组、乳腺良性患者组以及乳腺癌组三者之间差异有统计学显著性意义(P<0.05);乳腺癌血清IL-6和IL-8水平与分期以及预后有一定的关系(P<0.05).结论 IL-6和IL-8可能参与了乳腺癌发生、发展的全过程,它的变化可间接反映乳腺癌的生物学行为和预后,对其监测具有重要的临床意义.
作者：李明；张金业；林兰；刘继斌 刊期： 2011年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
