杨富强；康俊辉
乙型肝炎疫苗接种后不同个体的应答效果有差异性,其应答特征与遗传和免疫机制关系尤为密切,明确其具体的作用机制,提高乙肝疫苗的应答率对于有效防护乙型肝炎意义重大.现就近年来国内外对于此方面的研究现状和进展作一综述.
作者：李旭华；陈月；吴文苑 刊期： 2011年第06期
目的 明确儿童腹泻的病原,了解各种病原在地区、季节和年龄上的分布,以及致病菌对抗生素的耐药率.方法 对襄阳第一人民医院儿科2009年1月～12月就诊的1 022例门诊和住院腹泻患儿进行粪便常规、病毒学、培养及药敏的检验,分析腹泻患儿的病原分布规律、致病菌对抗生素的耐药率.结果 感染性腹泻占83.2%,轮状病毒(RV)感染是引起感染性腹泻的主要原因,其次是细菌.非感染性腹泻占16.8%.轮状病毒秋冬季感染率高,容易重复感染和合并乳糖不耐受,细菌感染以志贺氏杆菌多见.非感染性腹泻以糖原性腹泻和抗生素相关性腹泻为主.耐药分析:志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌等对氨苄西林、磺胺、头孢和喹诺酮类抗生素耐药率较高.结论 襄阳地区婴幼儿腹泻的主要病原是轮状病毒,集中于11和12月份,以6个月～2岁婴幼儿为主,其次是细菌性腹泻,集中于夏秋季(5～10月份),2岁以上儿童常见,5岁以上为多,细菌多元耐药明显.
作者：杨富强；康俊辉 刊期： 2011年第06期
目的 观察异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell,Allo-HSCT)病人血清中碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)术前术后的变化及其与预后的关系.方法 检测45例中南大学湘雅医院异基因干细胞移植病人(即观察组)和65例该院体检正常者(即对照组)血清中AKP和γ-GT的水平,并与对照组比较,分析观察组术前、术后外周血清AKP和γ-GT水平的变化及与预后的相关性.结果 ①移植前,观察组的AKP平均浓度(88.93±48.09)u/L和γ-GT平均浓度(24.37±16.77)u/L与对照组的AKP平均浓度(83.25±14.36)u/L和γ-GT(24.08±9.78)u/L平均浓度均正常,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);②预后良好的观察组移植后的AKP平均浓度(80.11±17.62)u/L和γ-GT平均浓度(36.87±24.70)u/L均正常,与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05);③预后差的观察组移植后的AKP平均浓度(183.87±220.24)u/L和γ-GT平均浓度(154.39±208.01)u/L明显升高,与移植前比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 患者血清中AKP和γ-GT水平可作为异基因造血干细胞移植术后预后判断的生化指标,对临床治疗及指导用药有一定辅助意义.
作者：谢卫民；张婷婷；钟白云 刊期： 2011年第06期
目的 应用参考方法[1]对血细胞分析仪白细胞分类计数(DIFF)进行校准,建立其量值溯源性.方法 采用手工目视显微镜法作为白细胞分类计数的参考方法对新鲜全血进行定值,以确定靶值;用该手工定值的新鲜全血对五台血液分析仪的DIFF参数进行校准,建立白细胞分类计数量值溯源性;校准完毕后进行新鲜全血比对试验.结果 DIFF参数手工分类靶值:NEUT,LYMPH,MONO,EOS和BASO分别为67.25%,26.58%,3.92%,2.00%和0.25%,五台仪器检测结果与手工分类靶值相比较,均在可信允许范围内;新鲜全血比对结果符合标准要求.结论 应用参考方法校准血细胞分析仪白细胞分类计数,可以实现其检测结果具有溯源性和准确性,同时可促进不同临床实验室DIFF检测结果互认.白细胞手工分类计数的准确性直接影响仪器分类参数校准的效果,实验室应定期进行人员手工分类能力比对.
作者：李明勇；李焱鑫；陈梅；张春平；李玉芹；李慧；王仁胜；周玉 刊期： 2011年第06期
目的 探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床价值.方法 用酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP)和乙型肝炎病毒标志物,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA),探讨HBV-LP与HBV DNA拷贝数之间相关性并对比三者在乙型肝炎患者中阳性检出率.结果 HBV-LP与HBV-DNA之间均存在显著相关性(r=0.86,P＜0.01);无论HBV-DNA阳性或阴性,HBV-LP阳性检出率(95.21%和69.86%)均显著高于HBeAg(49.70%和36.99%)(P＜0.01);在HBeAg阴性组中,HBV-LP阳性检出率(82.55%)显著高于HBV-DNA(44.97%)(P＜0.01).结论 HBV-LP检测是乙型肝炎患者特别是HBeAg阴性患者疾病进展、体内病毒复制及抗病毒治疗效果评判的敏感监测指标,可提高乙型肝炎患者血清学诊断水平.
作者：王菁；张小宁；程晓东；彭道荣 刊期： 2011年第06期
目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体(NT-proBNP)P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均＜0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.
作者：陈晓燕；曾玲；林茴 刊期： 2011年第06期
目的 研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者血小板活化特异性指标的检测意义.方法 选取2010年10月～2011年3月60例MS患者(其中单纯MS组、MS并发症组各30例)和30例健康对照者为研究对象,用ELISA法检测其血浆β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板第4因子(PF4)和血栓烷B2(TXB2)水平.结果 三组血浆β-TG,PF4和TXB2水平分别为:单纯MS组29.83±10.94 ng/ml,5.27±4.11 ng/ml,147.54±73.47 ng/ml;MS合并并发症组为51.62±20.26 ng/ml,12.16±6.03 ng/ml,231.72±111.69 ng/ml;对照组为23.68±8.15 ng/ml,4.36±3.52 ng/ml,125.27±49.6 ng/ml.单纯MS组明显高于对照组(t=5.21,P=0.008;t=2.45,P=0.021;t=3.42,P=0.019);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2水平显著高于对照组(t=23.52,P=0.004;t=31.45,P=0.001;t=1.67,P=0.005);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2明显高于单纯MS组(t=18.33,P=0.005;t=28.46,P=0.003;t=21.72,P=0.005);MS患者血浆β-TG和PF4及TXB2的变化正相关(r=0.485,P<0.01;r=0.772,P<0.01).结论 MS患者存在不同程度的血小板活化,测定血浆β-TG,PF4和TXB2水平可评估MS患者血小板活化程度.
作者：胡志坚；荀春华；徐炜；高志亮 刊期： 2011年第06期
目的 研究膝关节痛风性关节炎患者关节液中尿酸浓度值的变化.方法 对118例膝关节痛风性关节炎患者抽取关节液进行尿酸含量检测,并对其中的31例患者治疗一段时间后再次抽取关节液进行尿酸检测.结果 118例患者其关节液中尿酸含量(男性99名,尿酸值555±160 μmol/L;女性19名,尿酸值461±42 μmol/L)均明显高于同期所有膝关节关节炎患者的平均水平(男性335±133 μmol/L,女性237±78 μmol/L).31例患者经治疗后有30例关节液中尿酸含量明显下降.结论 检测关节液中尿酸含量对膝关节痛风性关节炎患者的诊断和疗效观察均具有重要的临床意义.
作者：池继敏；邹明；张峰 刊期： 2011年第06期
目的 探讨血清胃蛋白酶原测定与幽门螺杆菌感染的各种胃部病变的关系和临床诊断价值.方法 选取幽门螺杆菌抗体IgG阳性的病例168例.其中浅表性胃炎45例,萎缩性胃炎32例,消化性溃疡53例(胃溃疡28例,十二指肠溃疡25例),胃癌38例;正常对照组54例.应用乳胶增强免疫比浊法测定血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)以及计算PGⅠ/PGⅡ的比值.采用ELISA方法检测幽门螺杆菌抗体IgG.结果 胃癌组血清PGⅠ,PGⅠ/PGⅡ的比值明显低于正常对照组(P<0.01),萎缩性胃炎组血清PGⅠ低于正常对照组(P<0.01),消化性溃疡组血清PGⅠ,PGⅠ/PGⅡ明显高于正常对照组(P<0.01).浅表性胃炎患者与对照组比较,血清PGⅠ无明显差异.结论 血清胃蛋白酶原Ⅰ,PGⅠ/PGⅡ的比值可作为诊断幽门螺杆菌感染的各种胃疾病的参考指标.
作者：张汉园；蒋玉英；王斌 刊期： 2011年第06期
目的 探讨多色荧光原位杂交(multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH) 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.
作者：桂俊豪；刘鸿春；王瑞；周瑾；袁兰；杨柳；黄国香；邹红云；余伍忠 刊期： 2011年第06期
目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRNA及蛋白水平的干扰效应.结果 转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB mRNA表达量分别是阴性对照组的27.2%,45.6%和29.4%;空白对照组的23.7%,39.7%和25.6%;转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB/β-actin灰度值比值分别是阴性对照组的27.4%,39.4%和30.1%;空白对照组的26.9%,38.7%和29.5%.构建的shRNA表达载体可以使MCF-7细胞中prohibitin基因的mRNA及其蛋白含量降低.结论 构建的针对prohibitin基因的shRNA表达载体,转染MCF-7细胞后可有效抑制细胞中prohibitin的表达,证实构建有效.
作者：赵丽华；何谦；张淑群；安哲；张磊 刊期： 2011年第06期
目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%～76%和30%～72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
作者：饶国洲；李昂；苟建重；朱永进；孙慧玲；张引成 刊期： 2011年第06期
目的 探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值.方法 对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较.结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均、多形性,而AA患者未见上述特征.Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血频率(87.5%,62.5%,37.5%)较AA患者(20.3%,0%,0%)明显增高(P<0.01).Hypo-MDS患者骨髓切片CD34+细胞(3.87±2.89)%明显高于AA患者(0.13±0.17)%(P<0.01).Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)亦较AA(3.57%)明显增高(P<0.01),且AA均为小克隆异常.结论 长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段.
作者：吕树文；程利梅；那春龙；郑俊；刘艳丛；谢守军 刊期： 2011年第06期
目的 通过建立37℃α-淀粉酶(α-Amy)参考方法,对酶校准物定值,探讨血清α-Amy测定结果的准确性与可比性.方法 依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考测量程序建立α-Amy酶催化活性参考方法,测定α-Amy有证参考物(CRM)IRMM-456,验证其准确性,并对其精密度进行评价.同时用参考方法对制备的酶校准物进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案留取40份不同α-Amy浓度范围的人血清,采用A~E五种临床常规检测组合在使用自制酶校准物校准前后测定α-Amy,分别与参考方法进行比较,计算这五种常规方法在使用自制酶校准物校准前后测定结果与参考方法的相对偏倚及相关系数.结果 用参考方法测定IRMM-456结果是547.2 U/L,在其给定的546±18 U/L范围内.所建立的37℃α-Amy参考方法总CV<0.5%.用制备的酶校准物校准前后的五种常规方法和参考方法进行比较,相关性均良好(r2>0.98),校准前后的相对偏倚A方法从30%变为10%以下;B方法从30%变为15%以下;C方法从35%变为10%以下;D方法从20%变为8%以下;E方法从35%变为10%以下.结论 所建立的37℃α-Amy参考方法准确可靠,采用参考方法为酶校准物定值后校准常规方法,可以提高血清α-Amy测定结果的准确度和可比性.
作者：高学慧；齐志宏；秦续珍；赵芳；叶阿里；徐二木；邱玲；宋耀虹 刊期： 2011年第06期
目的 了解临床标本中铜绿假单胞菌感染分布的特点及对14种抗菌药物的耐药性,指导临床合理治疗铜绿假单胞菌的感染.方法 常规培养分离细菌,用美国DADE BEHRING MicroScan分析系统鉴定菌种,药敏试验采用K-B纸片扩散法,按美国NCCLS[1,2]规定标准执行.结果 183株铜绿假单胞菌主要来自呼吸道(68.9%)、伤口分泌物(18.0%),主要分布在神经外科(39.3%)、血液肿瘤科(27.7%)、呼吸科(16.9%).该菌对头孢曲松、头孢噻肟的耐药率高分别为82%和78.6%;对头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素和庆大霉素的耐药率分别为44.8%,36.1%,36.1%和36.1%;对其余八种抗菌药物的耐药率均≤18%.结论 阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和替卡西林/克拉维酸仍可作为铜绿假单胞菌的感染的经验用药.
作者：杨斌 刊期： 2011年第06期
目的 建立胃癌早期患者的血清差异表达蛋白诊断模型,构建用于胃癌早期诊断的敏感和特异的新方法.方法 采用PBSⅡ/C 型蛋白质指纹图谱仪及金芯片检测45例早期胃癌患者及80例健康对照人群血清蛋白质图谱,用Biomarker Wizard 3.1 软件分析所得数据,筛选胃癌差异表达蛋白.通过人工神经网络数学模型(ANN)选择佳差异表达组合建立并验证胃癌的诊断模型.内标物质加入血清样本,校准和消除操作条件波动对分析结果的影响,提高实验的准确度.后,应用SPSS13.0软件绘制胃癌诊断模型的受试者工作特征曲线(ROC curve),评价诊断模型的准确度.结果 在质荷比为2 000～20 000范围内共检测到有显著差异的蛋白质峰(t检验,P<0.01)28个.经ANN反复训练筛选其中5个差异蛋白(质荷比分别为2 545.3±3.6,2 942.7±4.3,3 135.5±2.8,4 130.6±2.1,8 691.4±1.3)组成胃癌人工神经网络诊断模型,对胃癌的诊断灵敏度为95.0%,特异度97.5%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值97.5%,诊断准确度为96.67%.绘制ROC曲线,曲线下面积为0.972,表明该诊断模型准确性较高.结论 该研究建立的诊断模型对胃癌的诊断准确度较高.SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在胃癌的早期诊断和血清肿瘤标志物的筛选方面具有一定价值,值得进一步深入研究.
作者：吕连华；曾白华；冯建军；王开正；丁银环 刊期： 2011年第06期
目的 通过比较各组人群血清胸苷激酶1(sTK1)和前列腺特异性抗原(PSA)浓度,评价血清胸苷激酶1在前列腺癌早期筛查和诊断中的价值.方法 应用增强发光免疫点印迹法和化学发光法检测60例正常人,50例前列腺增生(BPH)患者和30例前列腺癌(PCa)患者的sTK1,游离前列腺特异性抗原(fPSA)和总前列腺特异性抗原(tPSA)浓度,并计算fPSA/tPSA比值.结果 正常对照组、BPH组和PCa组的sTK1,tPSA和fPSA/tPSA比值分别为0.40±0.21 pmol/L,1.7±0.95 ng/ml,0.38±0.24;1.24±1.02 pmol/L,8.19±8.11 ng/ml,0.22±0.12和1.06±0.67 pmol/L,47.32±40.15 ng/ml,0.09±0.08.三组人群sTK1浓度总体差异有统计学意义(F=21.67,P<0.01),正常对照组与BPH组和PCa组比较,sTK1浓度差异均有统计学意义(P<0.01),BPH组和PCa组的sTK1浓度均较正常对照组升高,但BPH组与PCa组sTK1浓度差异无统计学意义(P>0.05).三组人群血清tPSA浓度及fPSA/tPSA比值差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.01),其中PCa组的血清tPSA浓度明显高于正常对照组和BPH组,而fPSA/tPSA比值则小于其他两组.结论 血清TK1在前列腺癌早期筛查和诊断中具有一定的警示作用,但其临床应用价值不如PSA.
作者：周建平；张新利；王春梅 刊期： 2011年第06期
肿瘤是当今社会影响人类健康的主要疾病之一,随着人们对肿瘤免疫、肿瘤病因及分子机制等研究的深入,肿瘤的基因治疗逐渐走向成熟,从多方面入手,建立个体化特定的肿瘤治疗方案和策略,合理选择基因治疗靶,使基因治疗广泛应用于临床,造福于肿瘤患者.
作者：黄红波；刘庚勋；李正贤 刊期： 2011年第06期
目的 了解深圳市福田人民医院临床分离对碳青霉烯类抗生素耐药革兰阴性杆菌产金属β-内酰胺酶的情况.方法 收集2010年6月～12月临床分离碳青霉烯类耐药菌株.用EDTA双纸片增效试验筛选分离的耐药细菌中的产金属β-内酰胺酶株,增效试验阳性菌株用聚合酶链反应(PCR) 扩增并通过对阳性扩增产物测序来确证金属酶基因型.结果 16株亚胺培南或美罗培南耐药细菌中铜绿假单胞菌10株,鲍曼不动杆菌4株,大肠埃希菌2株.双纸片增效试验阳性6株,PCR扩增阳性3株,1株VIM-2型和2株IMP-4型.结论 临床已出现产VIM-2型和IMP-4型金属β-内酰胺酶的碳青霉烯类抗生素耐药菌株,应加强对细菌耐药性监测及院内感染的管理控制,防止耐药菌株播散.
作者：聂署萍；萧王勇；黄烈；吴润香；凌利芬 刊期： 2011年第06期
目的 研究胸腔积液细胞抑癌基因PTEN(phosphatase and tension homology deleted on chromosome ten,PTEN) 基因突变高发区外显子5,7,8突变率与肺癌临床分期、病理组织学分级和病理类型的相关性.方法 研究组为52例伴有胸腔积液的肺癌患者,对照组为40例伴有胸腔积液的结核性胸膜炎和其他胸膜炎患者,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,对胸腔积液细胞PTEN基因外显子5,7,8进行突变分析.结果 52例肺癌胸腔积液细胞中检测到PTEN基因突变7例,均为外显子5突变,突变率为13.5%(7/52);40例良性胸腔积液中未检测到PTEN基因突变,二者差异有统计学意义(P<0.05).52例肺癌患者不同临床分期中,Ⅲ期突变率为3.4%(1/29),Ⅳ期突变率为26%(6/23),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理组织学分级中,低分化癌突变率为31%(5/16),中、高分化癌突变率为5.6%(2/36),二者差异有统计学意义(P<0.05);不同病理分型中,腺癌突变率为10.7%(3/28)、鳞癌突变率为14%(2/14)、小细胞肺癌突变率为20%(2/10),三者差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌胸腔积液细胞中存在PTEN基因突变,临床分期越晚、病理组织学分级越低,PTEN基因突变率越高,但与肺癌病理类型无关.PTEN基因突变可以作为有价值的肿瘤标记物用于恶性胸腔积液的诊断,可作为判断肺癌预后的一项指标.
作者：车德海；张华；魏海波；于雁 刊期： 2011年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
