吕晓莉;苍金荣;王华;毛学源;杨娜;罗小峰;康华;任健康
目的 观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对高糖高胰岛素诱导主动脉内皮细胞损伤的保护作用,并揭示其机理.方法 原代培养正常成年SD大鼠胸主动脉内皮细胞,将细胞分为五组,即(A)正常糖(5.5 mmol/L)组,(B)高糖(25 mmol/L)组、(C)高糖±GLP-1(10 nmol/L)组,(D)高糖+高胰岛素(100 nmol/L)组和(E)高糖高胰岛素±GLP-1组.采用DAPI染液检测发生凋亡改变的细胞,各组细胞凋亡率=(凋亡改变的细胞数/总细胞数)×100%;采用比色法检测细胞内caspase-3和SOD1,SOD2的相对酶活性(A实验组/A对照组);采用流式细胞术检测细胞中活性氧自由基(ROS)的相对含量(平均荧光强度),并通过荧光定量PCR对细胞中NADPH氧化酶的亚基p22phox以及SOD1,SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平进行检测(RQ值).结果 ①B组和C组细胞的凋亡率分别为(36.9±5.90)%和(20.5±3.39)%,两者相比差异具有统计学意义(P=0.035);D组和E组细胞的凋亡率分别为(52±8.14)%和(17.52±0.68)%,两者相比差异具有统计学意义(P=0.017);②caspase-3相对酶活性在B组和C组中分别为1.50±0.07,1.06±0.03,两者相比差异具有统计学意义(P=0.000),在D组和E组中分别为1.77±0.08和1.22±0.07,两者相比差异具有统计学意义(P=0.000);③ROS的相对含量在B组和C组中分别为1.50±0.11,0.52±0.10,两者相比差异具有统计学意义(t=6.844,P=0.000);④B组中SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平(1.06±0.06,1.04±0.22)均低于C组(1.33±0.10,1.77±0.16),差异具有统计学意义(P=0.002和0.018),D组中SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平(1.08±0.13,1.02±0.15)均低于E组(1.27±0.06,1.58±0.17),差异具有统计学意义(P=0.022和0.020);B组和D组分别与C组和E组相比,p22phox和SOD1的mRNA转录水平差异不具有统计学意义(P>0.05);⑤SOD2的相对酶活性在B和C组中分别为0.82±0.02和1.03±0.07,两者相比差异具有统计学意义(P=0.040),在D和E组中分别为0.78±0.06和0.96±0.05,两者相比差异具有统计学意义(P=0.033);SOD1的相对酶活力在各组中的差异不具有统计学意义(F=0.677,P=0.618).结论 GLP-1能降低大鼠主动脉内皮细胞中ROS的含量,抑制细胞凋亡,能有效抑制高糖和高胰岛素对内皮细胞的损伤.
作者:马丁;何殿殿;李妍;惠宏襄 刊期: 2014年第02期
目的 分析伴t(8;21)易位急性髓细胞初诊白血病患者FAB分型、血常规、骨髓细胞形态学、细胞遗传学及临床预后特点.方法 20例患者为中日友好医院2004年~2011年按WHO标准确诊的急性髓细胞白血病(AML)患者,血常规采用XE-2100全自动分析仪分析;骨髓细胞形态学检测对骨髓涂片进行瑞氏-姬姆萨染色,显微镜计数细胞;细胞遗传学检测为常规培养骨髓细胞,采用G显带技术对染色体核型进行分析.结果 伴t(8;21)易位AML患者中55%(11/20)患者外周血白细胞升高,20%(4/20)患者白细胞减低,所有患者均伴血小板减低.85%(17/20)患者骨髓涂片中可见奥氏小体.根据FAB分型,20例患者中15%(3/20)诊断为MDS-RAEB,20%(4/20)为MDS-RAEBt,55%(11/20)为AML-M2,10%(2/10)为AML-M4.55%(11/20)患者为单纯t(8;21)易位,45%(9/20)患者为t(8;21)易位同时伴有其它异常,其中伴性染色体丢失占所有患者35%(7/20),伴有9q-占所有患者的10%(2/20).82.4%(14/17)患者能达到完全缓解.结论 伴t(8;21)易位AML患者可见于FAB分型的不同亚型,主要见于AML-M2.t(8;21)患者常伴有附加异常,以性染色体丢失常见.t(8;21)易位患者疗效较好.
作者:沈军;马亮;钟明华;韩呈武;曹永跃;湛玉良;曹永彤 刊期: 2014年第02期
目的 了解人免疫缺陷病毒(HIV)在河南省肿瘤患者中的感染分布情况,以协助临床诊断和治疗,防止HIV院内传播.方法 对2012年3月~2013年2月期间,郑州大学附属肿瘤医院门诊及住院的35 585名肿瘤患者血清进行HIV抗体检测,并按性别、年龄和部位计算频数、构成比和感染率.结果 35 585例标本中阳性21例(男性7例,女性14例),年龄27~67岁,感染率是0.06%,颈部肿瘤感染构成比高为23.8%(5/21).结论 肿瘤患者HIV抗体阳性率较高,对其进行HIV常规检测,减少医源性感染,有利于艾滋病的防控工作.
作者:王书锋;王园园;周丽莉 刊期: 2014年第02期
目的 探讨血清N端脑钠肽前体在心脏功能衰竭、脑梗死及肾脏功能衰竭疾病的诊断以及治疗监测中的研究.方法 选择健康体检者30例作为正常对照组,同时选取经临床确诊的心功能衰竭患者101例、脑梗死患者95例及肾脏功能衰竭患者66例;采用罗氏全自动电化学发光免疫分析系统检测受检者血清N端脑钠肽前体浓度.结果 正常对照组、肾功能衰竭组、心功能衰竭组及脑梗死组血清N端脑钠肽前体的检测结果((x)士s,pg/ml)分别为:55.41士25.63,15 110.08±22 951.45,5 082.35±9 546.15和1 960.06±2 653.07.正常对照组与临床三组间及临床三组之间结果经t检验分析,t值在-2.73~6.99之间,P均<0.01,差异有统计学意义.结论 血清N端脑钠肽前体浓度水平不仅是评价和监测心功能状态的良好指标,同时对脑梗死及肾脏功能衰竭患者的诊断与治疗监测亦具有重要的临床意义.研究结果表明,即血清N端脑钠肽前体浓度水平在临床疾病的诊断中具有非常广泛的应用价值.
作者:李玲;王华;刘文康;解娟;王俊燕;任健康 刊期: 2014年第02期
目的 研究高浓度的胰岛素是否影响阿司匹林抑制的血小板聚集率.方法 将制备的4组等体积的富含血小板血浆(PRP)分别加入0,30,100和300μU/ml的胰岛素,37℃的环境下孵育3 min,再将上述每一组的PRP分成等体积的4个组,分别加入0,75,150和300 μmol/L的阿司匹林,于37℃的环境下继续孵育30 min.用血小板聚集仪检测各组的血小板大聚集率.结果 不同浓度胰岛素组之间有显著差异(F=4.056,P=0.008).300 μU/ml胰岛素浓度的富含血小板血浆,在不同浓度阿司匹林0,75,150和300 μmol/L的孵育下,血小板大聚集率分别为(87.62士6.23)%,(60.85±16.24)%,(55.28±16.48)%和(49.36士16.77)%,均高于相应对照组的血小板大聚集率(83.82±8.35)%,(48.80士21.35)%,(45.04±21.44)%,(38.90±21.70)%和30 μU/ml胰岛素组的血小板大聚集率(84.64±8.09)%,(48.13±19.27)%,(44.30士20.50)%和(35.30±16.81)%,其差异有统计学意义(P<0.05);而其他浓度的胰岛素组间比较,差异则无统计学显著性意义.结论 血小板暴露于高浓度的胰岛素(300 μU/ml)环境中,将会减弱阿司匹林对血小板的抗聚集效应.
作者:高玉龙;杨升华;薛临先;高德禄 刊期: 2014年第02期
目的 了解目前我国干化学测定胆红素的检测现状,以改进和提高胆红素检测质量.方法 对2012年自愿参加干化学胆红素检测室间质量调查的148家实验室发放两个批号的冻干粉质控品(批号为A1565和B1567),要求回报总胆红素(TBIL)、结合胆红素(CB)、未结合胆红素(UB)和Delta胆红素(DELB),并对回报结果进行统计分析,以评价实验室检测水平.结果 调查回报率为81.8%(121/148),分别有118,113,113和91家实验室回报了TBIL,CB,UB和DELB的检测结果,这四个检测项目在Vitros系列仪器上检测所得的稳健变异系数(RCV)差异较大.四个项目的实验室间CV的算术平均数分别为5.68%,19.41%,12.37%和53.98%;TBIL和CB的统计结果与2012年干化学第一次EQA比较,实验室间变异相差不大.根据目前干化学室间质量评价的评价标准,TBIL两个批号合格率较高,均为98.3%;CB为78.8%和92.9%;UB为85.8%和93.8%;Delta胆红素合格率较低,分别为46.2%和34.4%.结论 该次调查数据显示出目前我国干化学胆红素检测水平还需进一步提高,实验室应严格按照操作程序进行检测,并采取有效的室内质量控制,参加室间质量评价计划,以减小胆红素检测结果的误差并提高结果间的可比性.
作者:王薇;钟堃;何法霖;康凤凤;王治国 刊期: 2014年第02期
目的 了解铜陵地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,分析该地区HBV不同基因型别与肝功能损害、病毒复制水平及血清标志物的关系,探讨不同基因型的临床意义.方法 采用聚合酶链式反应-反向点杂交法(polymerase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)对铜陵地区228例ABV阳性感染者的血清分别进行HBV基因型的分型、HBV-DNA载量以及HBV血清标志物和肝功能等的检测,并结合其指标进行相关性分析.结果 在228份患者的血清样本中,226份样本成功分型,其中B型54.4%(124/228),C型37.3%(85/228),B/C混合型7.5%(17/228),2例未检出占0.88%(2/228).在各临床分型的慢性HBV感染者中,B基因型在慢性乙型肝炎组(CHB)、肝硬化组(LC)和原发性肝细胞癌组(HCC)中的构成比依次为61.8%,36.4%和60%,C基因型依次为25.7%,63.6%和40%,B型在CHB组占优势(x2=19.253,P=0.001);C型在LC组占优势,差异有统计学显著性意义(x2=9.818,P<0.001).C基因型HBV-DNA载量明显高于B型及B/C混合型,差异具有统计学非常显著性意义(P<0.01).在不同基因型HBV患者中,除了性别,男性高于女性外,患者的生化指标经方差分析各组差异均无统计学显著性意义(P>0.05).结论 铜陵地区HBV基因型主要以B型为主,对HBV基因分型有助于了解患者的病情,对HBV感染患者的临床诊治具有重要指导意义.
作者:唐吉斌;翁伟;张盛;宋有良;焦瑞宝;章文 刊期: 2014年第02期
microRNA(miRNA)是长21 nt~25 nt内源性非编码小分子RNA.miRNA通过调节基因的表达,广泛参与心血管系统细胞的增殖、迁移、分化、凋亡等病理生理过程,在心血管系统疾病的发生发展过程中起着重要的调控作用.近研究发现,miRNA参与了心肌肥厚、心肌梗死、心肌纤维化、心律失常和血管病变等的生理病理过程.该文就miRNA在心血管系统生理病理过程中的作用予以综述.
作者:李勤;王玉明;段勇 刊期: 2014年第02期
文章对钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,CaSR)的结构、分布、生理功能及其与疾病的关系做了简要介绍.并详细地阐述了在不同的细胞上,CaSR通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路引起的生理或者病理的变化.
作者:武春丽;孙轶华 刊期: 2014年第02期
目的 探讨糖化血红蛋白(HbA1c)在脑血管疾病中的临床应用.方法 收集2012年1月1日~5月31日住院病人的HbA1c资料358例,剔除已明确诊断为糖尿病患者的资料,将不同脑血管疾病的HbA1c水平与HbA1c 5.7%水平进行统计分析,评估脑血管疾病发生糖尿病的风险.结果 该研究中不同脑血管疾病的HbA1c水平与HbA1c 5.7%水平的单样本t检验分析,脑动脉供血不足、短暂性脑缺血发作、脑出血、眩晕综合征、椎-基底动脉供血不足和脑梗塞(t=2.98~6.92,P值均<0.01),差异有统计学意义.结论 脑血管疾病的HbA1c水平升高,灵活掌握HbA1c的应用,对医师在临床诊治上采取全面、有效的治疗措施具有实际的指导意义.
作者:李友建;顾桂兰;王志勇;汪峰;张超 刊期: 2014年第02期
目的 建立一种快速检测Toll样受体9(toll-like receptor 9,TLR9)基因rs187084和rs352140单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的方法,以及应用该方法检测湖北地区汉族人群各基因型的分布情况.方法 根据TLR9基因rs187084和rs352140 SNP中碱基变异频率分别设计野生型、突变型以及内参引物,建立等位基因特异性聚合酶链反应(allele specific PCR,AS PCR)检测135例体检人群外周血基因组DNA,以DNA测序法检测结果作为参照标准,并统计分析不同基因型在人群中的分布.结果 135例样本SNP位点均出现相应的野生型、突变型或者杂合子个体,AS-PCR的检测结果与DNA测序符合率为100%.湖北地区体检人群TILR9基因rs187084位点基因型为:CC型占8.14%(11/135),TT型占41.48%(56/135),CT型占50.37%(68/135).CC型所占比例小(x2=82.21,P<0.05),CT型比例略高于TT型,差异无统计学意义(x2=2.15,P>0.05).TLR9基因rs352140位点基因型为:CC型占41.48%(56/135),TT型占11.11%(15/135),CT型占47.41%(64/135). TT基因型所占比例小(x2=46.07,P<0.05),CT型略高于CC型,差异无统计学意义(x2 =0.96,P>0.05).结论 AS-PCR是一种简单、快速、可靠以及低成本检测TLR9基因SNP的方法.
作者:舒颖;魏新素;童永清;张平安 刊期: 2014年第02期
目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性B细胞(Breg)的含量,了解Breg在SLE疾病中的作用.方法 选择2013年1月~4月在南京大学医学院附属鼓楼医院住院的SLE患者34例、健康对照30例,以CD19+ CD5+CD1d+作为Breg标记,分别采用流式细胞术检测外周血Breg占B淋巴细胞的比率.结果 SLE患者组Breg的比率(7.86±4.10)%显著低于健康对照组(22.71±9.17)%(Z=2.16,P<0.01).结论 SLE患者外周血中Breg的比率显著降低,提示可能与SLE的发病相关.
作者:黄中伟;陈军浩;张立平 刊期: 2014年第02期
目的 分析急性白血病免疫分型的特点,为临床诊断提供快速准确的实验室依据.方法 回顾93例初发急性白血病的临床资料,采用流式细胞术进行骨髓免疫分型.结果 93例初发急性白血病中,急性髓系白血病(AML) 66例,其抗原表达从低到高依次为:CD7 (16.7%),CD15 (30.3%),CD71 (31.2%),CD11B (34.5%),CD34 (48.5%),CD117(50.0%),HLA-DR(65.2%),CD13(70%),CD33(86.4%)和CD38 (92.4%).急性B淋巴细胞白血病(B-ALL) 22例,其抗原表达从低到高依次为:CD34 (36.4%),CD20 (50.0%),CD38 (63.6%),CD10 (72.7%),HLA-DR (86.3%)和CD19(95.5%).急性T(T-ALL)淋巴细胞白血病5例,其抗原表达从低到高依次为:HLA-DR(60.0%),CD34 (60.0%),CD2(80.0%),CD7 (80.0%)和CD38(100.0%).结论 流式细胞术免疫分型能够快速、准确地为临床急性白血病的分型诊断提供依据.
作者:袁莉;杨玉琮;陈葳 刊期: 2014年第02期
目的 构建特异性沉默Ku80基因的真核表达栽体,检测其对乳腺癌基因HER2表达的影响.方法 设计2务表达短发夹RNA的互补DNA序列,分别克隆至真核表达载体pGCsi-U6/Neo/DsRed构建shRNA-Ku80,转化大肠埃希菌DH5α菌株扩增后,提取质粒测序分析,以相同的方法构建并鉴定Ku80基因的真核表达载体pEGFP-N1-Ku80;将2种shRNA-Ku80分别与pEGFP-N1-Ku80共转染HEK293细胞株,通过流式细胞仪检测荧光强度筛选高效敲减靶点,并在基因和蛋白水平观察抑制Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响.结果 成功构建Ku80特异性shRNA表达载体,shR-NA-Ku80对靶点Ku80敲减效率达到59.50%,抑制Ku80表达使乳腺癌基因HER2在基因和蛋白水平明显降低.结论 成功构建shRNA-Ku80载体,在体外可有效抑制Ku80的表达,使癌基因HER2的表达明显下调,提示Ku80有望成为乳腺癌治疗的基因靶点.
作者:王萍;杨勤;官全生 刊期: 2014年第02期
目的 探讨冠心病患者联合检测血清ⅡA分泌型磷脂酶A2 (secretory groupⅡA phospholipase A2,ⅡA-sPLA2)及脂蛋白相关磷脂酶A2 (LP-PLA2)对于其诊疗的意义.方法 对健康对照组50例、急性心肌梗死(AMI)组13例、稳定型心绞痛(UAP)组17例和不稳定型心绞痛(SAP)组70例的生化指标(主要ⅡA-sPLA2和LP-PLA2水平)进行测定,统计分析各组之间的差异是否有统计学意义.结果 随着冠心病患者病变程度加剧,HDL水平有降低的趋势,即AMI组比SAP和UAP组患者的HDL水平均高,三组相比差异均有统计学意义(t=3.013~3.987,均P>0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2在冠心病各亚型患者中的水平明显比对照组高,且AMI组比SAP和UAP组,SAP比UAP患者的水平均高,差异有统计学意义(t=3.507~9.967,均P<0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2指标之间呈正相关关系(r=0.657,P<0.05),HDL分别和ⅡA-sPLA2与LP-PLA2之间呈显著的负相关关系(r=-0.351,-0.294,均P<0.05).结论 ⅡA-sPLA2与LP-PLA2含量将可能是治疗冠状动脉粥样硬化和预防心血管疾病的新指标.
作者:刘津;应国光;田刚;林祥灿;李海平;王连环 刊期: 2014年第02期
目的 构建抗衰老Klotho分泌表达载体,鉴定表达产物.方法 采用高保真PCR扩增Klotho基因,将其克隆到穿梭载体pMG36e中,经鉴定后电击转化乳酸菌.通过RT-PCR和Western blot检测目的基因表达情况.结果 特异PCR、酶切和测序鉴定均证实Klotho基因克隆入表达载体pMG36e;将其转化至乳酸菌后,该乳酸菌能有效分泌表达Klotho.结论 成功构建能有效分泌表达Klotho的基因工程菌,为进一步口服重组乳酸菌进行抗衰老研究奠定了基础.
作者:谢宁;郭斌;熊元;黄义山;廖涛;唐中 刊期: 2014年第02期
目的 研究癌性贫血患者中骨形成发生蛋白(BMP6)和BMP4的表达水平,以及与铁调素调节蛋白(s-HJV和Hepcidin之间的关系.方法 应用双抗夹心生物素亲和素-酶联免疫吸附试验方法检测53例癌性贫血患者和52例无贫血癌症患者的血清BMP6,BMP4,s-HJV和Hepcidin水平,并分析它们之间的相互关系.结果 ①贫血组BMP6和Hepcidin分别为434.53±212.11 ng/ml和5.68±3.89 μg/L,均高于无贫血组癌症患者(334.37±171.32 ng/ml和4.60±2.28 μg/L)(分别为P<0.01或P<0.05);s-HJV则为0.69±0.28 ng/ml,明显低于无贫血组癌症患者1.07±1.00 ng/ml(P<0.01).而癌症贫血患者的BMP4表达水平与癌症无贫血患者比较,差异无统计学意义.②BMP6与s-HJV,Hb均呈负相关(r=-0.253 6,-0.294 9;P均<0.01),但与Hepcidin不相关.而BMP4则与Hb,s-HJV和Hepcidin三者均无相关关系.结论 癌性贫血患者高表达BMP6和Hepcidin,低表达s-HJV.BMP6和s-HJV呈负相关关系,BMP6,s-HJV和Hepcidin在贫血的发生发展中起重要的作用.
作者:史玉娟;潘湘涛 刊期: 2014年第02期
目的 了解常见输血不良反应发生率及相关因素调查分析.方法 收集东莞市4家医院在2009~2012年发生的输血不良反应临床记录162例,采用医学统计学方法进行数据分析.结果 输血不良反应总发生率为0.26%,其中女性受血者输血不良反应发生率明显多于男性受血者(x2 =41.2,P<0.05),有多次输血史者输血不良反应发生率明显多于首次输血者(x2=101.7,P<0.05),输注血浆后输血不良反应发生率高达0.79%,明显高于其他血液产品(x2=78.4,P<0.05),发生输血不良反应与临床用血科室和ABO血型无关.输血不良反应类型以过敏反应发生率高(74.1%),其次为非溶血性发热反应(24.1%).结论 输血不良反应的总发生率为0.26%,以过敏反应和发热反应为主;临床规范合理用血和尽量减少血浆应用可减少输血不良反应发生.
作者:陈金凤;叶柱江;何子毅 刊期: 2014年第02期
目的 了解海淀区食品中食源性致病菌污染现状及动态变化趋势,为食源性疾病控制提供科学依据.方法 2009~2013年按照北京市监测网工作计划要求对海淀区采集的20类食品根据国标方法进行沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌O157:H7/NM、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、阪崎肠杆菌等8种食源性致病菌检测.结果 在检测的19类822份食品中,共分离出4种52株食源性致病菌,总检出率为6.33%,其中副溶血性弧菌24株,金黄色葡萄球菌14株,单核细胞增生李斯特菌12株,创伤弧菌2株.结论 海淀区食品受到不同程度的致病菌污染,存在食物中毒和发生食源性疾病的隐患,应加强食品监督管理以减少可能引起食源性疾病的危险因素.
作者:刘伟;王菊光;谢利军;孙晓华;张海凤;纪黎黎 刊期: 2014年第02期
目的 用新型卟啉化合物分光光度法和原子吸收法检测精浆锌结果,观察比较其对诊断男性不育症的意义.方法 用新型卟啉化合物与精浆锌反应,用分光光度计比色,与标准品比较计算出精浆锌浓度,同时与原子吸收法检测结果比较.结果 原子吸收法测定200例健康组精浆锌为2.16±0.692 3 mmol/L,分光光度法测定200例健康组精浆锌为2.14±0.871 0 mmol/L,两种方法的相关系数r=0.998 6,差异无统计学意义(t=1.29,P>0.05).用分光光度法检测实验组210例不育症患者精浆锌均值为1.65±0.571 mmol/L,健康组200例已育男性精浆锌均值为2.14±0.871 mmol/L,两组相比差异有统计学意义(t=10.43,P<0.05).结论 新型卟啉化合物分光光度法是测定水中锌的一种简便方法,通过试验创新用于检测精浆锌,操作简单、灵敏度高、准确性和重复性好,与原子吸收法呈正相关(r=0.998 6),对男性不育症的诊断有很大参考价值,值得在基层医疗机构推广应用.
作者:李朝献;张志华;李妤蓉 刊期: 2014年第02期