张汉园;蒋玉英;王斌
目的 研究不同临床分型HCV感染者血清中HCV RNA与TNF-α之间的差异,探讨HCV RNA和TNF-α含量与肝损伤程度的关系.方法 收集HCV感染者45例,其中慢性肝炎轻度组11例,慢性肝炎重度组14例,肝硬化组11例,肝癌组9例,健康对照组20例.用ELISA法检测HCV IgG和TNF-α,制作标准曲线计算TNF-α含量.荧光定量PCR方法检测HCV RNA含量.血清ALT水平用HITACHI 7600型全自动生化分析仪采用速率法进行检测.HCV感染者血清HCV-RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT水平与正常对照组比较用t检验,各组之间的TNF-α含量和ALT水平及lg HCV RNA比较用方差分析,HCV RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT之间的相关性用直线相关性分析,用相关系数(r)表示.结果 丙肝患者各组之间ALT水平和TNF-α含量差异有统计学意义,F值分别为9.75和14.69,P<0.001;用t检验得出:各组丙肝患者血清TNF-α水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为6.596,9.857,6.673和8.358;各组患者血清ALT水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为12.031,6.61,3.971和6.857;慢性肝炎重度组、肝癌组与慢性肝炎轻度组之间ALT含量比较,差异有统计学意义(P<0.05),t值分别为3.242和3.246;慢性肝炎重度组和肝癌组HCV RNA的对数值分别为6.05±0.8和5.76±1.05,均低于慢性肝炎轻度组,t值分别为2.573和2.393,差异有统计学意义(P<0.05).ALT水平与TNF-α含量之间呈正相关,r=0.341,P<0.05.结论 不同临床类型HCV感染者血清中TNF-α和ALT含量存在差异,慢性肝炎轻度HCV感染者ALT水平明显低于其他临床类型组,HCV感染者血清ALT水平和TNF-α含量之间呈正相关.
作者:董西华;周霞;周立平;郑莹 刊期: 2011年第06期
目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法(剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法)制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测.
作者:贾宇臣;王利;郑源强;赵凯;陈琦 刊期: 2011年第06期
目的 应用参考方法[1]对血细胞分析仪白细胞分类计数(DIFF)进行校准,建立其量值溯源性.方法 采用手工目视显微镜法作为白细胞分类计数的参考方法对新鲜全血进行定值,以确定靶值;用该手工定值的新鲜全血对五台血液分析仪的DIFF参数进行校准,建立白细胞分类计数量值溯源性;校准完毕后进行新鲜全血比对试验.结果 DIFF参数手工分类靶值:NEUT,LYMPH,MONO,EOS和BASO分别为67.25%,26.58%,3.92%,2.00%和0.25%,五台仪器检测结果与手工分类靶值相比较,均在可信允许范围内;新鲜全血比对结果符合标准要求.结论 应用参考方法校准血细胞分析仪白细胞分类计数,可以实现其检测结果具有溯源性和准确性,同时可促进不同临床实验室DIFF检测结果互认.白细胞手工分类计数的准确性直接影响仪器分类参数校准的效果,实验室应定期进行人员手工分类能力比对.
作者:李明勇;李焱鑫;陈梅;张春平;李玉芹;李慧;王仁胜;周玉 刊期: 2011年第06期
目的 综述基于高分辨熔解分析(HRM)的基因分型新技术.方法 介绍无标记探针、弹回引物、隐蔽探针、温度开关PCR、等位基因特异延伸PCR和低变性温度下共扩增PCR等技术的基本原理并评价其适用性.结果 这些新技术不仅避免了产物污染,提高了HRM基因分型的准确性和敏感度,而且拓展了HRM的应用范围.结论 基于HRM的基因分型新技术有望成为临床分子诊断的新方法.
作者:李菲菲;尤崇革 刊期: 2011年第06期
目的 评价可溶性转铁蛋白受体(sTfR)在诊断和鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和慢性疾病性贫血(ACD)及慢性疾病性贫血(ACD)伴缺铁性贫血(IDA)中的应用.方法 比较30例缺铁性贫血患者、20例慢性疾病性贫血患者和20例非贫血的表面健康体检者血清sTfR,血清铁(SI),总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白饱和度(TS)水平,分析IDA的诊断符合率,观察不同贫血患者铁代谢状态.结果 IDA患者sTfR和TIBC明显高于ACD患者,分别为20.12±10.08 μmol/L和3.86±3.01 μmol/L(t=16.27,P<0.01),77.01±13.98 μmol/L和33.78±6.33 μmol/L(t=43.23,P<0.01),SI和TS明显减低,分别为3.16±1.10 μmol/L和11.64±5.82 μmol/L(t=8.48,P<0.01),4.25%±1.76%和34.11%±14.07%(t=29.86,P<0.01);ACD患者sTfR与表面健康的非贫血对照人群无明显差异(t=1.125,P>0.05),但其SI,TIBC和TS则有明显差异(t分别为4.26,27.85,8.21,P<0.01).使用TS和sTfR在IDA诊断中的阳性符合率优于常规使用的SI和TIBC指标.根据ROC曲线分析,sTfR有很高的诊断价值.结论 运用可溶性转铁蛋白受体、血清铁、总铁结合力和转铁蛋白饱和度四项铁状态观察指标,对缺铁性贫血和慢性疾病性贫血的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义,同时sTfR是提示功能性缺铁状态的敏感指标.
作者:杜振东;徐晓萍;彭凤;林炜炜;徐磊 刊期: 2011年第06期
目的 研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者血小板活化特异性指标的检测意义.方法 选取2010年10月~2011年3月60例MS患者(其中单纯MS组、MS并发症组各30例)和30例健康对照者为研究对象,用ELISA法检测其血浆β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板第4因子(PF4)和血栓烷B2(TXB2)水平.结果 三组血浆β-TG,PF4和TXB2水平分别为:单纯MS组29.83±10.94 ng/ml,5.27±4.11 ng/ml,147.54±73.47 ng/ml;MS合并并发症组为51.62±20.26 ng/ml,12.16±6.03 ng/ml,231.72±111.69 ng/ml;对照组为23.68±8.15 ng/ml,4.36±3.52 ng/ml,125.27±49.6 ng/ml.单纯MS组明显高于对照组(t=5.21,P=0.008;t=2.45,P=0.021;t=3.42,P=0.019);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2水平显著高于对照组(t=23.52,P=0.004;t=31.45,P=0.001;t=1.67,P=0.005);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2明显高于单纯MS组(t=18.33,P=0.005;t=28.46,P=0.003;t=21.72,P=0.005);MS患者血浆β-TG和PF4及TXB2的变化正相关(r=0.485,P<0.01;r=0.772,P<0.01).结论 MS患者存在不同程度的血小板活化,测定血浆β-TG,PF4和TXB2水平可评估MS患者血小板活化程度.
作者:胡志坚;荀春华;徐炜;高志亮 刊期: 2011年第06期
目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均<0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
作者:陈晓燕;曾玲;林茴 刊期: 2011年第06期
肿瘤是当今社会影响人类健康的主要疾病之一,随着人们对肿瘤免疫、肿瘤病因及分子机制等研究的深入,肿瘤的基因治疗逐渐走向成熟,从多方面入手,建立个体化特定的肿瘤治疗方案和策略,合理选择基因治疗靶,使基因治疗广泛应用于临床,造福于肿瘤患者.
作者:黄红波;刘庚勋;李正贤 刊期: 2011年第06期
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy),脂蛋白(a)[Lp(a)]和血浆纤维蛋白原(Fg)联合检测在急性脑梗死(ACI)诊断中的意义.方法 选择急性脑梗死患者63例,正常对照组43例,分别检测Hcy,Lp(a)和Fg的浓度,并进行比较,分析其与急性脑梗死的关系.结果 急性脑梗死组Hey,Lp(a)和Fg的浓度分别为19.48±8.42 μmol/L,373±182 mg/L和3.7±1.2 g/L,正常对照组三者的浓度分别为10.66±2.61 μmol/L,181±106 mg/L和2.4±1.0 g/L.急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.01);急性脑梗死组中各项阳性检出率为Hcy 60.3%,Lp(a) 42.9%和Fg 30.0%,而正常对照组三者的阳性率只有6.9%,11.6%和6.9%,急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三者联合检测阳性率为89%,高于三者任何一个单项阳性率.结论 Hcy,Lp(a)和Fg联合检测有利于急性脑梗死患者的预测、诊断及预后.
作者:崔杰西;程训民;葛玲;毛诗海;于成 刊期: 2011年第06期
目的 探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及CA72-4水平检测对胃癌患者手术治疗前后的临床意义.方法 选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例.采用免疫比浊法检测血清hs-CRP及电化学发光免疫法检测CA72-4在胃癌患者手术治疗前后血清中的含量,并与健康对照组作对比.结果 手术前胃癌患者血清hs-CRP含量为35.90±15.69 mg/L,CA72-4含量为25.51±15.19 U/ml,均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值为8.31,6.65,P<0.01).手术后血清中两指标含量与术前比较差异有统计学意义(t值为6.12,6.23,P<0.01).结论血清hs-CRP及CA72-4水平检测对评估胃癌患者手术治疗前后的病情及观察预后均有重要的临床价值.对比组之间的差异有统计学意义.
作者:王云峰;侯云娇 刊期: 2011年第06期
目的 为乳腺癌诊断提供血清学新尝试.方法 60例乳腺癌患者均来自于2009年3月~2010年3月南通市肿瘤医院病例,均为女性,年龄27~78岁,平均年龄57岁.所有患者均经手术病理证实且术前未经过化疗、放疗、内分泌及生物治疗.乳腺良性患者女性30例,年龄21~63岁,平均年龄36岁.对照组:健康体检者女性40例,年龄19~47岁,平均年龄33岁.所有研究对象近半年内未服用过免疫调节剂和激素类药物.采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8.结果 对照组、乳腺良性患者组以及乳腺癌组三者之间差异有统计学显著性意义(P<0.05);乳腺癌血清IL-6和IL-8水平与分期以及预后有一定的关系(P<0.05).结论 IL-6和IL-8可能参与了乳腺癌发生、发展的全过程,它的变化可间接反映乳腺癌的生物学行为和预后,对其监测具有重要的临床意义.
作者:李明;张金业;林兰;刘继斌 刊期: 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者:桂俊豪;刘鸿春;王瑞;周瑾;袁兰;杨柳;黄国香;邹红云;余伍忠 刊期: 2011年第06期
目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%~76%和30%~72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
作者:饶国洲;李昂;苟建重;朱永进;孙慧玲;张引成 刊期: 2011年第06期
目的 探讨全自动尿液分析仪UF-1000i的检测性能和检测结果的可信度,评估其在尿液标本检测中的应用.方法 选择批内精密度、批间精密度、准确度、携带污染、线性分析、参考区间验证和仪器间结果比对7个参数衡量UF-1000i的检测性能.结果 红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、上皮细胞(EC)、管型(CAST)和细菌(BACT)的批内精密度分别为5.28%~15.28%,2.2%~12.2%,24.4%~31.3%,34.1%~41.7%和4.7%~22.1%;批间精密度分别为3.8%~8.0%,2.0%~7.0%,8.7%~13.0%,14.0%~18.9%和3.4%~10.3%;准确度均值分别为40.1%~192%,36.2%~817.4%,11.5%~82.9%,4.58%~21.2%和200%~747.8%.RBC,WBC和BACT线性相关系数(r2)分别为0.988 8,0.988 8,0.962 7.RBC,BACT的携带污染率分别为0.1%和0.62%;参考区间的R值都>90%.仪器间比对结果RBC,CAST和BACT偏倚较大.结论 批内精密度高值、批间精密度、准确度、线性分析和参考区间验证等结果均符合ISO15189对仪器性能要求,而批内精密度低值、携带污染率和仪器间比对的结果均不符合ISO15189对仪器性能要求.全自动尿液分析仪UF-1000i可以用来进行临床标本的检测.
作者:潘莹;田瑶 刊期: 2011年第06期
可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)也称为朊病毒病(prion diseases),是一类可感染人类和多种动物罕见的致死性的神经系统退行性疾病[1].根据疾病的来源不同,朊病毒病可分为自发性、遗传性和医源性三种形式.目前,Prion疾病以每年1~1.5例/百万人口的速度在全球迅速扩展,自从英国国家克雅氏病监测组织(NCJDSU)1996年首次报告新型变异型克雅氏病(variant creutzfeldt-iakob disease,vCJD),并通过病原学和流行病学研究证实vCJD极有可能是由于食用了被疯牛病(BSE)污染的产品而引起的,医学界关于vCJD是否通过尿制品传播的问题一直在争论.2007年Gregori和Murayama首次证明羊瘙痒症仓鼠的尿液含有检测水平的PrPSc,进一步经颅内接种裸鼠可诱导其产生TSEs症状.随着全球确诊的vCJD患者的增加以及临床上尿源性促性腺激素制剂的大量应用,经尿制品传播朊病毒病的可能性越来越大.
作者:景媛媛 刊期: 2011年第06期
目的 探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值.方法 对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较.结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均、多形性,而AA患者未见上述特征.Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血频率(87.5%,62.5%,37.5%)较AA患者(20.3%,0%,0%)明显增高(P<0.01).Hypo-MDS患者骨髓切片CD34+细胞(3.87±2.89)%明显高于AA患者(0.13±0.17)%(P<0.01).Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)亦较AA(3.57%)明显增高(P<0.01),且AA均为小克隆异常.结论 长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段.
作者:吕树文;程利梅;那春龙;郑俊;刘艳丛;谢守军 刊期: 2011年第06期
目的 探讨不同年龄、不同性别儿童全血中常量元素(钙、镁)和微量元素(铜、锌、铁)含量及年龄差异,为儿童合理补充常量和微量元素提供参考.方法 采用原子吸收光谱法测定北京地区2010年4 158例0~6岁儿童全血铜、锌、铁、钙、镁5种元素含量,对不同性别间的差异采用t检验进行分析,采用F分析比较年龄间的分布差异.结果 在检测的五项指标中,五个年龄组之间铜、锌、铁、钙、镁含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05),不同年龄组儿童锌、镁、铁含量随年龄增长而升高,钙含量随年龄增长而降低.在性别上铜含量(男性高于女性)差异具有统计学意义(P<0.05).结论 不同年龄组儿童5种元素含量不同,需要摄入量也不同,针对不同年龄段的儿童给予有针对性的营养指导.
作者:于培红;李爱红;白雪梅;崔虹霞;赵蕊;毕晓郁 刊期: 2011年第06期
目的 探讨急性脑出血患者血清中前清蛋白(pre-albumin,PA)的变化趋势与病情严重程度及预后的关系.方法 测量武警北京市总队第二医院脑外科2010年3月~11月之间122名急性脑出血患者入院后第1,3,5,7天的PA水平,根据患者病情发展结果及愈后差异,将患者分为死亡组(29例)、重度后遗症组(42例)、轻度后遗症组(51例),并对各组PA值的变化趋势和同一时间段各组PA值进行统计学分析.结果 随住院时间的延长,死亡组PA值差异有统计学意义,且呈下降趋势;重症后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现先降后升的趋势;轻度后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现上升趋势.各组间PA值应用配对t检验进行比较,第1天P>0.05,差异无统计学意义,第3,5,7天表现为轻度后遗症组PA值>重症后遗症组PA值>死亡组PA值,P<0.05差异有统计学意义.结论 PA水平在各组间的差异有统计学意义,急性脑出血患者PA值水平越低,预后越差.
作者:李基克;李军;郭志强;徐朝;蒋芬 刊期: 2011年第06期
目的 明确儿童腹泻的病原,了解各种病原在地区、季节和年龄上的分布,以及致病菌对抗生素的耐药率.方法 对襄阳第一人民医院儿科2009年1月~12月就诊的1 022例门诊和住院腹泻患儿进行粪便常规、病毒学、培养及药敏的检验,分析腹泻患儿的病原分布规律、致病菌对抗生素的耐药率.结果 感染性腹泻占83.2%,轮状病毒(RV)感染是引起感染性腹泻的主要原因,其次是细菌.非感染性腹泻占16.8%.轮状病毒秋冬季感染率高,容易重复感染和合并乳糖不耐受,细菌感染以志贺氏杆菌多见.非感染性腹泻以糖原性腹泻和抗生素相关性腹泻为主.耐药分析:志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌等对氨苄西林、磺胺、头孢和喹诺酮类抗生素耐药率较高.结论 襄阳地区婴幼儿腹泻的主要病原是轮状病毒,集中于11和12月份,以6个月~2岁婴幼儿为主,其次是细菌性腹泻,集中于夏秋季(5~10月份),2岁以上儿童常见,5岁以上为多,细菌多元耐药明显.
作者:杨富强;康俊辉 刊期: 2011年第06期
目的 对Vitros-350全自动干式生化分析仪测定血清尿素氮 (BUN)、肌酐(CREA)和尿酸(UA)的分析性能进行评价.方法 采用Vitros-350全自动生化仪检测血清BUN,CREA和UA,验证其各项目检测的精密度、准确度、分析测量范围,临床可报告范围以及生物参考区间.结果 Vitros-350全自动干式生化仪测定BUN,CREA和UA的批内不精密度和总不精密度均达到厂家规定的不精密度且小于该科设定的质量要求.准确度方面,检测5个不同批号的室间质控品,均值与靶值的偏倚均小于允许偏倚.分析测量范围验证结果表明除CREA实测为3~1 226 μmol/L,稍低于厂家给定的4~1 238 μmol/L外,BUN(0.32~43.6 mmol/L)及UA(18~1 032 μmol/L)分析测量范围均宽于厂家给定的范围.BUN,CREA和UA的临床可报告范围分别为0.95~436 mmol/L,7~12 260 μmol/L和35~10 320 μmol/L.参考区间验证结果表明现用参考区间适用该实验室,可以继续使用.结论 Vitros-350全自动干式生化仪测定BUN,CREA和UA的主要验证试验结果均达到厂家给定的分析性能,能满足临床实验诊断的检测需求.
作者:张建忠;沈春燕;朱晶;陈建红 刊期: 2011年第06期