李婷婷;孙轶华
目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪(简称P-800)上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP).评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数(CV)均<5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致(P>0.05),相关性较好(r>0.975,b在1.0±0.05之间).结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.
作者:耿红莲;王淇泓;竺蓓;盛凤英;施巍宇;邓燕;王爱华;仲人前 刊期: 2011年第05期
目的 探讨血清抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体水平在诊断类风湿性关节炎(RA)中的意义.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定41例RA患者、39例非RA患者和30例健康体检者血清抗MCV抗体、抗CCP抗体水平,采用Mann-Whitney U检验、Spearman相关分析,并用ROC曲线比较对RA的诊断价值.结果 RA组抗MCV抗体水平(中位数410.00 U/ml)明显高于非RA组(中位数10.60 U/ml)和健康对照组(中位数8.30 U/ml)(U值分别为242.0和318.0,P值均<0.01).抗MCV抗体ROC曲线下面积为0.901,标准误0.032,其95%的近似可信区间为0.838~0.963.抗CCP抗体ROC曲线下面积为0.918,标准误为0.027,其95%的近似可信区间为0.865~0.970,两者均有较高的诊断价值.抗MCV抗体敏感度高于抗CCP抗体,但特异度比抗CCP抗体低.抗MCV抗体与抗CCP抗体(r=0.615,P<0.01)有相关性.结论 抗MCV抗体对RA有较高的诊断价值,可作为一种新的RA血清学指标.
作者:陈霞 刊期: 2011年第05期
目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)含量和幽门螺杆菌(Hp)感染与反流性食管炎(RE)的关系.方法 经胃镜检查诊断RE患者31例,其中0级10例,Ⅰ级8例,Ⅱ级7例,Ⅲ级6例,正常对照组20例.用乳胶增强免疫比浊法测定血清中的PGⅠ和PGⅡ含量,同时计算出PGⅠ/PGⅡ比值(PGR).另外采用酶联免疫法分析血清抗幽门螺杆菌IgG抗体.结果 RE分级越高组的患者PGⅠ的含量越低(依次为112.2±14.4 ng/ml;88.2±9.8 ng/ml;76.1±10.2 ng/ml;62.4±13.5 ng/ml);RE各分级组间PGⅠ含量和PGR值差异均有统计学显著性意义(F=128.71,P<0.01;F=88.45,P<0.01),PGⅡ含量(依次为45.1±5.1 ng/ml;46.3±4.2 ng/ml;47.5±4.4 ng/ml;49.7±5.7 ng/ml)相比差异无统计学显著性意义(F=1.72,P>0.05);血清抗Hp抗体阳性的RE患者血清PGⅠ含量(78.2±10.4 ng/ml)及PGR(55.2±11.6 ng/ml)比血清抗Hp抗体阴性的RE患者低,两组相比均差异有统计学显著性意义(t=23.14,P<0.01;t=48.26,P<0.01).结论 PG含量变化和Hp感染与RE病变程度有关,联合检测PG和Hp对诊疗RE具有积极的意义.
作者:梁学亚;葛艳玲;蓝宇;张学慧 刊期: 2011年第05期
目的 了解医院耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)流行状况及其耐药性相关分析.方法 收集西安医学院附属医院临床标本中分离的132株金黄色葡萄球菌(SA)和100株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)与同期医院环境及医务人员手中分离的5株SA和40株CNS,用苯唑西林和头孢西丁(K-B法)筛选MRS,再用PBP2a胶乳凝集法检测mecA基因,MIC法检测MRS对19种抗生素的耐药性;资料用NDST统计软件Fisher确切概率法进行组间分析.结果 137株SA中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)83株,占60.58%(83/137),140株CNS中凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌(MRCNS)74株,占52.86%(74/140);其中临床分离株和环境分离株MRSA检出率分别为62.12%(82/132)和20.00%(1/5),MRCNS检出率分别为70.00%(70/100),10.00%(4/40),并对157株MRS耐药菌株检测mecA基因,阳性率96.82%(152/157),对19种抗生素耐药性检测结果显示,MRS对利奈唑胺、万古霉素和新内吉耐药性0.00%,MRS对其他抗菌药物呈多重耐药.结论 MRS在医院内有较高的流行性,应引起医院预防感染部门的重视.
作者:李敬梅;井发红 刊期: 2011年第05期
目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.
作者:姜昌丽;马洁;滕毅;杜凌琳;瞿良;朱光旭;张悦;谭德勇;王惠萱 刊期: 2011年第05期
文章对钙敏感受体的结构特点、分布、功能、调节剂、信号转导、与疾病的关系以及几个相关细胞因子的功能进行了概述.重点阐述了钙敏感受体与这几种细胞因子之间的关系及相互作用机制,并对二者关系的研究前景进行了展望.
作者:李婷婷;孙轶华 刊期: 2011年第05期
目的 分析下呼吸道感染痰液标本分离出革兰氏阴性杆菌的分布及对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 对西安市第一医院2010年1~12月分离出的非重复562株革兰氏阴性杆菌利用VITEK 2 COMPACT进行病原学鉴定和药敏试验.采用WHONET5.0版软件统计分析数据.结果 562株革兰氏阴性杆菌前四位依次为肺炎克雷伯氏菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌和鲍氏不动杆菌.药敏结果显示大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌对常用抗生素的耐药率较高.结论 老年病科常见革兰氏阴性杆菌对常用抗生素的耐药性为严重,其次为呼吸科.临床应根据药敏试验结果合理选用抗生素,以减少耐药菌株的产生和传播,有效控制医院感染.
作者:赵棉;王君 刊期: 2011年第05期
目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
作者:王一;连小云;张玎;王晖;王岐山 刊期: 2011年第05期
目的 建立应用微流控电泳联合检测载脂蛋白C3(APOC3)启动子区2种基因型的方法.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增APOC3基因启动子区包含T-455C和C-482T多态性在内的DNA片段,产物分别用限制性内切酶BseGⅠ和MspⅠ酶切后同时进行微流控电泳,分析APOC3基因启动子区这2位点的基因型.结果 成功联合检测APOC3启动子区C-482T和T-455C多态性基因型.结论 应用微流控电泳联合检测APOC3启动子区2位点基因型方法可行,适合应用于常规实验或科研工作.
作者:俞娟;卢美红;王惠民;仲人前 刊期: 2011年第05期
目的 探讨不同程度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者N端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)的表达变化及与pH,PaCO2相关性.方法 选取不同程度COPD患者106例(轻度29例,中度25例,重度22例,极重度30例),采用双向侧流免疫法测定血清NT-proBNP浓度、离子电极选择法检测pH值以及气敏电极法检测PaCO2值,并分别与30例健康对照组进行比较;同时对NT-proBNP与pH,PaCO2进行相关分析.结果 重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(245±29.3,670±45.5)pg/ml,明显高于健康对照组(150±20.5)pg/ml,差异有统计学意义(分别P<0.05和P<0.01);轻度和中度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(157±21.2和161±22.5) pg/ml,与健康对照组(150±20.5)pg/ml比较,差异无统计学意义(P>0.05).重度和极重度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.20±0.03,48±6和7.10±0.04,52±6),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异有统计学意义(P<0.0;轻度和中度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.40±0.04,42±5;7.40±0.04,43±5),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异无统计学意义(P>0.05).对不同程度COPD患者血清NT-proBNP,pH以及PaCO2进行直线相关分析,重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度与pH呈负相关,和PaCO2呈正相关;轻度和中度患者血清NT-proBNP与pH和PaCO2无明显相关性.结论 NT-proBNP作为不同程度COPD患者并发心肌受损的检测指标之一;并且可作为诊断COPD严重程度具有较高的应用价值.
作者:曹典象;何仁忠 刊期: 2011年第05期
目的 探讨末梢全血标本的检测时间对血液分析结果的影响.方法 用Sysmex XS-1000i血液分析仪对末梢全血标本分别于采血后0,5 min及10 min连续检测,观察血液分析各项指标的变化.结果 采血后10 min与0 min时相比较,仅RBC,HGB和BASO%三个项目结果间的差异具有统计学意义(P<0.05);然而采血后5 min与0 min及与10 min时检测结果相比较,较多参数结果间差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 末梢全血采集后放置时间过短将影响血液分析检测结果的准确性,应在采血后至少10 min以后检测,方能较好地反映结果的真值.
作者:刘艳红;刘锋 刊期: 2011年第05期
目的 探讨自身免疫性疾病患者体液免疫与脂质过氧化反应的关系.方法 收集89例自身免疫性疾病患者及50例健康对照者血清样本,采用散射比浊法检测免疫球蛋白(IgG,IgM,IgA)和补体(C3,C4),化学比色法测定血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、硝酸还原法测定一氧化氮(NO)水平;比较体液免疫项目与氧自由基项目的 相关性.结果 自身免疫性疾病患者血清中IgG,IgM及IgA水平分别为:(21.46±14.08)g/L,(2.81±0.92)g/L和(2.85±0.63)g/L,与健康对照组比较P<0.01或P<0.05;而补体C3,C4水平分别为:(1.16±0.33)g/L和(0.25±0.16)g/L,与健康对照组比较均P<0.01;SOD,MDA及NO水平为:(85.64±9.86)U/ml,(6.17±0.89)μmol/L和(16.12±4.11)μmol/L,与健康对照组比较P<0.01,各指标差异均有统计学意义.相关分析显示IgG水平与SOD,MDA及NO水平呈显著相关(r=0.989;r=0.996;r=0.985,P<0.05),其它免疫球蛋白及补体也有与IgG相似的相关趋势.结论 自身免疫性疾病患者机体体液免疫应答升高与自由基代谢紊乱有关,临床医生在治疗该类疾病时有必要重视患者的抗脂质过氧化水平.
作者:黄婵娟;农朝赞;韦仕喻;顾国龙 刊期: 2011年第05期
目的 调查实验引起的糖尿病小鼠维生素D代谢酶表达的改变以及肾脏中分子间钙转运蛋白的变化.方法 雄性DBA/2J小鼠被连续5天注射链脲霉素(实验组)和空载体(对照组),Zhang.Y等使用边缘定量CT测量骨密度,用番红O染色观察骨组织形态学变化,通过实时定量PCR和Western blotting来研究目的 基因及蛋白表达的变化情况.结果 与对照组相比,实验组1型糖尿病可导致泌尿系大量钙的排泄和胫骨干骺端近端及股骨远端骨小梁的丢失.显微结构也显示骨质丢失与骨小梁恶化有关,定量PCR显示糖尿病小鼠肾脏内mRNA水平的表达为10周后25-羟化维生素D-24-羟化酶下调,20周后25-羟化维生素D-1α-羟化酶上调.另外,实验组小鼠体内肾脏瞬时感受器电位V6、质膜Ca-ATP酶(PMCA1b)、维生素D受体(VDR)基因mRNA表达水平均下降.Western blotting分析表明实验组小鼠肾脏内PMCA1b和VDR蛋白表达显著下降.结论 该实验局限性在于缺乏血清中维生素D、甲状旁腺激素和磷水平的研究,然而现有的研究支持1型糖尿病引起骨丢失的潜在机制可能是维生素D代谢酶的改变和肾脏转运蛋白表达的下降.
作者:张鹏;浦春 刊期: 2011年第05期
活组织检测和细胞分析法监控器官移植患者的免疫反应已有多年历史,活组织检测受限于它的损伤性,细胞分析法的预测值、灵敏度和特异度尚有待考证.此外尚无体外测定方法能够可靠地预测操纵耐受性.随着致耐受性等策略在临床应用,寻找充分相关的能够预测或辨别耐受性和急性排斥反应先兆的生物学标记已成为移植领域的重中之重,该文综述了近年来的研究进展.
作者:祁晓平;黎介寿 刊期: 2011年第05期
该综述介绍了对子痫前期有希望的生物标志物,内容包括可溶性血管内皮生长因子受体1、可溶性内皮蛋白、血管内皮生长因子,胎盘生长因子和胎盘蛋白13等,讨论了它们可能的临床价值.
作者:王继贵 刊期: 2011年第05期
目的 探讨东南亚缺失型α珠蛋白合成障碍性贫血(俗称α地中海贫血)的临床血液学指标,找出适合其筛查的红细胞平均体积(MCV)、红细胞脆性(EF)及血红蛋白A2(HbA2)的截断值(cutoff),提高检测东南亚缺失型α地中海贫血(简称地贫)的灵敏度和特异度.方法 对经基因确诊的162例东南亚缺失型α地贫(--SEA/αα)患者和143例正常者进行MCV,红细胞脆性试验和Hb电泳测定;采用ROC曲线分析得到佳的MCV,EF及HbA2的cutoff值;采用平行及系列联合检测法分析cutoff值的灵敏度和特异度.结果 地贫组与正常组的MCV,EF和HbA2分别为68.14±5.95 fl和85.99±8.76 fl,(50.13±15.87)%和(81.51±12.63)%,(1.93±0.49)%和(2.55±0.62)%,地贫组的三项指标均明显降低,差异具有统计学显著性意义(t值分别为14.51,17.60,9.16,P<0.001).以基因诊断的结果为金标准,MCV,EF和HbA2三指标ROC曲线下面积分别为0.927,0.922和0.827;其佳cutoff值分别为74fl,70%和2.05%;其诊断--SEA/αα地贫的灵敏度分别为92.01%,90.12%和74.69%,特异度分别为89.51%,82.52%和80.42%.与单项MCV检测相比,采用平行联合检测法筛查--SEA/αα可明显提高诊断的灵敏度(χ2值=5.03,P<0.05);系列联合检测法可明显提高诊断的特异度(χ2值=4.86,P<0.05).结论 采用ROC曲线分析得到的佳MCV,EF及HbA2的cutoff值,对筛查--SEA/αα具有较好的诊断价值,平行联合检测法可提高诊断的灵敏度,系列联合检测法可提高诊断的特异度.
作者:喻晶;郑金花;张银汉;刘晓翌;刘小平 刊期: 2011年第05期
目的 比较不同的方法检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗CCP抗体)的诊断有效性和临床适用性.方法 用电化学发光法(Roche公司提供)和酶联免疫吸附法(德国欧蒙医学实验诊断股份公司和上海富莼科芯生物技术公司提供)试剂盒同时检测58例RA患者和31例非RA患者血清中的抗CCP的IgG抗体.分析比较结果的相关性,对其进行临床诊断试验评价;并观察各方法的检验结果回报时间.结果 ①各方法组检测的RA组抗CCP抗体浓度显著高于非RA组(P均<0.01);②各方法组检测结果之间有相关性(r均>0.9,P<0.01);③各方法组ROC曲线下面积均>0.9(P>0.05);ECLIA法的灵敏度和特异度分别为91.4%和100%,两种ELISA试剂盒的灵敏度和特异度分别为93.1%,96.8%和89.7%,100%(P均>0.05);④ECLIA的回报时间(turn around time,TAT)(45 min)明显短于ELISA(160 min).结论 抗CCP对RA具有较高的诊断价值.ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体对RA的诊断有效性差异无统计学意义.选用ECLIA使检测会更快更及时,能更好地满足患者需要.
作者:王艳娇;李琳芸;董莉;彭长华;王昌富 刊期: 2011年第05期
目的 探讨Beckman Coulter AC.T 5diff血细胞分析系统和Abbot Cell-Dyn3200血细胞分析系统测定结果的可比性.方法 参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的EP9-A2文件[1],选取检测项目[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)]覆盖各医学决定水平的新鲜全血40份.样本在非连续5天中,每天以1~8,8~1的顺序在已校准的目标系统和检测系统同时完成检测.各项目检测结果做离群值检验,检测系统双份检测的均值(i)对目标系统双份检测的均值(i)做线性回归并计算线性回归方程,两个系统双份测定的均值差(i-i)对目标系统双份检测的均值(i)作偏差图.根据线性回归方程计算各项目医学决定水平的偏倚(bias)和不正确度(bias%),以1/2CLIA'88为实验室允许总误差(TEa)的临床可接受范围判断检测系统与目标系统检验之间的可比性.结果 离群值检验通过.两个血细胞分析系统的WBC检测具有可比性.RBC,PLT的低医学决定水平检测超出临床可接受范围,HGB的低、高医学决定水平检测均超出临床可接受范围,不具有可比性.结论 实验室内各血细胞分析系统之间的比对试验非常必要.EP9-A2文件在评价不同血细胞分析系统检测的可比性具有很好的参考价值,值得推广和应用.
作者:胡绿荫;杨冀;吴文娟 刊期: 2011年第05期
目的 自主开发管理软件,实现对检验科外送检测标本信息的科学化、规范化和自动化管理.方法 应用Access2003创建表、查询、窗体和报表等对象,并应用窗体查询技术开发成外送检测标本信息管理系统.结果 该系统可实现信息登记、多种条件的复杂查询、统计分析、并可汇总打印多种明细表,优化了工作流程,提高了工作效率.结论 该系统具有开发成本低廉、操作简便、功能针对性和适用性强等特点,运用它可初步实现外送检验标本信息的现代化管理.
作者:李红林;姜玉章;马君余 刊期: 2011年第05期
目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.
作者:吴燕;周爱华;孙万邦;任思坡;李振江;黄俊琼 刊期: 2011年第05期