学术投稿

冻存脐带间充质干细胞的临床前制备

何洁;赵晶;王金祥;蔡学敏;庞荣清;潘兴华

关键词:脐带, 间充质干细胞, 制剂, 制备, 质量检定
摘要:目的 将冻存的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)制备成一种复苏后可直接用于临床的制剂,并进行质量检定.方法 从种子细胞库复苏冻存的UC-MSCs,待细胞培养至P3代时,收集UC-MSCs,按照4×107/剂的规格加入含5%人血白蛋白、10%DMSO、85%复方电解质溶液的细胞保护液,形成制剂,并对其进行质量检定,包括无菌检测、支原体检测、细胞内外源致病因子检测、内毒素检测、免疫表型检测、稳定性检测、异常免疫学反应检测以及残留物检测.结果 制备的UC-MSCs制剂无菌、无支原体污染,无内外致病因子,毒素<2 EU,能抑制异源淋巴细胞的增殖,抑制率随脐带间充质干细胞数量增加而增大.牛血清残留<50 ng/袋,制剂冻存前细胞活性>90%,复苏后活性>85%.结论 按照此方法制备的UC-MSCs制剂符合临床治疗要求的质量检定标准.
西南国防医药杂志相关文献
  • 人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

    目的 建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术.方法 在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40~50 cm,弃被膜、血管后,剪成1 mm3的组织块,置于含10%胎牛血清的DMEM/F12的培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜动态观察细胞的生长及形态,对传代培养的第3代细胞采用流式细胞分析法进行细胞周期及表形分析,采用体外定向诱导分化实验观察多向分化潜能.结果 组织块贴壁后于第4d开始向周围呈放射状长出细胞,平均12 d左右长满瓶底,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于4~5 d达80%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90、CD29阳性率>99%,CD105阳性率>81%,不表达CD34,CD45,在体外能分化成骨、软骨、脂肪细胞.平均每条脐带获得细胞数>6×109个.结论 通过多条人脐带重复分离培养,建立了体外规模化、标准化的人脐带间充质干细胞的制备与鉴定技术规范及标准,可为人脐带间充质干细胞库建设和临床应用提供技术支持和标准化脐带间充质干细胞.

    作者:赵晶;何洁;王金祥;蔡学敏;庞荣清;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • UC-MSC治疗儿童造血干细胞移植后GVHD的疗效观察

    目的 观察脐带间充质干细胞(UC-MSC)治疗儿童造血干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的疗效.方法 对1例造血干细胞移植后发生GVHD的患儿行UC-MSC治疗,共治疗7次,每次4×107个细胞(20 ml).结果 患儿在接受UCMSC治疗后获得部分缓解(PR).结论 UC-MSC对治疗儿童造血干细胞移植后的GVHD具有一定的疗效.

    作者:何洁;赵晶;庞荣清;阮光萍;蔡学敏;朱向情;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • 自体心包片在心脏血管直视手术中的应用

    目的 探讨心包补片在心脏、大血管直视手术中的应用价值.方法 收集医院1999年3月~2015年8月应用新鲜自体心包片作为修补材料完成的体外循环下心脏、大血管直视手术患者1757例的病例资料,其中室间隔缺损910例,房间隔缺损680例,法洛四联症117例,心房黏液瘤18例,胸主动脉瘤32例,对手术治疗结果进行回顾性分析.结果 平均主动脉阻断时间(110.10±37.96)min,平均体外循环时间(122.46±66.01)min.术后10~60 d死亡46例,病死率4.1%.死亡原因:低心排血量综合征24例,感染心内膜炎9例,呼吸衰竭9例,深低温停循环致术后肾衰4例.死亡病例与应用自体心包材料无关.其他1711例治愈出院,总手术成功率97.4%.结论 自体心包补片在心脏、大血管直视手术中的应用安全有效,成功率高,患者预后较好.

    作者:石云;张利;杨黎;罗国军;蔡文科;陈瑜;陈小波;杨宝升;于杰 刊期: 2016年第12期

  • 树鼩急性放射损伤模型的建立

    目的 建立树鼩急性放射损伤模型.方法 将树鼩32只随机分为对照组(16只)和照射组(16只),照射组给予X射线全身一次性4 Gy照射.分别在照射后7、14、21和28 d,检测两组血象、血生化指标,并于照射后第2w,处死树鼩做病理检查.结果 照射组经4 Gy射线照射后,总死亡率为50%,对照组无树鼩死亡;照射后照射组白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM)先降低后升高;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)与对照组相比先降低后升高,之后又降低;血清尿素(BUN)、肌酐(CREA)含量与对照组相比先升高后降低,之后又升高.照射组肺、肝、肾、胃、脾及小肠等重要脏器病理改变明显.结论 成功地建立了树鼩急性放射损伤模型.

    作者:王强;王永刚;马洪磊;李自安;杨建勇;朱慧;朱向情;何洁;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • 腓骨肌腱脱位的诊断与治疗

    腓骨肌腱脱位早由Monteggia在1803年报道[1],90%以上由运动损伤引起[2],在踝关节肌腱脱位中较为常见,但在临床工作中并不多见.一旦发生后,因踝关节后外侧疼痛和肌腱滑脱导致日常生活和运动受限.多数临床医师缺乏对该疾病的认识,容易出现漏诊、误诊.大部分患者诊断时已形成慢性习惯性脱位,导致踝关节持续性疼痛和潜在的功能性问题,多需手术治疗.本文根据近年来国内外相关文献对腓骨肌腱脱位的诊断与治疗作一综述.

    作者:张军;丁晶 刊期: 2016年第12期

  • 微波联合药物局部治疗宫颈糜烂疗效及安全性探讨

    目的 探讨微波+干扰素联合宫颈炎康栓局部治宁宫颈糜烂的临床疗效与安全性.方法 选取医院接诊的宫颈糜烂患者100例,随机分为对照组与治疗组,各50例.对照组给予微波+干扰素局部治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用宫颈炎康栓,10d为1个疗程,观察比较两组的临床疗效和不良反应发生情况.结果 治疗后两组均取得良好的治疗效果,但治疗组的临床疗效优于对照组(P<0.05);治疗组不良反应发生率明显少于对照组(P<0.05).结论 采用微波+干扰素联合宫颈炎康栓局部治疗宫颈糜烂临床疗效显著,且可显著减少术后并发症的发生,安全性较高,值得推广.

    作者:刘芳;巨瑛;刘丹;杨红睚;肖西峰 刊期: 2016年第12期

  • 野战医疗所占用型医疗装备使用效能评估模型的构建

    目的 结合野战医疗所基地化训练,分析占用型医疗装备的使用效能,为总体评估野战医疗所的卫勤保障能力提供参考.方法 利用线性规划方法建立占用型医疗装备使用效能评估模型,并进行效能分析.结果 占用型医疗装备使用效能随着伤病员数量增加而递减,其中工效指标与使用效能呈正比关系,硬件指标、损耗指标与使用效能呈反比关系.结论 通过校验,该模型有效且稳定性较好,可应用于不同野战医疗所占用型医疗装备使用效能的横向比较,也可为决策层合理配置人员、装备提供参考依据.

    作者:张平;范立冬;唐硕;肖南;郑然 刊期: 2016年第12期

  • 不同峰值负压脉冲超声联合微泡对脾创伤止血的作用研究

    目的 对比不同峰值负压超声联合微泡对脾创伤的止血效果.方法 将15只家犬开腹建立脾创伤模型后,随机分为3组,治疗前记录各组10 s出血速率,然后经股静脉推注等量微泡后,分别以高(4785 kPa)、中(3439 kPa)、低(1785 kPa)峰值负压脉冲超声辐照6 min,分别记录各组治疗后10 min总出血量.结果 治疗前各组出血速率无统计学差异(P>0.05);治疗后,各组10 min总出血量均有统计学差异(P<0.01),其中高峰值负压组少,中峰值负压组次之,低峰值负压组多.治疗后,超声造影显示低峰值负压组治疗区造影浅表局部有充盈缺损,大部分辐照区仍有造影剂充填;中峰值负压组可见辐照区大部充盈缺损,局部可见零星造影剂灌注;高峰值负压组可见治疗区基本无造影剂充填,呈充盈缺损.结论 高峰值负压脉冲超声联合微泡治疗脾出血更加快速、彻底.

    作者:钟渝;孙丹宁;区文才;柳建华;刘政 刊期: 2016年第12期

  • 基底节区高血压脑出血术后再出血临床分析

    目的 探讨高血压基底节区脑出血术后再出血的相关因素及预防措施.方法 回顾分析235例高血压基底节区脑出血行手术治疗患者的临床资料,探讨手术时间、止血方式、术后高血压等因素与术后再出血的关系.结果 共24例发生术后再出血,发生率为10.2%,主要发生在超早期手术后(出血时间<6h)及术后监测高血压过高(收缩压>180 mmHg)的患者,再出血率分别为23.3%和22.2%;另外肉眼直视下止血较显微镜下止血具有较高的再出血发生率(14.4% vs 4.9%),上述因素均具有统计学意义(P<0.05).结论 基底节区脑出血术后再出血与超早手术时机、肉眼下止血不彻底及术后血压过高有关.因此,在不危及生命的前提下,将手术延迟至出血6h后、显微镜下彻底止血和严格控制术后血压,可以降低术后再出血风险.

    作者:薛峰;陈登奎;刘蓉;杨帆 刊期: 2016年第12期

  • 长期吸烟史对CHD患者口服阿司匹林二级预防效果的影响

    目的 探讨长期吸烟史对冠心病(CHD)患者口服阿司匹林二级预防效果的影响.方法 回顾性分析88例伴长期吸烟史的CHD患者临床资料,根据其发病后戒烟情况分为持续吸烟组(n=32)和戒烟组(n=56).比较其2年随访过程中次要终点事件及主要终点事件发生情况;记录其随访前后血脂指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血小板黏附率及血浆黏度变化情况.结果 随访2年后,两组TC、TG等血脂水平、血小板黏附率及血浆黏度均较入组时显著降低,且戒烟组<持续吸烟组(P< 0.05);HDL-C水平则较入组时显著提高,且戒烟组>持续吸烟组(P<0.05).随访2年内,两组除心绞痛发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)外,持续吸烟组心力衰竭率、非致死性心肌梗死率、脑卒中率、再入院率及心源性死亡率均显著高于戒烟组(P<0.05).结论 长期吸烟会对CHD患者阿司匹林二级预防效果造成不良影响,易增加心源性死亡风险,于患者预后恢复不利.

    作者:张淑波 刊期: 2016年第12期

  • 早期肠内营养对直肠癌手术患者炎症因子及淋巴细胞的影响

    目的 观察早期肠内营养对直肠癌手术患者炎症因子及淋巴细胞的影响.方法 80例直肠癌术后患者随机分为两组,每组40例,对照组术后给予静脉营养,观察组术后给予早期肠内营养,分别在术前30 min和术后3、4、7d采集患者外周血,采用ELISA法测定TNF-a、IL-6水平,采用流式细胞仪测定CD4+T及CD8+T细胞水乎,比较两组检测结果.结果 在术后3、4、7d,观察组TNF-α和IL-6水平显著低于对照组(均P<0.05),而CD4+T和CD8+T细胞水平显著高于对照组(均P<0.05).观察组术后出现腹胀4例,均经对症治愈,无患者因腹胀而中断肠内营养;对照组术后发生腹胀5例,两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05).结论 早期肠内营养有助于降低直肠癌手术患者TNF-α和IL-6水平,对调节机体炎性反应具有重要作用;且可使CD4+T、CD8+T细胞水平升高,有助于免疫功能恢复,具有重要临床价值.

    作者:李迪;涂永久;陈战;林硕 刊期: 2016年第12期

  • 不同促排方案对PCOS不孕患者治疗效果的比较

    目的 探析不同促排方案治疗多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者的临床疗效.方法 选择我科收治的PCOS不孕患者93例作为研究对象,根据就诊先后顺序编号分为A组、B组与C组,各31例.A组应用来曲唑片治疗,B组应用人绝经期促性腺激素治疗,C组联合应用来曲唑片与人绝经期促性腺激素,3组在此基础上均行宫腔内人工授精术.比较3组优势卵泡数、排卵数、子宫内膜厚度、妊娠结局[包括临床妊娠率、流产率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)、多胎妊娠、异位妊娠].结果 A组优势卵泡数、排卵数均低于C组(P<0.05),B组与C组比较无统计学差异(P>0.05).3组治疗前子宫内膜厚度均无统计学差异(P>0.05);手术当日A组与C组子宫内膜厚度大于B组(均P< 0.05).3组妊娠结局也均无统计学差异(P>0.05).结论 来曲唑片侧重增加患者子宫内膜厚度,但缺点为卵泡成熟率不高;注射用人绝经期促性腺激素有较高促卵泡成熟率,但对子宫内膜厚度增加作用较弱.二者联合应用既可增加子宫内膜厚度,又可提高卵泡成熟率,可能有助于促进临床妊娠率的提高,为PCOS不孕患者理想治疗方案之一.

    作者:姜艳萍;张印星;殷旭光 刊期: 2016年第12期

  • CHM及PHM病理组织中p57kiP2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达差异

    目的 探讨完全性葡萄胎(CHM)和部分性葡萄胎(PHM)病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达差异.方法 对医院妇科收治63例葡萄胎患者进行回顾性分析,其中CHM组患者33例,PHM组30例,采取免疫组织化学染色法检测病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达,并与31例正常妊娠妇女做对比,.结果 CHM组和PHM组的p57kip2、p53、CD117及EGFR阳性表达率分别为(3.03%、93.94%、87.88%、12.12%)和(83.33%、36.67%、63.33%、36.67%);CD34分数分别为(12.23±2.27)%、(14.45±2.42)%,CHM组与PHM组差异有统计学意义(P<0.05),CHM组与正常组差异有统计学意义(P<0.05),PHM组与正常组无统计学差异(P>0.05).结论 以免疫组化法检测葡萄胎病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达水平,通过其表达水平高低程度,可有效鉴别CHM与PHM.

    作者:梁尚华 刊期: 2016年第12期

  • 滇南地区烧伤患者感染病原学及耐药性分析

    目的 分析滇南地区烧伤病房患者病原菌分布及耐药性特点,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 对医院2012年1月~2014年12月烧伤外科住院患者感染细菌分布及耐药性进行回顾性分析,血标本采用法国梅里埃血培养箱进行培养,其他标本按常规方法接种相应琼脂平板进行培养,菌种鉴定采用Bact-IST微生物鉴定系统.结果 共分离出非重复病原菌245株,其中革兰阴性菌21 1株占86.1%,分离率高的前5种病原菌分别为鲍氏不动杆菌、奇异变形杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌,均为革兰阴性菌;革兰阳性菌31株占14.3%,分离率高为金黄色葡萄球菌,占64.5%,未检出对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素耐药的葡萄球菌属;主要的肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率小于10.0%,但鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物敏感性低,耐药率达80.0%以上.结论 烧伤患者感染病原菌的耐药形势严峻,应加强对烧伤患者的细菌耐药监测,尽早进行病原学检查,指导临床合理使用抗菌药物.

    作者:张荣萍;何雨佳;潘文东;刘敏 刊期: 2016年第12期

  • 脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞转移侵袭能力影响初探

    目的 观察人源脐带间充质干细胞(HUCMSC)对胶质瘤细胞株U87转移、侵袭能力的影响.方法 建立细胞共培养体系,CCK8法、transwell法和Matrigel法分别检测HUCMSC与U87非接触共培养后,U87增殖、转移、侵袭能力变化.结果 体外细胞共培养体系中,HUCMSC共培养U87组(实验组)比U87单独培养组(对照组)转移和侵袭能力都有显著提高(P<0.05),HUCMSC共培养对U87有促增殖作用.结论 在体外共培养体系中,HUCMSC可能通过促进EMT转化而提高胶质瘤细胞株U87增殖、转移和侵袭潜能.因此,在HUCMSC的临床转化应用中,应该考虑其可能的促肿瘤作用.

    作者:刘高米洋;朱慧;何洁;刘菊芬;阮光萍;李自安;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • 肿瘤多学科联合会诊580例体会

    目的 探讨肿瘤多学科联合会诊的实施方法及成效.方法 以医院近3年实施多学科联合会诊的肿瘤患者580例为观察对象.成立肿瘤多学科联合诊治小组,科室提出多学科联合会诊申请,由医疗科科长通知并组织肿瘤多学科联合诊治小组进行集中会诊,各组员根据各自专业围绕患者诊断、肿瘤分期、治疗方案及预后判定等提出意见.分析会诊原因及结果,统计确诊疾病类型及转归.结果 580例多学科会诊患者中,会诊原因列前3位的依次为诊断不明(32.1%)、诊断明确但疗效不佳(26.9%)、治疗涉及多学科(18.6%).通过多学科会诊后,580例中,共明确诊断528例(91.0%),明确分期494例(85.2%),明确或改进治疗方案546例(94.1%),213例(36.7%)预后判断为良.通过会诊明确诊断13类病种,列前5位的依次为伴有其他脏器转移(31.4%)、肺癌(12.9%)、胃癌(10.0%)、结直肠癌(8.7%)、肝癌(6.6%).528例确诊患者中,共治愈118例(22.3%),好转302例(57.2%),无效92例(17.4%),住院期间死亡16例(3.1%).结论 肿瘤多学科联合会诊有助于明确肿瘤诊断,制定佳诊疗方案,提高疗效及改善预后.

    作者:何坤;罗晓明;肖军;梁晓明;姚杰 刊期: 2016年第12期

  • 人脐带间充质干细胞制剂创制的关键技术研究

    脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)来源于新生儿脐带,具有自我复制和多向分化能力,在体内外特定环境诱导下,可分化为骨、软骨、肌肉、肝、内皮和心肌等功能细胞[1].与骨髓和脂肪来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)相比,HUC-MSC采集方便、来源充足、可规模化、标准化生产与储存,无伦理学争论,是具有产业化和临床应用前景的干细胞之一.鉴于HUC-MSC的可塑性和免疫调节作用,在临床上可用于衰老、退变、损伤性疾病的治疗,例如肝肾损伤、脊髓损伤、退行性病变、移植物抗宿主病(GVHD)以及自身免疫性疾病等的治疗[2].笔者对研制UC-MSC制剂的关键技术进行了概述.

    作者:潘兴华;庞荣清;阮光萍;朱向情;蔡学敏;何洁;赵晶;刘高米洋 刊期: 2016年第12期

  • 优化肺动脉CT成像技术在临床的应用效果观察

    目的 观察并分析优化肺动脉CT成像技术在临床的应用效果.方法 选择2013年5月~2015年5月医院接收的150例进行肺动脉CT成像检查患者为研究对象,将其随机分成延迟法组、上腔静脉组、肺动脉干组,分别进行经验延迟法、上腔静脉触发和肺动脉干触发扫描,观察比较三组的扫描图像效果.结果 肺动脉干组肺动脉干及亚段肺动脉的CT值均明显高于其他两组,且对比度噪声比(CNR)值也明显较高(P<0.05);肺动脉干组评价结果5分和4分所占比例合计为86.0%,扫描图像质量显著高于延迟法组和上腔静脉组的56.0%(P<0.05).结论 优化的肺动脉干触发扫描技术所得的扫描图像更加准确,可为临床诊疗提供更优价值的参考依据.

    作者:王俊峰;王会轩;高朝前 刊期: 2016年第12期

  • 中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎的疗效及不良反应

    目的 探讨中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎的疗效及不良反应.方法 选取我院收治的140例鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎患者为研究对象,随机分成两组,每组70例.观察组给予中医辨证施治,对照组给予小剂量罗红霉素治疗,比较两组临床疗效、治疗前后Lund-Mackey鼻窦评分及药物不良反应.结果 观察组治愈率为81.43%,总有效率为97.14%,均较对照组有明显上升(P<0.05);两组治疗后Lund-Mackey鼻窦评分均有明显下降,而观察组下降更明显(P<0.01),且不良反应发生率明显低于对照组(P<0.01).结论 中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎疗效显著,且不良反应少,值得临床推广应用.

    作者:聂晨阳;陈斌 刊期: 2016年第12期

  • C肽对高糖下肾足细胞凋亡和肾病蛋白的影响

    目的 探讨C肽对高糖下肾足细胞凋亡和肾病蛋白的影响.方法 将肾足细胞分成4组:对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖,下同)、C肽组(高糖+C肽)、百日咳毒素(PTX)组(高糖+C肽+PTX),干预24 h后,Western blot 检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和mTOR蛋白,免疫荧光法检测肾病蛋白,TUNEL一步法检测足细胞凋亡.结果 5 nmol/L C肽即能显著抑制高糖下足细胞mTOR的表达(P<0.01).与对照组相比,高糖组PI3K、Akt和mTOR表达显著升高(P<0.05),肾病蛋白表达显著下降(P<0.01),足细胞凋亡显著增加(P<0.01);与高糖组相比,C肽能逆转高糖所致的上述变化(P<0.01),而nX能消除或减弱C肽的上述逆转作用(P<0.05).结论 C肽可抑制高糖激活的足细胞PI3K-Akt-mTOR信号通路,并减少高糖所致的足细胞肾病蛋白减少和足细胞凋亡.

    作者:游志清;郎红梅;程莹;刘君静;任丽;万勇;郭蔚;李宁娜;艾智华 刊期: 2016年第12期

西南国防医药杂志

西南国防医药杂志

主管:成都军区联勤部卫生部

主办:成都军区医学科学技术委员会