李基克;李军;郭志强;徐朝;蒋芬
目的 评价化学发光仪测定甲状腺激素进行仪器性能验证.方法 用LIAISON Diasorin化学发光仪测定甲状腺激素T3,T4,FT3,FT4和TSH的含量,分别计算批内精密度、批间精密度和携带污染率.结果 T3,T4,FT3,FT4和TSH的批内精密度分别是6.49%,4.07%,3.02%,3.70%和5.39%;批间精密度分别是7.32%,6.88%,7.32%,5.74%和10.95%;携带污染率分别是-4.20%,-4.04%,0.21%,-0.65%和0.05%.结论 LIAISON Diasorin化学发光仪检测系统测定甲状腺功能具有重复性好、携带污染率低等优点,符合厂家声明的结果.
作者:贾淑芬 刊期: 2011年第06期
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy),脂蛋白(a)[Lp(a)]和血浆纤维蛋白原(Fg)联合检测在急性脑梗死(ACI)诊断中的意义.方法 选择急性脑梗死患者63例,正常对照组43例,分别检测Hcy,Lp(a)和Fg的浓度,并进行比较,分析其与急性脑梗死的关系.结果 急性脑梗死组Hey,Lp(a)和Fg的浓度分别为19.48±8.42 μmol/L,373±182 mg/L和3.7±1.2 g/L,正常对照组三者的浓度分别为10.66±2.61 μmol/L,181±106 mg/L和2.4±1.0 g/L.急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.01);急性脑梗死组中各项阳性检出率为Hcy 60.3%,Lp(a) 42.9%和Fg 30.0%,而正常对照组三者的阳性率只有6.9%,11.6%和6.9%,急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三者联合检测阳性率为89%,高于三者任何一个单项阳性率.结论 Hcy,Lp(a)和Fg联合检测有利于急性脑梗死患者的预测、诊断及预后.
作者:崔杰西;程训民;葛玲;毛诗海;于成 刊期: 2011年第06期
目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%~76%和30%~72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
作者:饶国洲;李昂;苟建重;朱永进;孙慧玲;张引成 刊期: 2011年第06期
目的 研究凝血传感器在检测血浆凝血因子Ⅷ过程中的影响因素,确立佳的检测条件并应用于临床研究.方法 ①用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;②观察在相对湿度50%±2%,缓冲稀释液放置室温29±2℃,缓冲稀释液4℃冰箱内放置5 min,缓冲稀释液37℃水浴箱内放置5 min,标准血浆1∶20稀释的频率变化;③分别观察室温20±2℃,相对湿度61%±2%和38%±2%,标准血浆1∶20稀释的频率变化;④整个检测系统置于室温34±2℃,相对温度48%±2%的环境中用压电石英晶体凝血传感器检测缓冲稀释液配制的1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30和1∶40标准血浆,观察凝集反应的全部过程;⑤随机抽取西京医院住院病人凝血功能检查的常规标本50例,一份用压电石英晶体凝血传感器检测血浆FⅧ活性,另一份用STAGO全自动凝血分析仪同时做平行检测.结果 ①结果显示温度决定反应时间的长短,反应时间由于温度上升而缩短;反应环境湿度大,反应过程充分,反应频率稳定;反应环境湿度小,反应过程不充分导致反应时间缩短.反应时间随着血浆浓度增大而缩短,且随着FⅧ的活性降低而增加,反应过程中因血浆浓度的不同,频率的变化也各不相同.②将检测系统放置室温为34±2℃、相对湿度48%±2%的环境,检测池加入乏Ⅷ血浆、活化部分凝血活酶时间试剂、待测血浆混匀,待频率稳定后,加入CaCl2于检测池,观察反应频率,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点T1,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点T2,计算两点的时间即为反应时间T=T2-T1,查标准曲线得血浆凝血因子Ⅷ的活性.③用该方法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为107.4%,STAGO磁珠检测法检测50例临床标本所得平均血浆凝血因子Ⅷ活性为102.0%,该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r=0.948).结论 凝血传感器检测血浆凝血因子的适温度为34±2℃、相对湿度48%±2%,压电石英晶体传感器检测血浆凝血因子Ⅷ是一种实时在线检测的方法,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确,并可用于临床检测.
作者:屈玲;郝晓柯;府伟灵 刊期: 2011年第06期
目的 探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及CA72-4水平检测对胃癌患者手术治疗前后的临床意义.方法 选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例.采用免疫比浊法检测血清hs-CRP及电化学发光免疫法检测CA72-4在胃癌患者手术治疗前后血清中的含量,并与健康对照组作对比.结果 手术前胃癌患者血清hs-CRP含量为35.90±15.69 mg/L,CA72-4含量为25.51±15.19 U/ml,均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值为8.31,6.65,P<0.01).手术后血清中两指标含量与术前比较差异有统计学意义(t值为6.12,6.23,P<0.01).结论血清hs-CRP及CA72-4水平检测对评估胃癌患者手术治疗前后的病情及观察预后均有重要的临床价值.对比组之间的差异有统计学意义.
作者:王云峰;侯云娇 刊期: 2011年第06期
目的 寻找细胞周期分析更好的样本处理方法.方法 以小鼠肺组织作为标本,采用四种方法(剪碎法、研磨法、剪碎结合酶消化法、研磨结合酶消化法)制备单细胞悬液,胎盘蓝染色检测细胞的存活率,经不同时间固定后的样本利用流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 剪碎法结合酶消化法制备的单细胞悬液效果佳;单细胞固定后两周内细胞各个时期所占比例基本相同.结论 小鼠肺组织单细胞制备采用剪碎法联合酶消化法优于其他三种方法,样本经固定处理后可以进行流式批量检测.
作者:贾宇臣;王利;郑源强;赵凯;陈琦 刊期: 2011年第06期
乙型肝炎疫苗接种后不同个体的应答效果有差异性,其应答特征与遗传和免疫机制关系尤为密切,明确其具体的作用机制,提高乙肝疫苗的应答率对于有效防护乙型肝炎意义重大.现就近年来国内外对于此方面的研究现状和进展作一综述.
作者:李旭华;陈月;吴文苑 刊期: 2011年第06期
目的 观察异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell,Allo-HSCT)病人血清中碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)术前术后的变化及其与预后的关系.方法 检测45例中南大学湘雅医院异基因干细胞移植病人(即观察组)和65例该院体检正常者(即对照组)血清中AKP和γ-GT的水平,并与对照组比较,分析观察组术前、术后外周血清AKP和γ-GT水平的变化及与预后的相关性.结果 ①移植前,观察组的AKP平均浓度(88.93±48.09)u/L和γ-GT平均浓度(24.37±16.77)u/L与对照组的AKP平均浓度(83.25±14.36)u/L和γ-GT(24.08±9.78)u/L平均浓度均正常,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);②预后良好的观察组移植后的AKP平均浓度(80.11±17.62)u/L和γ-GT平均浓度(36.87±24.70)u/L均正常,与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05);③预后差的观察组移植后的AKP平均浓度(183.87±220.24)u/L和γ-GT平均浓度(154.39±208.01)u/L明显升高,与移植前比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 患者血清中AKP和γ-GT水平可作为异基因造血干细胞移植术后预后判断的生化指标,对临床治疗及指导用药有一定辅助意义.
作者:谢卫民;张婷婷;钟白云 刊期: 2011年第06期
肿瘤是当今社会影响人类健康的主要疾病之一,随着人们对肿瘤免疫、肿瘤病因及分子机制等研究的深入,肿瘤的基因治疗逐渐走向成熟,从多方面入手,建立个体化特定的肿瘤治疗方案和策略,合理选择基因治疗靶,使基因治疗广泛应用于临床,造福于肿瘤患者.
作者:黄红波;刘庚勋;李正贤 刊期: 2011年第06期
目的 明确儿童腹泻的病原,了解各种病原在地区、季节和年龄上的分布,以及致病菌对抗生素的耐药率.方法 对襄阳第一人民医院儿科2009年1月~12月就诊的1 022例门诊和住院腹泻患儿进行粪便常规、病毒学、培养及药敏的检验,分析腹泻患儿的病原分布规律、致病菌对抗生素的耐药率.结果 感染性腹泻占83.2%,轮状病毒(RV)感染是引起感染性腹泻的主要原因,其次是细菌.非感染性腹泻占16.8%.轮状病毒秋冬季感染率高,容易重复感染和合并乳糖不耐受,细菌感染以志贺氏杆菌多见.非感染性腹泻以糖原性腹泻和抗生素相关性腹泻为主.耐药分析:志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌等对氨苄西林、磺胺、头孢和喹诺酮类抗生素耐药率较高.结论 襄阳地区婴幼儿腹泻的主要病原是轮状病毒,集中于11和12月份,以6个月~2岁婴幼儿为主,其次是细菌性腹泻,集中于夏秋季(5~10月份),2岁以上儿童常见,5岁以上为多,细菌多元耐药明显.
作者:杨富强;康俊辉 刊期: 2011年第06期
目的 探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 细菌培养及药敏试验在老年人肺部感染病原诊断和指导抗生素治疗的价值.方法 常规方法分离培养2010~2011年度91例住院的肺部感染老年患者痰和BALF病原菌,应用半自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行.结果 91例肺部感染老年患者痰和BALF标本共分离出71株铜绿假单胞菌、21株肺炎克雷伯菌、15株大肠埃希菌和14株鲍曼不动杆菌.BALF病原菌检出率为92.3%,明显高于痰培养(76.9%,χ2=10.90,P<0.01).药敏结果显示铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南、头孢吡肟和左氧氟沙星耐药,耐药率分别为81.1%,64.9%,86.5%和75.0%,66.7%,75.0%;铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素敏感;肺炎克雷伯菌对替卡西林/克拉维酸、阿米卡星和亚胺培南敏感.28例病原菌检出阳性结果患者根据药敏结果指导抗生素治疗后BALF和痰培养阳性率分别下降到35.7%和21.4%.结论 BALF细菌培养和药敏试验可明显提高老年肺部感染患者病原诊断率,可更好地指导临床选择有效抗菌药物.
作者:彭旭;倪小勤 刊期: 2011年第06期
目前,全国绝大多数医院进行网织红细胞计数仍然采用的是煌焦油蓝染色手工计数法,正常情况下,采用干粉EDTA-K2子弹头离心管采集新鲜离体末梢血进行网织红细胞染色计数对结果是没影响的,但我院在更换了一新批号的干粉EDTA-K2子弹头离心管后,却发现每次进行煌焦油蓝染色网织红细胞计数时全都会失败,镜下均无网织红细胞,而换以前剩下的子弹头离心管同样染色,结果却很好.这一现象以前无人报道过,因此我们就围绕离心管、染液和干粉EDTA-K2这几个因素进行了一系列的试验,以探讨染色失败的原因.
作者:施迎春;金小军;王锋 刊期: 2011年第06期
目的 探讨加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验在碳青霉烯酶类药物敏感性降低的细菌中检测碳青霉烯酶的临床应用价值.方法 收集2009年~2010年南京军区总医院对碳青霉烯酶类药物敏感性降低(亚胺培南、美罗培南或厄他培南的MIC≥2 μg/ml)的肠杆菌科细菌65株;采用琼脂倍比稀释法测定其对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC;通过改良Hodge试验和加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;采用PCR检测多种β-内酰胺酶基因,并对PCR阳性产物测序鉴定.结果 65株临床分离菌中,53株菌对亚胺培南不敏感(MIC>4 μg/ml),51株菌对美罗培南不敏感(MIC>4 μg/ml),58株菌对厄他培南不敏感(MIC>2 μg/ml).65株菌中38株改良Hodge试验阳性,包括7株弱阳性和31强阳性;33株加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验阳性,包括改良Hodge试验弱阳性2株和强阳性31株.经过对菌株进行β-内酰胺酶基因PCR和测序,发现加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验阳性菌株均携带blaKPC-2;32株阴性菌株均未携带碳青霉烯酶酶基因,但其中5株改良Hodge试验弱阳性菌株携带blampC/blaESBL.结论 加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验可快速、有效地区分改良Hodge试验的真、假阳性,是检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的简便可靠方法,适用于临床微生物实验室.
作者:王卫萍;严留佳;施德仕;邵海枫;范明;黄梅 刊期: 2011年第06期
目的 通过比较各组人群血清胸苷激酶1(sTK1)和前列腺特异性抗原(PSA)浓度,评价血清胸苷激酶1在前列腺癌早期筛查和诊断中的价值.方法 应用增强发光免疫点印迹法和化学发光法检测60例正常人,50例前列腺增生(BPH)患者和30例前列腺癌(PCa)患者的sTK1,游离前列腺特异性抗原(fPSA)和总前列腺特异性抗原(tPSA)浓度,并计算fPSA/tPSA比值.结果 正常对照组、BPH组和PCa组的sTK1,tPSA和fPSA/tPSA比值分别为0.40±0.21 pmol/L,1.7±0.95 ng/ml,0.38±0.24;1.24±1.02 pmol/L,8.19±8.11 ng/ml,0.22±0.12和1.06±0.67 pmol/L,47.32±40.15 ng/ml,0.09±0.08.三组人群sTK1浓度总体差异有统计学意义(F=21.67,P<0.01),正常对照组与BPH组和PCa组比较,sTK1浓度差异均有统计学意义(P<0.01),BPH组和PCa组的sTK1浓度均较正常对照组升高,但BPH组与PCa组sTK1浓度差异无统计学意义(P>0.05).三组人群血清tPSA浓度及fPSA/tPSA比值差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.01),其中PCa组的血清tPSA浓度明显高于正常对照组和BPH组,而fPSA/tPSA比值则小于其他两组.结论 血清TK1在前列腺癌早期筛查和诊断中具有一定的警示作用,但其临床应用价值不如PSA.
作者:周建平;张新利;王春梅 刊期: 2011年第06期
目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均<0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
作者:陈晓燕;曾玲;林茴 刊期: 2011年第06期
目的 探究无电流斑电击死后各阶段的大鼠肝脏热休克蛋白60(HSP60)表达情况.方法 制作无电流斑电击死动物模型,即大鼠按体重(5 ml/kg)腹腔注射20 ml/dl乌拉坦溶液,待麻醉生效后,将大鼠的左前肢与右后肢用生理盐水浸湿,外包以生理盐水浸泡过的湿纱布,施以110V交流电电击5 min致死,并设立对照组(空白组和死后电击组),于死亡即刻,15,30 min,1,2,4 h取出大鼠肝右叶作切片,用HSP60抗体进行免疫组化染色,以图像平均灰度值作为HSP60表达情况指标作统计学分析.结果 电击死组肝细胞HSP60表达水平在15 min内表现为高表达,之后呈下降趋势.死后电击后15 min内表达较电击死组低,在30 min处表达超过电击死组,后下降,1 h处回升,2 h达高峰又回落,但其值始终高于电击死组.结论 死亡2 h内对肝脏HSP60表达水平的检测对鉴定无电流斑电击死及判断生前电击和死后电击有积极意义.
作者:王乔峰;刘慧通;谢亚男;赵泽;丁素真;王振原 刊期: 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者:桂俊豪;刘鸿春;王瑞;周瑾;袁兰;杨柳;黄国香;邹红云;余伍忠 刊期: 2011年第06期
目的 探讨抗凝血浆代替血清测定ASO的可行性.方法 随机抽取142例患者静脉血标本,将每例标本3 ml分别注入市售普通试管和肝素锂抗凝管中,于同一仪器上采用免疫散射比浊法对ASO进行检测,并对结果进行统计学分析.结果 肝素锂抗凝血浆与血清两组间结果比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 可用肝素锂抗凝血浆代替血清测定ASO.
作者:杨萍 刊期: 2011年第06期
目的 了解革兰阳性球菌在临床标本中的分离与耐药情况,指导临床合理用药.方法 收集送检标本中分离的病原菌是革兰阳性球菌的菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,药敏试验采用K-B法,利用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离革兰阳性球菌445株,葡萄球菌占主导地位,其中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)133株(29.9%);肠球菌呈多重耐药状态,并且出现屎肠球菌的万古霉素耐药菌株;替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺对革兰阳性球菌均显示出强大的抗菌活性.结论 细菌耐药性严重,耐万古霉素的肠球菌也已经出现,临床医生和药师应重视耐药监控,预防耐药菌株的产生及流行.
作者:蔡璇;施菁玲;李从荣;孙端阳;李娟 刊期: 2011年第06期
目的 研究PTEN蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及间质内微血管计数情况.方法 采用免疫组化S-P法检测50例乳腺浸润性导管癌和10例正常乳腺组织中的PTEN表达,以CD34标记血管内皮细胞,计数微血管密度.结果 浸润性导管癌组织中PTEN的高表达率为46%,与正常乳腺组织比较差异有统计学显著性意义(P<0.01).CD34表达在病理分级中Ⅲ级比较Ⅰ,Ⅱ级的差异有统计学显著性意义(P<0.05);临床分期中,Ⅲ期较Ⅰ,Ⅱ期差异显著(P<0.01).PTEN的表达与微血管密度呈负相关.结论 PTEN表达与微血管密度计数呈负相关,PTEN表达下调的侵袭性较强,易出现浸润和转移,检测PTEN表达在临床预后的评估中有重要作用.
作者:李瀚;张利红 刊期: 2011年第06期