学术投稿

小鼠CD40L重组腺病毒载体的构建

吴红兵;田聆;刘玉梅;文艳君;王虎;魏于全

关键词:mCD40L基因, 腺病毒载体, DNA同源重组, 基因治疗
摘要:目的:构建含有小鼠CD40L基因的重组腺病毒载体,为研究mCD40L的生物学特性及肿瘤基因治疗提供基础.方法:用XhoI、SwaI双酶切质粒pORF-mCD40L,回收1955bp基因片断并定向克隆插入穿梭质粒pShuttle中XhoI、EcoRV双酶切位点,得到重组质粒pSh-mCD40L.经PmeI酶切与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,同源重组后用选择培养基筛选阳性克隆,提取质粒PacI酶切线性化后用脂质体介导转染293细胞.14天左右观察细胞病变及PCR鉴定重组的腺病毒.结果:酶切分析、PCR验证mCD40L基因克隆到腺病毒pAdEasy-1载体中.结论:成功构建表达mCD40L基因的重组腺病毒载体,为进一步研究其功能和基因治疗提供了基础.
华西医学杂志相关文献
  • 非生物型人工肝治疗肝衰竭的临床应用进展

    人工肝支持系统是通过体外的机械、理化装置,担负起暂时辅助或部分替代严重病变的肝脏功能,从而使肝细胞得以再生恢复或等待机会进行肝移植.由于肝脏功能复杂,目前的人工肝多数只能替代肝脏的部分功能,因此,只能称为人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS),简称人工肝.目前,人工肝支持系统已成为国内外治疗肝衰竭的重要手段之一,在以肝细胞为生物材料的新型生物人工肝(bioartificial liver,BAL)快速发展的同时,传统的非生物型人工肝也取得了重大进展.

    作者:龙波;雷学忠 刊期: 2007年第02期

  • 骨髓间充质干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究进展

    细胞移植已成为目前脊髓损伤修复研究的热点[1,2],国内、外研究者分别探索了Schwann细胞、嗅鞘细胞、少突胶质细胞、神经干细胞、胚胎干细胞等的脊髓移植研究.

    作者:冯大雄;宋跃明 刊期: 2007年第02期

  • Mammotome乳腺良性肿瘤微创切除术的围手术期护理

    在超声引导监控下,使用Mammotome进行乳腺良性肿瘤的切除,具有准确、有效、创伤小、病人痛苦少、安全、并发症少、手术前后护理及观察简单的特性,对病人则既切除了肿瘤组织,又保持了乳房外观的完好,满足了女性要求美观的需要.是一项病人乐于接受、医生护士容易操作的值得推广的微创技术.

    作者:许瑞华;苟菊香;曾翠芳;韩蔷 刊期: 2007年第02期

  • 老年COPD患者在BiPAP通气治疗过程中的常见问题及护理对策

    目的:通过对老年慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者在双水平气道正压(bilevel positive airway pressure,BiPAP)通气治疗过程中存在的常见问题进行调查,分析出现原因,为应用BiPAP治疗的老年COPD患者提供护理依据.方法:为描述性研究,采用自制调查表对46例应用BiPAP治疗的老年COPD患者进行问卷调查.结果:老年COPD患者在应用BiPAP治疗过程中常存在的问题有:心理方面包括怀疑治疗效果、第一次使用无创呼吸机时感到恐惧、担心对呼吸机有依赖;生理方面有:腹胀、呼吸困难、气短憋气、口鼻腔干燥、面部皮肤压红破损等;其他方面的问题如患者不耐受、治疗依从性差、人机配合不协调.结论:护理人员应加强BiPAP治疗过程中老年COPD患者的健康教育,积极预防并及时处理BiPAP治疗过程中出现的各种问题,提高患者BiPAP治疗的依从性和疗效.

    作者:高浪丽;冯先琼;郑玉霞 刊期: 2007年第02期

  • 89例慢性肺原性心脏病死亡病例临床分析

    目的:探讨慢性肺原性心脏病死亡的相关危险因素和防治的有效方法.方法:回顾性分析89例慢性肺原性心脏病病程、吸烟指数、白蛋白水平、血气、发病诱因、伴随疾病、并发症、直接死亡原因.结果:89例慢性肺原性心脏病死亡病例平均年龄76.42±7.512岁,病程17.92±12.19年,吸烟指数402.2±344.09年.支,血清白蛋白水平33.951±5.421g/L,呼吸道感染为常见的发病原因,伴随疾病中高血压病、肿瘤(肺部和肺外)、CAP、糖尿病、冠心病、HAP排在前6位,并发症呼吸衰竭、心力衰竭、肺性脑病、上消化道出血、多器官功能衰竭、肾功能衰竭、肝功能衰竭、感染性休克.呼衰、恶病质、多器官功能衰竭、心力衰竭是导致患者直接死亡的主要原因.结论:大力倡导戒烟,合理的营养支持治疗,切实有效的防范感染,减少反复住院的次数,防治并发症,有效的保护心、肺、脑、肝、肾、消化道等重要器官的生理功能,极大减少慢性肺原性心脏病患者住院死亡率.

    作者:周黎强;魏家宁 刊期: 2007年第02期

  • 改良氧气湿化瓶的消毒管理

    氧气吸入疗法是临床上常用的治疗方法之一,而氧气湿化瓶作为必要的设施,由此引起的医院感染多有报道.

    作者:吴小玲;朱晶 刊期: 2007年第02期

  • 伊曲康唑治疗侵袭性肺曲霉菌病的临床观察及护理

    侵袭性肺曲霉菌病(invasive pulmonary aspergillosis,IPA)是一种病死率很高的深部真菌感染[1,2],早期诊断的困难使治疗延误是该病预后差的主要原因.

    作者:敖宇;陈懿;卢家桀;杨梅 刊期: 2007年第02期

  • 1例青少年躯体化疼痛障碍的护理体会

    躯体化疼痛障碍又称心因性疼痛障碍,是躯体形式障碍的一种,是国际疾病分类第十版(ICD-10)中一个新增的疾病单元[1].

    作者:解蓉;罗桂先 刊期: 2007年第02期

  • 选择性面神经减压术治疗面神经瘫痪病人44例

    目的:研究周围性面瘫的治疗方法,探讨影响其疗效的因素.方法:回顾性分析44例面神经瘫痪住院患者的临床资料.结果:44例患者术后随访36例,以House-brackmann(H-B)分级法评定,恢复到Ⅰ-Ⅱ级22例(22/36),Ⅲ-Ⅳ级10例(10/36),有效率为88.9%(32/36).3个月以内与3个月以上组手术的疗效差异有统计学意义(P>0.05).结论:选择性面神经减压术是治疗周围性面瘫的有效方法.

    作者:杨慧;赵宇;郑虹;秦学玲 刊期: 2007年第02期

  • 14例创伤性假性颈动脉瘤病人的救治和护理

    我院自1998年以来,共收治14例创伤性假性颈动脉瘤病人,分别采用修补动脉破口,自体大隐静脉移植,结扎颈动脉等方法,除1例死于血栓脱落,其余取得满意效果,现报告如下:

    作者:张健 刊期: 2007年第02期

  • 草酸铂或伊立替康联合5-氟脲嘧啶治疗晚期大肠癌的近期临床观察

    目的:比较草酸铂联合5-氟脲嘧啶(FOLFOX4方案)和伊立利替康联合5-氟脲嘧啶(FOLFIRI方案)对初治晚期大肠癌的近期疗效和不良反应.方法:有客观病灶的晚期大肠癌患者随机分为两组,23例应用FOLFIRI方案治疗,24例应用FOLFOX4方案治疗.两组均每2周为1周期,连续接受4个周期以上化疗,对两组近期疗效和不良反应进行对比观察.结果:FOLFIRI组22例可评价疗效,1例因Ⅲ度腹泻未能接受第4周期化疗而改用FOLFOX4方案治疗,有效率为40.9%(9/23);FOLFOX4组24例可评价疗效,有效率为45.8%(11/24).两组之间有效率差异无统计学意义(P>0.05).两组的不良反应均以Ⅰ、Ⅱ度为主,FOLFIRI组的腹泻发生率(47.8%)比FOLFOX4组(16.7%)明显(P《0.05),FOLFOX4组的神经毒性发生率(33.3%)明显高于FOLFIRI组(13.0%)(P<0.05),其他副作用包括白细胞减少、肝功能损害、恶心呕吐、静脉炎等,两组之间差异无统计学意义.结论:对于Ⅳ期初治大肠癌,FOLFOX4和FOLFIRI方案可获得相似的近期疗效.两种方案均有较好的耐受性.

    作者:杨雨;蒋明;侯梅 刊期: 2007年第02期

  • 乳腺粘液腺癌的超声诊断及误诊

    目的:研究乳腺粘液癌的病理学特性和超声声像图表现,解释其病理学特性是超声诊断敏感性低的客观原因.方法:回顾性分析我院1999~2006年经手术和病理证实的乳腺粘液腺癌56例68个病变的声像图表现和病理资料.结果:56例乳腺粘液腺癌中,术前超声检出乳腺病变的敏感性为98.5%(1/68个包块漏检),但术前超声提示乳腺癌的敏感性仅33例(59%),漏诊病例23例(41%).病理学上,乳腺粘液腺癌属于特殊性的浸润性乳腺癌,包块生长缓慢,约半数呈膨胀性生长,境界清楚,甚至假包膜形成,肿瘤富含粘液,质地较软,容易被误诊为富含粘液的纤维腺瘤.结论:乳腺粘液癌特殊的病理学特性是超声容易误诊的客观原因,影像学医师在推断引起影像学改变的病因或病理时应该使用较为客观的诊断术语.

    作者:彭玉兰;魏兵;吕青;马步云;周琛云;卢强;李宏江 刊期: 2007年第02期

  • 脑梗死并发肢体深部静脉血栓的防治

    深部静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)是由于血栓阻塞了某支深静脉,致血栓远侧的血液回流障碍,引起组织淤血,多见于四肢,尤其是下肢,常表现为相应肢体肿胀,也是致命性肺栓塞的原因.

    作者:宋晓灵;张中念;陈俊抛 刊期: 2007年第02期

  • 胃电图临床应用:进展、启示与策略

    胃电图因其具有非侵入性,简单易操作,检查时痛苦小,而易于被患者接受,它另一方面又可以弥补闪烁造影术等在检查胃轻瘫患者的胃动力方面的不足,因而在临床中应用也越来越受欢迎.

    作者:赵文堂;黄熙;任平;王一平 刊期: 2007年第02期

  • 静脉麻醉下腹腔镜诊断性手术的围术期监护

    目的:探讨静脉全麻下门诊诊断性腹腔镜手术的围术期护理要求,以提高手术患者的安全性.资料与方法:对1200例静脉麻醉下诊断性腹腔镜手术患者的监护记录,观察生命体征、麻醉效果、副反应、苏醒时间等.结果:所有患者手术顺利,术中放射性心率减慢、膈逆、返流、误吸的发生率分别为45%,6‰,5‰,2‰;手术时间8~25分钟,平均为11.5±2.6分钟.术毕至意识恢复时间5.7±1.1分钟,术毕至定向力恢复时间为9.6±1.6分钟.术中无知晓发生,310(25.4%)例患者诉术中噩梦,286(23.8%)例患者发生术后恢复期躁动,204例患者(9.5%)发生呕吐,其中49例患者(4.1%)发生在术中,155例患者(5.4%)发生在术后.所有患者均在术毕90分钟内离院.结论:静脉麻醉可减轻腹腔镜诊断性手术患者的痛苦,但存在一些不良反应.需强调的是术前准备和围术期监护以及与施术医师的密切协作方能提高围手术期的安全性.

    作者:袁琦;孙志君;唐英;李华凤 刊期: 2007年第02期

  • 腹腔灌注治疗恶性腹水的现状与进展

    恶性腹水是肿瘤引起液体在腹腔内异常潴留,常见于乳腺、支气管、卵巢、胃、胰腺、结肠等部位的肿瘤.据统计以恶性腹水起病的病人有20%没找到原发灶[1].

    作者:白娟;刘继彦 刊期: 2007年第02期

  • 急性胆囊炎腹腔镜胆囊切除术1080例临床分析

    目的:提高急性胆囊炎的腹腔镜手术成功率.方法:回顾性分析1993年10月~2006年10月1080例腹腔镜胆囊切除术(1aparoscopic cholecystectomy,LC)治疗急性胆囊炎(acute cholecystitis,AC)的临床资料.结果:手术成功1033例,中转开腹47例.全组无严重手术并发症.结论:合理运用LC及选择性引流、适时中转,急性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术(LC)是安全有效地.

    作者:王学文;邱桂刚;赵斌;赖钊;刘苏 刊期: 2007年第02期

  • 荧光定量PCR检测子宫内膜异位症病人基质金属蛋白酶基因的方法

    目的:探讨基质金属蛋白酶-2、3(matrix metalloproteinase-2、3)、金属蛋白酶组织抑制物-2(tissueinhibitor of metalloproteinase-2)TIMP-2的mRNA的定量检测方法,以及它们的检测对研究子宫内膜异位症的发生的意义.方法:使用实时荧光PCR( real-time PCR)法在正常妇女子宫内膜、子宫内膜异位症妇女正位内膜及异位内膜进行MMP-2、MMP-3、TIMP-2的mRNA的定量分析.结果:实时荧光定量PCR法可以较准确地检测出正位内膜及子宫内膜异位症妇女的宫内膜囊肿的MMP-2、MMP-3、TIMP-2 mRNA的相对含量.子宫内膜异位症妇女异位内膜的MMP-2、MMP-3、TIMP-2 mRNA含量均高于正常对照(P<0.05).结论:实时定量PCR方法是一种较准确地检测基因含量的方法,检测MMPs、TIMPs的mRNA表达具有灵敏度高、相对定量方法简便易行的优点,可以为子宫内膜异位症的发病机制的研究、治疗方法的评估、新药的研制及筛选提供更准确的基因水平信息,有望成为临床应用的检测手段.

    作者:高雪梅;邱芳;王和;程薇 刊期: 2007年第02期

  • 丁丙诺啡地塞米松加入局麻药用于骶管阻滞术后镇痛的临床观察

    目的:观察丁丙诺啡、地塞米松加入局麻药用于骶管阻滞对术后镇痛的作用.方法:90例ASAⅠ~Ⅱ级在骶管阻滞麻醉下手术患者,随机分三组,每组30例.局麻药为0.5%罗哌卡因和1%利多卡因混合液15~20ml,A组单纯应用局麻药,麻醉成功后肌注丁丙诺啡0.15mg;B组局麻药中加入丁丙诺啡0.15mg、地塞米松10mg;C组局麻药中加入丁丙诺啡0.15mg.记录术后3、9、15、24、48h的视觉模拟评分(VAS);评估术后镇痛持续时间(术毕至术后VAS>3分的时间);记录不良应及镇痛药使用情况.结果:术后B组VAS明显低于A组(P<0.01),镇痛持续时间B组显著长于A组(P<0.01).C组15h、24hVAS评分明显高于B组(P<0.05),镇痛持续时间显著短于B组(P<0.05).不良反应三组间无显著差异(P>0.05).结论:骶管阻滞时加入丁丙诺啡、地塞米松能明显增强术后镇痛作用,延长术后镇痛时间,不良反应轻微.

    作者:段鲁;谭志敏;曾凡辉;董涛 刊期: 2007年第02期

  • 鞍结节脑膜瘤的显微外科手术治疗

    目的:探讨显微外科手术治疗鞍结节脑膜瘤的方法及效果.方法:回顾性分析自2003年6月至2006年10月显微手术治疗的38例鞍结节脑膜瘤.结果:SimpsonⅠ级切除23例,Ⅱ级切除12例,Ⅲ级切除3例.术后视力损害和视野缺损均有不同程度恢复18例,12例视力无改变,2例视力下降.2例术后出现不同程度的尿崩,经相应治疗后在7天内好转.无死亡病例.结论:选择恰当的手术入路,应用显微神经外科手术治疗鞍结节脑膜瘤,肿瘤全切除率高,术后并发症少,视觉症状恢复率高,疗效满意.

    作者:王斌;游潮;蔡博文;刘翼;李进;贺民 刊期: 2007年第02期

华西医学杂志

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