谢红;郝选明
目的 探讨斑点免疫胶体金渗滤法与ELISA法检测包虫抗体的相关性及免疫诊断价值.方法 用四种抗原联合检测的DIGFA法分别检测感染包虫病患者、健康人群、疑为包虫病感染者血清中的特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较.结果 DIGFA法检测包虫病患者血清中特异性抗体的敏感度为96.1% (74/77)、特异度为100%(20/20),与ELISA 法检测结果符合率为93.7%;不同虫荷数感染者间抗体水平差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 用四联抗原检测感染包囊虫患者血清中特异性抗体具有较好的敏感度和特异度,组间差异无显著性.DIGFA法与ELISA法相比,前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合基层寄生虫病的临床检验和流行病学调查.若能进一步纯化检测用抗原,囊型抗原和泡型抗原间的特异性,则更具有非常大的潜在应用价值.
作者:欧仕颖;余长芳 刊期: 2011年第05期
目的 提高侵袭性大颗粒淋巴细胞白血病(LGLL)的认识及鉴别诊断.方法 报告3例侵袭性LGLL的临床特征,MICM实验室检查并结合文献进行复习.结果 1例侵袭性T-LGLL及2例侵袭性NK-LGLL,临床以全身症状明显并有肝、脾肿大,预后极差.且有各自的免疫表型特点,大颗粒淋巴细胞形态及CE,ACP,PAS是LGLL诊断的重要线索.结论 LGLL的诊断需结合临床、细胞学检测、免疫分型综合分析并加以鉴别诊断.
作者:翟洪顺;林丽淑;邹德学;聂李平;刘延涛;周宇;张莉莉 刊期: 2011年第05期
目的 检测分析窒息新生儿多种血清电解质的变化及临床意义.方法 对51例在西安市第四医院住院的窒息新生儿和30例正常新生儿在出生后3 d内取静脉血,检测血清K+,Na+,Cl-,Ca2+和Mg2+等多种电解质的变化,分组统计分析均值的差异.结果 两个窒息新生儿组血清Na+,Cl-,Ca2+和Mg2+水平 (mmol/L)分别为130.22±5.33和134.07±2.68,95.45±5.40和97.32±4.80,1.59±0.36和1.94±0.40,0.70±0.17和0.78±0.13,分别低于正常新生儿血清的139.37±4.38,101.71±3.79,2.32±0.15和0.99±0.19,差异具有统计学意义(P<0.05).血清钾的差异无统计学意义.结论 通过检测分析窒息新生儿多种血清电解质的改变,有助于及时了解患儿病情进程,指导临床治疗.
作者:樊雪英;蒋文英;王忠民;俞海珍 刊期: 2011年第05期
目的 比较核酸提取仪和手工法核酸提取对荧光定量PCR准确定量的影响.方法 血清样本分别用NP968核酸提取仪和手工法提取DNA和RNA,提取产物作为模板,用ABI 7500进行荧光定量PCR分别检测HBV和HCV,对比CT值,比较两种核酸提取方法的效率.结果 核酸提取仪提取的核酸PCR扩增的CT值明显低于手工法的CT值,处理大批量样本的时间也明显短于手工法.结论 核酸提取仪具有速度快、提取效率高的优点,值得在临床实验室推广应用.
作者:张建芳;燕凤;王德堂;陈必良 刊期: 2011年第05期
目的 探讨水蛭素对DIC模型的大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的干预作用.方法 通过鼠尾静脉滴注脂多糖制作DIC模型,将大鼠分为三组即对照组、DIC组和水蛭素组,选取4个时间点(4,6,8,12 h)测定血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D水平的变化;同时用免疫印迹杂交法检测大鼠脑组织水通道蛋白4的表达.结果 与对照组相比,DIC组及水蛭素组血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D差异具有统计学意义(P<0.05);水蛭素组上述指标变化明显低于DIC组(P<0.05);AQP4表达在水蛭素组明显低于DIC组(P<0.05).结论 DIC时产生的凝血酶可能通过上调AQP4蛋白的表达,参与脑水肿形成和发展;水蛭素通过抑制凝血酶的形成,减轻脑水肿.
作者:玉光哲;金英玉;刘倩;刘琰;张艳芬;辛晓敏;张亚男;彭鹏 刊期: 2011年第05期
目的 了解医院耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)流行状况及其耐药性相关分析.方法 收集西安医学院附属医院临床标本中分离的132株金黄色葡萄球菌(SA)和100株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)与同期医院环境及医务人员手中分离的5株SA和40株CNS,用苯唑西林和头孢西丁(K-B法)筛选MRS,再用PBP2a胶乳凝集法检测mecA基因,MIC法检测MRS对19种抗生素的耐药性;资料用NDST统计软件Fisher确切概率法进行组间分析.结果 137株SA中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)83株,占60.58%(83/137),140株CNS中凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌(MRCNS)74株,占52.86%(74/140);其中临床分离株和环境分离株MRSA检出率分别为62.12%(82/132)和20.00%(1/5),MRCNS检出率分别为70.00%(70/100),10.00%(4/40),并对157株MRS耐药菌株检测mecA基因,阳性率96.82%(152/157),对19种抗生素耐药性检测结果显示,MRS对利奈唑胺、万古霉素和新内吉耐药性0.00%,MRS对其他抗菌药物呈多重耐药.结论 MRS在医院内有较高的流行性,应引起医院预防感染部门的重视.
作者:李敬梅;井发红 刊期: 2011年第05期
目的 探讨末梢全血标本的检测时间对血液分析结果的影响.方法 用Sysmex XS-1000i血液分析仪对末梢全血标本分别于采血后0,5 min及10 min连续检测,观察血液分析各项指标的变化.结果 采血后10 min与0 min时相比较,仅RBC,HGB和BASO%三个项目结果间的差异具有统计学意义(P<0.05);然而采血后5 min与0 min及与10 min时检测结果相比较,较多参数结果间差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 末梢全血采集后放置时间过短将影响血液分析检测结果的准确性,应在采血后至少10 min以后检测,方能较好地反映结果的真值.
作者:刘艳红;刘锋 刊期: 2011年第05期
目的 对临床免疫学试验18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则.方法 对标本稀释液的空白值、小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等五种参数进行检测,并依据制订的判断标准及评分方法进行综合评分,以综合评分高者为临床免疫学试验佳通用稀释液.结果 18种标本稀释液中专用稀释液评价得分高,其次是自配的含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS,混合人血清和不含胶体介质的稀释液得分低,不同稀释液主要是对检测指标的分析灵敏度、回收率和相关系数等三个参数产生影响.结论 专用稀释液应用范围窄,含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS可以作为临床免疫学实验室高值检测指标的通用稀释液,它具有配制简单、使用方便、应用范围广等特点.
作者:戴玉柱;王国政;吴遥遥;金美彤;张群;周华君;王磊;孙长贵;成军 刊期: 2011年第05期
目的 探讨影响骨髓血CD34+细胞纯化的因素.方法 45例进行性肌营养不良患者的骨髓血标本,在去或不去RBC和PLT的状况下,经Clini MACS免疫磁珠分选技术纯化CD34+细胞并计数其数量.结果 RBC和PLT的多少对CD34+细胞的纯化有显著的影响,差异具有统计学意义.结论 在进行Clini MACS免疫磁珠分选技术对骨髓血CD34+细胞纯化时,去除RBC及其碎片和PLT,可以提高CD34+细胞纯化的数量.
作者:白雯;张聪;王黎明;周建军;白槟;李铭;钟占强 刊期: 2011年第05期
目的 探讨维持性血液透析患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD25+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测23例血液透析患者(透析组)和25例健康志愿者(健康对照组)外周血中CD4+T细胞比例及Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 透析组的CD4+T细胞的比例为(43.89±7.72)%,明显高于对照组(31.14±4.89)%(P<0.01);透析组的Th17/CD4+T细胞的比例为(1.23±0.84)%,明显低于对照组(1.99±1.22)%(P<0.05);透析组的Treg/CD4+T细胞的比例为(4.79±1.39)%,明显低于对照组(8.90±2.30)%(P<0.01);透析组的Th17/Treg细胞的比值为(0.29±0.22)%,明显高于对照组(0.21±0.10)%(P<0.05).结论 维持性血液透析患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致透析患者的并发症发生和发展.
作者:眭维国;李凤艳;车文体;陈洁晶;黄河;戴勇 刊期: 2011年第05期
为适应细胞遗传学领域的快速发展,人类细胞遗传学命名国际体制标准委员会对人类细胞遗传学命名国际体制进行了多次的修订和完善.2009年再次修订并出版了人类细胞遗传学命名国际体制.该文主要比较了2009版与前一版即2005版人类细胞遗传学命名国际体制的差异,这有助于国内细胞遗传学工作者用新的命名法描述染色体的畸变.
作者:王卫萍;张静;崔英霞 刊期: 2011年第05期
目的 根据现有的检测方法的实际性能,应用Westgard质控选择表格设计工具,设计常见特定蛋白检测项目佳的室内质量控制方法.方法 依据生物学变异的允许总误差Tea确定作为临床允许总误差(Tea),以该科2010年室内质控的变异系数(CV)反映方法的不精密度,以该科参加卫生部临床检验中心2010年免疫特定蛋白项目室间质评的偏倚(Bias)反映方法的不准确度.以误差发生率(f)反映检测方法的稳定性,使用Westgard质控选择表格选择候选方法,以功效函数图确认质控方法的性能,选定合适的质控规则和控制测定值个数(N),确定终的质控方案.结果 不同的测试项目,每批测定值个数(N)不相同,同时使用的控制规则也不同.CRP,IgA和IgM可使用13s,N=1;13s/(41sW);N=2的控制方法,RF和C4可使用12s,N=2;13s/22s/R4s/(41sW),N=2的控制方法;C3和IgG没有满足质量要求的控制方法,需进行质量改进,或者使用其他的允许总误差重新设计质控方法.结论 实验室应使用质控方案设计工具,选择适合本实验室的质控方案,满足临床质量要求,查找并解决存在的问题.
作者:李翠;周迎春 刊期: 2011年第05期
目的 探讨抗Ro-52 kDa自身抗体与抗SSA抗体的关系及其在中国人群中SLE和SS等自身免疫病的诊断价值.方法 收集自身免疫病患者血清,其中SLE 50例,SS 50例,其他自身免疫病30例,50例健康者血清作为对照,用免疫印迹法检测所有标本中抗Ro-52与抗SSA抗体,同时用间接免疫荧光法检测所有标本ANA核型.结果 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性率在SLE患者中分别为60%和64%,在SS中分别为72%和82%,在其他自身免疫病患者中分别为30%和23.33%,均高于健康对照组(6%),经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05).结论 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性对诊断SLE和SS有一定的临床价值,二者的确切关系还需进一步探讨.
作者:金燕萍;林贵高;阎超;鄢盛恺 刊期: 2011年第05期
目的 提出用TPPA方法检测梅毒,结果判断有不确定的现象,并进行初步分析.方法 应用TPPA方法检测梅毒,筛选出不确定的标本,使用ELISA试验进行比对.结果 26例TPPA不确定的血清标本,报告阴性的16例,报告阳性的10例.ELISA试验报告阴性的21例,阳性的5例,而且这5例TPPA也为阳性.结论 TPPA结果不确定指的是致敏孔凝集不良,可能的原因为非特异的反应,抗体水平不足或试剂敏感度不够,以及其他污染等可能导致结果不好判断.
作者:李韶深;刘春莉;韩玉华;赵媛 刊期: 2011年第05期
目的 调查实验引起的糖尿病小鼠维生素D代谢酶表达的改变以及肾脏中分子间钙转运蛋白的变化.方法 雄性DBA/2J小鼠被连续5天注射链脲霉素(实验组)和空载体(对照组),Zhang.Y等使用边缘定量CT测量骨密度,用番红O染色观察骨组织形态学变化,通过实时定量PCR和Western blotting来研究目的 基因及蛋白表达的变化情况.结果 与对照组相比,实验组1型糖尿病可导致泌尿系大量钙的排泄和胫骨干骺端近端及股骨远端骨小梁的丢失.显微结构也显示骨质丢失与骨小梁恶化有关,定量PCR显示糖尿病小鼠肾脏内mRNA水平的表达为10周后25-羟化维生素D-24-羟化酶下调,20周后25-羟化维生素D-1α-羟化酶上调.另外,实验组小鼠体内肾脏瞬时感受器电位V6、质膜Ca-ATP酶(PMCA1b)、维生素D受体(VDR)基因mRNA表达水平均下降.Western blotting分析表明实验组小鼠肾脏内PMCA1b和VDR蛋白表达显著下降.结论 该实验局限性在于缺乏血清中维生素D、甲状旁腺激素和磷水平的研究,然而现有的研究支持1型糖尿病引起骨丢失的潜在机制可能是维生素D代谢酶的改变和肾脏转运蛋白表达的下降.
作者:张鹏;浦春 刊期: 2011年第05期
目的 分析2010年西安交通大学医学院第一附属医院分离的3 476株感染病原菌的分布及抗生素耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 细菌鉴定方法应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法.结果 2010年医院临床标本分离病原菌3 476株,分离率居前10位的细菌分别为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达到72.9%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为58.7%和63.4%,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺对革兰阳性球菌保持较强的抗菌活性,未发现耐药菌株;肠杆菌科的细菌对碳青霉烯类及头孢哌酮/舒巴坦等抗生素的敏感性较强,非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌呈多重耐药性.结论 医院感染病原菌的多重耐药相当严重,检验科加强对病原菌的分布及耐药性监测,对指导临床合理应用抗生素具有重要意义.
作者:张凯歌;宋丽亚;雷金娥;李超;答嵘;曾晓艳;李和平 刊期: 2011年第05期
目的 运用ROC曲线评价促甲状腺激素受体抗体(TRAb)在诊断毒性弥漫性甲状腺肿(Graves)病中的应用价值.方法 参照<内科学>(第7版),根据Graves病的诊断标准,结合病史及甲状腺激素水平,选取甲状腺功能紊乱患者41例,分为两组:Graves病组25例,非Graves病组16例;另设健康对照组40名.采用化学发光法对三组人群血清中的TRAb进行定量检测.比较三组结果间的差异,评估Graves病的诊断临界值及建立健康人群的参考范围.结果 Graves病组TRAb结果为118.07(43.84~371.27)IU/ml,高于非Graves病组的33.76(20.54~95.45)IU/ml和健康对照组的33.13(11.16~49.94)IU/ml,差异有统计学意义(H=47.35,P<0.01);而非Graves病组和健康对照组之间比较差异无统计学意义(Z=-1.215,P>0.05).对实验数据进行ROC曲线分析显示,TRAb 诊断Graves病的ROC曲线下面积(AUC)为0.974(95%CI 0.946~1.000),诊断临界值为50.29 IU/ml,其诊断敏感度为96.00%(95%CI 80.00%~100.00%),诊断特异度为91.10%(95%CI 83.64%~98.55%),阳性预期值为82.75%,阴性预期值为98.07%,正确率为92.59%,Youden值为87.10%.该实验室健康人群的参考范围为0.00~45.44 IU/ml.结论 TRAb在诊断Graves病中具有较高的敏感度和特异度,可作为Graves病诊断以及与其他甲状腺功能紊乱的鉴别诊断指标.
作者:邓仁兵;王强;汪光蓉;凡瞿明;唐中;何兰;张国元 刊期: 2011年第05期
目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
作者:王一;连小云;张玎;王晖;王岐山 刊期: 2011年第05期
目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.
作者:吴燕;周爱华;孙万邦;任思坡;李振江;黄俊琼 刊期: 2011年第05期
目的 观察阿托伐他汀(ATO)药物干预对自发性高血压大鼠(SHR)血清炎症因子的影响.方法 选取8周龄雄性SHR 16只,随机分为SHR对照组(n=8)、阿托伐他汀治疗组(n=8)和同龄Wistar-Kyoto大鼠(WKY)组(n=8),喂养8周后抽取血液,双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清IL-6,TNF-α,hs-CRP浓度.结果 应用阿托伐他汀8周后血清IL-6,TNF-α,hs-CRP浓度明显下降.阿托伐他汀(ATO)组IL-6,TNF-α,hs-CRP分别为(105.62±15.27 pg/ml,9.29±2.43 pg/ml,0.97±0.13 pg/ml),SHR组(201.72±28.91 pg/ml,14.33±3.15 pg/ml,1.54±0.34 pg/ml),差异有统计学意义(P<0.05).结论 阿托伐他汀具有降低SHR细胞因子,改善内皮功能及抗炎作用.
作者:吕晓莉;程功;任健康;闫福堂;李博;杨军录 刊期: 2011年第05期