戚传平;许联红;蒋立新;王永仿
目的 探讨水蛭素对DIC模型的大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的干预作用.方法 通过鼠尾静脉滴注脂多糖制作DIC模型,将大鼠分为三组即对照组、DIC组和水蛭素组,选取4个时间点(4,6,8,12 h)测定血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D水平的变化;同时用免疫印迹杂交法检测大鼠脑组织水通道蛋白4的表达.结果 与对照组相比,DIC组及水蛭素组血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D差异具有统计学意义(P<0.05);水蛭素组上述指标变化明显低于DIC组(P<0.05);AQP4表达在水蛭素组明显低于DIC组(P<0.05).结论 DIC时产生的凝血酶可能通过上调AQP4蛋白的表达,参与脑水肿形成和发展;水蛭素通过抑制凝血酶的形成,减轻脑水肿.
作者:玉光哲;金英玉;刘倩;刘琰;张艳芬;辛晓敏;张亚男;彭鹏 刊期: 2011年第05期
活组织检测和细胞分析法监控器官移植患者的免疫反应已有多年历史,活组织检测受限于它的损伤性,细胞分析法的预测值、灵敏度和特异度尚有待考证.此外尚无体外测定方法能够可靠地预测操纵耐受性.随着致耐受性等策略在临床应用,寻找充分相关的能够预测或辨别耐受性和急性排斥反应先兆的生物学标记已成为移植领域的重中之重,该文综述了近年来的研究进展.
作者:祁晓平;黎介寿 刊期: 2011年第05期
目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪(简称P-800)上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP).评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数(CV)均<5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致(P>0.05),相关性较好(r>0.975,b在1.0±0.05之间).结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.
作者:耿红莲;王淇泓;竺蓓;盛凤英;施巍宇;邓燕;王爱华;仲人前 刊期: 2011年第05期
目的 观察阿托伐他汀(ATO)药物干预对自发性高血压大鼠(SHR)血清炎症因子的影响.方法 选取8周龄雄性SHR 16只,随机分为SHR对照组(n=8)、阿托伐他汀治疗组(n=8)和同龄Wistar-Kyoto大鼠(WKY)组(n=8),喂养8周后抽取血液,双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清IL-6,TNF-α,hs-CRP浓度.结果 应用阿托伐他汀8周后血清IL-6,TNF-α,hs-CRP浓度明显下降.阿托伐他汀(ATO)组IL-6,TNF-α,hs-CRP分别为(105.62±15.27 pg/ml,9.29±2.43 pg/ml,0.97±0.13 pg/ml),SHR组(201.72±28.91 pg/ml,14.33±3.15 pg/ml,1.54±0.34 pg/ml),差异有统计学意义(P<0.05).结论 阿托伐他汀具有降低SHR细胞因子,改善内皮功能及抗炎作用.
作者:吕晓莉;程功;任健康;闫福堂;李博;杨军录 刊期: 2011年第05期
目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.
作者:吴燕;周爱华;孙万邦;任思坡;李振江;黄俊琼 刊期: 2011年第05期
目的 探讨Beckman Coulter AC.T 5diff血细胞分析系统和Abbot Cell-Dyn3200血细胞分析系统测定结果的可比性.方法 参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的EP9-A2文件[1],选取检测项目[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)]覆盖各医学决定水平的新鲜全血40份.样本在非连续5天中,每天以1~8,8~1的顺序在已校准的目标系统和检测系统同时完成检测.各项目检测结果做离群值检验,检测系统双份检测的均值(i)对目标系统双份检测的均值(i)做线性回归并计算线性回归方程,两个系统双份测定的均值差(i-i)对目标系统双份检测的均值(i)作偏差图.根据线性回归方程计算各项目医学决定水平的偏倚(bias)和不正确度(bias%),以1/2CLIA'88为实验室允许总误差(TEa)的临床可接受范围判断检测系统与目标系统检验之间的可比性.结果 离群值检验通过.两个血细胞分析系统的WBC检测具有可比性.RBC,PLT的低医学决定水平检测超出临床可接受范围,HGB的低、高医学决定水平检测均超出临床可接受范围,不具有可比性.结论 实验室内各血细胞分析系统之间的比对试验非常必要.EP9-A2文件在评价不同血细胞分析系统检测的可比性具有很好的参考价值,值得推广和应用.
作者:胡绿荫;杨冀;吴文娟 刊期: 2011年第05期
目的 探讨东南亚缺失型α珠蛋白合成障碍性贫血(俗称α地中海贫血)的临床血液学指标,找出适合其筛查的红细胞平均体积(MCV)、红细胞脆性(EF)及血红蛋白A2(HbA2)的截断值(cutoff),提高检测东南亚缺失型α地中海贫血(简称地贫)的灵敏度和特异度.方法 对经基因确诊的162例东南亚缺失型α地贫(--SEA/αα)患者和143例正常者进行MCV,红细胞脆性试验和Hb电泳测定;采用ROC曲线分析得到佳的MCV,EF及HbA2的cutoff值;采用平行及系列联合检测法分析cutoff值的灵敏度和特异度.结果 地贫组与正常组的MCV,EF和HbA2分别为68.14±5.95 fl和85.99±8.76 fl,(50.13±15.87)%和(81.51±12.63)%,(1.93±0.49)%和(2.55±0.62)%,地贫组的三项指标均明显降低,差异具有统计学显著性意义(t值分别为14.51,17.60,9.16,P<0.001).以基因诊断的结果为金标准,MCV,EF和HbA2三指标ROC曲线下面积分别为0.927,0.922和0.827;其佳cutoff值分别为74fl,70%和2.05%;其诊断--SEA/αα地贫的灵敏度分别为92.01%,90.12%和74.69%,特异度分别为89.51%,82.52%和80.42%.与单项MCV检测相比,采用平行联合检测法筛查--SEA/αα可明显提高诊断的灵敏度(χ2值=5.03,P<0.05);系列联合检测法可明显提高诊断的特异度(χ2值=4.86,P<0.05).结论 采用ROC曲线分析得到的佳MCV,EF及HbA2的cutoff值,对筛查--SEA/αα具有较好的诊断价值,平行联合检测法可提高诊断的灵敏度,系列联合检测法可提高诊断的特异度.
作者:喻晶;郑金花;张银汉;刘晓翌;刘小平 刊期: 2011年第05期
目的 了解湖北荆门地区无偿献血者中RhD阴性表型分布情况.方法 常规血清学方法初筛RhD阴性标本,用间接抗球蛋白试验确认弱D,用吸收放散试验检测Del,RhC,c,E和e抗原使用血清学方法进行检测.结果 38 921名无偿献血者中初筛为RhD阴性124例;用抗人球蛋白试验确认弱D 11例;除11例弱D和10例假阴性后,103例确认为Rh阴性标本中共检出Del型25例;103例确认为Rh阴性的标本,血清学表型分布为dccee 63例,dCcee 28例,dCCee 6例,dccEe 4例,dccEE 1例,dCcEe 1例.结论 湖北荆门地区RhD阴性献血者中存在相当比例人群携带弱D表达抗原,为确保临床用血的安全,应加强弱D或Del型的确认.
作者:柯丽 刊期: 2011年第05期
目的 观察不同厂家的校准品能否直接校准非配套的检测系统.方法 参考美国临床实验室标准化委员会的EP9-A2文件,以罗氏检测系统为目标检测系统(系统1),用罗氏C-fas、朗道校准品Level2和Level3分别与国内某一厂家生产的生化分析仪器、试剂和检测程序组成待评检测系统(系统2~4),然后用上述四个检测系统分别检测40份新鲜患者血清中的总胆红素(TBil)等10个项目,每个标本测定两次,结果取均值.计算待评检测系统(Y)与目标检测系统(X)之间的相对偏倚,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA'88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性.结果 系统2与系统1的TBil,DBil,ALP和CK具有可比性,其他项目不具有可比性.系统3与系统1的TBil和GGT具有可比性,其他项目不具可比性.系统4与系统1的Glu具有可比性,其他项目不具可比性.结论 不同厂家生产的校准品不能直接用于校准非配套检测系统,每一检测系统都必须具有自己的配套校准品.
作者:王建兵;韩丽乔;郑松柏;曾碧霞;林海标;黄宪章;庄俊华 刊期: 2011年第05期
目的 探讨影响骨髓血CD34+细胞纯化的因素.方法 45例进行性肌营养不良患者的骨髓血标本,在去或不去RBC和PLT的状况下,经Clini MACS免疫磁珠分选技术纯化CD34+细胞并计数其数量.结果 RBC和PLT的多少对CD34+细胞的纯化有显著的影响,差异具有统计学意义.结论 在进行Clini MACS免疫磁珠分选技术对骨髓血CD34+细胞纯化时,去除RBC及其碎片和PLT,可以提高CD34+细胞纯化的数量.
作者:白雯;张聪;王黎明;周建军;白槟;李铭;钟占强 刊期: 2011年第05期
目的 观察多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦对泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-Ab)的体外抗菌活性,为临床PDR-Ab感染的治疗选择药物.方法 采用MH药敏试验方法,测定多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦等抗菌药物对2010.2~2011.8临床分离的PDR-Ab的体外抗菌活性.结果 70株非重复统计的PDR-Ab对多黏菌素B的敏感率为95.7%,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为7.14%,中介敏感率为78.6%,但对美罗培南、亚胺培南、头孢西丁、氨曲南、哌拉西林、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、替卡西林/棒酸等抗菌药物的耐药率均为100%.结论 多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦对PDR-Ab有一定的体外抗菌活性,提示多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦可为临床此类菌株感染的治疗提供一种选择.
作者:苍金荣;王华;张利侠;苏宝凤;刘英;李彦 刊期: 2011年第05期
目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.
作者:姜昌丽;马洁;滕毅;杜凌琳;瞿良;朱光旭;张悦;谭德勇;王惠萱 刊期: 2011年第05期
目的 检测分析窒息新生儿多种血清电解质的变化及临床意义.方法 对51例在西安市第四医院住院的窒息新生儿和30例正常新生儿在出生后3 d内取静脉血,检测血清K+,Na+,Cl-,Ca2+和Mg2+等多种电解质的变化,分组统计分析均值的差异.结果 两个窒息新生儿组血清Na+,Cl-,Ca2+和Mg2+水平 (mmol/L)分别为130.22±5.33和134.07±2.68,95.45±5.40和97.32±4.80,1.59±0.36和1.94±0.40,0.70±0.17和0.78±0.13,分别低于正常新生儿血清的139.37±4.38,101.71±3.79,2.32±0.15和0.99±0.19,差异具有统计学意义(P<0.05).血清钾的差异无统计学意义.结论 通过检测分析窒息新生儿多种血清电解质的改变,有助于及时了解患儿病情进程,指导临床治疗.
作者:樊雪英;蒋文英;王忠民;俞海珍 刊期: 2011年第05期
目的 了解医院耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)流行状况及其耐药性相关分析.方法 收集西安医学院附属医院临床标本中分离的132株金黄色葡萄球菌(SA)和100株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)与同期医院环境及医务人员手中分离的5株SA和40株CNS,用苯唑西林和头孢西丁(K-B法)筛选MRS,再用PBP2a胶乳凝集法检测mecA基因,MIC法检测MRS对19种抗生素的耐药性;资料用NDST统计软件Fisher确切概率法进行组间分析.结果 137株SA中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)83株,占60.58%(83/137),140株CNS中凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌(MRCNS)74株,占52.86%(74/140);其中临床分离株和环境分离株MRSA检出率分别为62.12%(82/132)和20.00%(1/5),MRCNS检出率分别为70.00%(70/100),10.00%(4/40),并对157株MRS耐药菌株检测mecA基因,阳性率96.82%(152/157),对19种抗生素耐药性检测结果显示,MRS对利奈唑胺、万古霉素和新内吉耐药性0.00%,MRS对其他抗菌药物呈多重耐药.结论 MRS在医院内有较高的流行性,应引起医院预防感染部门的重视.
作者:李敬梅;井发红 刊期: 2011年第05期
目的 比较核酸提取仪和手工法核酸提取对荧光定量PCR准确定量的影响.方法 血清样本分别用NP968核酸提取仪和手工法提取DNA和RNA,提取产物作为模板,用ABI 7500进行荧光定量PCR分别检测HBV和HCV,对比CT值,比较两种核酸提取方法的效率.结果 核酸提取仪提取的核酸PCR扩增的CT值明显低于手工法的CT值,处理大批量样本的时间也明显短于手工法.结论 核酸提取仪具有速度快、提取效率高的优点,值得在临床实验室推广应用.
作者:张建芳;燕凤;王德堂;陈必良 刊期: 2011年第05期
目的 探讨δ-胆红素,ADA,γ-GT和ALP在肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸鉴别诊断中的价值.方法 对大庆市第二医院88例健康人群、67例急性黄疸型肝炎和29例阻塞性黄疸病人的血清进行了δ-胆红素,ADA,γ-GT,ALP和ALT酶活性平行检测,用SPSS10.0系统对数据进行统计分析.结果 δ-胆红素和γ-GT结果在肝细胞性黄疸、梗阻性黄疸组中差异均有统计学显著性意义(P<0.05),且其阳性率均为100%.而ADA在急性黄疸型肝炎组中虽只有88%阳性率,但其在梗阻性黄疸组中有非常低的阳性率,在两病例组中差异有统计学非常显著性意义(P<0.05).结论 δ-胆红素,ADA,γ-GT和ALP的联合检测是诊断梗阻性黄疸的良好指标,若4项指标均增高,则为肝细胞性黄疸;δ-胆红素,γ-GT和ALP显著增高,而ADA正常则为梗阻性黄疸.
作者:刘佃香 刊期: 2011年第05期
目的 观察白藜芦醇对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的生长抑制及凋亡诱导作用.方法 白藜芦醇处理体外培养的Molt-4细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率,Wrigh-Gimesa染色、透射电镜观察细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞的凋亡率及周期分布.结果 MTT结果显示,200 μmol/L的白藜芦醇作用于Molt-4细胞72 h后,细胞的生长抑制率达到74.98%,并呈时间、剂量依赖性;Wrigh-Gimesa染色和透射电镜结果显示:与对照组比较,经白藜芦醇处理后Molt-4细胞出现体积缩小,染色质浓缩边集化等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞术检测结果显示100 μmol/L白藜芦醇作用于Molt-4细胞48 h后78.8%的细胞被阻滞于S期.结论 白藜芦醇能明显抑制Molt-4细胞增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并进一步诱导其凋亡.
作者:姚君霞;李永军 刊期: 2011年第05期
目的 建立西安地区健康人群血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的参考区间.方法 参照IFCC多中心酶学研究参考人群筛选标准,募集18~79岁健康参考人群1 098人,其中男性506人和女性592人,分别用和光试剂检测系统、加入磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统和不加磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统建立西安地区健康人群酶活性参考区间.结果 三个系统间检测结果存在明显差异(P<0.01),各系统间男性和女性结果存在差异.ALT和AST需要按性别划分参考区间.不加磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统ALT-1:7.46~51.34 U/L(女),9.09~71.06 U/L(男);AST-1:11.89~40.49 U/L(女),13.6~40.52 U/L(男).加入磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统ALT-P:10.24~57.06 U/L(女),11.02~84.00 U/L(男);AST-P:13.55~50.14 U/L(女),15.3~53.42 U/L(男).和光试剂检测系统ALT:6.41~41.73 U/L(女),7.21~67.77 U/L(男);AST:9.41~40.64 U/L(女),12.1~41.11 U/L(男).结论 西安地区人群ALT和AST三个系统间检测结果的参考区间上限较目前临床所用参考区间较高,且各个检测系统间结果存在较大差异.罗氏加入磷酸吡哆醛试剂的参考范围高于不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围,加入磷酸吡哆醛试剂的参考范围比不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围高15%~20%.但不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围高于和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果的参考范围,不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围比和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果的参考范围约高10%.而和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果高于目前临床所用的参考范围.
作者:周铁成;张莹;童开;岳乔红;郝晓柯 刊期: 2011年第05期
目的 分析2010年西安交通大学医学院第一附属医院分离的3 476株感染病原菌的分布及抗生素耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 细菌鉴定方法应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法.结果 2010年医院临床标本分离病原菌3 476株,分离率居前10位的细菌分别为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达到72.9%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为58.7%和63.4%,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺对革兰阳性球菌保持较强的抗菌活性,未发现耐药菌株;肠杆菌科的细菌对碳青霉烯类及头孢哌酮/舒巴坦等抗生素的敏感性较强,非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌呈多重耐药性.结论 医院感染病原菌的多重耐药相当严重,检验科加强对病原菌的分布及耐药性监测,对指导临床合理应用抗生素具有重要意义.
作者:张凯歌;宋丽亚;雷金娥;李超;答嵘;曾晓艳;李和平 刊期: 2011年第05期
目的 调查实验引起的糖尿病小鼠维生素D代谢酶表达的改变以及肾脏中分子间钙转运蛋白的变化.方法 雄性DBA/2J小鼠被连续5天注射链脲霉素(实验组)和空载体(对照组),Zhang.Y等使用边缘定量CT测量骨密度,用番红O染色观察骨组织形态学变化,通过实时定量PCR和Western blotting来研究目的 基因及蛋白表达的变化情况.结果 与对照组相比,实验组1型糖尿病可导致泌尿系大量钙的排泄和胫骨干骺端近端及股骨远端骨小梁的丢失.显微结构也显示骨质丢失与骨小梁恶化有关,定量PCR显示糖尿病小鼠肾脏内mRNA水平的表达为10周后25-羟化维生素D-24-羟化酶下调,20周后25-羟化维生素D-1α-羟化酶上调.另外,实验组小鼠体内肾脏瞬时感受器电位V6、质膜Ca-ATP酶(PMCA1b)、维生素D受体(VDR)基因mRNA表达水平均下降.Western blotting分析表明实验组小鼠肾脏内PMCA1b和VDR蛋白表达显著下降.结论 该实验局限性在于缺乏血清中维生素D、甲状旁腺激素和磷水平的研究,然而现有的研究支持1型糖尿病引起骨丢失的潜在机制可能是维生素D代谢酶的改变和肾脏转运蛋白表达的下降.
作者:张鹏;浦春 刊期: 2011年第05期