学术投稿

临床免疫学试验标本稀释液的实验评价及选择原则

戴玉柱;王国政;吴遥遥;金美彤;张群;周华君;王磊;孙长贵;成军

关键词:标本稀释液, 免疫学试验, 影响因素, 评价
摘要:目的 对临床免疫学试验18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则.方法 对标本稀释液的空白值、小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等五种参数进行检测,并依据制订的判断标准及评分方法进行综合评分,以综合评分高者为临床免疫学试验佳通用稀释液.结果 18种标本稀释液中专用稀释液评价得分高,其次是自配的含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS,混合人血清和不含胶体介质的稀释液得分低,不同稀释液主要是对检测指标的分析灵敏度、回收率和相关系数等三个参数产生影响.结论 专用稀释液应用范围窄,含4 g/L小牛血清的等渗pH7.4 PBS可以作为临床免疫学实验室高值检测指标的通用稀释液,它具有配制简单、使用方便、应用范围广等特点.
现代检验医学杂志相关文献
  • 巨核细胞免疫组化染色在各类血液病中的应用

    目的 了解巨核细胞免疫组化染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法在各类血液病鉴别诊断中的意义.方法 各类血液病患者均列为研究对象.用APAAP法染色患者骨髓涂片,显微镜下计数巨核细胞并进行分类.结果 多(双)核巨核、单圆核小巨核、多(双)圆核小巨核均可不同程度见于白血病[如急性髓系白血病(AML),急、慢性淋巴细胞白血病(A/CLL),慢性粒细胞白血病急变等],骨髓增生异常综合症(MDS),特发性血小板减少性紫癜(ITP),骨髓增殖性疾病MPD[包括原发性血小板增多症(ET)、骨髓纤维化(MF)、真性红细胞增多症(PV)],淋巴瘤,多发性骨髓瘤(MM),各种原因引起的贫血等病人骨髓涂片中,再生障碍性贫血(AA)未见巨核细胞.淋巴样小巨核仅见于MDS.结论 用APAAP法检查各类血液病骨髓涂片中的巨核细胞,有助于各类血液病的鉴别诊断.

    作者:马巍娜;沈建良;黄友章;宫立众;岑坚;向丹 刊期: 2011年第05期

  • 四代HIV酶免检测试剂的应用初步评价

    目的 评价四代HIV酶免试剂的临床价值.方法 应用第三代和四代HIV酶免检测试剂平行测定3 500例样本,评价试剂性能指标.结果 对CDC确认的HIV阳性样本,2种试剂灵敏度均为100%;第三代和四代HIV试剂特异度分别为99.8%和99.7%,差异无统计学意义(Fisher's确切概率为0.607);2种试剂对丙肝抗体、表面抗原阳性及含自身抗体的样本交叉反应较少;对1例窗口期样本,出现四代试剂检出而三代漏检的情况.结论 四代试剂通过P24抗原和HIV抗体的联合检测,在特异度与三代试剂相当的情况下,灵敏度进一步增加,缩短了HIV检测窗口期.

    作者:王林川;封婧;徐莉 刊期: 2011年第05期

  • 两种血细胞分析系统检测结果的可比性研究

    目的 探讨Beckman Coulter AC.T 5diff血细胞分析系统和Abbot Cell-Dyn3200血细胞分析系统测定结果的可比性.方法 参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的EP9-A2文件[1],选取检测项目[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)]覆盖各医学决定水平的新鲜全血40份.样本在非连续5天中,每天以1~8,8~1的顺序在已校准的目标系统和检测系统同时完成检测.各项目检测结果做离群值检验,检测系统双份检测的均值(i)对目标系统双份检测的均值(i)做线性回归并计算线性回归方程,两个系统双份测定的均值差(i-i)对目标系统双份检测的均值(i)作偏差图.根据线性回归方程计算各项目医学决定水平的偏倚(bias)和不正确度(bias%),以1/2CLIA'88为实验室允许总误差(TEa)的临床可接受范围判断检测系统与目标系统检验之间的可比性.结果 离群值检验通过.两个血细胞分析系统的WBC检测具有可比性.RBC,PLT的低医学决定水平检测超出临床可接受范围,HGB的低、高医学决定水平检测均超出临床可接受范围,不具有可比性.结论 实验室内各血细胞分析系统之间的比对试验非常必要.EP9-A2文件在评价不同血细胞分析系统检测的可比性具有很好的参考价值,值得推广和应用.

    作者:胡绿荫;杨冀;吴文娟 刊期: 2011年第05期

  • 用DIGFA,ELISA两种免疫诊断方法检测包虫病的综合评价

    目的 探讨斑点免疫胶体金渗滤法与ELISA法检测包虫抗体的相关性及免疫诊断价值.方法 用四种抗原联合检测的DIGFA法分别检测感染包虫病患者、健康人群、疑为包虫病感染者血清中的特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较.结果 DIGFA法检测包虫病患者血清中特异性抗体的敏感度为96.1% (74/77)、特异度为100%(20/20),与ELISA 法检测结果符合率为93.7%;不同虫荷数感染者间抗体水平差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 用四联抗原检测感染包囊虫患者血清中特异性抗体具有较好的敏感度和特异度,组间差异无显著性.DIGFA法与ELISA法相比,前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合基层寄生虫病的临床检验和流行病学调查.若能进一步纯化检测用抗原,囊型抗原和泡型抗原间的特异性,则更具有非常大的潜在应用价值.

    作者:欧仕颖;余长芳 刊期: 2011年第05期

  • 水蛭素对大鼠DIC模型脑组织水通道蛋白4表达的干预作用

    目的 探讨水蛭素对DIC模型的大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的干预作用.方法 通过鼠尾静脉滴注脂多糖制作DIC模型,将大鼠分为三组即对照组、DIC组和水蛭素组,选取4个时间点(4,6,8,12 h)测定血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D水平的变化;同时用免疫印迹杂交法检测大鼠脑组织水通道蛋白4的表达.结果 与对照组相比,DIC组及水蛭素组血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D差异具有统计学意义(P<0.05);水蛭素组上述指标变化明显低于DIC组(P<0.05);AQP4表达在水蛭素组明显低于DIC组(P<0.05).结论 DIC时产生的凝血酶可能通过上调AQP4蛋白的表达,参与脑水肿形成和发展;水蛭素通过抑制凝血酶的形成,减轻脑水肿.

    作者:玉光哲;金英玉;刘倩;刘琰;张艳芬;辛晓敏;张亚男;彭鹏 刊期: 2011年第05期

  • 维持性血液透析患者外周血Th17细胞与Treg表达水平的研究

    目的 探讨维持性血液透析患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD25+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测23例血液透析患者(透析组)和25例健康志愿者(健康对照组)外周血中CD4+T细胞比例及Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 透析组的CD4+T细胞的比例为(43.89±7.72)%,明显高于对照组(31.14±4.89)%(P<0.01);透析组的Th17/CD4+T细胞的比例为(1.23±0.84)%,明显低于对照组(1.99±1.22)%(P<0.05);透析组的Treg/CD4+T细胞的比例为(4.79±1.39)%,明显低于对照组(8.90±2.30)%(P<0.01);透析组的Th17/Treg细胞的比值为(0.29±0.22)%,明显高于对照组(0.21±0.10)%(P<0.05).结论 维持性血液透析患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致透析患者的并发症发生和发展.

    作者:眭维国;李凤艳;车文体;陈洁晶;黄河;戴勇 刊期: 2011年第05期

  • 湖北荆门地区RhD阴性无偿献血者表型分布调查

    目的 了解湖北荆门地区无偿献血者中RhD阴性表型分布情况.方法 常规血清学方法初筛RhD阴性标本,用间接抗球蛋白试验确认弱D,用吸收放散试验检测Del,RhC,c,E和e抗原使用血清学方法进行检测.结果 38 921名无偿献血者中初筛为RhD阴性124例;用抗人球蛋白试验确认弱D 11例;除11例弱D和10例假阴性后,103例确认为Rh阴性标本中共检出Del型25例;103例确认为Rh阴性的标本,血清学表型分布为dccee 63例,dCcee 28例,dCCee 6例,dccEe 4例,dccEE 1例,dCcEe 1例.结论 湖北荆门地区RhD阴性献血者中存在相当比例人群携带弱D表达抗原,为确保临床用血的安全,应加强弱D或Del型的确认.

    作者:柯丽 刊期: 2011年第05期

  • 不同程度COPD患者NT-proBNP临床检验意义与pH,PCO2相关性分析

    目的 探讨不同程度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者N端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)的表达变化及与pH,PaCO2相关性.方法 选取不同程度COPD患者106例(轻度29例,中度25例,重度22例,极重度30例),采用双向侧流免疫法测定血清NT-proBNP浓度、离子电极选择法检测pH值以及气敏电极法检测PaCO2值,并分别与30例健康对照组进行比较;同时对NT-proBNP与pH,PaCO2进行相关分析.结果 重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(245±29.3,670±45.5)pg/ml,明显高于健康对照组(150±20.5)pg/ml,差异有统计学意义(分别P<0.05和P<0.01);轻度和中度COPD患者血清NT-proBNP浓度分别为(157±21.2和161±22.5) pg/ml,与健康对照组(150±20.5)pg/ml比较,差异无统计学意义(P>0.05).重度和极重度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.20±0.03,48±6和7.10±0.04,52±6),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异有统计学意义(P<0.0;轻度和中度COPD患者动脉血pH值和PaCO2分别为(7.40±0.04,42±5;7.40±0.04,43±5),与健康对照组(7.40±0.05,39±4)比较,差异无统计学意义(P>0.05).对不同程度COPD患者血清NT-proBNP,pH以及PaCO2进行直线相关分析,重度和极重度COPD患者血清NT-proBNP浓度与pH呈负相关,和PaCO2呈正相关;轻度和中度患者血清NT-proBNP与pH和PaCO2无明显相关性.结论 NT-proBNP作为不同程度COPD患者并发心肌受损的检测指标之一;并且可作为诊断COPD严重程度具有较高的应用价值.

    作者:曹典象;何仁忠 刊期: 2011年第05期

  • 应用微流控电泳联合检测载脂蛋白C3基因型

    目的 建立应用微流控电泳联合检测载脂蛋白C3(APOC3)启动子区2种基因型的方法.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增APOC3基因启动子区包含T-455C和C-482T多态性在内的DNA片段,产物分别用限制性内切酶BseGⅠ和MspⅠ酶切后同时进行微流控电泳,分析APOC3基因启动子区这2位点的基因型.结果 成功联合检测APOC3启动子区C-482T和T-455C多态性基因型.结论 应用微流控电泳联合检测APOC3启动子区2位点基因型方法可行,适合应用于常规实验或科研工作.

    作者:俞娟;卢美红;王惠民;仲人前 刊期: 2011年第05期

  • HBV-DNA定量检测应用中的几个理解误区

    对实时荧光HBV-DNA 定量检测常见的几个理解误区进行分析探讨,主要涉及HBV血清标志物与DNA定量、DNA定量结果的分析以及诊断与治疗,旨在加强与临床医生沟通、信息反馈,增进相互理解,形成共识,更好地服务于患者.

    作者:李锐成;王敏娟;马燕粉;邹菊贤;张惠中 刊期: 2011年第05期

  • 侵袭性大颗粒淋巴细胞白血病MICM诊断及临床特征分析

    目的 提高侵袭性大颗粒淋巴细胞白血病(LGLL)的认识及鉴别诊断.方法 报告3例侵袭性LGLL的临床特征,MICM实验室检查并结合文献进行复习.结果 1例侵袭性T-LGLL及2例侵袭性NK-LGLL,临床以全身症状明显并有肝、脾肿大,预后极差.且有各自的免疫表型特点,大颗粒淋巴细胞形态及CE,ACP,PAS是LGLL诊断的重要线索.结论 LGLL的诊断需结合临床、细胞学检测、免疫分型综合分析并加以鉴别诊断.

    作者:翟洪顺;林丽淑;邹德学;聂李平;刘延涛;周宇;张莉莉 刊期: 2011年第05期

  • 5型腺病毒载体与血小板减少的研究进展

    腺病毒有两种属性:首先它们是普遍存在的病原体,机会性的引起威胁生命的疾病;其次也可以加工成为有效的转基因载体.然而,在进行腺病毒载体基因治疗时会引起血小板减少,但是其机制仍然不明.该文章的目的 在于总结目前关于5型腺病毒载体基因治疗后导致血小板减少的可能机制,为腺病毒载体的安全应用提供参考.

    作者:于修楠;辛晓敏;金英玉 刊期: 2011年第05期

  • 人类细胞遗传学国际体制命名进展

    为适应细胞遗传学领域的快速发展,人类细胞遗传学命名国际体制标准委员会对人类细胞遗传学命名国际体制进行了多次的修订和完善.2009年再次修订并出版了人类细胞遗传学命名国际体制.该文主要比较了2009版与前一版即2005版人类细胞遗传学命名国际体制的差异,这有助于国内细胞遗传学工作者用新的命名法描述染色体的畸变.

    作者:王卫萍;张静;崔英霞 刊期: 2011年第05期

  • MICA抗体与移植肾慢性失功的研究

    目的 探讨肾移植术后患者抗主要组织相容性复合物I类相关链A基因(MICA)抗体与移植肾慢性失功的关系.方法 选择了1986年~2005年间在北京友谊医院接受肾移植的38例患者,男性32例,女性6例,年龄24~68岁,血肌酐和尿素氮水平高于正常值.采用MICA抗体流式筛查技术,于2009年7月检测MICA抗体和PRA抗体,38例肾移植患者PRA抗体均为阴性,而后观察一年后的肾功能变化.结果 38例肾移植术后群体反应性抗体阴性但血肌酐和尿素氮高于正常值的患者中有9例MICA抗体阳性,阳性率达23.68%.9例MICA抗体阳性患者均呈现MICA抗体多特异性.29例MICA抗体阴性患者,经过一年的治疗,7例患者肾功能基本恢复,2例患者恢复透析,20例患者肾功能基本未变.MICA抗体阳性的9例患者中有4例患者恢复透析,其MICA抗体均为强阳性;另5例患者肾功能基本未变,其MICA抗体4例为弱阳性,1例为阳性.MICA抗体阳性和MICA抗体阴性患者之间恢复透析的患者间差异有统计学意义(χ2=4.73,P<0.025).结论 高滴度MICA抗体是引起移植肾慢性失功的重要因素之一.

    作者:贾保祥;田野 刊期: 2011年第05期

  • 1型糖尿病骨缺失中维生素D代谢酶表达的改变和肾脏钙转运蛋白的变化

    目的 调查实验引起的糖尿病小鼠维生素D代谢酶表达的改变以及肾脏中分子间钙转运蛋白的变化.方法 雄性DBA/2J小鼠被连续5天注射链脲霉素(实验组)和空载体(对照组),Zhang.Y等使用边缘定量CT测量骨密度,用番红O染色观察骨组织形态学变化,通过实时定量PCR和Western blotting来研究目的 基因及蛋白表达的变化情况.结果 与对照组相比,实验组1型糖尿病可导致泌尿系大量钙的排泄和胫骨干骺端近端及股骨远端骨小梁的丢失.显微结构也显示骨质丢失与骨小梁恶化有关,定量PCR显示糖尿病小鼠肾脏内mRNA水平的表达为10周后25-羟化维生素D-24-羟化酶下调,20周后25-羟化维生素D-1α-羟化酶上调.另外,实验组小鼠体内肾脏瞬时感受器电位V6、质膜Ca-ATP酶(PMCA1b)、维生素D受体(VDR)基因mRNA表达水平均下降.Western blotting分析表明实验组小鼠肾脏内PMCA1b和VDR蛋白表达显著下降.结论 该实验局限性在于缺乏血清中维生素D、甲状旁腺激素和磷水平的研究,然而现有的研究支持1型糖尿病引起骨丢失的潜在机制可能是维生素D代谢酶的改变和肾脏转运蛋白表达的下降.

    作者:张鹏;浦春 刊期: 2011年第05期

  • 白藜芦醇抑制白血病Molt-4细胞增殖的初步研究

    目的 观察白藜芦醇对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的生长抑制及凋亡诱导作用.方法 白藜芦醇处理体外培养的Molt-4细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率,Wrigh-Gimesa染色、透射电镜观察细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞的凋亡率及周期分布.结果 MTT结果显示,200 μmol/L的白藜芦醇作用于Molt-4细胞72 h后,细胞的生长抑制率达到74.98%,并呈时间、剂量依赖性;Wrigh-Gimesa染色和透射电镜结果显示:与对照组比较,经白藜芦醇处理后Molt-4细胞出现体积缩小,染色质浓缩边集化等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞术检测结果显示100 μmol/L白藜芦醇作用于Molt-4细胞48 h后78.8%的细胞被阻滞于S期.结论 白藜芦醇能明显抑制Molt-4细胞增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并进一步诱导其凋亡.

    作者:姚君霞;李永军 刊期: 2011年第05期

  • 不同方法检测类风湿关节炎患者血清中抗环瓜氨酸肽IgG抗体的比较研究

    目的 比较不同的方法检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗CCP抗体)的诊断有效性和临床适用性.方法 用电化学发光法(Roche公司提供)和酶联免疫吸附法(德国欧蒙医学实验诊断股份公司和上海富莼科芯生物技术公司提供)试剂盒同时检测58例RA患者和31例非RA患者血清中的抗CCP的IgG抗体.分析比较结果的相关性,对其进行临床诊断试验评价;并观察各方法的检验结果回报时间.结果 ①各方法组检测的RA组抗CCP抗体浓度显著高于非RA组(P均<0.01);②各方法组检测结果之间有相关性(r均>0.9,P<0.01);③各方法组ROC曲线下面积均>0.9(P>0.05);ECLIA法的灵敏度和特异度分别为91.4%和100%,两种ELISA试剂盒的灵敏度和特异度分别为93.1%,96.8%和89.7%,100%(P均>0.05);④ECLIA的回报时间(turn around time,TAT)(45 min)明显短于ELISA(160 min).结论 抗CCP对RA具有较高的诊断价值.ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体对RA的诊断有效性差异无统计学意义.选用ECLIA使检测会更快更及时,能更好地满足患者需要.

    作者:王艳娇;李琳芸;董莉;彭长华;王昌富 刊期: 2011年第05期

  • 四种高危感染菌联合诊断基因芯片的研制

    目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.

    作者:姜昌丽;马洁;滕毅;杜凌琳;瞿良;朱光旭;张悦;谭德勇;王惠萱 刊期: 2011年第05期

  • 检测反流性食管炎患者血清胃蛋白酶原和幽门螺杆菌抗体的临床意义

    目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)含量和幽门螺杆菌(Hp)感染与反流性食管炎(RE)的关系.方法 经胃镜检查诊断RE患者31例,其中0级10例,Ⅰ级8例,Ⅱ级7例,Ⅲ级6例,正常对照组20例.用乳胶增强免疫比浊法测定血清中的PGⅠ和PGⅡ含量,同时计算出PGⅠ/PGⅡ比值(PGR).另外采用酶联免疫法分析血清抗幽门螺杆菌IgG抗体.结果 RE分级越高组的患者PGⅠ的含量越低(依次为112.2±14.4 ng/ml;88.2±9.8 ng/ml;76.1±10.2 ng/ml;62.4±13.5 ng/ml);RE各分级组间PGⅠ含量和PGR值差异均有统计学显著性意义(F=128.71,P<0.01;F=88.45,P<0.01),PGⅡ含量(依次为45.1±5.1 ng/ml;46.3±4.2 ng/ml;47.5±4.4 ng/ml;49.7±5.7 ng/ml)相比差异无统计学显著性意义(F=1.72,P>0.05);血清抗Hp抗体阳性的RE患者血清PGⅠ含量(78.2±10.4 ng/ml)及PGR(55.2±11.6 ng/ml)比血清抗Hp抗体阴性的RE患者低,两组相比均差异有统计学显著性意义(t=23.14,P<0.01;t=48.26,P<0.01).结论 PG含量变化和Hp感染与RE病变程度有关,联合检测PG和Hp对诊疗RE具有积极的意义.

    作者:梁学亚;葛艳玲;蓝宇;张学慧 刊期: 2011年第05期

  • 下呼吸道感染革兰氏阴性杆菌分布与耐药性分析

    目的 分析下呼吸道感染痰液标本分离出革兰氏阴性杆菌的分布及对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 对西安市第一医院2010年1~12月分离出的非重复562株革兰氏阴性杆菌利用VITEK 2 COMPACT进行病原学鉴定和药敏试验.采用WHONET5.0版软件统计分析数据.结果 562株革兰氏阴性杆菌前四位依次为肺炎克雷伯氏菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌和鲍氏不动杆菌.药敏结果显示大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌对常用抗生素的耐药率较高.结论 老年病科常见革兰氏阴性杆菌对常用抗生素的耐药性为严重,其次为呼吸科.临床应根据药敏试验结果合理选用抗生素,以减少耐药菌株的产生和传播,有效控制医院感染.

    作者:赵棉;王君 刊期: 2011年第05期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院