任芙蓉;刘长利;吕秋霜;李慧;张评;高东英;高国静;马国栋;赵海燕;庄辉
经历了传染性非典型肺炎(又称严重急性呼吸综合征, SARS)的疫情之后,人们再次感受了微生物的威力和感染性疾病的凶险.SARS改变了医院的很多工作模式或制度,如建立发热门诊、让发热的初诊患者戴口罩、医护人员穿戴防护衣和护目镜等[1].的确,许多SARS疫情与医院感染密切相关.通过采用严格的医院感染控制措施,终使疫情得以控制.
作者:胡必杰 刊期: 2004年第09期
王鸿利教授是我国著名的实验诊断学和血液学专家,是我国检验医学教育的奠基人之一,也是上海第二医科大学检验医学专业的创始人之一.现任上海第二医科大学附属瑞金医院终身教授、主任医师、博士研究生导师.
作者: 刊期: 2004年第09期
目的探讨肿瘤坏死因子-a(TNF-a)诱导Graves病甲状腺细胞凋亡与相关蛋白表达在Graves病(GD)发病关系中的意义.方法采用免疫组织化学S-P方法检测50例Graves病患者TNF-a,并检测对照组对Fas表达的影响.采用原代细胞培养方法进行细胞培养,细胞培养液中的sFas含量采用ELISA法检测.Fas/sFas mRNA检测采用半定量RT-PCR法. 结果含有TNF-a GD组细胞凋亡率为92.6%,显著高于对照组的凋亡率(36.0%) (P<0.01).其含有TNF-a GD组甲状腺细胞sFas、Fas/sFas mRNA含量与对照组比较差异有显著意义(P<0.01). 结论 TNF-a诱导Graves病甲状腺细胞凋亡及凋亡相关蛋白sFas、Fas/sFas mRNA有一定水平的表达,这些改变可能是TNF-a破坏甲状腺细胞的重要机制之一.
作者:何凤屏;冼苏;陆云飞;尹瑞兴;陈青云 刊期: 2004年第09期
聚合酶链反应(PCR)具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点.但也常因标本受PCR扩增产物污染而产生假阳性结果.因此,控制外源性DNA污染已成为各实验室非常关注的问题.近年来,人们采用了许多方法消毒处理不同的污染环境和污染物[1-5],但结果报导不一.为选择一种消除实验室DNA污染的佳方法,我们选用六种传统的消毒法进行对比研究.现将结果报告如下.
作者:刘军权;陈复兴;周忠海;曹苏梅 刊期: 2004年第09期
目的对红细胞(Red blood cell, RBC)与白细胞(White blood cell, WBC) 计数参考方法的结果进行比对,以保证结果的可靠性.方法按照国际血液学标准化委员会的要求,建立红细胞与白细胞计数的参考方法.使用Eightcheck-3WP和Cellcheck-400 为比对物质,同时在卫生部临床检验中心和日本参考实验室进行检测并将结果进行比对.结果红细胞计数结果的差别可控制于2%以下,白细胞计数结果的差别可控制于3.5%以下.结论红细胞与白细胞计数参考方法检测结果的可比性良好,该比对模式的建立保证了参考方法检测结果的准确性和可靠性.
作者:彭明婷;谷小林;陆红;申子瑜 刊期: 2004年第09期
目的建立献血者血液混合核酸检测方法, 调查北京现有检测体系下血液的残余风险度,评估核酸检测(NAT)的必要性和可行性.方法用世界卫生组织标准品对国产丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺陷病毒(HIV)荧光-聚合酶链反应核酸扩增检测试剂进行灵敏度、重复性和精密度试验;对2002年2~10月34 373份常规血清学检测(ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体)合格的献血者血样进行HCV RNA和HIV-1 RNA核酸扩增分析.采取24人份混合血样测定,超离心浓缩病毒,Roche核酸提取柱提取病毒核酸.结果扩增系统能100%检出50 IU/ml HCV及50 IU/ml HIV-1标准品核酸(n=16);常规血清学检测合格的献血者血液中,没有检出HCV或HIV NAT阳性.结论该核酸检测体系适用于献血者血液病毒筛查; 北京市血液的病毒安全性已有相当高的保障.为更准确地评估NAT检测项目的可行性和必要性,检测标本量尚待增加.
作者:任芙蓉;刘长利;吕秋霜;李慧;张评;高东英;高国静;马国栋;赵海燕;庄辉 刊期: 2004年第09期
目的研究分析我国南方汉族人脊髓小脑性共济失调(SCA)不同基因亚型的分布状况.方法对临床诊断为SCA的36个家系43例患者和散发38例患者,采用聚合酶链反应(PCR)对SCA病的三核苷酸重复(TNR)片段进行扩增,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像分析软件计算其长度,推算所有正常和异常扩增等位基因内TNR重复次数.结果我国南方汉族人群的SCA患者中SCA3是常见的类型,占42.0%,而SCA2、SCA1、SCA7、SCA6和SCA12型分别为7.4%、4.9%、3.7%、2.5%和1.2%,未检出SCA8、SCA10、SCA17、DRPLA和FRDA亚型.结论在家族性和散发性SCA患者中,SCA3为常见类型,PCR检测可确立大部分患者的基因亚型.
作者:谢秋幼;梁秀龄;李洵桦 刊期: 2004年第09期
床旁分析(point-of-care testing, POCT)是指在患者身旁所进行的实时医学检验.POCT是一类极具潜力的检测技术,可提高效率、降低成本,具有缩短检验周期(TAT)、需样量少、操作简单、使用方便等优点.同时,其结果和传统或参考方法所得结果具有可比性,并在临床可接受范围内.
作者:彭黎明;颜存粮 刊期: 2004年第09期
目的研究硝酸甘油(GTN)对肿瘤细胞生长繁殖的影响及机制.方法以人宫颈癌细胞系(Hela细胞)为研究对象,用四甲基偶氮唑(MTT)法检测Hela细胞的活性;流式细胞仪检测bcl-2蛋白,细胞周期,细胞凋亡指数;比色法检测亚硝酸盐、还原型谷胱甘肽(GSH).结果 GTN代谢产生一氧化氮(NO)及亚硝酸盐,MTT试验显示Hela细胞活性明显降低;经0.175 mmol/L GTN处理后,Hela内GSH由(43.97±2.80) nmol/106降至(36.46±2.32) nmol/106细胞,细胞培养体系GSH由(71.68 ± 3.02) μmmol/L降至(58.38±0.81) μmol/L;bcl-2蛋白表达下降,细胞凋亡指数由1.47±0.03提高到2.72±0.089,使Hela细胞G2~M期所占比例由3.47±1.09增加至12.71±1.45,S期所占比例由45.955±4.66降至34.867±3.92.结论 GTN可抑制肿瘤细胞的生长繁殖,其机制与GTN代谢消耗GSH和产生NO有关.
作者:张阳东;田亚平;董矜;汪德清 刊期: 2004年第09期
2002年5月,我们从一例脑脓肿患者的脓液标本中分离出SR菌落变异的嗜沫嗜血杆菌.患者,男,40岁,2002年4月30日入院,该患者在入院前一周无明显诱因出现右侧肢体活动不灵,于入院前两天开始出现头痛,伴头晕、恶心、呕吐,无复视,无耳聋.
作者:宿丽娟;冯刚;杨静波;蔡秀荣 刊期: 2004年第09期
乳腺癌的发生、发展和治疗具有很强的个体特异性.寡核苷酸芯片是一种高通量基因检测技术[1].目前,该项技术已被用于炎症[2]和细胞分化[3]相关基因等研究领域.本研究制备了288条人类肿瘤相关基因的寡核苷酸芯片,并对乳腺癌组织和正常乳腺黏膜组织所表达的基因进行筛选,同时进行差异表达基因生物信息学分析研究,以揭示这些差异基因与乳腺癌发生、分化、浸润及淋巴结转移之间的内在联系.
作者:徐笑红;孟旭莉;王升启 刊期: 2004年第09期
临床检验是将患者的血液、体液、分泌物等标本,通过目视观察、物理、化学分析、仪器等手段进行检测.近年来,随着基础医学、临床医学的发展,检验医学发展迅速,临床检验科实现了自动化、智能化、试剂多样化、检验方法标准化及床边检验快速化,这种现代化在给临床实验室诊断带来准确、高效的同时,也给临床检验科带来了亟待解决的问题.
作者:于翠英 刊期: 2004年第09期
乙型肝炎病毒(HBV)基因组表面抗原(HBsAg)编码区(S区)由S、前S1和前S2基因组成,分别编码S、前S1和前S2三种主要蛋白,从而共同构成HBV外壳蛋白[1].作为一项新的HBV血清学检测指标,乙型肝炎病毒前S1抗原(HBV preS1-Ag)的检测已被普遍应用于乙型肝炎的实验室诊断和疗效观察.我们对310份慢性乙型肝炎患者血清进行了HBV preS1-Ag、HBV-M、HBV-DNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)联合检测,进而分析探讨这些指标之间的关系.
作者:夏邦世;沈忠海;马红松;朱金明 刊期: 2004年第09期
细菌感染的有效治疗要求快速和准确的诊断.但是,目前对临床病原菌的检测,还是应用常规血培养的方法,一般需要4~7 d时间[1],延误了临床治疗.使用基因芯片可以大大缩短诊断时间,基因芯片是在PCR扩增基础上,利用多种探针对败血症的致病菌种类进行检测.
作者:刘健;赵雨杰;秦海明;侯伟健;孙中芙;陶凯 刊期: 2004年第09期
目的探索甲状腺功能紊乱者适实验室诊断指标.方法采用化学发光免疫技术(CLIA)测定不同人群中三碘甲状腺原氨酸(TT3)、甲状腺素(TT4)、促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)浓度,比较受试者工作特征曲线(ROC)下面积及频数分布散点图分离效果.结果甲减诊断 ROC值TSH: 0.94±0.02, FT3:0.70±0.07,FT4:0.92±0.04,FT4/TSH比值:0.95±0.02;甲亢诊断ROC值分别为0.86±0.05, 0.82±0.03, 0.83±0.06, 0.90±0.05.从频数分布散点图显示,FT4/TSH的分离效率甲减93%,甲亢85%.结论 CLIA法测定FT4/TSH比值显示出佳的性能与分离效果,可提高甲状腺功能的诊断效率,FT4/TSH比值应被推荐为甲状腺功能评价的首选指标.
作者:王志刚;王君耀;贾鸣;石亚国 刊期: 2004年第09期
细菌鞭毛纤细,直径只有10~30 nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态.由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述.
作者:谷海瀛 刊期: 2004年第09期
目的采用分子生物学技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌(CNS).方法用16S~23SrDNA内转录间隔区序列PCR(ITS-PCR)技术,对6株质控菌和171株已通过AutoScan-4微生物分析仪鉴定过的CNS临床分离株进行分型鉴定.结果质控菌株及经API Staph系统确证的11种CNS得到各自不同的ITS-PCR电泳类型,建立了该技术在本实验室的CNS初级数据库,包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌、华纳葡萄球菌、头部葡萄球菌、孔氏葡萄球菌解脲亚种、松鼠葡萄球菌、耳葡萄球菌和模仿葡萄球菌.只有松鼠葡萄球菌表现了多态性.该ITS-PCR数据库对所研究的临床株的识别率为93.57%(160/171),准确率达93.75%(150/160).API Staph系统证明,ITS-PCR法鉴定结果较为准确,AutoScan-4微生物分析仪检测CNS至少有9.36%(16/171)是不确切的.结论 ITS-PCR证明是一项有价值,对CNS可选用的简便、快速、可靠,廉价的分子生物学鉴定技术.
作者:李奕;沈叙庄;底建辉;甄景慧;张美和;杨永弘 刊期: 2004年第09期
目的了解中国产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布.方法收集北京、浙江、新疆及郑州等共400株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用接合试验,聚合酶链反应,克隆测序等方法明确ESBLs基因型. 结果 400株细菌中356株细菌ESBLs的基因型明确.其中328株细菌产1种ESBLs,主要为CTX-M型,包括CTX-M-14型ESBLs占52.25%,CTX-M-3型占14.25%,CTX-M-24型占7.25%,CTX-M-22型占2%,CTX-M-28和CTX-M-9型分别占0.75%,CTX-M-13、CTX-M-27和CTX-M-29型各占0.25%;其次为SHV型,其中SHV-12占2.5%(10/400),SHV-5占1.00%,SHV-2占0.5%.28株细菌同时携带2种或3种ESBLs,占7.00%(28/400),其中以同时产CTX-M-14和CTX-M-3常见.结论中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX-M-14型为主;其次为CTX-M-3型,部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs.
作者:季淑娟;顾怡明;谭文涛;王丹丹;冯羡菊;周志慧;俞云松;陈亚岗;李兰娟 刊期: 2004年第09期
传染性非典型肺炎又称严重急性呼吸综合征(SARS),是一种新发现的传染病[1-3], 由SARS 冠状病毒(CoV)引起.目前尚存在感染者体内是否产生IgG、IgM抗体,能持续多久?是否为保护性抗体等一系列亟待解决的问题.本研究利用欧蒙(德国)试验免疫制品有限公司提供的间接免疫荧光法,检测抗SARS-CoV 的IgG、 IgM抗体试剂盒,测定SARS患者血清(浆)中IgG、 IgM抗体.
作者:刘振元;徐作军;危天倪;是若春;秦伟;刘志肖;佟大伟 刊期: 2004年第09期
2002年11月16日我国广东省佛山市发现第一例传染性非典型肺炎(严重急性呼吸综合征,SARS)患者,其传播途径主要通过近距离空气飞沫和密切接触传播,传染性极强 [1,2].本研究采用军事医学科学院微生物流行病研究所从一例北京SARS患者的肺组织中分离的新型冠状病毒感染Vero E6细胞制成抗原片,对2月份收集的广州地区52例SARS患者血清进行了间接免疫荧光检测(IFA)及分析,以期为SARS的实验室诊断提供参考.
作者:李林海;石玉玲;徐德兴;王露霞;段朝晖;司炳银;张雨;祝庆余 刊期: 2004年第09期