高学慧；齐志宏；秦续珍；赵芳；叶阿里；徐二木；邱玲；宋耀虹
可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)也称为朊病毒病(prion diseases),是一类可感染人类和多种动物罕见的致死性的神经系统退行性疾病[1].根据疾病的来源不同,朊病毒病可分为自发性、遗传性和医源性三种形式.目前,Prion疾病以每年1～1.5例/百万人口的速度在全球迅速扩展,自从英国国家克雅氏病监测组织(NCJDSU)1996年首次报告新型变异型克雅氏病(variant creutzfeldt-iakob disease,vCJD),并通过病原学和流行病学研究证实vCJD极有可能是由于食用了被疯牛病(BSE)污染的产品而引起的,医学界关于vCJD是否通过尿制品传播的问题一直在争论.2007年Gregori和Murayama首次证明羊瘙痒症仓鼠的尿液含有检测水平的PrPSc,进一步经颅内接种裸鼠可诱导其产生TSEs症状.随着全球确诊的vCJD患者的增加以及临床上尿源性促性腺激素制剂的大量应用,经尿制品传播朊病毒病的可能性越来越大.
作者：景媛媛 刊期： 2011年第06期
目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法(剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法)制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测.
作者：贾宇臣；王利；郑源强；赵凯；陈琦 刊期： 2011年第06期
目的 探讨IgA肾病患者血清cystatin C,IgA和IgA/C3比值在IgA肾病(IgAN)的诊断及预后中的临床价值.方法 应用乳胶增强散射比浊法测定62例IgAN患者和58例非IgAN患者血清cystatin C,IgA及C3含量,同时对检测结果进行分析.结果 ①IgAN患者血清cystatin C水平[(1.26±0.46)mg/L] 与非IgAN患者血清cystatin C[(1.66±1.17)mg/L] 水平比较,差异有统计学意义(t=-2.50,P<0.05);IgAN患者血清IgA/C3比值(2.59±1.41)显著高于非IgAN患者(2.07±1.03),差异亦有统计学意义(t=2.33,P<0.05);而血清IgA含量[(2.44±1.04)g/L]和C3 含量[(1.07±0.27)g/L] 与非IgAN患者比较差异均无统计学显著性意义;② Lee氏分级为Ⅲ,Ⅳ,V级的IgAN患者血清IgA水平及IgA/C3比值均显著高于Lee氏I和Ⅱ级,差异有统计学意义(t=-2.21,P<0.05;t=-2.04,P<0.05);③IgAN患者IgA水平>3.0 g/L和IgA/C3比值≥2时诊断IgAN的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及Youden指数YI分别为68.42%,51.48%,20.97%,89.66%,0.20和59.68%,56.90%,59.68%,56.90%,0.17.结论 血清IgA/C3比值联合IgA及cystatin C水平可作为IgAN鉴别诊断、病情判断、预后评估的参考指标;血清cystatin C可能是反映IgA肾病中肾小球滤过功能更为敏感的指标.
作者：彭道荣；王菁；邢瑞青；杨玉琪；张涛；吴永昌；程晓东；张小宁 刊期： 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者：桂俊豪；刘鸿春；王瑞；周瑾；袁兰；杨柳；黄国香；邹红云；余伍忠 刊期： 2011年第06期
目的 比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在骨髓增生异常综合征(MDS)染色体异常检测中的灵敏度和特异度.方法 40例MDS患者,CCA法采用骨髓短期培养法,核型分析采用R带技术.FISH法采用间期FISH,选取4组探针组合检测-5/5q-和-7/7q-.结果 采用CCA法,5号和7号染色体异常检出率为17.5%,而利用FISH技术,阳性率为35.0%.5号,7号染色体异常检出率分别由7.5%,10.0%升至15.0%,20.0%.两种方法之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异.
作者：唐元艳；梁艳；熊涛；虞咏知；黄知平 刊期： 2011年第06期
目的 探究无电流斑电击死后各阶段的大鼠肝脏热休克蛋白60(HSP60)表达情况.方法 制作无电流斑电击死动物模型,即大鼠按体重(5 ml/kg)腹腔注射20 ml/dl乌拉坦溶液,待麻醉生效后,将大鼠的左前肢与右后肢用生理盐水浸湿,外包以生理盐水浸泡过的湿纱布,施以110V交流电电击5 min致死,并设立对照组(空白组和死后电击组),于死亡即刻,15,30 min,1,2,4 h取出大鼠肝右叶作切片,用HSP60抗体进行免疫组化染色,以图像平均灰度值作为HSP60表达情况指标作统计学分析.结果 电击死组肝细胞HSP60表达水平在15 min内表现为高表达,之后呈下降趋势.死后电击后15 min内表达较电击死组低,在30 min处表达超过电击死组,后下降,1 h处回升,2 h达高峰又回落,但其值始终高于电击死组.结论 死亡2 h内对肝脏HSP60表达水平的检测对鉴定无电流斑电击死及判断生前电击和死后电击有积极意义.
作者：王乔峰；刘慧通；谢亚男；赵泽；丁素真；王振原 刊期： 2011年第06期
目前,全国绝大多数医院进行网织红细胞计数仍然采用的是煌焦油蓝染色手工计数法,正常情况下,采用干粉EDTA-K2子弹头离心管采集新鲜离体末梢血进行网织红细胞染色计数对结果是没影响的,但我院在更换了一新批号的干粉EDTA-K2子弹头离心管后,却发现每次进行煌焦油蓝染色网织红细胞计数时全都会失败,镜下均无网织红细胞,而换以前剩下的子弹头离心管同样染色,结果却很好.这一现象以前无人报道过,因此我们就围绕离心管、染液和干粉EDTA-K2这几个因素进行了一系列的试验,以探讨染色失败的原因.
作者：施迎春；金小军；王锋 刊期： 2011年第06期
目的 探讨急性脑出血患者血清中前清蛋白(pre-albumin,PA)的变化趋势与病情严重程度及预后的关系.方法 测量武警北京市总队第二医院脑外科2010年3月～11月之间122名急性脑出血患者入院后第1,3,5,7天的PA水平,根据患者病情发展结果及愈后差异,将患者分为死亡组(29例)、重度后遗症组(42例)、轻度后遗症组(51例),并对各组PA值的变化趋势和同一时间段各组PA值进行统计学分析.结果 随住院时间的延长,死亡组PA值差异有统计学意义,且呈下降趋势;重症后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现先降后升的趋势;轻度后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现上升趋势.各组间PA值应用配对t检验进行比较,第1天P>0.05,差异无统计学意义,第3,5,7天表现为轻度后遗症组PA值＞重症后遗症组PA值＞死亡组PA值,P<0.05差异有统计学意义.结论 PA水平在各组间的差异有统计学意义,急性脑出血患者PA值水平越低,预后越差.
作者：李基克；李军；郭志强；徐朝；蒋芬 刊期： 2011年第06期
目的 了解深圳市福田人民医院临床分离对碳青霉烯类抗生素耐药革兰阴性杆菌产金属β-内酰胺酶的情况.方法 收集2010年6月～12月临床分离碳青霉烯类耐药菌株.用EDTA双纸片增效试验筛选分离的耐药细菌中的产金属β-内酰胺酶株,增效试验阳性菌株用聚合酶链反应(PCR) 扩增并通过对阳性扩增产物测序来确证金属酶基因型.结果 16株亚胺培南或美罗培南耐药细菌中铜绿假单胞菌10株,鲍曼不动杆菌4株,大肠埃希菌2株.双纸片增效试验阳性6株,PCR扩增阳性3株,1株VIM-2型和2株IMP-4型.结论 临床已出现产VIM-2型和IMP-4型金属β-内酰胺酶的碳青霉烯类抗生素耐药菌株,应加强对细菌耐药性监测及院内感染的管理控制,防止耐药菌株播散.
作者：聂署萍；萧王勇；黄烈；吴润香；凌利芬 刊期： 2011年第06期
目的 探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值.方法 对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较.结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均、多形性,而AA患者未见上述特征.Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血频率(87.5%,62.5%,37.5%)较AA患者(20.3%,0%,0%)明显增高(P<0.01).Hypo-MDS患者骨髓切片CD34+细胞(3.87±2.89)%明显高于AA患者(0.13±0.17)%(P<0.01).Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)亦较AA(3.57%)明显增高(P<0.01),且AA均为小克隆异常.结论 长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段.
作者：吕树文；程利梅；那春龙；郑俊；刘艳丛；谢守军 刊期： 2011年第06期
目的 研究胸腔积液细胞抑癌基因PTEN(phosphatase and tension homology deleted on chromosome ten,PTEN) 基因突变高发区外显子5,7,8突变率与肺癌临床分期、病理组织学分级和病理类型的相关性.方法 研究组为52例伴有胸腔积液的肺癌患者,对照组为40例伴有胸腔积液的结核性胸膜炎和其他胸膜炎患者,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,对胸腔积液细胞PTEN基因外显子5,7,8进行突变分析.结果 52例肺癌胸腔积液细胞中检测到PTEN基因突变7例,均为外显子5突变,突变率为13.5%(7/52);40例良性胸腔积液中未检测到PTEN基因突变,二者差异有统计学意义(P<0.05).52例肺癌患者不同临床分期中,Ⅲ期突变率为3.4%(1/29),Ⅳ期突变率为26%(6/23),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理组织学分级中,低分化癌突变率为31%(5/16),中、高分化癌突变率为5.6%(2/36),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理分型中,腺癌突变率为10.7%(3/28)、鳞癌突变率为14%(2/14)、小细胞肺癌突变率为20%(2/10),三者差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌胸腔积液细胞中存在PTEN基因突变,临床分期越晚、病理组织学分级越低,PTEN基因突变率越高,但与肺癌病理类型无关.PTEN基因突变可以作为有价值的肿瘤标记物用于恶性胸腔积液的诊断,可作为判断肺癌预后的一项指标.
作者：车德海；张华；魏海波；于雁 刊期： 2011年第06期
目的 研究血清磷脂酰肌醇硫酸类肝素蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)对原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值.方法 检测46例肝硬化患者和44例HCC患者的血清GPC3和AFP水平,血清GPC3测定采用酶联免疫吸附法(ELISA),血清AFP测定采用微粒子酶免疫分析法(MEIA),统计分析GPC3和AFP单独使用及联合检测对HCC患者诊断的灵敏度和特异度.结果 HCC组的血清GPC3和AFP浓度分别为611.09 ng/L和958.37 ng/ml,均明显高于肝硬化组(190.53 ng/L和55.12 ng/ml)(P<0.05).GPC3和AFP的浓度之间无相关关系.AFP阴性的HCC患者15例中GPC3阳性者6例,GPC3阴性的HCC组患者17例中AFP阳性者8例.AFP联合GPC3检测用于HCC诊断的灵敏度(79.54%)优于AFP(65.91%)及GPC3单独使用(61.36%).GPC3浓度与HCC病灶大小、PVI浸润和HBV感染均无相关关系(P>0.05).结论 GPC3对于HCC具有与AFP相似的诊断价值,GPC3可以协同AFP的诊断作用,二者联合检测能明显提高HCC诊断率.
作者：张华；李永兴；毛顺露；乐嫣；项明洁；陈华 刊期： 2011年第06期
目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均＜0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
作者：陈晓燕；曾玲；林茴 刊期： 2011年第06期
目的 探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及CA72-4水平检测对胃癌患者手术治疗前后的临床意义.方法 选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例.采用免疫比浊法检测血清hs-CRP及电化学发光免疫法检测CA72-4在胃癌患者手术治疗前后血清中的含量,并与健康对照组作对比.结果 手术前胃癌患者血清hs-CRP含量为35.90±15.69 mg/L,CA72-4含量为25.51±15.19 U/ml,均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值为8.31,6.65,P<0.01).手术后血清中两指标含量与术前比较差异有统计学意义(t值为6.12,6.23,P<0.01).结论血清hs-CRP及CA72-4水平检测对评估胃癌患者手术治疗前后的病情及观察预后均有重要的临床价值.对比组之间的差异有统计学意义.
作者：王云峰；侯云娇 刊期： 2011年第06期
目的 评价可溶性转铁蛋白受体(sTfR)在诊断和鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和慢性疾病性贫血(ACD)及慢性疾病性贫血(ACD)伴缺铁性贫血(IDA)中的应用.方法 比较30例缺铁性贫血患者、20例慢性疾病性贫血患者和20例非贫血的表面健康体检者血清sTfR,血清铁(SI),总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白饱和度(TS)水平,分析IDA的诊断符合率,观察不同贫血患者铁代谢状态.结果 IDA患者sTfR和TIBC明显高于ACD患者,分别为20.12±10.08 μmol/L和3.86±3.01 μmol/L(t=16.27,P<0.01),77.01±13.98 μmol/L和33.78±6.33 μmol/L(t=43.23,P<0.01),SI和TS明显减低,分别为3.16±1.10 μmol/L和11.64±5.82 μmol/L(t=8.48,P<0.01),4.25%±1.76%和34.11%±14.07%(t=29.86,P<0.01);ACD患者sTfR与表面健康的非贫血对照人群无明显差异(t=1.125,P>0.05),但其SI,TIBC和TS则有明显差异(t分别为4.26,27.85,8.21,P<0.01).使用TS和sTfR在IDA诊断中的阳性符合率优于常规使用的SI和TIBC指标.根据ROC曲线分析,sTfR有很高的诊断价值.结论 运用可溶性转铁蛋白受体、血清铁、总铁结合力和转铁蛋白饱和度四项铁状态观察指标,对缺铁性贫血和慢性疾病性贫血的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义,同时sTfR是提示功能性缺铁状态的敏感指标.
作者：杜振东；徐晓萍；彭凤；林炜炜；徐磊 刊期： 2011年第06期
目的 观察异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell,Allo-HSCT)病人血清中碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)术前术后的变化及其与预后的关系.方法 检测45例中南大学湘雅医院异基因干细胞移植病人(即观察组)和65例该院体检正常者(即对照组)血清中AKP和γ-GT的水平,并与对照组比较,分析观察组术前、术后外周血清AKP和γ-GT水平的变化及与预后的相关性.结果 ①移植前,观察组的AKP平均浓度(88.93±48.09)u/L和γ-GT平均浓度(24.37±16.77)u/L与对照组的AKP平均浓度(83.25±14.36)u/L和γ-GT(24.08±9.78)u/L平均浓度均正常,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);②预后良好的观察组移植后的AKP平均浓度(80.11±17.62)u/L和γ-GT平均浓度(36.87±24.70)u/L均正常,与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05);③预后差的观察组移植后的AKP平均浓度(183.87±220.24)u/L和γ-GT平均浓度(154.39±208.01)u/L明显升高,与移植前比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 患者血清中AKP和γ-GT水平可作为异基因造血干细胞移植术后预后判断的生化指标,对临床治疗及指导用药有一定辅助意义.
作者：谢卫民；张婷婷；钟白云 刊期： 2011年第06期
目的 探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 细菌培养及药敏试验在老年人肺部感染病原诊断和指导抗生素治疗的价值.方法 常规方法分离培养2010~2011年度91例住院的肺部感染老年患者痰和BALF病原菌,应用半自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行.结果 91例肺部感染老年患者痰和BALF标本共分离出71株铜绿假单胞菌、21株肺炎克雷伯菌、15株大肠埃希菌和14株鲍曼不动杆菌.BALF病原菌检出率为92.3%,明显高于痰培养(76.9%,χ2=10.90,P<0.01).药敏结果显示铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南、头孢吡肟和左氧氟沙星耐药,耐药率分别为81.1%,64.9%,86.5%和75.0%,66.7%,75.0%;铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素敏感;肺炎克雷伯菌对替卡西林/克拉维酸、阿米卡星和亚胺培南敏感.28例病原菌检出阳性结果患者根据药敏结果指导抗生素治疗后BALF和痰培养阳性率分别下降到35.7%和21.4%.结论 BALF细菌培养和药敏试验可明显提高老年肺部感染患者病原诊断率,可更好地指导临床选择有效抗菌药物.
作者：彭旭；倪小勤 刊期： 2011年第06期
目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%～76%和30%～72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
作者：饶国洲；李昂；苟建重；朱永进；孙慧玲；张引成 刊期： 2011年第06期
乙型肝炎疫苗接种后不同个体的应答效果有差异性,其应答特征与遗传和免疫机制关系尤为密切,明确其具体的作用机制,提高乙肝疫苗的应答率对于有效防护乙型肝炎意义重大.现就近年来国内外对于此方面的研究现状和进展作一综述.
作者：李旭华；陈月；吴文苑 刊期： 2011年第06期
目的 明确儿童腹泻的病原,了解各种病原在地区、季节和年龄上的分布,以及致病菌对抗生素的耐药率.方法 对襄阳第一人民医院儿科2009年1月～12月就诊的1 022例门诊和住院腹泻患儿进行粪便常规、病毒学、培养及药敏的检验,分析腹泻患儿的病原分布规律、致病菌对抗生素的耐药率.结果 感染性腹泻占83.2%,轮状病毒(RV)感染是引起感染性腹泻的主要原因,其次是细菌.非感染性腹泻占16.8%.轮状病毒秋冬季感染率高,容易重复感染和合并乳糖不耐受,细菌感染以志贺氏杆菌多见.非感染性腹泻以糖原性腹泻和抗生素相关性腹泻为主.耐药分析:志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌等对氨苄西林、磺胺、头孢和喹诺酮类抗生素耐药率较高.结论 襄阳地区婴幼儿腹泻的主要病原是轮状病毒,集中于11和12月份,以6个月～2岁婴幼儿为主,其次是细菌性腹泻,集中于夏秋季(5～10月份),2岁以上儿童常见,5岁以上为多,细菌多元耐药明显.
作者：杨富强；康俊辉 刊期： 2011年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
