吕树文；程利梅；那春龙；郑俊；刘艳丛；谢守军
目的 综述基于高分辨熔解分析(HRM)的基因分型新技术.方法 介绍无标记探针、弹回引物、隐蔽探针、温度开关PCR、等位基因特异延伸PCR和低变性温度下共扩增PCR等技术的基本原理并评价其适用性.结果 这些新技术不仅避免了产物污染,提高了HRM基因分型的准确性和敏感度,而且拓展了HRM的应用范围.结论 基于HRM的基因分型新技术有望成为临床分子诊断的新方法.
作者：李菲菲；尤崇革 刊期： 2011年第06期
目的 探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床价值.方法 用酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP)和乙型肝炎病毒标志物,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA),探讨HBV-LP与HBV DNA拷贝数之间相关性并对比三者在乙型肝炎患者中阳性检出率.结果 HBV-LP与HBV-DNA之间均存在显著相关性(r=0.86,P＜0.01);无论HBV-DNA阳性或阴性,HBV-LP阳性检出率(95.21%和69.86%)均显著高于HBeAg(49.70%和36.99%)(P＜0.01);在HBeAg阴性组中,HBV-LP阳性检出率(82.55%)显著高于HBV-DNA(44.97%)(P＜0.01).结论 HBV-LP检测是乙型肝炎患者特别是HBeAg阴性患者疾病进展、体内病毒复制及抗病毒治疗效果评判的敏感监测指标,可提高乙型肝炎患者血清学诊断水平.
作者：王菁；张小宁；程晓东；彭道荣 刊期： 2011年第06期
目的 探讨全自动尿液分析仪UF-1000i的检测性能和检测结果的可信度,评估其在尿液标本检测中的应用.方法 选择批内精密度、批间精密度、准确度、携带污染、线性分析、参考区间验证和仪器间结果比对7个参数衡量UF-1000i的检测性能.结果 红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、上皮细胞(EC)、管型(CAST)和细菌(BACT)的批内精密度分别为5.28%～15.28%,2.2%～12.2%,24.4%～31.3%,34.1%～41.7%和4.7%～22.1%;批间精密度分别为3.8%～8.0%,2.0%～7.0%,8.7%～13.0%,14.0%～18.9%和3.4%～10.3%;准确度均值分别为40.1%～192%,36.2%～817.4%,11.5%～82.9%,4.58%～21.2%和200%～747.8%.RBC,WBC和BACT线性相关系数(r2)分别为0.988 8,0.988 8,0.962 7.RBC,BACT的携带污染率分别为0.1%和0.62%;参考区间的R值都>90%.仪器间比对结果RBC,CAST和BACT偏倚较大.结论 批内精密度高值、批间精密度、准确度、线性分析和参考区间验证等结果均符合ISO15189对仪器性能要求,而批内精密度低值、携带污染率和仪器间比对的结果均不符合ISO15189对仪器性能要求.全自动尿液分析仪UF-1000i可以用来进行临床标本的检测.
作者：潘莹；田瑶 刊期： 2011年第06期
目的 对Vitros-350全自动干式生化分析仪测定血清尿素氮 (BUN)、肌酐(CREA)和尿酸(UA)的分析性能进行评价.方法 采用Vitros-350全自动生化仪检测血清BUN,CREA和UA,验证其各项目检测的精密度、准确度、分析测量范围,临床可报告范围以及生物参考区间.结果 Vitros-350全自动干式生化仪测定BUN,CREA和UA的批内不精密度和总不精密度均达到厂家规定的不精密度且小于该科设定的质量要求.准确度方面,检测5个不同批号的室间质控品,均值与靶值的偏倚均小于允许偏倚.分析测量范围验证结果表明除CREA实测为3～1 226 μmol/L,稍低于厂家给定的4～1 238 μmol/L外,BUN(0.32～43.6 mmol/L)及UA(18～1 032 μmol/L)分析测量范围均宽于厂家给定的范围.BUN,CREA和UA的临床可报告范围分别为0.95～436 mmol/L,7～12 260 μmol/L和35～10 320 μmol/L.参考区间验证结果表明现用参考区间适用该实验室,可以继续使用.结论 Vitros-350全自动干式生化仪测定BUN,CREA和UA的主要验证试验结果均达到厂家给定的分析性能,能满足临床实验诊断的检测需求.
作者：张建忠；沈春燕；朱晶；陈建红 刊期： 2011年第06期
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy),脂蛋白(a)[Lp(a)]和血浆纤维蛋白原(Fg)联合检测在急性脑梗死(ACI)诊断中的意义.方法 选择急性脑梗死患者63例,正常对照组43例,分别检测Hcy,Lp(a)和Fg的浓度,并进行比较,分析其与急性脑梗死的关系.结果 急性脑梗死组Hey,Lp(a)和Fg的浓度分别为19.48±8.42 μmol/L,373±182 mg/L和3.7±1.2 g/L,正常对照组三者的浓度分别为10.66±2.61 μmol/L,181±106 mg/L和2.4±1.0 g/L.急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.01);急性脑梗死组中各项阳性检出率为Hcy 60.3%,Lp(a) 42.9%和Fg 30.0%,而正常对照组三者的阳性率只有6.9%,11.6%和6.9%,急性脑梗死组明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三者联合检测阳性率为89%,高于三者任何一个单项阳性率.结论 Hcy,Lp(a)和Fg联合检测有利于急性脑梗死患者的预测、诊断及预后.
作者：崔杰西；程训民；葛玲；毛诗海；于成 刊期： 2011年第06期
目的 通过比较各组人群血清胸苷激酶1(sTK1)和前列腺特异性抗原(PSA)浓度,评价血清胸苷激酶1在前列腺癌早期筛查和诊断中的价值.方法 应用增强发光免疫点印迹法和化学发光法检测60例正常人,50例前列腺增生(BPH)患者和30例前列腺癌(PCa)患者的sTK1,游离前列腺特异性抗原(fPSA)和总前列腺特异性抗原(tPSA)浓度,并计算fPSA/tPSA比值.结果 正常对照组、BPH组和PCa组的sTK1,tPSA和fPSA/tPSA比值分别为0.40±0.21 pmol/L,1.7±0.95 ng/ml,0.38±0.24;1.24±1.02 pmol/L,8.19±8.11 ng/ml,0.22±0.12和1.06±0.67 pmol/L,47.32±40.15 ng/ml,0.09±0.08.三组人群sTK1浓度总体差异有统计学意义(F=21.67,P<0.01),正常对照组与BPH组和PCa组比较,sTK1浓度差异均有统计学意义(P<0.01),BPH组和PCa组的sTK1浓度均较正常对照组升高,但BPH组与PCa组sTK1浓度差异无统计学意义(P>0.05).三组人群血清tPSA浓度及fPSA/tPSA比值差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.01),其中PCa组的血清tPSA浓度明显高于正常对照组和BPH组,而fPSA/tPSA比值则小于其他两组.结论 血清TK1在前列腺癌早期筛查和诊断中具有一定的警示作用,但其临床应用价值不如PSA.
作者：周建平；张新利；王春梅 刊期： 2011年第06期
目的 研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者血小板活化特异性指标的检测意义.方法 选取2010年10月～2011年3月60例MS患者(其中单纯MS组、MS并发症组各30例)和30例健康对照者为研究对象,用ELISA法检测其血浆β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板第4因子(PF4)和血栓烷B2(TXB2)水平.结果 三组血浆β-TG,PF4和TXB2水平分别为:单纯MS组29.83±10.94 ng/ml,5.27±4.11 ng/ml,147.54±73.47 ng/ml;MS合并并发症组为51.62±20.26 ng/ml,12.16±6.03 ng/ml,231.72±111.69 ng/ml;对照组为23.68±8.15 ng/ml,4.36±3.52 ng/ml,125.27±49.6 ng/ml.单纯MS组明显高于对照组(t=5.21,P=0.008;t=2.45,P=0.021;t=3.42,P=0.019);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2水平显著高于对照组(t=23.52,P=0.004;t=31.45,P=0.001;t=1.67,P=0.005);MS合并并发症组血浆β-TG,PF4和TXB2明显高于单纯MS组(t=18.33,P=0.005;t=28.46,P=0.003;t=21.72,P=0.005);MS患者血浆β-TG和PF4及TXB2的变化正相关(r=0.485,P<0.01;r=0.772,P<0.01).结论 MS患者存在不同程度的血小板活化,测定血浆β-TG,PF4和TXB2水平可评估MS患者血小板活化程度.
作者：胡志坚；荀春华；徐炜；高志亮 刊期： 2011年第06期
目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA(siRNA)的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%～76%和30%～72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),阴性对照组无此作用(P>0.05).结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.
作者：饶国洲；李昂；苟建重；朱永进；孙慧玲；张引成 刊期： 2011年第06期
目的 探讨抗凝血浆代替血清测定ASO的可行性.方法 随机抽取142例患者静脉血标本,将每例标本3 ml分别注入市售普通试管和肝素锂抗凝管中,于同一仪器上采用免疫散射比浊法对ASO进行检测,并对结果进行统计学分析.结果 肝素锂抗凝血浆与血清两组间结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 可用肝素锂抗凝血浆代替血清测定ASO.
作者：杨萍 刊期： 2011年第06期
目的 了解革兰阳性球菌在临床标本中的分离与耐药情况,指导临床合理用药.方法 收集送检标本中分离的病原菌是革兰阳性球菌的菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,药敏试验采用K-B法,利用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离革兰阳性球菌445株,葡萄球菌占主导地位,其中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)133株(29.9%);肠球菌呈多重耐药状态,并且出现屎肠球菌的万古霉素耐药菌株;替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺对革兰阳性球菌均显示出强大的抗菌活性.结论 细菌耐药性严重,耐万古霉素的肠球菌也已经出现,临床医生和药师应重视耐药监控,预防耐药菌株的产生及流行.
作者：蔡璇；施菁玲；李从荣；孙端阳；李娟 刊期： 2011年第06期
目的 评价化学发光仪测定甲状腺激素进行仪器性能验证.方法 用LIAISON Diasorin化学发光仪测定甲状腺激素T3,T4,FT3,FT4和TSH的含量,分别计算批内精密度、批间精密度和携带污染率.结果 T3,T4,FT3,FT4和TSH的批内精密度分别是6.49%,4.07%,3.02%,3.70%和5.39%;批间精密度分别是7.32%,6.88%,7.32%,5.74%和10.95%;携带污染率分别是-4.20%,-4.04%,0.21%,-0.65%和0.05%.结论 LIAISON Diasorin化学发光仪检测系统测定甲状腺功能具有重复性好、携带污染率低等优点,符合厂家声明的结果.
作者：贾淑芬 刊期： 2011年第06期
目的 探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值.方法 对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较.结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均、多形性,而AA患者未见上述特征.Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血频率(87.5%,62.5%,37.5%)较AA患者(20.3%,0%,0%)明显增高(P<0.01).Hypo-MDS患者骨髓切片CD34+细胞(3.87±2.89)%明显高于AA患者(0.13±0.17)%(P<0.01).Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)亦较AA(3.57%)明显增高(P<0.01),且AA均为小克隆异常.结论 长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段.
作者：吕树文；程利梅；那春龙；郑俊；刘艳丛；谢守军 刊期： 2011年第06期
目的 观察2007年~2010年深圳市急性呼吸道感染的各类人群中随年龄、性别及季节变化肺炎支原体的流行情况.方法 对2007年1月～2010年12月在福田区人民医院确诊为下呼吸道感染的3 710例患者取静脉血,用被动凝集法检测肺炎支原体特异性抗体IgM(MP-IgM).结果 四年间下呼吸道感染患儿中,Mp-IgM的总检出率为18.7%,其中2岁以下幼儿组及55岁以上老年组MP-IgM阳性率低(8.33%和7.16%),其次为2～7岁儿童组和15~55岁成人组(21.58%和 20.53%).7～15岁儿童组MP-IgM阳性率高达31.10%.肺炎支原体的抗体检出率与性别无关且秋冬季流行性较高.结论 由于肺炎支原体在学龄儿童人群中具有明显的高发态势,对于该类人群的呼吸道感染者应高度重视MP-IgM抗体的检查,以便能做到对因治疗,早日康复.
作者：杨来智；吴润香；何涛君；邱羽 刊期： 2011年第06期
目的 探讨不同年龄、不同性别儿童全血中常量元素(钙、镁)和微量元素(铜、锌、铁)含量及年龄差异,为儿童合理补充常量和微量元素提供参考.方法 采用原子吸收光谱法测定北京地区2010年4 158例0～6岁儿童全血铜、锌、铁、钙、镁5种元素含量,对不同性别间的差异采用t检验进行分析,采用F分析比较年龄间的分布差异.结果 在检测的五项指标中,五个年龄组之间铜、锌、铁、钙、镁含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05),不同年龄组儿童锌、镁、铁含量随年龄增长而升高,钙含量随年龄增长而降低.在性别上铜含量(男性高于女性)差异具有统计学意义(P<0.05).结论 不同年龄组儿童5种元素含量不同,需要摄入量也不同,针对不同年龄段的儿童给予有针对性的营养指导.
作者：于培红；李爱红；白雪梅；崔虹霞；赵蕊；毕晓郁 刊期： 2011年第06期
目的 探讨全血制备冷沉淀过程中,保存温度、制备时间和融化终点对冷沉淀中Ⅷ因子含量的影响.方法 80例全血平均分4组,A组(4±2)℃温度保存6～8 h,B组室温保存6～8 h,C组(4±2)℃温度保存8～10 h,D组室温保存8～10 h,用希森美康CA-50自动血凝测试仪检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.另外随机选择40例全血制备冷沉淀,(4±2)℃温度保存6～8 h,分为E组(n=20)选择终点为冰块融化至直径4～5 cm、厚度约1 cm,F组(n=20)选择终点为冰块融化至基本无渣,同法检测每组冷沉淀中Ⅷ因子含量.结果 A组冷沉淀中Ⅷ因子含量平均为76.45±15.65 IU,B组为52.55±12.54 IU,C组为58.52±17.84 IU,D组为42.26±10.32 IU,ABCD组采用SPSS11.0统计软件Student-Newman-Keuls方差分析比较,结果表明:A组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著高于其他组的含量(P值均<0.05),D组冷沉淀中Ⅷ因子含量均显著低于其他组的含量(P值均<0.05);E组为75.23±12.65 IU,F组为50.64±12.31 IU,EF组采用SPSS11.0统计软件独立样本t检验(Independent Samples t test)比较,结果表明E组冷沉淀中Ⅷ因子含量显著高于F组(t=2.76,P值<0.05).结论 原料血在(4±2)℃温度保存6～8 h制备冷沉淀,其Ⅷ因子含量高;终点为冰块融化至直径4~5 cm、厚度约1 cm时制备冷沉淀,冷沉淀中Ⅷ因子含量高.
作者：李炜华；漆云霞 刊期： 2011年第06期
目的 比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在骨髓增生异常综合征(MDS)染色体异常检测中的灵敏度和特异度.方法 40例MDS患者,CCA法采用骨髓短期培养法,核型分析采用R带技术.FISH法采用间期FISH,选取4组探针组合检测-5/5q-和-7/7q-.结果 采用CCA法,5号和7号染色体异常检出率为17.5%,而利用FISH技术,阳性率为35.0%.5号,7号染色体异常检出率分别由7.5%,10.0%升至15.0%,20.0%.两种方法之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异.
作者：唐元艳；梁艳；熊涛；虞咏知；黄知平 刊期： 2011年第06期
目的 探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 细菌培养及药敏试验在老年人肺部感染病原诊断和指导抗生素治疗的价值.方法 常规方法分离培养2010~2011年度91例住院的肺部感染老年患者痰和BALF病原菌,应用半自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行.结果 91例肺部感染老年患者痰和BALF标本共分离出71株铜绿假单胞菌、21株肺炎克雷伯菌、15株大肠埃希菌和14株鲍曼不动杆菌.BALF病原菌检出率为92.3%,明显高于痰培养(76.9%,χ2=10.90,P<0.01).药敏结果显示铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南、头孢吡肟和左氧氟沙星耐药,耐药率分别为81.1%,64.9%,86.5%和75.0%,66.7%,75.0%;铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素敏感;肺炎克雷伯菌对替卡西林/克拉维酸、阿米卡星和亚胺培南敏感.28例病原菌检出阳性结果患者根据药敏结果指导抗生素治疗后BALF和痰培养阳性率分别下降到35.7%和21.4%.结论 BALF细菌培养和药敏试验可明显提高老年肺部感染患者病原诊断率,可更好地指导临床选择有效抗菌药物.
作者：彭旭；倪小勤 刊期： 2011年第06期
目的 了解临床标本中铜绿假单胞菌感染分布的特点及对14种抗菌药物的耐药性,指导临床合理治疗铜绿假单胞菌的感染.方法 常规培养分离细菌,用美国DADE BEHRING MicroScan分析系统鉴定菌种,药敏试验采用K-B纸片扩散法,按美国NCCLS[1,2]规定标准执行.结果 183株铜绿假单胞菌主要来自呼吸道(68.9%)、伤口分泌物(18.0%),主要分布在神经外科(39.3%)、血液肿瘤科(27.7%)、呼吸科(16.9%).该菌对头孢曲松、头孢噻肟的耐药率高分别为82%和78.6%;对头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素和庆大霉素的耐药率分别为44.8%,36.1%,36.1%和36.1%;对其余八种抗菌药物的耐药率均≤18%.结论 阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和替卡西林/克拉维酸仍可作为铜绿假单胞菌的感染的经验用药.
作者：杨斌 刊期： 2011年第06期
目的 探究无电流斑电击死后各阶段的大鼠肝脏热休克蛋白60(HSP60)表达情况.方法 制作无电流斑电击死动物模型,即大鼠按体重(5 ml/kg)腹腔注射20 ml/dl乌拉坦溶液,待麻醉生效后,将大鼠的左前肢与右后肢用生理盐水浸湿,外包以生理盐水浸泡过的湿纱布,施以110V交流电电击5 min致死,并设立对照组(空白组和死后电击组),于死亡即刻,15,30 min,1,2,4 h取出大鼠肝右叶作切片,用HSP60抗体进行免疫组化染色,以图像平均灰度值作为HSP60表达情况指标作统计学分析.结果 电击死组肝细胞HSP60表达水平在15 min内表现为高表达,之后呈下降趋势.死后电击后15 min内表达较电击死组低,在30 min处表达超过电击死组,后下降,1 h处回升,2 h达高峰又回落,但其值始终高于电击死组.结论 死亡2 h内对肝脏HSP60表达水平的检测对鉴定无电流斑电击死及判断生前电击和死后电击有积极意义.
作者：王乔峰；刘慧通；谢亚男；赵泽；丁素真；王振原 刊期： 2011年第06期
目的 研究微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体的能力.方法 采用微柱凝胶抗球蛋白技术对127例含有红细胞同种抗体的样本进行检测,使用经典的试管抗球蛋白法平行检测,比对两种方法的检测结果.结果 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率为98.4%,试管抗球蛋白法的检出率为80.3%.其中,试管抗球蛋白法对抗-D,-E,-C,-c,-e,-C+e,-E+c,-Mur,-Dia,-Dib,-Fyb,-Jka,-Jkb,-Lea和-P1抗体均能检出,但对于MNS血型系统抗M抗体的检出率仅为36.4%,对未知抗体特异性的冷抗体检出率为57.7%;而微柱凝胶抗球蛋白法对所有样本包含的红细胞同种抗体均能检出,除了Kidd血型系统,漏检率为33.3%.结论 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率高于试管抗球蛋白法,但是可能会漏检Kidd血型系统同种抗体,建议实验室在使用微柱凝胶抗球蛋白法的同时,应结合试管抗球蛋白方法,可以更有效地检出抗体,特别是输血前相容性试验.
作者：苏宇清；喻琼；梁延连 刊期： 2011年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
