吕晓莉；程功；任健康；闫福堂；李博；杨军录
目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
作者：王一；连小云；张玎；王晖；王岐山 刊期： 2011年第05期
目的 观察多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦对泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-Ab)的体外抗菌活性,为临床PDR-Ab感染的治疗选择药物.方法 采用MH药敏试验方法,测定多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦等抗菌药物对2010.2~2011.8临床分离的PDR-Ab的体外抗菌活性.结果 70株非重复统计的PDR-Ab对多黏菌素B的敏感率为95.7%,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为7.14%,中介敏感率为78.6%,但对美罗培南、亚胺培南、头孢西丁、氨曲南、哌拉西林、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、替卡西林/棒酸等抗菌药物的耐药率均为100%.结论 多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦对PDR-Ab有一定的体外抗菌活性,提示多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦可为临床此类菌株感染的治疗提供一种选择.
作者：苍金荣；王华；张利侠；苏宝凤；刘英；李彦 刊期： 2011年第05期
目的 观察有氧运动刺激引起的T淋巴细胞功能的变化过程,探讨有氧运动对人体T细胞免疫功能的影响及机制.方法 随机选择未经体育训练的普通健康女大学生16名,进行连续56天的有氧训练,每日分别在功率自行车(90 w,60 r/min,15 min)和活动跑台(9 km/h,坡度为0°,15 min)上进行总时间为30 min的有氧运动.选择第1,7,14,28,42,56天作为测试日,测试运动负荷为活动跑台(9 km/h,坡度为0°,15 min),于运动前、运动后即刻、运动后1 h抽取静脉血,用PHA刺激使淋巴细胞发生分裂增殖,用MTT比色法测定T淋巴细胞转化率,计算刺激指数SI值,来反映T细胞的活性和功能.结果 在第1天有氧运动后SI值表现为明显降低,从运动前1.117±0.174下降到运动后即刻的0.866±0.132(t=6.605,P<0.01),运动后恢复1 h为0.885±0.122 (t=7.037,P<0.01),未出现明显恢复.在第7,14,28,42,56天的应激反应中,SI在运动后均降低,第14天降低幅度达到大,在第28,42,56天降低幅度逐渐减弱,运动前SI值在前4周处于持续明显降低,第28天运动前SI值为0.972±0.114(t=2.536,P<0.05),第42,56天运动前SI值恢复至1.114±0.124(t=0.651,P>0.05),1.125±0.097(t=0.225,P>0.05).结论 有氧运动刺激引起T淋巴细胞的活性降低,降低程度与机体对运动负荷的适应程度有关,T细胞免疫功能表现出前4周的免疫抑制和后4周的逐渐适应过程,依赖于体内神经内分泌免疫网络的调节作用,以及免疫细胞、免疫因子的调节作用.
作者：谢红；郝选明 刊期： 2011年第05期
目的 观察凝血标本不同的放置和离心时间对凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)测定结果的影响,并提出合理化建议,提高检验质量.方法 采用STA Compact全自动血凝仪测定凝血四项结果的精密度.对40名患者的新鲜抗凝血分离血浆即刻检测,然后将标本放置2,4,6,8 h重复测定,并与即刻测定结果进行比较.将30名患者凝血标本用相同的离心力分别离心5 min和10 min进行四项检测结果的比较.结果 STA Compact全自动血凝仪检测凝血四项指标的重复性好,变异系数(CV)均≤4.0%.标本在常温下放置2 h,PT,APTT与即刻检测结果比较差异均无统计学意义(P＞0.05);放置4 h,PT缩短(P<0.05),APTT差异无统计学意义(P＞0.05);放置6 h,PT差异无统计学意义(P＞0.05),APTT延长(P<0.01),放置8 h,PT延长(P<0.01),APTT明显延长(P<0.001).FIB,TT于2,4,6,8 h与即刻检测结果比较差异均无统计学意义(P＞0.05);相同离心力和不同离心时间对凝血标本检测结果比较差异无统计学显著性意义(P＞0.05).结论 标本放置时间对PT,APTT的检测结果影响很大,室温下不宜超过2 h,当标本量大时,还可适当减少离心时间.
作者：茅蔚；俞赞临；薛济鸿；毛尤静 刊期： 2011年第05期
目的 检测胃肠道肿瘤患者门静脉血中CEA mRNA和CK-20 mRNA的表达.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测胃肠道肿瘤患者手术前后门静脉血中循环肿瘤细胞标志物CEAm RNA和CK20 mRNA的表达情况,并对上述指标在外周血中的含量进行检测;同时以非肿瘤手术患者作为对照组.结果 胃肠道肿瘤患者手术后门静脉血CK20 mRNA (79.7%)和CEA mRNA(84.4%)的阳性表达率与手术前(62.5%,67.2%)比较差异具有统计学意义(P<0.05);手术前后门静脉血CK20 mRNA和CEA mRNA的阳性表达率与外周血(43.8%,51.6%)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).胃肠道肿瘤患者术后门静脉血中CK20 mRNA(mean=3.00)和CEA mRNA(mean=3.56)表达量与手术前(mean=2.34,2.58)和外周血(mean=1.16,1.93)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 门静脉血中CK-20 mRNA,CEA mRNA的表达明显高于外周血.
作者：李强；黄建武；钱定良 刊期： 2011年第05期
目的 分析下呼吸道感染痰液标本分离出革兰氏阴性杆菌的分布及对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 对西安市第一医院2010年1～12月分离出的非重复562株革兰氏阴性杆菌利用VITEK 2 COMPACT进行病原学鉴定和药敏试验.采用WHONET5.0版软件统计分析数据.结果 562株革兰氏阴性杆菌前四位依次为肺炎克雷伯氏菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌和鲍氏不动杆菌.药敏结果显示大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌对常用抗生素的耐药率较高.结论 老年病科常见革兰氏阴性杆菌对常用抗生素的耐药性为严重,其次为呼吸科.临床应根据药敏试验结果合理选用抗生素,以减少耐药菌株的产生和传播,有效控制医院感染.
作者：赵棉；王君 刊期： 2011年第05期
目的 对临床免疫学试验18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则.方法 对标本稀释液的空白值、小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等五种参数进行检测,并依据制订的判断标准及评分方法进行综合评分,以综合评分高者为临床免疫学试验佳通用稀释液.结果 18种标本稀释液中专用稀释液评价得分高,其次是自配的含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS,混合人血清和不含胶体介质的稀释液得分低,不同稀释液主要是对检测指标的分析灵敏度、回收率和相关系数等三个参数产生影响.结论 专用稀释液应用范围窄,含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS可以作为临床免疫学实验室高值检测指标的通用稀释液,它具有配制简单、使用方便、应用范围广等特点.
作者：戴玉柱；王国政；吴遥遥；金美彤；张群；周华君；王磊；孙长贵；成军 刊期： 2011年第05期
目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪(简称P-800)上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP).评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数(CV)均<5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致(P>0.05),相关性较好(r>0.975,b在1.0±0.05之间).结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.
作者：耿红莲；王淇泓；竺蓓；盛凤英；施巍宇；邓燕；王爱华；仲人前 刊期： 2011年第05期
活组织检测和细胞分析法监控器官移植患者的免疫反应已有多年历史,活组织检测受限于它的损伤性,细胞分析法的预测值、灵敏度和特异度尚有待考证.此外尚无体外测定方法能够可靠地预测操纵耐受性.随着致耐受性等策略在临床应用,寻找充分相关的能够预测或辨别耐受性和急性排斥反应先兆的生物学标记已成为移植领域的重中之重,该文综述了近年来的研究进展.
作者：祁晓平；黎介寿 刊期： 2011年第05期
目的 探讨维持性血液透析患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD25+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测23例血液透析患者(透析组)和25例健康志愿者(健康对照组)外周血中CD4+T细胞比例及Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 透析组的CD4+T细胞的比例为(43.89±7.72)%,明显高于对照组(31.14±4.89)%(P<0.01);透析组的Th17/CD4+T细胞的比例为(1.23±0.84)%,明显低于对照组(1.99±1.22)%(P<0.05);透析组的Treg/CD4+T细胞的比例为(4.79±1.39)%,明显低于对照组(8.90±2.30)%(P<0.01);透析组的Th17/Treg细胞的比值为(0.29±0.22)%,明显高于对照组(0.21±0.10)%(P<0.05).结论 维持性血液透析患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致透析患者的并发症发生和发展.
作者：眭维国；李凤艳；车文体；陈洁晶；黄河；戴勇 刊期： 2011年第05期
目的 研究Ki67基因、张力蛋白同源基因(PTEN)和存活素(survivin)在视网膜母细胞瘤(RB)中表达及临床意义.方法 收集RB 44例和正常视网膜组织10例,采用免疫组织化学方法检测Ki67,PTEN和survivin的表达,并分析它们的表达与RB患者性别、临床分期、视神经受侵犯情况和分化程度之间关系.结果 在正常视网膜组织中Ki67和survivin表达均为阴性,PTEN表达均为阳性.在RB组织中,Ki67,PTEN和survivin的阳性表达率分别为47.7%(21/44),65.9%(29/44)和59.1%(26/44),PTEN表达明显降低,Ki67和survivin表达明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).不同性别之间Ki67,PTEN和survivin表达差异均无统计学意义(P＞0.05).眼内生长期和青光眼期(眼内压增高)Ki67和PTEN表达阳性率均较眼外期表达增高(P<0.05),但survivin表达阳性率则降低(P<0.05).无视神经浸润(N0)者Ki67和PTEN表达阳性率均高于N1~N3(P<0.05),survivin表达阳性率则降低(P<0.05).RB组织细胞分化为R0者,Ki67,PTEN和survivin表达阳性率明显高于R1和R2(P<0.05).结论 在RB组织中PTEN的阳性表达率显著降低,而Ki67和survivin阳性表达率显著高于正常视网膜组织.提示测定Ki67,PTEN和survivin表达对研究RB的发生发展、侵袭和转移有一定参考价值.
作者：喻磊；刘建荣；李陕区；张惠中 刊期： 2011年第05期
腺病毒有两种属性:首先它们是普遍存在的病原体,机会性的引起威胁生命的疾病;其次也可以加工成为有效的转基因载体.然而,在进行腺病毒载体基因治疗时会引起血小板减少,但是其机制仍然不明.该文章的目的 在于总结目前关于5型腺病毒载体基因治疗后导致血小板减少的可能机制,为腺病毒载体的安全应用提供参考.
作者：于修楠；辛晓敏；金英玉 刊期： 2011年第05期
目的 观察不同厂家的校准品能否直接校准非配套的检测系统.方法 参考美国临床实验室标准化委员会的EP9-A2文件,以罗氏检测系统为目标检测系统(系统1),用罗氏C-fas、朗道校准品Level2和Level3分别与国内某一厂家生产的生化分析仪器、试剂和检测程序组成待评检测系统(系统2～4),然后用上述四个检测系统分别检测40份新鲜患者血清中的总胆红素(TBil)等10个项目,每个标本测定两次,结果取均值.计算待评检测系统(Y)与目标检测系统(X)之间的相对偏倚,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA'88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性.结果 系统2与系统1的TBil,DBil,ALP和CK具有可比性,其他项目不具有可比性.系统3与系统1的TBil和GGT具有可比性,其他项目不具可比性.系统4与系统1的Glu具有可比性,其他项目不具可比性.结论 不同厂家生产的校准品不能直接用于校准非配套检测系统,每一检测系统都必须具有自己的配套校准品.
作者：王建兵；韩丽乔；郑松柏；曾碧霞；林海标；黄宪章；庄俊华 刊期： 2011年第05期
目的 观察白藜芦醇对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的生长抑制及凋亡诱导作用.方法 白藜芦醇处理体外培养的Molt-4细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率,Wrigh-Gimesa染色、透射电镜观察细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞的凋亡率及周期分布.结果 MTT结果显示,200 μmol/L的白藜芦醇作用于Molt-4细胞72 h后,细胞的生长抑制率达到74.98%,并呈时间、剂量依赖性;Wrigh-Gimesa染色和透射电镜结果显示:与对照组比较,经白藜芦醇处理后Molt-4细胞出现体积缩小,染色质浓缩边集化等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞术检测结果显示100 μmol/L白藜芦醇作用于Molt-4细胞48 h后78.8%的细胞被阻滞于S期.结论 白藜芦醇能明显抑制Molt-4细胞增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并进一步诱导其凋亡.
作者：姚君霞；李永军 刊期： 2011年第05期
目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.
作者：姜昌丽；马洁；滕毅；杜凌琳；瞿良；朱光旭；张悦；谭德勇；王惠萱 刊期： 2011年第05期
目的 分析2010年西安交通大学医学院第一附属医院分离的3 476株感染病原菌的分布及抗生素耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 细菌鉴定方法应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法.结果 2010年医院临床标本分离病原菌3 476株,分离率居前10位的细菌分别为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达到72.9%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为58.7%和63.4%,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺对革兰阳性球菌保持较强的抗菌活性,未发现耐药菌株;肠杆菌科的细菌对碳青霉烯类及头孢哌酮/舒巴坦等抗生素的敏感性较强,非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌呈多重耐药性.结论 医院感染病原菌的多重耐药相当严重,检验科加强对病原菌的分布及耐药性监测,对指导临床合理应用抗生素具有重要意义.
作者：张凯歌；宋丽亚；雷金娥；李超；答嵘；曾晓艳；李和平 刊期： 2011年第05期
目的 探讨血清抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体水平在诊断类风湿性关节炎(RA)中的意义.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定41例RA患者、39例非RA患者和30例健康体检者血清抗MCV抗体、抗CCP抗体水平,采用Mann-Whitney U检验、Spearman相关分析,并用ROC曲线比较对RA的诊断价值.结果 RA组抗MCV抗体水平(中位数410.00 U/ml)明显高于非RA组(中位数10.60 U/ml)和健康对照组(中位数8.30 U/ml)(U值分别为242.0和318.0,P值均<0.01).抗MCV抗体ROC曲线下面积为0.901,标准误0.032,其95%的近似可信区间为0.838～0.963.抗CCP抗体ROC曲线下面积为0.918,标准误为0.027,其95%的近似可信区间为0.865～0.970,两者均有较高的诊断价值.抗MCV抗体敏感度高于抗CCP抗体,但特异度比抗CCP抗体低.抗MCV抗体与抗CCP抗体(r=0.615,P<0.01)有相关性.结论 抗MCV抗体对RA有较高的诊断价值,可作为一种新的RA血清学指标.
作者：陈霞 刊期： 2011年第05期
文章对钙敏感受体的结构特点、分布、功能、调节剂、信号转导、与疾病的关系以及几个相关细胞因子的功能进行了概述.重点阐述了钙敏感受体与这几种细胞因子之间的关系及相互作用机制,并对二者关系的研究前景进行了展望.
作者：李婷婷；孙轶华 刊期： 2011年第05期
目的 探讨末梢全血标本的检测时间对血液分析结果的影响.方法 用Sysmex XS-1000i血液分析仪对末梢全血标本分别于采血后0,5 min及10 min连续检测,观察血液分析各项指标的变化.结果 采血后10 min与0 min时相比较,仅RBC,HGB和BASO%三个项目结果间的差异具有统计学意义(P<0.05);然而采血后5 min与0 min及与10 min时检测结果相比较,较多参数结果间差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 末梢全血采集后放置时间过短将影响血液分析检测结果的准确性,应在采血后至少10 min以后检测,方能较好地反映结果的真值.
作者：刘艳红；刘锋 刊期： 2011年第05期
目的 提出用TPPA方法检测梅毒,结果判断有不确定的现象,并进行初步分析.方法 应用TPPA方法检测梅毒,筛选出不确定的标本,使用ELISA试验进行比对.结果 26例TPPA不确定的血清标本,报告阴性的16例,报告阳性的10例.ELISA试验报告阴性的21例,阳性的5例,而且这5例TPPA也为阳性.结论 TPPA结果不确定指的是致敏孔凝集不良,可能的原因为非特异的反应,抗体水平不足或试剂敏感度不够,以及其他污染等可能导致结果不好判断.
作者：李韶深；刘春莉；韩玉华；赵媛 刊期： 2011年第05期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
