茅蔚；俞赞临；薛济鸿；毛尤静
目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.
作者：吴燕；周爱华；孙万邦；任思坡；李振江；黄俊琼 刊期： 2011年第05期
目的 了解巨核细胞免疫组化染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法在各类血液病鉴别诊断中的意义.方法 各类血液病患者均列为研究对象.用APAAP法染色患者骨髓涂片,显微镜下计数巨核细胞并进行分类.结果 多(双)核巨核、单圆核小巨核、多(双)圆核小巨核均可不同程度见于白血病[如急性髓系白血病(AML),急、慢性淋巴细胞白血病(A/CLL),慢性粒细胞白血病急变等],骨髓增生异常综合症(MDS),特发性血小板减少性紫癜(ITP),骨髓增殖性疾病MPD[包括原发性血小板增多症(ET)、骨髓纤维化(MF)、真性红细胞增多症(PV)],淋巴瘤,多发性骨髓瘤(MM),各种原因引起的贫血等病人骨髓涂片中,再生障碍性贫血(AA)未见巨核细胞.淋巴样小巨核仅见于MDS.结论 用APAAP法检查各类血液病骨髓涂片中的巨核细胞,有助于各类血液病的鉴别诊断.
作者：马巍娜；沈建良；黄友章；宫立众；岑坚；向丹 刊期： 2011年第05期
目的 建立符合永州地区健康人群血清三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的参考区间.方法 应用日立7180全自动生化分析仪及其配套试剂,对永州地区3 608名10岁～79岁经过筛选的健康者血清标本进行血清TG和TC的检测,并按不同性别、不同年龄组进行统计学分析,观察其平均水平和变化范围.结果 永州地区TG的参考区间男性为0.71～2.89 mmol/L,女性为0.59～2.30 mmol/L;TC的参考区间为3.47～6.28 mmol/L.结论 永州地区健康人群血清TG和TC的参考区间因年龄、性别的不同而各有差异,与不同地区的、试剂盒制定的也有差异,差异具有统计学意义(P＜0.05),因此建立该地区人群TG,TC的参考区间,可为临床分析提供准确科学的依据.
作者：鲁君艳；杨晓斌；姜志刚；周维新；李林；蒋鑫晟；张丽娜 刊期： 2011年第05期
目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
作者：王一；连小云；张玎；王晖；王岐山 刊期： 2011年第05期
目的 提出用TPPA方法检测梅毒,结果判断有不确定的现象,并进行初步分析.方法 应用TPPA方法检测梅毒,筛选出不确定的标本,使用ELISA试验进行比对.结果 26例TPPA不确定的血清标本,报告阴性的16例,报告阳性的10例.ELISA试验报告阴性的21例,阳性的5例,而且这5例TPPA也为阳性.结论 TPPA结果不确定指的是致敏孔凝集不良,可能的原因为非特异的反应,抗体水平不足或试剂敏感度不够,以及其他污染等可能导致结果不好判断.
作者：李韶深；刘春莉；韩玉华；赵媛 刊期： 2011年第05期
该综述介绍了对子痫前期有希望的生物标志物,内容包括可溶性血管内皮生长因子受体1、可溶性内皮蛋白、血管内皮生长因子,胎盘生长因子和胎盘蛋白13等,讨论了它们可能的临床价值.
作者：王继贵 刊期： 2011年第05期
目的 自主开发管理软件,实现对检验科外送检测标本信息的科学化、规范化和自动化管理.方法 应用Access2003创建表、查询、窗体和报表等对象,并应用窗体查询技术开发成外送检测标本信息管理系统.结果 该系统可实现信息登记、多种条件的复杂查询、统计分析、并可汇总打印多种明细表,优化了工作流程,提高了工作效率.结论 该系统具有开发成本低廉、操作简便、功能针对性和适用性强等特点,运用它可初步实现外送检验标本信息的现代化管理.
作者：李红林；姜玉章；马君余 刊期： 2011年第05期
目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)含量和幽门螺杆菌(Hp)感染与反流性食管炎(RE)的关系.方法 经胃镜检查诊断RE患者31例,其中0级10例,Ⅰ级8例,Ⅱ级7例,Ⅲ级6例,正常对照组20例.用乳胶增强免疫比浊法测定血清中的PGⅠ和PGⅡ含量,同时计算出PGⅠ/PGⅡ比值(PGR).另外采用酶联免疫法分析血清抗幽门螺杆菌IgG抗体.结果 RE分级越高组的患者PGⅠ的含量越低(依次为112.2±14.4 ng/ml;88.2±9.8 ng/ml;76.1±10.2 ng/ml;62.4±13.5 ng/ml);RE各分级组间PGⅠ含量和PGR值差异均有统计学显著性意义(F=128.71,P<0.01;F=88.45,P<0.01),PGⅡ含量(依次为45.1±5.1 ng/ml;46.3±4.2 ng/ml;47.5±4.4 ng/ml;49.7±5.7 ng/ml)相比差异无统计学显著性意义(F=1.72,P>0.05);血清抗Hp抗体阳性的RE患者血清PGⅠ含量(78.2±10.4 ng/ml)及PGR(55.2±11.6 ng/ml)比血清抗Hp抗体阴性的RE患者低,两组相比均差异有统计学显著性意义(t=23.14,P<0.01;t=48.26,P<0.01).结论 PG含量变化和Hp感染与RE病变程度有关,联合检测PG和Hp对诊疗RE具有积极的意义.
作者：梁学亚；葛艳玲；蓝宇；张学慧 刊期： 2011年第05期
目的 评价四代HIV酶免试剂的临床价值.方法 应用第三代和四代HIV酶免检测试剂平行测定3 500例样本,评价试剂性能指标.结果 对CDC确认的HIV阳性样本,2种试剂灵敏度均为100%;第三代和四代HIV试剂特异度分别为99.8%和99.7%,差异无统计学意义(Fisher's确切概率为0.607);2种试剂对丙肝抗体、表面抗原阳性及含自身抗体的样本交叉反应较少;对1例窗口期样本,出现四代试剂检出而三代漏检的情况.结论 四代试剂通过P24抗原和HIV抗体的联合检测,在特异度与三代试剂相当的情况下,灵敏度进一步增加,缩短了HIV检测窗口期.
作者：王林川；封婧；徐莉 刊期： 2011年第05期
目的 探讨不同程度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者N端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)的表达变化及与pH,PaCO2相关性.方法 选取不同程度COPD患者106例(轻度29例,中度25例,重度22例,极重度30例),采用双向侧流免疫法测定血清NT-proBNP浓度、离子电极选择法检测pH值以及气敏电极法检测PaCO2值,并分别与30例健康对照组进行比较;同时对NT-proBNP与pH,PaCO2进行相关分析.结果 重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(245±29.3,670±45.5)pg/ml,明显高于健康对照组(150±20.5)pg/ml,差异有统计学意义(分别P<0.05和P<0.01);轻度和中度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(157±21.2和161±22.5) pg/ml,与健康对照组(150±20.5)pg/ml比较,差异无统计学意义(P>0.05).重度和极重度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.20±0.03,48±6和7.10±0.04,52±6),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异有统计学意义(P<0.0;轻度和中度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.40±0.04,42±5;7.40±0.04,43±5),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异无统计学意义(P>0.05).对不同程度COPD患者血清NT-proBNP,pH以及PaCO2进行直线相关分析,重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度与pH呈负相关,和PaCO2呈正相关;轻度和中度患者血清NT-proBNP与pH和PaCO2无明显相关性.结论 NT-proBNP作为不同程度COPD患者并发心肌受损的检测指标之一;并且可作为诊断COPD严重程度具有较高的应用价值.
作者：曹典象；何仁忠 刊期： 2011年第05期
目的 对临床免疫学试验18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则.方法 对标本稀释液的空白值、小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等五种参数进行检测,并依据制订的判断标准及评分方法进行综合评分,以综合评分高者为临床免疫学试验佳通用稀释液.结果 18种标本稀释液中专用稀释液评价得分高,其次是自配的含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS,混合人血清和不含胶体介质的稀释液得分低,不同稀释液主要是对检测指标的分析灵敏度、回收率和相关系数等三个参数产生影响.结论 专用稀释液应用范围窄,含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS可以作为临床免疫学实验室高值检测指标的通用稀释液,它具有配制简单、使用方便、应用范围广等特点.
作者：戴玉柱；王国政；吴遥遥；金美彤；张群；周华君；王磊；孙长贵；成军 刊期： 2011年第05期
文章对钙敏感受体的结构特点、分布、功能、调节剂、信号转导、与疾病的关系以及几个相关细胞因子的功能进行了概述.重点阐述了钙敏感受体与这几种细胞因子之间的关系及相互作用机制,并对二者关系的研究前景进行了展望.
作者：李婷婷；孙轶华 刊期： 2011年第05期
目的 探讨抗Ro-52 kDa自身抗体与抗SSA抗体的关系及其在中国人群中SLE和SS等自身免疫病的诊断价值.方法 收集自身免疫病患者血清,其中SLE 50例,SS 50例,其他自身免疫病30例,50例健康者血清作为对照,用免疫印迹法检测所有标本中抗Ro-52与抗SSA抗体,同时用间接免疫荧光法检测所有标本ANA核型.结果 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性率在SLE患者中分别为60%和64%,在SS中分别为72%和82%,在其他自身免疫病患者中分别为30%和23.33%,均高于健康对照组(6%),经χ2检验,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性对诊断SLE和SS有一定的临床价值,二者的确切关系还需进一步探讨.
作者：金燕萍；林贵高；阎超；鄢盛恺 刊期： 2011年第05期
目的 调查实验引起的糖尿病小鼠维生素D代谢酶表达的改变以及肾脏中分子间钙转运蛋白的变化.方法 雄性DBA/2J小鼠被连续5天注射链脲霉素(实验组)和空载体(对照组),Zhang.Y等使用边缘定量CT测量骨密度,用番红O染色观察骨组织形态学变化,通过实时定量PCR和Western blotting来研究目的 基因及蛋白表达的变化情况.结果 与对照组相比,实验组1型糖尿病可导致泌尿系大量钙的排泄和胫骨干骺端近端及股骨远端骨小梁的丢失.显微结构也显示骨质丢失与骨小梁恶化有关,定量PCR显示糖尿病小鼠肾脏内mRNA水平的表达为10周后25-羟化维生素D-24-羟化酶下调,20周后25-羟化维生素D-1α-羟化酶上调.另外,实验组小鼠体内肾脏瞬时感受器电位V6、质膜Ca-ATP酶(PMCA1b)、维生素D受体(VDR)基因mRNA表达水平均下降.Western blotting分析表明实验组小鼠肾脏内PMCA1b和VDR蛋白表达显著下降.结论 该实验局限性在于缺乏血清中维生素D、甲状旁腺激素和磷水平的研究,然而现有的研究支持1型糖尿病引起骨丢失的潜在机制可能是维生素D代谢酶的改变和肾脏转运蛋白表达的下降.
作者：张鹏；浦春 刊期： 2011年第05期
目的 观察不同厂家的校准品能否直接校准非配套的检测系统.方法 参考美国临床实验室标准化委员会的EP9-A2文件,以罗氏检测系统为目标检测系统(系统1),用罗氏C-fas、朗道校准品Level2和Level3分别与国内某一厂家生产的生化分析仪器、试剂和检测程序组成待评检测系统(系统2～4),然后用上述四个检测系统分别检测40份新鲜患者血清中的总胆红素(TBil)等10个项目,每个标本测定两次,结果取均值.计算待评检测系统(Y)与目标检测系统(X)之间的相对偏倚,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA'88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性.结果 系统2与系统1的TBil,DBil,ALP和CK具有可比性,其他项目不具有可比性.系统3与系统1的TBil和GGT具有可比性,其他项目不具可比性.系统4与系统1的Glu具有可比性,其他项目不具可比性.结论 不同厂家生产的校准品不能直接用于校准非配套检测系统,每一检测系统都必须具有自己的配套校准品.
作者：王建兵；韩丽乔；郑松柏；曾碧霞；林海标；黄宪章；庄俊华 刊期： 2011年第05期
目的 探讨影响骨髓血CD34+细胞纯化的因素.方法 45例进行性肌营养不良患者的骨髓血标本,在去或不去RBC和PLT的状况下,经Clini MACS免疫磁珠分选技术纯化CD34+细胞并计数其数量.结果 RBC和PLT的多少对CD34+细胞的纯化有显著的影响,差异具有统计学意义.结论 在进行Clini MACS免疫磁珠分选技术对骨髓血CD34+细胞纯化时,去除RBC及其碎片和PLT,可以提高CD34+细胞纯化的数量.
作者：白雯；张聪；王黎明；周建军；白槟；李铭；钟占强 刊期： 2011年第05期
目的 分析2010年西安交通大学医学院第一附属医院分离的3 476株感染病原菌的分布及抗生素耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 细菌鉴定方法应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法.结果 2010年医院临床标本分离病原菌3 476株,分离率居前10位的细菌分别为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达到72.9%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为58.7%和63.4%,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺对革兰阳性球菌保持较强的抗菌活性,未发现耐药菌株;肠杆菌科的细菌对碳青霉烯类及头孢哌酮/舒巴坦等抗生素的敏感性较强,非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌呈多重耐药性.结论 医院感染病原菌的多重耐药相当严重,检验科加强对病原菌的分布及耐药性监测,对指导临床合理应用抗生素具有重要意义.
作者：张凯歌；宋丽亚；雷金娥；李超；答嵘；曾晓艳；李和平 刊期： 2011年第05期
目的 研究Ki67基因、张力蛋白同源基因(PTEN)和存活素(survivin)在视网膜母细胞瘤(RB)中表达及临床意义.方法 收集RB 44例和正常视网膜组织10例,采用免疫组织化学方法检测Ki67,PTEN和survivin的表达,并分析它们的表达与RB患者性别、临床分期、视神经受侵犯情况和分化程度之间关系.结果 在正常视网膜组织中Ki67和survivin表达均为阴性,PTEN表达均为阳性.在RB组织中,Ki67,PTEN和survivin的阳性表达率分别为47.7%(21/44),65.9%(29/44)和59.1%(26/44),PTEN表达明显降低,Ki67和survivin表达明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).不同性别之间Ki67,PTEN和survivin表达差异均无统计学意义(P＞0.05).眼内生长期和青光眼期(眼内压增高)Ki67和PTEN表达阳性率均较眼外期表达增高(P<0.05),但survivin表达阳性率则降低(P<0.05).无视神经浸润(N0)者Ki67和PTEN表达阳性率均高于N1~N3(P<0.05),survivin表达阳性率则降低(P<0.05).RB组织细胞分化为R0者,Ki67,PTEN和survivin表达阳性率明显高于R1和R2(P<0.05).结论 在RB组织中PTEN的阳性表达率显著降低,而Ki67和survivin阳性表达率显著高于正常视网膜组织.提示测定Ki67,PTEN和survivin表达对研究RB的发生发展、侵袭和转移有一定参考价值.
作者：喻磊；刘建荣；李陕区；张惠中 刊期： 2011年第05期
目的 探讨斑点免疫胶体金渗滤法与ELISA法检测包虫抗体的相关性及免疫诊断价值.方法 用四种抗原联合检测的DIGFA法分别检测感染包虫病患者、健康人群、疑为包虫病感染者血清中的特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较.结果 DIGFA法检测包虫病患者血清中特异性抗体的敏感度为96.1% (74/77)、特异度为100%(20/20),与ELISA 法检测结果符合率为93.7%;不同虫荷数感染者间抗体水平差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 用四联抗原检测感染包囊虫患者血清中特异性抗体具有较好的敏感度和特异度,组间差异无显著性.DIGFA法与ELISA法相比,前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合基层寄生虫病的临床检验和流行病学调查.若能进一步纯化检测用抗原,囊型抗原和泡型抗原间的特异性,则更具有非常大的潜在应用价值.
作者：欧仕颖；余长芳 刊期： 2011年第05期
目的 建立应用微流控电泳联合检测载脂蛋白C3(APOC3)启动子区2种基因型的方法.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增APOC3基因启动子区包含T-455C和C-482T多态性在内的DNA片段,产物分别用限制性内切酶BseGⅠ和MspⅠ酶切后同时进行微流控电泳,分析APOC3基因启动子区这2位点的基因型.结果 成功联合检测APOC3启动子区C-482T和T-455C多态性基因型.结论 应用微流控电泳联合检测APOC3启动子区2位点基因型方法可行,适合应用于常规实验或科研工作.
作者：俞娟；卢美红；王惠民；仲人前 刊期： 2011年第05期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
