杨虹；莫小辉；高志琴；金月兰；张皓
目的 探讨后穹窿穿刺液酶联免疫斑点试验(ELISPOT)法在盆腔结核诊断中的应用价值.方法 采集64例确诊为盆腔结核患者及56例妇科盆腔恶性肿瘤患者(对照组)后穹隆穿刺液,分离其中单个核细胞采用TB-ELISPOT法检测其结核多肽抗原特异性的T淋巴细胞反应,同时对后穹窿穿刺液采用荧光定量PCR法检测TB-DNA.根据检测结果比较两种方法的灵敏度及特异度.结果 后穹窿穿刺液TB-ELISPOT法及PCR法检测灵敏度分别为92.8%,64.1%,两种方法比较差异有统计学意义(χ2=14.8,P<0.01);两种方法检测特异度分别为92.8%,85.7%,两者相比较,差异无统计学意义(χ2=1.49,P>0.05).结论 采用后穹窿穿刺液检验,并使用TB-ELISPOT法进行结核分枝杆菌检测灵敏度高、特异度好,对于盆腔结核的诊断有很好的应用价值.
作者：杨富强；刘焰 刊期： 2013年第03期
目的 评价小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd LDL-C)均相酶法检测试剂盒的性能.方法参照CLSI EP文件及其它文献,评估新型sd LDL-C均相酶法液态双试剂检测试剂盒的灵敏度、精密度、线性范围、抗干扰能力和携带污染率,并以密度梯度超速离心法(DUGC)为参比方法,评价新型sd LDL-C均相酶法液态试剂盒的准确度.结果均相法各项精密度及特异度良好,灵敏度可达0.048 mmol/L,低值样本和高值样本的总精密度分别为8.69%和4.64%,测定结果与DUGC法相关性良好(Y=1.065 4X-1.8354),线性范围上限可达2.634 mmol/L,可以抵抗临床中常见的干扰现象,符合试剂说明书的参数和临床应用的要求.结论新型sd LDL-C均相酶法检测试剂盒各项性能良好,是一种可用于临床常规的快速简便sd LDL-C检测方法.
作者：林文涛；李江；孙菲；赵兴波；Yasuki Ito；Motoko Ohta；鄢盛恺 刊期： 2013年第03期
目的 使用荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌进行快速检测,同时用细菌培养及涂片法为对照组,比较三种方法的敏感度及特异度,为临床气性坏疽的诊断提供快速准确的测定结果.方法 收集2009年12月～2011年12月入住广州军区总医院、广东省人民医院、南方医院、广州市第一人民医院、武警医院、空军医院等临床上严重创伤患者的伤口脓液或分泌物558例,同时用荧光定量PCR法、细菌培养及涂片法进行检测,分别比较三种方法的敏感度和特异度.结果 采用荧光定量PCR检出产气荚膜梭菌阳性31例,细菌培养则检出30例,涂片法检出65例.以细菌培养法为金标准,与荧光定量PCR法相比较,差异无统计学意义(P>0.05,Kappa值为0.983);与涂片法相比较,差异有统计学意义(P<0.001,Kappa值为0.489).结论 涂片法与细菌培养法比较,假阳性率高,特异度差.荧光定量PCR检测法与细菌培养法结果一致,但荧光定量PCR方法检测时间较培养法缩短20 h,检测结果快速准确,较培养法具有明显优势,适用于临床气性坏疽的快速诊断.
作者：石玉玲；李薇；廖扬；陈丽丹；陈建芸 刊期： 2013年第03期
目的 研究缺铁性贫血(IDA)患者血清铁调素(hepcidin,Hep)、铁幼素(hemojuvelin,HJV)、膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)和转铁蛋白受体2 (trasferrin-receptor2,TFR2)表达特点,并探讨他们在IDA发病机制中的意义.方法 应用ELISA方法测定28例IDA患者和20例健康对照者的血清Hepcidin,HJV,FPN和TFR2浓度,并进行相关分析.同时还检测了血清铁蛋白(SF)和促红细胞生成素(EPO).结果 ①IDA组血清铁调素水平为2.04±1.27 ng/ml,明显低于对照组的3.07±1.68 ng/ml(t=2.203 6,P<0.05).②IDA组的血清HJV水平为0.65±0.51 ng/ml,明显低于对照组的0.99±0.46 ng/ml(t=2.352 9,P<0.05).③IDA组血清TFR2水平为8.15±3.09 ng/ml,明显高于对照组的6.62±1.42 ng/ml(t=2.061 7,P<0.05).④IDA组的血清FPN水平为2.69±1.71 ng/ml略高于对照组的2.11±0.58 ng/ml,但差异无统计学意义(P＞0.05).⑤SF与EPO呈负相关(r=-0.4958,t=2.911 0,P<0.01),与HJV和Hepcidin均呈正相关(r=0.5015,t=2.9560,P<0.01;r=0.515 7,t=3.069 1,P<0.01).⑥Hepcidin与HJV呈正相关(r=0.398 3,t= 2.214 1,P<0.05).结论 IDA患者高表达TFR2,低表达Hep和HJV.Hep和HJV在IDA的发病中有一定的意义,TFR2对IDA的诊断有重要的意义.联合Hep,HJV和TFR2对IDA与慢性病贫血等疾病的鉴别诊断有重要意义.FPN在IDA中的意义有待于进一步探讨.
作者：陆晔；程旭；王金湖；潘湘涛 刊期： 2013年第03期
目的 研制幽门螺杆菌(HP)粪便抗原(HPSA)纳米金侧流免疫层析快速检测板.方法 利用枸橼酸钠作为还原剂制备纳米金,标记兔抗HP多价抗体,建立双抗体夹心法的纳米金侧流免疫层析快速检测板;采用该检测板和英国Atlas公司试纸条分别对HP阳性病例组(123例)、健康体检HP阳性对照I组(109例)、健康体检HP阴性对照II组(129例)进行双盲法HPSA检测,并以14C-尿素呼气试验(14C-UBT)为金标准,对结果进行评价.结果 制备的直径40 nm纳米金大吸收波长(λmax)为525 nm,标记抗体的0.05 mol/L硼酸盐缓冲液适pH为7.6,抗体标记佳用量为18 μg/ml(小标记量为15 μg/ml);检测板与试纸条的检测结果在三组之间差异无统计学意义(χ2=0～0.337,P均<0.05);以14C-UBT结果为金标准,检测板的灵敏度、特异度、符合率分别为98.3%,99.2%和98.6%,试纸条的灵敏度、特异度、符合率分别为97.4%,98.4%和97.8%.结论 以纳米金标记多抗的双抗体夹心法侧流免疫层析快速检测板,检测HPSA诊断HP感染,方法简便、价格便宜、重复性好、无创伤,具有很高的敏感度和特异度.
作者：陈达伟；江晓肖；戴玉柱；陈少明；王国政；孙长贵；成军 刊期： 2013年第03期
除传统的抗人球蛋白实验外,酶联免疫吸附实验、流式细胞仪检测以及表面等离子体共振也是常见的用于检测ABO血型抗体的方法,了解这些方法的原理和优缺点对提高检验质量具有重要意义.
作者：杨树法；赵娟 刊期： 2013年第03期
目的 探讨乙型肝炎患者外周血抗原抗体表达及乙肝病毒载量与T细胞亚群关系及其临床意义.方法 2010年5月～10月苏州市第五人民医院住院乙肝患者70例(实验组)、正常对照40例,分别采用流式细胞术检测外周血T细胞亚群、微粒子酶免分析法获取HBV抗原抗体结果、实时荧光定量法检测HBV-DNA.按HBV抗原抗体检测结果分为HBeAg阳性乙肝组与HBeAg阴性乙肝组.按HBV-DNA载量分为三组(<104,104～106,107～108) IU/ml.结果 ①HBeAg阳性乙肝与HBeAg阴性乙肝T细胞亚群检测值(%)分别为CD3+:69.81±1.1,68.76±3.03;CD4+:32.84±2.55,35.32±3.45;CD8+:31.66±1.67,29.68±2.58,与正常人T细胞亚群结果(CD3+:75.17±1.31;CD4+:42.29±2.13;CD8+:24.73±0.83)差异具有统计学显著性意义(t=3.637~7.468,P<0.001).两检测组间T细胞亚群差异无统计学显著性意义,但CD4+与CD8+比值后者高于前者.②HBV-DNA定量结果小于104 IU/ml时,只有CD3+(69.59%±3.73%)与正常人组间差异具有统计学显著性意义(t=3.574,P=0.000 8).当病毒量大于104 IU/ml而小于106 IU/ml时,CD3+(71.89%±2.21%)与正常人组间差异具有统计学显著性意义(t=2.665,P=0.010 1),CD8+(31.29%±2.03%)与正常人组间差异具有统计学显著性意义(t=7.183,P<0.000 1).当病毒量大于107 IU/ml而小于108 IU/ml时,CD3+,CD4+,CD8+(66.71%±1.99%,33.79%±2.22%,32.84%±1.52%)与正常人组差异具有统计学显著性意义(t=5.514～9.567,P<0.000 1);且该组与上一组CD4+(38.38%±3.20%)间差异有统计学显著性意义(t=2.297,P=0.025).结论 临床上乙肝患者HBV抗原抗体的不同表达,其T细胞亚群、DNA含量与正常人组存在显著性差异,通过它们的协同检测可以监控患者的免疫功能状况,适时调节患者的免疫功能水平,为乙肝患者的抗病毒治疗提供帮助.
作者：胥萍；陈慧；吴敏娟；吴建鸿；杭茵 刊期： 2013年第03期
目的 研究膜转运蛋白NorA的转运机制以及抑制剂对其转运机制的影响.方法 将NorA重组表达在大肠埃希菌中,采用微孔板法测定表达菌株对于数种奎诺酮类抗生素的小抑菌浓度;后通过对比NorA过量表达菌株与对照组在诺氟沙星和/或NorA抑制剂胡麻碱存在时的生长情况,对其转运功能以及抑制剂对转运功能的阻碍进行研究;后将在大肠埃希菌中过量表达的NorA采用去污剂进行分离纯化.结果 NorA表达菌株对于诺氟沙星和环丙沙星的小抑菌浓度明显降低,但对司氟沙星的敏感度不变.NorA抑制剂胡麻碱的存在可显著阻断NorA的转运功能.NorA在大肠埃希菌中被成功表达纯化,产量可达到0.5~1 mg/L培养物,且纯度可达90%.这为治疗由于NorA过量表达导致的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染治疗提供了借鉴意义,同时为今后对NorA的功能研究奠定了基础.结论 NorA的表达可导致细菌对奎诺酮类抗生素的耐药,但其抑制剂胡麻碱可阻断NorA的转运功能.
作者：张文；韩想利；宋斌；刘晖 刊期： 2013年第03期
目的 探讨中华骨髓库HLA实验室质量控制工作方法和措施,以期为长效做好HLA实验室质量控制工作提供参考.方法 按照中华骨髓库HLA实验室建设要求,总结、分析河南省红十字血液中心实验室HLA分型实验过程中血样管理、检测等各环节的质量控制工作.结果 该实验室现行的HLA分型质量控制方法和措施,基本能够满足中华骨髓库对HLA实验室质量控制工作的实际要求,能够确保实验数据的质量和安全.结论 HLA实验室切实建立一套符合本室工作流程的质量控制系统,并严格采取一定的方法和措施,是确保中华骨髓库实验标本和入库数据质量,推动中华骨髓库建设持续健康发展的基础.
作者：王凯；王艺芳；张伯伟 刊期： 2013年第03期
目的 探讨血清β2-MG检测对消化系统肿瘤的临床诊断价值.方法 选取2010年5月～2012年12月临床确诊消化系统肿瘤患者137例,同期临床确诊消化系统良性疾病者150例及体检健康者200例,比较三组β2-MG检测异常率及血清浓度等.结果 该研究中消化道肿瘤组患者血清β2-MG浓度(2.37±0.44 mg/L)显著增高,与消化道良性疾病组(1.57±0.83 mg/L)和体检健康组(1.80±0.51 mg/L)比较,差异具有统计学意义(t1=7.365,t2=5.854,P<0.05).且消化道肿瘤组检测异常率为37.23%(51/137),与消化道良性疾病组10.7%(16/150)、体检健康组3.5%(7/200)比较,差异有统计学意义(χ12=23.85,χ22=19.36,P<0.05).消化道良性疾病组与体检健康组,血清β2-MG检测异常率(t3=1.584,P<0.05)和浓度(χ32=5.23,P<0.05)进行比较,差异具有统计学意义.结论 血清β2-MG在消化系统肿瘤患者中呈高表达,血清β2-MG检测在消化系统肿瘤诊断中具有重要意义.
作者：田涛；王小华；刘俊；郭瑞林 刊期： 2013年第03期
目的 对河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌进行筛查与鉴定,以了解其耐药机制.方法 选择2011年10月～2012年10月河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌临床菌株,采用纸片扩散法和E-test法检测耐药性,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序.结果 50株耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌中检测到一株对亚胺培南和美洛培南高度耐药的阴沟肠杆菌,亚胺培南和美洛培南对阴沟肠杆菌的抑菌环直径均为6 mm.E-test法测得亚胺培南和美洛培南的MIC均＞32 μg/ml,改良Hodge试验结果阳性,金属酶表型初筛试验阳性.经上海生物工程公司ABI测序仪测序后,并与GeneBank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性.结论 河北省发现1株对碳青霉烯类抗生素高度耐药的阴沟肠杆菌,经进一步试验证实为产NDM-1金属酶.
作者：时东彦；曹丽君；杨靖；李志荣；强翠新；赵建宏 刊期： 2013年第03期
目的 建立肠道病毒71型分离培养的Hep-2细胞法,探索佳培养条件.方法 采用Hep-2细胞分别接种肠道病毒71型核酸检测阳性的咽拭子标本30份,观察标本在不同培养条件下的细胞病变.结果 分离肠道病毒71型22株,分离率为73.33%,肠道病毒71型接种细胞在35℃培养7天后出现拉网、圆缩、脱落等现象.降低培养温度(35℃)可提高病毒分离率.结论 初步建立了肠道病毒71型分离培养的Hep-2细胞法.
作者：于翔翔；高玉朋；李莉；张学军 刊期： 2013年第03期
目的 探讨外周血中性粒细胞和淋巴细胞VCS参数在巨幼细胞贫血(megaloblastic anemia,MA)诊断中的应用价值.方法 选取2011年1月~12月南京医科大学第一附属医院门诊已经通过叶酸、VitB12检查和骨髓涂片确诊的MA患者49例,并分为MA1组(叶酸缺乏组,19例)和MA2组(VitB12缺乏组,30例),以120例健康体检者(男性60例,女性60例)作为对照组,其血常规分析结果正常,并排除血液系统疾病及其他器质性疾病.通过LH750血液分析仪(Beckman Coulter)进行血常规检测,分析中性粒细胞和淋巴细胞体积(volume,V)、电导(conductivity,C)和光散射(light scattering,S)参数,用Stata/SE9.2统计软件进行统计分析.结果 MA1组和MA2组患者中性粒细胞平均体积(mean neutrophil volume,MNV)、平均电导率(mean neutrophil conductivity,MNC)和平均散射率(mean neutrophil scatter,MNS)以及淋巴细胞平均体积(mean lymphocyte volume,MLV)、平均电导率(mean lymphocyte conductivity,MLC)和平均散射率(mean lymphocyte scatter,MLS)均高于对照组,其中MA1组和MA2组的MNV,MLV和MLS和健康对照组差异均具统计学意义(t=-19.29~-7.62,P值均<0.01).MA患者中性粒细胞MNV值与血清VitB12水平呈负相关(r=-0.686,P=0.003),而其余中性粒细胞和淋巴细胞的VCS参数与血清叶酸和VitB12水平无相关关系(P＞0.05).结论 MA患者外周血中性粒细胞和淋巴细胞VCS参数发生了改变,具有一定诊断价值.
作者：张丽霞；高丽；陆琳；张杰；刘健；潘世扬 刊期： 2013年第03期
目的 对中国两个高IgM综合征(HIGM)家系进行基因突变检测,并应用生物信息学软件加以分析诊断.方法 该研究以2012年中国贵州省收治的两名HIGM先证者(男孩)及其家系成员为研究对象,对先证者的CD40LG,AICDA,CD40和UNG基因外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物经纯化后Sanger法测序.应用Mutation Surveyor软件检测序列图谱中所有的基因变异点,并运用Alamut软件预测变异的致病性.同时选取100位排除患有HIGM疾病健康者的DNA,作为基因多态性对照.结果 基因测序分析发现:第1例先证者为7岁男孩,其CD40LG基因第5外显子存在错义突变p.Gly167Arg(c.499G>C),该患者母亲携带此错义突变;第2例先证者为3岁男孩,其CD40LG基因第1外显子存在单碱基缺失c.114delG,导致39位后编码氨基酸发生移码突变,并在53位引入终止密码,形成截断型蛋白(p.Ser39GlnfsX14),患者母亲同样携带此突变.两个突变均未在100位排除患有HIGM疾病健康者中发现.结论 该研究建立了HIGM准确、简便的基因突变筛查办法,CD40LG基因c.114delG突变为国际上首次报道.
作者：郁俐；汪希珂；王剑 刊期： 2013年第03期
目的 探讨2012年西安地区120例幽门螺杆菌(Helicoba-cter pylori,H.pylori)阳性患者标本中,H.pylori对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的耐药情况,以指导临床用药.方法 收集2012年3月至2013年1月西安市中心医院将120例H.pylori阳性患者胃粘膜组织,接种于H.pylori选择性培养基,37℃微需氧环境培养3～5天,采用E-test法,筛选出耐药菌株.结果 120例标本H.pylori菌株培养阳性62例,H.pylori对甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素、左氧氟沙星的耐药率分别为61.3%,6.5%,33.9%和25.8%.结论 2012年西安地区H.pylori对几种常用抗生素耐药率较之前有所升高,对甲硝唑耐药率比较高,对阿莫西林较高度敏感,药敏实验有助于抗生素的选择.
作者：姜小建；张玲霞；朱建伟；谢紫阳；马京玲；庄坤 刊期： 2013年第03期
次黄嘌呤核苷5'-一磷酸脱氢酶(IMPDH)是鸟嘌呤核苷酸更新合成时的限速酶,直接测定此酶活性作为麦考酚酸(MPA)的一种生物标志物,可以帮助更好地估计个体对免疫抑制剂的反应.该文的目的是提供近关于方法学的文献以及在器官移植领域应用IMPDH监测的概况.
作者：王继贵 刊期： 2013年第03期
目的 究UF-1000i尿沉渣分析仪对孕妇尿检测结果的可靠性分析.方法 随机选择100例怀孕妇女中段尿及100例门诊患者中段尿,用UF-1000i尿沉渣分析仪、干化学分析仪及显微镜检查测定,对比三种方法的结果,分析UF-1000i尿沉渣分析仪产生假阳性的原因.结果 UF-1000i尿沉渣分析仪对孕妇尿的阳性预测值:白细胞为67.8%,红细胞为61.9%,管型为16.7%,上皮细胞为91.0%,结晶为57.1%.其他患者的阳性预测值:白细胞为89.3%,红细胞为83.3%,管型为65.5%,上皮细胞为93.6%,结晶为87.1%.干化学对孕妇尿的阳性预测值:白细胞为88.9%,红细胞为81.1%,对其他患者的阳性预测值:白细胞为96.1%,红细胞为81.6%.结论 UF-1000i尿沉渣分析仪对孕妇尿各参数的阳性预测值及干化学对孕妇尿白细胞的阳性预测值低于其他患者.因此当孕妇尿干化学与UF-1000i尿沉渣分析仪检测结果有差异时必须进行显微镜检查,对假阳性结果进行修正.
作者：李芒会；张利侠；胡淑玲；弥鹏；王莉；张连 刊期： 2013年第03期
目的 对同一医院内血清葡萄糖在两台生化分析仪上检测可比性进行验证.方法 极差检验可比性方法包括:选择比对的分析物,选择比对的仪器,确定可比性检验接近的分析物浓度,计算用于比对样本选择的期望的浓度,选择可比性的样本,设定可比性检验的临界差值,患者结果可比性检验可接受标准,确定检测重复的次数.结果 两台生化分析仪(仪器A和B)在两个浓度水平质控制物(质控物1和2)的不精密度(CV%)分别为:1.17%,0.92%;1.47%,1.44%.质控物1合成的CV为1.76%,质控物2合成的CV为1.46%.患者样本范围计算为控制物均值的20%,即为4.33～6.49 mmol/L和10.48～15.72 mmol/L.对于比对试验选择在分析仪器A上样本初的值为5.54 mmol/L (样本1)和13.25 mmol/L(样本2).临界差值可接受标准定为1.90%.根据极差检验的临界差值(%)以及上述的信息可选择两个不同水平的患者样本,且每一样本只作三次检测来检验两台仪器之间是否存在差异.两台检测系统对于两个浓度水平的患者样本的极差值分别为1.83%和1.30%,因为极差值小于临界差值,对于两样本方法的可比性对于给定的已知的差值是可接受的.结论 极差检验方法为评估在一个医疗机构内检测同一患者样本的不同系统的可比性提供了指南,比传统的方法比对试验简单、易实施.
作者：赵海建；王萌；张传宝；王薇；闫颖；张天娇；王治国 刊期： 2013年第03期
目的 金标法和直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒的方法比较.方法同时用金标法和直接免疫荧光法检测350例儿童患者的鼻咽拭子中呼吸道合胞病毒.结果 350例中,直接免疫荧光法检出173例阳性,阳性率为49.4%;金标法检出121例阳性,阳性率为34.6%,两种检测方法灵敏度比较差异有统计学非常显著性意义(P＜0.01),但两种检测方法的检测结果一致性检验,kappa=0.702,基本一致.结论 直接免疫荧光法比金标法的灵敏度高,两种检测方法的检测结果基本一致.
作者：郭虹；金正江；胡兴文 刊期： 2013年第03期
通过对迈瑞BS-320全自动生化分析仪的使用总结,归纳出由于设备配套、运行环境配置、人员操作经验等原因导致的非技术性问题的分析思路与排除方法.
作者：任从棉；李志军 刊期： 2013年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
