学术投稿

人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

赵晶;何洁;王金祥;蔡学敏;庞荣清;潘兴华

关键词:脐带, 间充质干细胞, 制备, 鉴定, 规模化, 标准化
摘要:目的 建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术.方法 在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40~50 cm,弃被膜、血管后,剪成1 mm3的组织块,置于含10%胎牛血清的DMEM/F12的培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜动态观察细胞的生长及形态,对传代培养的第3代细胞采用流式细胞分析法进行细胞周期及表形分析,采用体外定向诱导分化实验观察多向分化潜能.结果 组织块贴壁后于第4d开始向周围呈放射状长出细胞,平均12 d左右长满瓶底,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于4~5 d达80%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90、CD29阳性率>99%,CD105阳性率>81%,不表达CD34,CD45,在体外能分化成骨、软骨、脂肪细胞.平均每条脐带获得细胞数>6×109个.结论 通过多条人脐带重复分离培养,建立了体外规模化、标准化的人脐带间充质干细胞的制备与鉴定技术规范及标准,可为人脐带间充质干细胞库建设和临床应用提供技术支持和标准化脐带间充质干细胞.
西南国防医药杂志相关文献
  • 野战医疗所占用型医疗装备使用效能评估模型的构建

    目的 结合野战医疗所基地化训练,分析占用型医疗装备的使用效能,为总体评估野战医疗所的卫勤保障能力提供参考.方法 利用线性规划方法建立占用型医疗装备使用效能评估模型,并进行效能分析.结果 占用型医疗装备使用效能随着伤病员数量增加而递减,其中工效指标与使用效能呈正比关系,硬件指标、损耗指标与使用效能呈反比关系.结论 通过校验,该模型有效且稳定性较好,可应用于不同野战医疗所占用型医疗装备使用效能的横向比较,也可为决策层合理配置人员、装备提供参考依据.

    作者:张平;范立冬;唐硕;肖南;郑然 刊期: 2016年第12期

  • 食管癌术后二氧化碳严重蓄积致苏醒延迟1例

    病例 女性,71岁,体重31 kg,因进食后胸后隐痛半年,加重伴吞咽梗阻1d入院.入院诊断为食管癌,拟在全身麻醉下进行左侧开胸食管癌切除+胃食管左颈部吻合术.入室监测生命体征:T 36.7℃,R 18次/min,BP 156/76mmHg,P 80次/min.麻醉诱导:咪达唑仑2.5 mg,舒芬太尼15 μg,苯磺酸顺阿曲库铵10 mg,依托咪酯10 mg;面罩预给氧5 min后行气管插管,插管顺利,听诊两肺呼吸音对称,固定导管连接麻醉机,术中监测动脉血压125~140/80~90 mmHg,呼气末二氧化碳分压25~40 mmHg,术程顺利.

    作者:王伟立;姜雄华;胡兵;卢承志 刊期: 2016年第12期

  • 细化改进院内绿色通道措施在缩短门-球时间中的作用

    我院胸痛中心于2015年4月正式通过中国胸痛中心认证委员会认证授牌,对于急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardialinfarction,STMEI)的救治起到了明显的促进作用.在胸痛中心建设过程中,需要不断的总结经验,持续改进,才能进一步提高救治效率,缩短STEMI的救治时间,大限度的挽救患者.我院胸痛中心定期总结院内绿色通道运行情况,并进行细化改进,优化流程,有效缩短了从入医院院门到球囊开通血管(门-球)时间(door-to-balloon,DTB),取得了良好的临床效果和社会效益,现报告如下.

    作者:石燕昆;杨丽霞;叶金善;陈长征;陈广;任丽;蒋永强 刊期: 2016年第12期

  • MIPO术结合锁定钢板对肱骨近端粉碎性骨折的临床疗效

    目的 探讨微创钢板固定术(MIPO)结合锁定钢板寸肱骨近端粉碎性骨折的临床疗效.方法 选取80例肱骨近端粉碎性骨折患者,按照入院时间段分为两组,对照组(39例)给予传统钢板内固定治疗,MIPO组(41例)给予MIPO联合锁定钢板治疗.观察并记录两组围手术期指标、肩功恢复情况、SF-36量表评分及随访12个月期间并发症发生情况.结果 MIPO组在术中失血量、手术时间和骨折愈合时间上均明显少于对照组(P<0.05),两组住院时间没有统计学差异(P>0.05);术后6个月,MIPO组肩功能恢复优良率明显高于对照组(P<0.05);与术前相比,术后6个月两组SF-36量表各项评分均明显升高,而两组间比较,没有统计学差异(P>0.05);随访12个月期间,两组并发症如延迟愈合、不愈合、畸形愈合、桡神经损伤、术后感染等的发生率均较低,两组相比,没有统计学差异(P>0.05).结论 MIPO结合锁定钢板对肱骨近端粉碎性骨折具有骨折愈合快、恢复肩关节功能好、改善患者生活质量、手术安全等优点,值得临床推广.

    作者:王志强;王琨 刊期: 2016年第12期

  • 改良法建立内膜损伤致大鼠颈动脉狭窄模型

    目的 改良球囊致内膜损伤建立大鼠颈动脉狭窄模型,并对其发生机制作初步探究.方法 42只SD大鼠随机分为模型组(n=21)和假手术组(n=21),模型组利用10 ml注射器针头模拟球囊抽拉致内膜损伤建立颈动脉狭窄模型;假手术组除针头抽拉损伤外,其余处理与模型组一致.伊文思蓝染色观察两组(每组3只)术侧颈总动脉内膜损伤差异;分别于术后1、2及3w取两组颈总动脉(每组每次6只)行HE染色,观察血管狭窄变化;将2w颈总动脉行α-smooth muscle actin免疫组化染色及二氧乙啶(DHE)测量活性氧(ROS)含量.结果 伊文思蓝染色指示,针头抽拉区域内膜损伤.HE染色显示,模型组术后1w时内膜开始增殖,2w时内膜快速增殖达到1 w时的6.1倍,血管狭窄形成;3w时内膜缓慢增值达到1 w时的6.8倍.α-smoothmuscle actin染色指示新生内膜大部分为平滑肌细胞(VSMCs).与假手术组相比,模型组ROS表达量急剧升高(P<0.01).结论 利用注射器针头抽拉成功建立大鼠颈动脉狭窄模型,其机制可能是内膜损伤使ROS含量升高,诱导VSMCs由中膜迁移至内膜并恶性增殖,从而导致颈动脉狭窄发生.

    作者:张耀雷;李昆;张彦;杨炯;呼永和 刊期: 2016年第12期

  • Mb、cTnI、hs-CRP、CK-MB联合检测对急性心肌梗死的诊断价值

    目的 研究单独检测和联合检测肌红蛋白(Mb)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)4项指标对急性心肌梗死的诊断价值.方法 选择医院诊治的急性心肌梗死患者45例为A组,不稳定型心绞痛患者40例为B组,体检健康者40例为C组.比较3组的cTnI、Mb、hs-CRP、CK-MB水平和阳性率,以及cTnI、Mb、hs-CRP、CK-MB单独检测和联合检测诊断急性心肌梗死的效率.结果 3组的Mb、cTnI、hs-CRP、CK-MB水平和阳性率均有统计学差异(P<0.05),均为A组>B组>C组(P<0.05);且4项指标联合检测的阳性率明显高于单独检测(P<0.05);4项指标联合检测的特异度、敏感度和阴性预测值分别为99.31%、98.12%和97.68%,且阳性预测值达到100.00%.结论 Mb、cTnI、hs-CRP、CK-MB对急性心肌梗死的诊断有重要临床意义,联合检测能提高诊断的灵敏度,减少误诊,具有较高的临床应用价值.

    作者:焦方晓;张彦宁 刊期: 2016年第12期

  • 病毒唑联合思密达治疗婴幼儿轮状病毒肠炎80例疗效分析

    目的 探讨病毒唑联合思密达治疗婴幼儿轮状病毒肠炎的疗效.方法 选取80例轮状病毒肠炎患儿,按入院时间段分为两组,对照组(39例)给予病毒唑治疗,观察组(41例)采用思密达联合病毒唑治疗.观察比较两组治疗后72 h内的疗效、治疗前后免疫功能指标及治疗期间不良反应情况.结果 治疗后72 h内,观察组总有效率为95.1%,明显高于对照组的79.5%(P<0.05);与对照组相比,观察组退热时间、纠正脱水时间、腹泻时间和治愈时间均明显较短(P<0.05);治疗前,两组血清免疫功能指标无统计学差异(P>0.05);治疗后3d,除了CD8+水平无明显变化外,两组其他免疫功能指标均明显升高,且观察组升高幅度均大于对照组(P<0.05).治疗期间,两组不良反应率无统计学差异(P>0.05).结论 病毒唑联合思密达对婴幼儿轮状病毒肠炎具有较好的治疗作用,止泻效果迅速,能提高患儿免疫功能,且用药安全性好,值得临床推广使用.

    作者:桂兰;吕丽英 刊期: 2016年第12期

  • 不同支抗对青少年安氏Ⅱ类Ⅰ分类错(牙合)矫治效果对比

    目的 探讨不同正畸支抗(支抗)对青少年安氏Ⅱ类Ⅰ分类错(牙合)的矫治效果.方法 回顾性选择我院收治的青少年安氏Ⅱ类Ⅰ分类错(牙合)患者79例,分为微种植组(39例)及J钩组(40例),分别给予微种植支抗治疗和高位J钩牵引治疗.观察两组的治疗完成情况,对比分析两组矫治前及矫治8个月后的SNA、SNB、ANB、MP-FH、U1-SN、U1-X、U1-Y、U6-X、U6-Y、UL-Y及Z角变化.结果 微种植组均完成治疗;J钩组40例中,3例治疗中途转为微种植支抗.治疗后,两组的SNB、ANB、MP-FH、U1-Y、U6vY、UL-Y均发生显著变化(P<0.05),而两组的SNA、U1-SN、U1-X、U6-X治疗前后无显著变化(P>0.05).微种植组的ANB、MP-FH、U1-Y、U6-Y、UL-Y治疗前后变化明显大于J钩组(P<0.05),而SNB治疗前后变化明显小于J钩组(P<0.05).与治疗前相比,两组治疗后Z角均明显增加(P<0.05),而组间对比无统计学差异(P>0.05).结论 微种植支抗及J钩牵引均可有效改善青少年安氏Ⅱ类Ⅰ分类错(牙合)软组织侧貌,但微种植支抗较J钩支抗的支抗作用强,患者治疗依从性好.

    作者:岳强;车霄楠;韩玮;杨晓虎;李沛 刊期: 2016年第12期

  • 阿托伐他汀治疗糖耐量减低原发性高血压的临床研究

    目的 研究阿托伐他汀治疗原发性高血压(EH)伴糖耐量减低(IGT)的临床效果.方法 选取医院确诊且治疗的EH合并IGT患者90例,随机分为观察组(45例,常规降压治疗联合阿托伐他汀治疗)和对照组(45例,常规降压治疗),对比两组血压、血糖、血脂及血清炎症因子水平变化.结果 治疗后两组的血压(SBP、DBP)均明显降低(P<0.05),但组间比较无统计学差异(P>0.05);治疗后观察组的血脂(LDL-C、TC、TG)、血糖(2hPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清炎症因子(IL-6、TNF-α)水平均明显低于对照组(P<0.05).结论 阿托伐他汀辅助治疗EH伴IGT能够有效减轻炎症反应,下调炎症因子,降低血糖、血脂及胰岛素抵抗,值得推广应用.

    作者:朵皓英 刊期: 2016年第12期

  • 中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎的疗效及不良反应

    目的 探讨中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎的疗效及不良反应.方法 选取我院收治的140例鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎患者为研究对象,随机分成两组,每组70例.观察组给予中医辨证施治,对照组给予小剂量罗红霉素治疗,比较两组临床疗效、治疗前后Lund-Mackey鼻窦评分及药物不良反应.结果 观察组治愈率为81.43%,总有效率为97.14%,均较对照组有明显上升(P<0.05);两组治疗后Lund-Mackey鼻窦评分均有明显下降,而观察组下降更明显(P<0.01),且不良反应发生率明显低于对照组(P<0.01).结论 中医辨证施治鼻咽癌放疗后并发鼻窦炎疗效显著,且不良反应少,值得临床推广应用.

    作者:聂晨阳;陈斌 刊期: 2016年第12期

  • 青黄散联合化疗治疗急性髓性白血病临床研究

    目的 探讨青黄散联合化疗治疗急性髓性白血病(AML)的疗效.方法 选取60例AML患者,随机分为两组,观察组(31例)给予青黄散联合DA化疗方案,对照组(29例)单纯给予DA化疗方案.观察比较两组治疗后1年的疗效、外周血象、随访1年期间不良反应情况和2年内生存率.结果 治疗1年后,观察组有效率明显高于对照组(P<0.05);与治疗前相比,治疗后两组血红蛋白水平均上升(P<0.05),但两组间比较无统计学差异(P>0.05);治疗后两组白细胞计数和血小板计数均下降(P<0.05),且观察组数值均明显低于对照组(P<0.05);随访1年期间,两组在胃肠道不适、四肢水肿、恶心、腹痛、便血、皮疹等不良反应发生率方面比较,没有统计学差异(P>0.05);随访2年期间,第1年两组生存率无统计学差异(P>0.05),第2年,观察组生存率明显高于对照组(P<0.05).结论 青黄散联合化疗对AML具有较好的治疗效果,能显著抑制白细胞增殖,提高患者2年生存率,对正常血液功能影响小,未增加不良反应,值得临床推广使用.

    作者:孟咸中;缪文雄 刊期: 2016年第12期

  • 辛伐他汀与洛伐他汀对老年血脂异常患者的疗效比较

    目的 探讨辛伐他汀和洛伐他汀对老年血脂异常患者的临床疗效.方法 选取120例老年血脂异常患者,按入院时间分为两组,辛伐他汀组(62例)口服辛伐他汀片治疗,洛伐他汀组(58例)口服洛伐他汀片治疗,均持续服药8w.观察并记录两组治疗前后血脂变化、疗效、药品支出及随访2个月期间不良反应情况.结果 治疗后两组TC、TG、LDL-C值均降低,HDL-C值升高(P<0.05),且辛伐他汀组TC、TG、LDL-C值低于洛伐他汀组(P<0.05),但两组HDL-C值没有统计学差异(P>0.05).治疗后辛伐他汀组总有效率明显高于洛伐他汀组(P<0.05),辛伐他汀组比洛伐他汀组在药品费用上节约26.88元/例.随访2个月期间,两组不良反应率比较,差异没有统计学意义(P>0.05).结论 辛伐他汀对老年血脂异常患者具有较好的疗效,且价格低廉,值得临床推广使用.

    作者:刘晓萍;郭晓贤 刊期: 2016年第12期

  • 以患者为中心交接班流程标准化的实施与效果

    护士交接班是护理工作的核心内容之一[1].外科肝胆胰中心的患者病种多、病情重且变化快,床位周转快、护理专科性强,原有交接班模式存在交接不完整、与患者有效沟通少等问题,而交接班质量好坏将直接影响科室医疗护理安全.因此,为使临床护理交接班具有计划性、预见性、针对性和专科性,保证护理交接班的连续性,提高临床护理工作质量,为患者提供责任制整体优质护理服务[2],南京军区总医院普通外科研究所肝胆胰中心于2015年8月将“护士交接班流程标准化”应用于日常护理交接班中,取得良好效果,现将实施情况和效果报告如下.

    作者:谢业花;薛阳阳;吕玲;曹媛媛;杨秀芳;彭南海 刊期: 2016年第12期

  • CHM及PHM病理组织中p57kiP2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达差异

    目的 探讨完全性葡萄胎(CHM)和部分性葡萄胎(PHM)病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达差异.方法 对医院妇科收治63例葡萄胎患者进行回顾性分析,其中CHM组患者33例,PHM组30例,采取免疫组织化学染色法检测病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达,并与31例正常妊娠妇女做对比,.结果 CHM组和PHM组的p57kip2、p53、CD117及EGFR阳性表达率分别为(3.03%、93.94%、87.88%、12.12%)和(83.33%、36.67%、63.33%、36.67%);CD34分数分别为(12.23±2.27)%、(14.45±2.42)%,CHM组与PHM组差异有统计学意义(P<0.05),CHM组与正常组差异有统计学意义(P<0.05),PHM组与正常组无统计学差异(P>0.05).结论 以免疫组化法检测葡萄胎病理组织中p57kip2、CD34、p53、CD117及EGFR的表达水平,通过其表达水平高低程度,可有效鉴别CHM与PHM.

    作者:梁尚华 刊期: 2016年第12期

  • 血痛定喷雾剂的制备及体外凝血作用的研究

    目的 制备中药血痛定喷雾剂,并考察其对体外凝血指标的影响.方法 通过高分子材料PCEC合成、制备可同时传输疏水性(独一味、祖师麻)和亲水性药物(三七)的高效透皮给药的中药外用喷雾剂——血痛定喷雾剂.结果 制备的血痛定喷雾剂纳米粒呈圆形颗粒状分布,峰形单一,平均粒径32.86 nm,带负电荷,电位-1.79 mV.随着喷雾剂浓度的增加,体外凝血酶时间、部分激活的凝血酶时间降低,凝血酶原时间呈不规律性变化,纤维蛋白原呈先递减后递增的趋势.结论 成功制备血痛定喷雾剂,明确其对体外凝血指标的止血作用.

    作者:侯君;郑德志;李聃丹;于波涛;呼永河 刊期: 2016年第12期

  • 自体心包片在心脏血管直视手术中的应用

    目的 探讨心包补片在心脏、大血管直视手术中的应用价值.方法 收集医院1999年3月~2015年8月应用新鲜自体心包片作为修补材料完成的体外循环下心脏、大血管直视手术患者1757例的病例资料,其中室间隔缺损910例,房间隔缺损680例,法洛四联症117例,心房黏液瘤18例,胸主动脉瘤32例,对手术治疗结果进行回顾性分析.结果 平均主动脉阻断时间(110.10±37.96)min,平均体外循环时间(122.46±66.01)min.术后10~60 d死亡46例,病死率4.1%.死亡原因:低心排血量综合征24例,感染心内膜炎9例,呼吸衰竭9例,深低温停循环致术后肾衰4例.死亡病例与应用自体心包材料无关.其他1711例治愈出院,总手术成功率97.4%.结论 自体心包补片在心脏、大血管直视手术中的应用安全有效,成功率高,患者预后较好.

    作者:石云;张利;杨黎;罗国军;蔡文科;陈瑜;陈小波;杨宝升;于杰 刊期: 2016年第12期

  • 心梗介入术中突发室颤抢救时医护技配合流程的规范

    随着影像医疗技术的迅速发展和人们生活水平的逐渐提高,放射介入性诊疗技术越来越广泛地应用于临床.介入诊断治疗创伤小、恢复快,容易被患者接受[”.心梗患者介入手术中突发室颤是严重的并发症[2].为完善介入手术室突发事件的应急处理流程,提高术中病情变化的抢救能力,使介入手术室应急抢救中医护技的配合工作做到准、快、有序,我院于2013年9月对心梗患者介入手术中突发室颤抢救时医护技配合流程进行图谱设计.按介入室工作场景及人员进行排序,制作图谱,规范优化流程,组织医护技人员定期进行情景演练及强化训练.

    作者:欧阳湘;李嘉家;何桂凤 刊期: 2016年第12期

  • 干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像

    目的 研究用化学发光成像的方法观察脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后的情况,代替活体成像仪的可行性.方法 用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换.将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物.结果 细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱.树鼩皮下也观察到发光细胞.结论 CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布.

    作者:阮光萍;刘菊芬;李自安;王金祥;吕燕波;庞荣清;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • 树鼩急性放射损伤模型的建立

    目的 建立树鼩急性放射损伤模型.方法 将树鼩32只随机分为对照组(16只)和照射组(16只),照射组给予X射线全身一次性4 Gy照射.分别在照射后7、14、21和28 d,检测两组血象、血生化指标,并于照射后第2w,处死树鼩做病理检查.结果 照射组经4 Gy射线照射后,总死亡率为50%,对照组无树鼩死亡;照射后照射组白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM)先降低后升高;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)与对照组相比先降低后升高,之后又降低;血清尿素(BUN)、肌酐(CREA)含量与对照组相比先升高后降低,之后又升高.照射组肺、肝、肾、胃、脾及小肠等重要脏器病理改变明显.结论 成功地建立了树鼩急性放射损伤模型.

    作者:王强;王永刚;马洪磊;李自安;杨建勇;朱慧;朱向情;何洁;潘兴华 刊期: 2016年第12期

  • 地高辛联合比索洛尔治疗COPD合并心衰的效果及安全性分析

    目的 探析地高辛联合比索洛尔治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并心力衰竭(HF)的效果及安全性.方法 选择医院收治的COPD合并HF患者86例,随机分为观察组(45例)与对照组(41例).对照组应用地高辛联合卡维地洛片治疗,观察组应用地高辛片联合富马酸比索洛尔片治疗,比较两组治疗前后肺功能(FEV1、FVC、FEVJFVC)、心功能(心率、6 min步行距离)、生活质量(SGRQ问卷评估)及不良反应发生率.结果 治疗前两组肺功能、心功能和生活质量评分均无统计学差异(P>0.05);治疗后两组肺功能和6 min步行距离均升高,心率和生活质量评分均降低(P<0.05),而观察组的改善幅度均大于对照组(P<0.05).观察组不良反应发生率为11.1%,对照组为17.0%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 比索洛尔联合地高辛治疗COPD合并HF,可显著改善患者心肺功能,提高生活质量,安全性较高,为理想治疗方案.

    作者:金超英 刊期: 2016年第12期

西南国防医药杂志

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主管:成都军区联勤部卫生部

主办:成都军区医学科学技术委员会