学术投稿

靶向BIRC5,Bcl-2siRNA慢病毒表达载体佳干扰序列的筛选

饶国洲;李昂;苟建重;朱永进;孙慧玲;张引成

关键词:Tca-8113细胞, RNA干扰, BIRC5, Bcl-2
摘要:目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%~76%和30%~72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
现代检验医学杂志相关文献
  • 血清胸苷激酶1和前列腺特异性抗原在前列腺癌中的诊断价值比较

    目的 通过比较各组人群血清胸苷激酶1(sTK1)和前列腺特异性抗原(PSA)浓度,评价血清胸苷激酶1在前列腺癌早期筛查和诊断中的价值.方法 应用增强发光免疫点印迹法和化学发光法检测60例正常人,50例前列腺增生(BPH)患者和30例前列腺癌(PCa)患者的sTK1,游离前列腺特异性抗原(fPSA)和总前列腺特异性抗原(tPSA)浓度,并计算fPSA/tPSA比值.结果 正常对照组、BPH组和PCa组的sTK1,tPSA和fPSA/tPSA比值分别为0.40±0.21 pmol/L,1.7±0.95 ng/ml,0.38±0.24;1.24±1.02 pmol/L,8.19±8.11 ng/ml,0.22±0.12和1.06±0.67 pmol/L,47.32±40.15 ng/ml,0.09±0.08.三组人群sTK1浓度总体差异有统计学意义(F=21.67,P<0.01),正常对照组与BPH组和PCa组比较,sTK1浓度差异均有统计学意义(P<0.01),BPH组和PCa组的sTK1浓度均较正常对照组升高,但BPH组与PCa组sTK1浓度差异无统计学意义(P>0.05).三组人群血清tPSA浓度及fPSA/tPSA比值差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.01),其中PCa组的血清tPSA浓度明显高于正常对照组和BPH组,而fPSA/tPSA比值则小于其他两组.结论 血清TK1在前列腺癌早期筛查和诊断中具有一定的警示作用,但其临床应用价值不如PSA.

    作者:周建平;张新利;王春梅 刊期: 2011年第06期

  • 探讨胱抑素C在慢性肾病中的诊断价值

    目的 探讨胱抑素C(cystatin C,Cys-C)在慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)中的诊断价值.方法 选正常人群50例为正常对照组,另选CKD患者140例,根据其内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)分为五组进行:①组46例(Ccr≥75 ml/min);②组37例(50 ml/min≤Ccr<75 ml/min);③组24例(25 ml/min≤Ccr<50 ml/min);④组22例(10 ml/min≤Ccr<25 ml/min);⑤组11例(Ccr<10 ml/min),分别测定Cys-C,血清肌酐(serum creatinine,SCr),采用Cockroft-Gault公式计算Ccr.结果 Cys-C值在对照组、①组、②组、③组、④组和⑤组之间进行比较,相邻各组之间的差异均有统计学意义,并随Ccr的下降,Cys-C浓度呈阶梯状上升(P<0.05),而SCr值在①组(85.09±24.22 μmol/L)与对照组(78.06±14.25 μmol/L)之间的差异无统计学意义(P>0.05);在①组、②组患者中,Cys-C异常检出率分别为47.8%和86.5%,SCr的异常率分别为6.5%和45.9%,Cys-C异常检出率明显高于SCr (P<0.05).结论 在不同程度肾功能损害时,Cys-C均能准确反映肾小球滤过功能,尤其更能敏感提示早期的肾功能损害,其结果优于血清肌酐.因此,Cys-C的检测对慢性肾病的早期诊断具有重要意义.

    作者:陈鑫;王开宇;兰小鹏 刊期: 2011年第06期

  • 183株铜绿假单胞菌感染分布及耐药性分析

    目的 了解临床标本中铜绿假单胞菌感染分布的特点及对14种抗菌药物的耐药性,指导临床合理治疗铜绿假单胞菌的感染.方法 常规培养分离细菌,用美国DADE BEHRING MicroScan分析系统鉴定菌种,药敏试验采用K-B纸片扩散法,按美国NCCLS[1,2]规定标准执行.结果 183株铜绿假单胞菌主要来自呼吸道(68.9%)、伤口分泌物(18.0%),主要分布在神经外科(39.3%)、血液肿瘤科(27.7%)、呼吸科(16.9%).该菌对头孢曲松、头孢噻肟的耐药率高分别为82%和78.6%;对头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素和庆大霉素的耐药率分别为44.8%,36.1%,36.1%和36.1%;对其余八种抗菌药物的耐药率均≤18%.结论 阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和替卡西林/克拉维酸仍可作为铜绿假单胞菌的感染的经验用药.

    作者:杨斌 刊期: 2011年第06期

  • 化学发光免疫法检测B型利钠肽的分析性能评价

    目的 验证西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的精密度及判断准确度性能的可接受性,以及探讨BNP的分析灵敏度及BNP的适血液标本类型.方法 参照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件和相关文献,对ADVIA Centaur 240 检测BNP的精密度和准确度进行评价.分别采用肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和干燥血清管进行抽血,样本在不同时间进行BNP检测,比较BNP的测定值与变化趋势,判断BNP的适血液标本类型.通过EP17-A文件确定BNP检测的空白限(limit of blank,LoB)、检测低限(limit of detection,LoD)和功能灵敏度(functional sensitivity,FS).结果 ADVIA Centaur 240 化学发光免疫检测系统检测BNP精密度的批内CV和总CV均为>3.5%,准确度与定值校准品的偏差为1.1%~2.6%,BNP检测的适血液标本类型为EDTA抗凝血浆,LoB,LoD及FS分别为0.86,3.61和4.64 pg/ml.结论 西门子ADVIA Centaur 240化学发光检测系统检测BNP的主要分析性能均达到了厂商声明的性能和有关的质量要求.佳血液标本类型的选择及建立临床实验室的LoB,LoD和FS可为临床提供更加准确可信的检测值.

    作者:李飞;王伟佳;温冬梅;索明环;欧阳能良;严海忠;阚丽娟;张秀明 刊期: 2011年第06期

  • 荧光原位杂交技术与细胞遗传学分析在骨髓增生异常综合征患者-5/5q-和-7/7q-检测中的评价应用

    目的 比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在骨髓增生异常综合征(MDS)染色体异常检测中的灵敏度和特异度.方法 40例MDS患者,CCA法采用骨髓短期培养法,核型分析采用R带技术.FISH法采用间期FISH,选取4组探针组合检测-5/5q-和-7/7q-.结果 采用CCA法,5号和7号染色体异常检出率为17.5%,而利用FISH技术,阳性率为35.0%.5号,7号染色体异常检出率分别由7.5%,10.0%升至15.0%,20.0%.两种方法之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异.

    作者:唐元艳;梁艳;熊涛;虞咏知;黄知平 刊期: 2011年第06期

  • 血清cystatin C,IgA/C3及IgA/C3检测在IgA肾病诊断及预后评估中的临床价值

    目的 探讨IgA肾病患者血清cystatin C,IgA和IgA/C3比值在IgA肾病(IgAN)的诊断及预后中的临床价值.方法 应用乳胶增强散射比浊法测定62例IgAN患者和58例非IgAN患者血清cystatin C,IgA及C3含量,同时对检测结果进行分析.结果 ①IgAN患者血清cystatin C水平[(1.26±0.46)mg/L] 与非IgAN患者血清cystatin C[(1.66±1.17)mg/L] 水平比较,差异有统计学意义(t=-2.50,P<0.05);IgAN患者血清IgA/C3比值(2.59±1.41)显著高于非IgAN患者(2.07±1.03),差异亦有统计学意义(t=2.33,P<0.05);而血清IgA含量[(2.44±1.04)g/L]和C3 含量[(1.07±0.27)g/L] 与非IgAN患者比较差异均无统计学显著性意义;② Lee氏分级为Ⅲ,Ⅳ,V级的IgAN患者血清IgA水平及IgA/C3比值均显著高于Lee氏I和Ⅱ级,差异有统计学意义(t=-2.21,P<0.05;t=-2.04,P<0.05);③IgAN患者IgA水平>3.0 g/L和IgA/C3比值≥2时诊断IgAN的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及Youden指数YI分别为68.42%,51.48%,20.97%,89.66%,0.20和59.68%,56.90%,59.68%,56.90%,0.17.结论 血清IgA/C3比值联合IgA及cystatin C水平可作为IgAN鉴别诊断、病情判断、预后评估的参考指标;血清cystatin C可能是反映IgA肾病中肾小球滤过功能更为敏感的指标.

    作者:彭道荣;王菁;邢瑞青;杨玉琪;张涛;吴永昌;程晓东;张小宁 刊期: 2011年第06期

  • 血清GPC3对原发性肝细胞癌的诊断价值

    目的 研究血清磷脂酰肌醇硫酸类肝素蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)对原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值.方法 检测46例肝硬化患者和44例HCC患者的血清GPC3和AFP水平,血清GPC3测定采用酶联免疫吸附法(ELISA),血清AFP测定采用微粒子酶免疫分析法(MEIA),统计分析GPC3和AFP单独使用及联合检测对HCC患者诊断的灵敏度和特异度.结果 HCC组的血清GPC3和AFP浓度分别为611.09 ng/L和958.37 ng/ml,均明显高于肝硬化组(190.53 ng/L和55.12 ng/ml)(P<0.05).GPC3和AFP的浓度之间无相关关系.AFP阴性的HCC患者15例中GPC3阳性者6例,GPC3阴性的HCC组患者17例中AFP阳性者8例.AFP联合GPC3检测用于HCC诊断的灵敏度(79.54%)优于AFP(65.91%)及GPC3单独使用(61.36%).GPC3浓度与HCC病灶大小、PVI浸润和HBV感染均无相关关系(P>0.05).结论 GPC3对于HCC具有与AFP相似的诊断价值,GPC3可以协同AFP的诊断作用,二者联合检测能明显提高HCC诊断率.

    作者:张华;李永兴;毛顺露;乐嫣;项明洁;陈华 刊期: 2011年第06期

  • 可溶性转铁蛋白受体对功能性缺铁代谢的鉴别应用

    目的 评价可溶性转铁蛋白受体(sTfR)在诊断和鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和慢性疾病性贫血(ACD)及慢性疾病性贫血(ACD)伴缺铁性贫血(IDA)中的应用.方法 比较30例缺铁性贫血患者、20例慢性疾病性贫血患者和20例非贫血的表面健康体检者血清sTfR,血清铁(SI),总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白饱和度(TS)水平,分析IDA的诊断符合率,观察不同贫血患者铁代谢状态.结果 IDA患者sTfR和TIBC明显高于ACD患者,分别为20.12±10.08 μmol/L和3.86±3.01 μmol/L(t=16.27,P<0.01),77.01±13.98 μmol/L和33.78±6.33 μmol/L(t=43.23,P<0.01),SI和TS明显减低,分别为3.16±1.10 μmol/L和11.64±5.82 μmol/L(t=8.48,P<0.01),4.25%±1.76%和34.11%±14.07%(t=29.86,P<0.01);ACD患者sTfR与表面健康的非贫血对照人群无明显差异(t=1.125,P>0.05),但其SI,TIBC和TS则有明显差异(t分别为4.26,27.85,8.21,P<0.01).使用TS和sTfR在IDA诊断中的阳性符合率优于常规使用的SI和TIBC指标.根据ROC曲线分析,sTfR有很高的诊断价值.结论 运用可溶性转铁蛋白受体、血清铁、总铁结合力和转铁蛋白饱和度四项铁状态观察指标,对缺铁性贫血和慢性疾病性贫血的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义,同时sTfR是提示功能性缺铁状态的敏感指标.

    作者:杜振东;徐晓萍;彭凤;林炜炜;徐磊 刊期: 2011年第06期

  • 基因治疗靶向基因选择的新进展

    肿瘤是当今社会影响人类健康的主要疾病之一,随着人们对肿瘤免疫、肿瘤病因及分子机制等研究的深入,肿瘤的基因治疗逐渐走向成熟,从多方面入手,建立个体化特定的肿瘤治疗方案和策略,合理选择基因治疗靶,使基因治疗广泛应用于临床,造福于肿瘤患者.

    作者:黄红波;刘庚勋;李正贤 刊期: 2011年第06期

  • 临床常见革兰阳性球菌的耐药状况分析

    目的 了解革兰阳性球菌在临床标本中的分离与耐药情况,指导临床合理用药.方法 收集送检标本中分离的病原菌是革兰阳性球菌的菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,药敏试验采用K-B法,利用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离革兰阳性球菌445株,葡萄球菌占主导地位,其中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)133株(29.9%);肠球菌呈多重耐药状态,并且出现屎肠球菌的万古霉素耐药菌株;替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺对革兰阳性球菌均显示出强大的抗菌活性.结论 细菌耐药性严重,耐万古霉素的肠球菌也已经出现,临床医生和药师应重视耐药监控,预防耐药菌株的产生及流行.

    作者:蔡璇;施菁玲;李从荣;孙端阳;李娟 刊期: 2011年第06期

  • Sysmex UF-1000i在尿液检测中的性能评价

    目的 探讨全自动尿液分析仪UF-1000i的检测性能和检测结果的可信度,评估其在尿液标本检测中的应用.方法 选择批内精密度、批间精密度、准确度、携带污染、线性分析、参考区间验证和仪器间结果比对7个参数衡量UF-1000i的检测性能.结果 红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、上皮细胞(EC)、管型(CAST)和细菌(BACT)的批内精密度分别为5.28%~15.28%,2.2%~12.2%,24.4%~31.3%,34.1%~41.7%和4.7%~22.1%;批间精密度分别为3.8%~8.0%,2.0%~7.0%,8.7%~13.0%,14.0%~18.9%和3.4%~10.3%;准确度均值分别为40.1%~192%,36.2%~817.4%,11.5%~82.9%,4.58%~21.2%和200%~747.8%.RBC,WBC和BACT线性相关系数(r2)分别为0.988 8,0.988 8,0.962 7.RBC,BACT的携带污染率分别为0.1%和0.62%;参考区间的R值都>90%.仪器间比对结果RBC,CAST和BACT偏倚较大.结论 批内精密度高值、批间精密度、准确度、线性分析和参考区间验证等结果均符合ISO15189对仪器性能要求,而批内精密度低值、携带污染率和仪器间比对的结果均不符合ISO15189对仪器性能要求.全自动尿液分析仪UF-1000i可以用来进行临床标本的检测.

    作者:潘莹;田瑶 刊期: 2011年第06期

  • prohibitin在乳腺癌MCF-7细胞表达抑制的鉴定

    目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRNA及蛋白水平的干扰效应.结果 转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB mRNA表达量分别是阴性对照组的27.2%,45.6%和29.4%;空白对照组的23.7%,39.7%和25.6%;转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB/β-actin灰度值比值分别是阴性对照组的27.4%,39.4%和30.1%;空白对照组的26.9%,38.7%和29.5%.构建的shRNA表达载体可以使MCF-7细胞中prohibitin基因的mRNA及其蛋白含量降低.结论 构建的针对prohibitin基因的shRNA表达载体,转染MCF-7细胞后可有效抑制细胞中prohibitin的表达,证实构建有效.

    作者:赵丽华;何谦;张淑群;安哲;张磊 刊期: 2011年第06期

  • 血细胞分析仪白细胞分类计数量值溯源性的建立

    目的 应用参考方法[1]对血细胞分析仪白细胞分类计数(DIFF)进行校准,建立其量值溯源性.方法 采用手工目视显微镜法作为白细胞分类计数的参考方法对新鲜全血进行定值,以确定靶值;用该手工定值的新鲜全血对五台血液分析仪的DIFF参数进行校准,建立白细胞分类计数量值溯源性;校准完毕后进行新鲜全血比对试验.结果 DIFF参数手工分类靶值:NEUT,LYMPH,MONO,EOS和BASO分别为67.25%,26.58%,3.92%,2.00%和0.25%,五台仪器检测结果与手工分类靶值相比较,均在可信允许范围内;新鲜全血比对结果符合标准要求.结论 应用参考方法校准血细胞分析仪白细胞分类计数,可以实现其检测结果具有溯源性和准确性,同时可促进不同临床实验室DIFF检测结果互认.白细胞手工分类计数的准确性直接影响仪器分类参数校准的效果,实验室应定期进行人员手工分类能力比对.

    作者:李明勇;李焱鑫;陈梅;张春平;李玉芹;李慧;王仁胜;周玉 刊期: 2011年第06期

  • 前清蛋白对急性脑出血患者预后的评估

    目的 探讨急性脑出血患者血清中前清蛋白(pre-albumin,PA)的变化趋势与病情严重程度及预后的关系.方法 测量武警北京市总队第二医院脑外科2010年3月~11月之间122名急性脑出血患者入院后第1,3,5,7天的PA水平,根据患者病情发展结果及愈后差异,将患者分为死亡组(29例)、重度后遗症组(42例)、轻度后遗症组(51例),并对各组PA值的变化趋势和同一时间段各组PA值进行统计学分析.结果 随住院时间的延长,死亡组PA值差异有统计学意义,且呈下降趋势;重症后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现先降后升的趋势;轻度后遗症组PA值差异有统计学意义,且呈现上升趋势.各组间PA值应用配对t检验进行比较,第1天P>0.05,差异无统计学意义,第3,5,7天表现为轻度后遗症组PA值>重症后遗症组PA值>死亡组PA值,P<0.05差异有统计学意义.结论 PA水平在各组间的差异有统计学意义,急性脑出血患者PA值水平越低,预后越差.

    作者:李基克;李军;郭志强;徐朝;蒋芬 刊期: 2011年第06期

  • 电击死大鼠肝HSP60表达水平变化的法医学意义

    目的 探究无电流斑电击死后各阶段的大鼠肝脏热休克蛋白60(HSP60)表达情况.方法 制作无电流斑电击死动物模型,即大鼠按体重(5 ml/kg)腹腔注射20 ml/dl乌拉坦溶液,待麻醉生效后,将大鼠的左前肢与右后肢用生理盐水浸湿,外包以生理盐水浸泡过的湿纱布,施以110V交流电电击5 min致死,并设立对照组(空白组和死后电击组),于死亡即刻,15,30 min,1,2,4 h取出大鼠肝右叶作切片,用HSP60抗体进行免疫组化染色,以图像平均灰度值作为HSP60表达情况指标作统计学分析.结果 电击死组肝细胞HSP60表达水平在15 min内表现为高表达,之后呈下降趋势.死后电击后15 min内表达较电击死组低,在30 min处表达超过电击死组,后下降,1 h处回升,2 h达高峰又回落,但其值始终高于电击死组.结论 死亡2 h内对肝脏HSP60表达水平的检测对鉴定无电流斑电击死及判断生前电击和死后电击有积极意义.

    作者:王乔峰;刘慧通;谢亚男;赵泽;丁素真;王振原 刊期: 2011年第06期

  • 基于高分辨率熔解分析的基因分型新技术

    目的 综述基于高分辨熔解分析(HRM)的基因分型新技术.方法 介绍无标记探针、弹回引物、隐蔽探针、温度开关PCR、等位基因特异延伸PCR和低变性温度下共扩增PCR等技术的基本原理并评价其适用性.结果 这些新技术不仅避免了产物污染,提高了HRM基因分型的准确性和敏感度,而且拓展了HRM的应用范围.结论 基于HRM的基因分型新技术有望成为临床分子诊断的新方法.

    作者:李菲菲;尤崇革 刊期: 2011年第06期

  • 异基因造血干细胞移植患者血清中AKP和-GT水平的变化及临床意义

    目的 观察异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell,Allo-HSCT)病人血清中碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)术前术后的变化及其与预后的关系.方法 检测45例中南大学湘雅医院异基因干细胞移植病人(即观察组)和65例该院体检正常者(即对照组)血清中AKP和γ-GT的水平,并与对照组比较,分析观察组术前、术后外周血清AKP和γ-GT水平的变化及与预后的相关性.结果 ①移植前,观察组的AKP平均浓度(88.93±48.09)u/L和γ-GT平均浓度(24.37±16.77)u/L与对照组的AKP平均浓度(83.25±14.36)u/L和γ-GT(24.08±9.78)u/L平均浓度均正常,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);②预后良好的观察组移植后的AKP平均浓度(80.11±17.62)u/L和γ-GT平均浓度(36.87±24.70)u/L均正常,与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05);③预后差的观察组移植后的AKP平均浓度(183.87±220.24)u/L和γ-GT平均浓度(154.39±208.01)u/L明显升高,与移植前比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 患者血清中AKP和γ-GT水平可作为异基因造血干细胞移植术后预后判断的生化指标,对临床治疗及指导用药有一定辅助意义.

    作者:谢卫民;张婷婷;钟白云 刊期: 2011年第06期

  • 同型半胱氨酸、脂蛋白(a)、纤维蛋白原联合检测在急性脑梗死诊断中的意义

    目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy),脂蛋白(a)[Lp(a)]和血浆纤维蛋白原(Fg)联合检测在急性脑梗死(ACI)诊断中的意义.方法 选择急性脑梗死患者63例,正常对照组43例,分别检测Hcy,Lp(a)和Fg的浓度,并进行比较,分析其与急性脑梗死的关系.结果 急性脑梗死组Hey,Lp(a)和Fg的浓度分别为19.48±8.42 μmol/L,373±182 mg/L和3.7±1.2 g/L,正常对照组三者的浓度分别为10.66±2.61 μmol/L,181±106 mg/L和2.4±1.0 g/L.急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.01);急性脑梗死组中各项阳性检出率为Hcy 60.3%,Lp(a) 42.9%和Fg 30.0%,而正常对照组三者的阳性率只有6.9%,11.6%和6.9%,急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三者联合检测阳性率为89%,高于三者任何一个单项阳性率.结论 Hcy,Lp(a)和Fg联合检测有利于急性脑梗死患者的预测、诊断及预后.

    作者:崔杰西;程训民;葛玲;毛诗海;于成 刊期: 2011年第06期

  • 冷沉淀制备过程中的关键因素探讨

    目的 探讨全血制备冷沉淀过程中,保存温度、制备时间和融化终点对冷沉淀中Ⅷ因子含量的影响.方法 80例全血平均分4组,A组(4±2)℃温度保存6~8 h,B组室温保存6~8 h,C组(4±2)℃温度保存8~10 h,D组室温保存8~10 h,用希森美康CA-50自动血凝测试仪检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.另外随机选择40例全血制备冷沉淀,(4±2)℃温度保存6~8 h,分为E组(n=20)选择终点为冰块融化至直径4~5 cm、厚度约1 cm,F组(n=20)选择终点为冰块融化至基本无渣,同法检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.结果 A组冷沉淀中Ⅷ因子含量平均为76.45±15.65 IU,B组为52.55±12.54 IU,C组为58.52±17.84 IU,D组为42.26±10.32 IU,ABCD组采用SPSS11.0统计软件Student-Newman-Keuls方差分析比较,结果表明:A组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著高于其他组的含量(P值均<0.05),D组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著低于其他组的含量(P值均<0.05);E组为75.23±12.65 IU,F组为50.64±12.31 IU,EF组采用SPSS11.0统计软件独立样本t检验(Independent Samples t test)比较,结果表明E组冷沉淀中Ⅷ因子含量显著高于F组(t=2.76,P值<0.05).结论 原料血在(4±2)℃温度保存6~8 h制备冷沉淀,其Ⅷ因子含量高;终点为冰块融化至直径4~5 cm、厚度约1 cm时制备冷沉淀,冷沉淀中Ⅷ因子含量高.

    作者:李炜华;漆云霞 刊期: 2011年第06期

  • 大鼠脑缺血后脑红蛋白对Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA表达的影响

    目的 观察脑缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)后缺血半暗区脑红蛋白(neuroglobin,NGB)表达与细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)及细胞凋亡蛋白酶3(Caspase-3)的相关性,以阐明NGB在脑缺血早期是否通过Cyt-C途径抑制Caspase-3发挥脑保护作用.方法 大鼠随机分为假手术对照(sham)组(n=6)、CIR组、干预(IV)组和干预对照(IVC)组(n=6).其中CIR组制作左侧局灶性脑缺血模型(MCAO)后2 h再灌注,然后按断头时程不同又分为再灌注后1,6,12,24h和72 h五个亚组(n=6).IV组采用立体定向技术将重组人NGB注入左侧尾壳核30 min后制作模型,方法同CIR组,按断头时程不同又分为再灌注后1,6,12,24 h和72 h五个亚组(n=6),sham和IVC于24 h断头.制作脑组织匀浆和标本,测定NGBmRNA,Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA含量并行HE染色.结果 ①CIR组梗死灶体积随着时间逐步增大,24h~72h达大(F=6.771,P=0.001),经重组人NGB干预后,IV组各亚组梗死体积均增大(t检验比较,P值均<0.05).②CIR组在大脑皮质及尾壳核部NGBmRNA于再灌注损伤1 h后逐步升高,24 h达高峰,然后逐步下降(F=85.578,P=0.000),而Cyt-CmRNA和Caspase-3mRNA在再灌注损伤1h后已经增多,12 h~24 h增高达到高峰,然后逐步下降(Cyt-CmRNA:F=27.378,P=0.000,Caspase-3mRNA:F=47.622,P=0.000).重组人NGB注入尾壳核区后,再灌注损伤早期Cyt-CmRNA明显减少(1 h:t=3.773,P=0.013;6 h:t=6.037,P=0.002;12 h:t=4.972,P=0.004;24 h:t=-1.249,P=0.267;72 h:t=-1.724,P=0.166);Caspase-3 mRNA表达亦明显减少(1 h:t=2.964,P=0.031;6 h:t=3.053,P=0.028;12 h:t=4.508,P=0.006;24 h:t=5.859,P=0.002;72 h:t=-1.139,P=0.306).结论 脑缺血后NGB在缺血半暗区早期升高,然后逐步下降,可能通过细胞色素C途径抑制Caspase-3的表达,发挥脑保护作用.

    作者:李明;储照虎;马领松;周曾;胡成伍;赵守才 刊期: 2011年第06期

现代检验医学杂志

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主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院