刘方军;刘智惠
目的:研究人B7-2瘤苗和负载了肿瘤细胞冻融抗原的DC瘤苗体外联合诱导抗食管癌的免疫作用.方法:应用脂质体转染技术,将融合基因表达载体pEGFP-N3-B7-2转染人食管癌细胞株EC9706.采用密度梯度离心法从脐血中分离单个核细胞(MNC)后,获得单核细胞(Mo).在细胞因子作用下诱导分化,第3 d加入EC9706的冻融抗原,共培养4 d后获得负载肿瘤抗原的成熟树突状细胞(MDC).将致敏DC与从脐血中分离的T淋巴细胞共培养3 d,获得细胞毒T淋巴细胞(CTL);四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染的EC9706的细胞毒作用.结果:融合基因在食管癌细胞株EC9706的胞膜上定位表达.脐血来源的DC可负载并递呈肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,诱导肿瘤特异性CTL产生,对转染pEGFP-N3-B7-2的EC9706细胞有显著杀伤作用(F=21.672,P=0.000).结论:人B7-2瘤苗和DC瘤苗体外联合应用,诱导出明显的杀伤食管癌细胞的免疫效应.
作者:路静;赵军;宋谦;崔自由;赵国强;黄幼田;杨洪艳;赵继敏;董子明 刊期: 2005年第12期
人鼠嵌合肝动物模型的建立可为进一步研究病毒性、代谢性肝病的发病机制、治疗药物及疫苗开发提供新的技术手段,具有良好的前景与发展意义.本文综述了人鼠嵌合肝相关内容,包括该模型建立原理、移植细胞来源、建立途径与方法,介绍了近期研究进展,探讨了如何进一步提高移植细胞的增殖能力以延长生存时间这一重要课题.
作者:林沪;毛青;王宇明 刊期: 2005年第12期
目的:观察拉米夫定(lamivudine,LAM)耐药的慢性乙型肝炎患者继续使用拉米夫定治疗的临床疗效.方法:定期观察89例出现拉米夫定耐药继续使用拉米夫定治疗或停用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者临床结局,观察项目包括临床症状、ALT、乙型肝炎病毒血清学标志、HBV DNA.结果:43例继续用药患者,24 wk和48 wk病毒学应答为16例(37.2%,P<0.05)和15例(34.9%,P<0.05);生化学应答为17例(39.5%,P<0.05)和14例(32.6%,P<0.05);HBeAg转阴分别为8例(18.6%,P>0.05)和5例(11.6%,P>0.05);HBeAg血清转换分别为5例(11.6%,P>0.05)和5例(11.6%,P>0.05).46例停用拉米夫定患者,24wk和48wk病毒学应答分别为8例(17.4%)和7例(15.2%);生化学应答为28例(60.9%)和32例(69.6%);HBeAg转阴分别为4例(8.7%)和5例(10.9%);HBeAg血清转换分别为3例(6.5%)和4例(8.7%).结论:拉米夫定对发生拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者仍有部分疗效,可以继续使用;发生拉米夫定耐药后继续或停用拉米夫定,都是相对安全的.
作者:陆德云;赵连三;王甦 刊期: 2005年第12期
目的:观察不同佐剂对不同剂量HCV DNA疫苗效果的影响.方法:雌性Balb/c小鼠分别用脂质体DDAB/EPC和氢氧化铝为佐剂的HCV DNA疫苗(由HCV结构基因、NS3和NS5b各50μg或100μg等量混合)免疫3次,ELISPOT法观察脾淋巴细胞受HCV核心、E2、E1/E2、NS3和NS5b蛋白刺激后细胞因子的产生.结果:DDAB/EPC组产生IFN-γ和IL-4较多,用核心、E2或E1/E2刺激,显著高于裸DNA和氢氧化铝组(P<0.05).以氢氧化铝为佐剂用每种DNA100μg剂量免疫的小鼠,在受抗原刺激后,除E2外,其脾淋巴细胞产生IL-4的能力显著高于相应裸DNA组(P<0.05).在多数情况下,接受每种DNA10μg剂量的小鼠产生IFN-γ和IL-4的能力显著高于接种每种50 μg者(P<0.05).与裸DNA组及DDAB/EPC组比较,氢氧化铝组小鼠淋巴细胞产生的IL-4多于IFN-γ.结论:DDAB/EPC对HCV DNA疫苗有很强的免疫佐剂效应,氢氧化铝是Th2佐剂,可将DNA疫苗Th1为主的免疫特性转换为以Th2为主,50μg的HCV DNA疫苗似不能诱导小鼠产生有效的免疫反应.
作者:金博;Richard Y.-H.Wang;程留芳;裘奇;史维国 刊期: 2005年第12期
目的:研究我国湖北汉族人CD14基因C-260T多态性的分布及CD14基因C-260T位点的突变是否与溃疡性结肠炎(UC)相关.方法:采用PCR-RFLP方法检测114例UC患者以及160例正常对照者CD14-260基因型及等位基因频率.结果:对上述274份DNA标本的基因型分析,发现CD14-260基因型在正常对照组与UC组间无显著性差异.此基因多态性与UC无相关性.结论:CD14基因C-260T多态性与中国湖北汉族UC无明显相关性.CD14基因不是溃疡性结肠炎的易感基因.
作者:郭秋莎;夏冰 刊期: 2005年第12期
目的:观察脾部分栓塞术患者外周血常规、脾脏大小、上消化道出血次数及门脉血流量变化,以其评价脾部分栓塞术治疗肝硬化门脉高压的疗效.方法:应用Seldinger法经皮股动脉穿刺插管至脾动脉,用50 g/L鱼肝油酸钠,40%碘油乳剂(二者体积比为1:1)加明胶海绵颗粒混合制剂,对33例肝硬化门脉高压脾功能亢进患者行脾部分栓塞术,术后1、2、3 wk、1、2、3、4、5、6 mo查血常规,术后1、3、6 mo B超检查脾脏体积、静脉直径、平均血流速度,并对其中24例术后上消化道出血次数进行观察.结果:患者红、白细胞及血小板于脾部分栓塞后1、3、6 mo较治疗前有明显升高,经统计学配对t检验处理有非常显著性差异(P<0.001);脾部分栓塞后3 wk以内脾脏有不同程度增大,3 wk以后逐渐缩小,6 mo左右稳定在正常值范围内或仅脾门留有正常一小块脾组织.患者经脾部分栓塞后上消化道出血次数明显减少,经术后观察1 a以上者24例,发生上消化道出血的次数(0.14±0.07)例,经统计学配对t检验处理有非常显著性差异(P<0.001).栓塞后门脉血流量明显下降,较栓塞前有非常显著性差异(P<0.001).33例患者栓塞后11例静脉曲张消失,22例较前明显减轻.脾部分栓塞后33例患者均有脾栓塞后综合征,但无脾脓肿及脾破裂发生.结论:脾部分栓塞术明显改善了肝硬化门脉高压症状,是治疗肝硬化脾功能亢进及预防上消化道出血的有效方法.
作者:刘方军;刘智惠 刊期: 2005年第12期
目的:探讨柴胡枳实水提物促胃肠动力作用.方法:将昆明小鼠随机分成6组,每组15只,分别为A(蒸馏水)组、B(阿托品)组、D(吗啡)组、F(水提取物)组、C(阿托品+水提取物)、E(吗啡+水提取物)组,A组、B组、D组灌服蒸馏水0.3 mL/d,C组、E组、F组灌服柴胡枳实水提物0.3 mL/d,连续喂养3 d,第4 d灌服上述药物,同时B组、C组腹腔注射阿托品0.0003 g/kg、E组、D组腹腔注射盐酸吗啡0.0003 g/kg,采用葡聚糖蓝2000观察胃内色素残留率及平均小肠推进比.结果:分别比较B组与A组、D组与A组、D组与E组、E组与F组、C组与F组的相对胃内色素残留率及平均小肠推进比均具有显著性差异(123.20±29.26vs100.00±28.28,48.53±8.70 vs 56.02±8.33;126.30±31.86vs100.00±28.28,38.58±5.29vs56.02±8.33;126.30±31.86vs88.56±21.22,38.58±5.29vs44.83±8.13;88.56±21.22vs49.75±17.50,44.83±8.13vs70.84±8.03;102.41±28.72vs49.75±17.50,51.68±8.92 vs70.84±8.03;P<0.05),而B组与C组相比无显著性差异(123.20±29.26vs102.41±28.72,48.53±8.70vs51.68±8.92,P>0.05).结论:柴胡枳实水提取物不能拮抗阿托品的作用,能够拮抗吗啡所致的胃肠抑制运动.
作者:孙军;张宁;李岩 刊期: 2005年第12期
目的:研究PEG10在肝癌组织中表达的特异性,为其作为一个潜在的肝癌基因治疗的新的分子靶点提供实验依据.方法:从来自不同器官组织的肿瘤细胞系(人肝癌细胞株HepG2、人胃癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3、人黑色素瘤细胞株A375、人T淋巴瘤细胞株Jurkat)、正常人胎肝细胞株L02、32例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、10例良性肝病患者肝组织、10例正常人外周血单个核细胞中抽提总RNA,经RT逆转录合成cDNA,再以PCR方法检测PEG10的表达.同时,肝癌组织和癌旁组织标本经RT-PCR检测AFP的表达.结果:经RT-PCR扩增的PEG10基因片段为455 bp,AFP基因的扩增片段为140 bp,与原设计一致;PEG10 在人肝癌细胞株HepG2中明显表达,人胃癌细胞株SGK7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3中弱表达,而正常人胚胎肝细胞株LO2和其他肿瘤细胞株(人T淋巴细胞瘤、人黑色素瘤)中表达均为阴性.在32例肝癌及相应癌旁组织中,PEG10的表达阳性率分别为78.1%和0%;而AFP基因的阳性率分别为93.8%和59.4%.经McNemar检验,显示PEG10基因在肝癌组织中表达的敏感性与AFP表达敏感性之间无显著性差异(x20.01,1=1.78,P>0.05);而癌旁组织中PEG10表达率(0/32)明显低于AFP表达率(19/32)(x20.001,1=17.05,P<0.01).另外10例良性肝病患者(肝硬化4例,自身免疫性肝病2例,肝血管瘤2例,丙型肝炎1例,血色素病1例)肝组织标本及正常人的外周血细胞进行PEG10基因检测,结果均为阴性.结论:PEG10的表达不但具有比AFP更高的肝癌组织特异性,而且具有相对器官组织特异性.本实验为PEG10作为一个新的肝癌标志物和基因治疗的分子靶点提供了实验依据.
作者:常莹;陶璐薇;陈孝平;周秀敏;宋宇虎;黄锦;张琼;林菊生 刊期: 2005年第12期
目的:探讨益肝康及其拆方丹参小复方(丹参、黄芪、归尾)对肝星状细胞PDGF与受体表达的影响.方法:分别制备益肝康及丹参小复方纯化浸膏、正常大鼠及肝纤维化大鼠药物血清,温育体外培养的HSCRT-PCR和Western blot技术检测PDGF-BB mRNA及蛋白表达,RT-PCR和流式细胞技术检测PDGFR-βmRNA及蛋白表达.结果:益肝康及丹参小复方纯化浸膏使PDGF-BB蛋白表达分别下调了78.79%、56.77%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了67.13%、43.59%(P<0.01),使(其)PDGFR-β蛋白表达分别下调了11.61%、6.7%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了54.85%、30.51%(P<0.01);正常大鼠益肝康及丹参小复方药物血清使PDGF-BB蛋白表达分别下调了68.05%、49.95%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了55.87%、38.66%(P<0.01),使PDGFR-β蛋白表达分别下调了10.98%、6.48%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了39.67%、21.38%(P<0.01);肝纤维化大鼠益肝康及丹参小复方药物血清使PDGF-BB蛋白表达分别下调了81.93%、67.31%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了72.68%、55.49%(P<0.01),使PDGFR-β蛋白表达分别下调了17.43%、11.15%(P<0.01),使其mRNA表达分别下调了60.46%、46.47%(P<0.01),全方作用优于拆方(P<0.01),肝纤维化大鼠药物血清作用优于正常大鼠药物血清(P<0.01).结论:益肝康及丹参小复方可显著抑制PDGF与PDGFR-β基因和蛋白表达,此可能是该方抗肝纤维化的主要机制之一,且全方作用优于拆方.
作者:姚希贤;房红梅;王军民 刊期: 2005年第12期
病毒结合到宿主细胞表面受体后,启动了病毒融合蛋白的一系列构象变化,暴露出融合肽,使病毒包膜和细胞膜融合.膜融合使病毒蛋白及病毒RNA基因组释放到宿主细胞内而感染宿主.针对包膜病毒进入细胞的分子机制设计抗病毒药物和疫苗,为防治疾病发生开辟了新的思路.
作者:卞传秀;杨建勇;廖国阳;李卫东 刊期: 2005年第12期
目的:观察以胃舒散为主的三联疗法(胃舒散、呋喃唑酮和克拉霉素)治疗幽门螺杆菌(H pylon)阳性胃炎的临床效果及其对病理组织学的影响.方法:对80例H pylori阳性胃炎患者随机分为二组.治疗组:(n=47)服用胃舒散2.0 g,呋喃唑酮0.1 g,各3次/d,克拉仙0.25 g,2次/d.1 wk后再继服胃舒散5 wk.对照组:(n=33)服用三九胃泰1包,2次/d,共6 wk.治疗前及疗程结束后进行临床症状评分、H pylori检测.1 a后进行内镜检查以了解组织学改变.H pylori检测采用Warthin-Starry银染色法、14C-尿素呼气试验或快速尿素酶试验,2项阳性定为H pylori感染,2项阴性为H pylori根除.结果:6 wk治疗结束后,治疗组临床症状总有效率89.3%,H pylori根除率为87.2%;对照组分别为69.7%和0(P<0.01).治疗组慢性活动性炎症明显减轻,胃萎缩程度及肠上皮化生较治疗前好转(P<0.05).结论:以胃舒散为主的三联疗法具有较好根除H pylori的效果,有效减轻胃黏膜活动性炎症,改善萎缩性胃炎的组织学状态并阻止胃癌前病变进展.
作者:郑宗茂;吴灵飞;王炳周;李国平 刊期: 2005年第12期
目的:探讨胃黏液腺癌组织中端粒酶活化催化亚单位(hTERT)与E-cadhenn(E-cad),catenin-β(β-cat)的表达意义.方法:采用原位杂交和免疫组织化学技术,检测92例胃黏液腺癌组织中hTERT和E-cad,β-cat的表达.结果:hTERT在胃黏液腺癌组织中细胞外黏液阴性,细胞内黏液阳性;单纯黏液癌、腺管乳头结构黏液癌、印戒细胞黏液癌和混合细胞黏液癌表达分别为88.9%,85.4%,100.0%和95.8%,显示恶性程度越高其表达率越高,但差异无显著性(P>0.05).E-cad在单纯黏液癌和腺管乳头结构黏液癌的表达率为100.0%,而印戒细胞黏液癌和混合细胞黏液癌分别为38.9%和62.5%,显示恶性程度高表达率降低,差异有显著性(P<0.01).β--cat在胃含黏液癌中显示出恶性程度高其表达强度明显减弱.结论:hTERT,E-cad和β-cat阳性表达水平与胃含黏液腺癌组织病理学分型显著相关,对临床判断预后具有重要意义.
作者:王仰坤;蒙念龙;陈松涛;郝艳;郭艳博;张轶 刊期: 2005年第12期
目的:观察血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗对预防大肠癌术后肝转移的作用.方法:RT-PCR克隆血管抑素基因,建立重组腺病毒载体.建立人结肠癌LoVo肝转移种植的模型,给予血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗.观察其对大肠癌细胞肝转移的影响.结果:血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗治疗组肝转移发生率明显低于其他各组(P<0.05),肝转移瘤数少于其他各组(P<0.05),荷瘤生存时间长,治疗组肿瘤组织中血管抑素基因表达为阳性,MVD明显低于其他各组.结论:血管抑素的基因治疗与传统的腹腔化疗联合应用,对预防裸鼠人LoVo结肠癌细胞肝转移有一定的作用.
作者:杜卫东;袁祖荣;沈达明;乔伟伟;黄春锦;唐健雄;程爱群;张赣生;王一倩;于晓峰;竺越 刊期: 2005年第12期
国外的研究表明,贾第虫虽然是一种较低级的真核生物,但确有与其他生物相似的高度发达的、复杂的细胞骨架系统.贾第虫的细胞骨架与虫体的运动、增殖及致病密切相关.因此,将贾第虫的骨架成分作为新药物开发的靶点,筛选对细胞骨架有损伤作用的药物,破坏贾第虫的细胞骨架使其丧失吸附功能,失去致病能力是值得探寻的新途径.
作者:田喜凤;卢思奇 刊期: 2005年第12期
目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)并发急性肾功能衰竭(ARF)的发病因素和防治措施.方法:回顾分析我院2003年180例SAP病例中44例并发ARF和同期未发生肾功能衰竭的136例患者的临床资料.结果:ARF多发生在起病10 d内,90.27%在3 d内发生;肾衰组48 h体液隔绝量大于6 L的发生率、高脂血症发生率及血小板减少发生率高于非肾衰竭组(分别为40.9%vs 22.8%;40.9% vs 19.9%;65.9% vs 39.7%P=0.03<0.05),三酰甘油和乳酸脱氢酶的水平高于非肾衰竭组(7.1±6.2 mmol/L vs 3.9±4.6mmol/L;1 221.2±1 04.4IU/Lvs611.9±496.5IU/L P<0.05);肾衰组CT评分、APACHEⅡ评分也高于非肾衰竭组(14.7±5.2 vs 9.8±3.8;7.5±2.5 vs 6.4±2.2 P=0.01<0.05);前者并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、休克、脑病、感染者多于后者(分别为81.8%vs 63.2%;47.7%vs 25%;36.4 vs 12.5%P=0.02<0.05),死亡率明显高于后者(45.5%vs8.8%P=0.000<0.05).结论:SAP合并ARF是多因素作用的结果,与血流动力学紊乱、胰酶释放、炎症递质、细胞因子以及SAP伴发的其他脏器的功能损伤有密切关系.早期诊治SAP是预防其并发ARF的关键.
作者:张鸿彦;夏庆 刊期: 2005年第12期
目的:研究Survivin ASODN联合三氧化二砷(As2O3)对食管鳞癌细胞系EC109凋亡的影响.方法:设计合成特异性Survivin反义寡核苷酸(ASODN).细胞分成6组:空白对照组、空脂质体转染对照组、正义链转染对照组、160、200、240 nmol/L反义链转染组.以阳离子脂质体为载体转染至EC109细胞内,用Western blot法检测各组细胞Survivin蛋白表达情况;TUNEL法检测细胞凋亡情况;MTT法检测As2O3和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对转染前后细胞的生长抑制情况.结果:各浓度ASODN转染组癌细胞Survivin蛋白表达有不同程度减少,而各对照组细胞Survivin蛋白表达无明显变化.各ASODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(5.48±1.56,6.04±1.95,11.92±1.76 vs 1.52±0.73,P<0.05),以240 nmol/L转染组明显高于160和200 nmol/L组(11.92±1.76%vs5.48±1.56%,6.04±1.95%,P<0.05).240 nmol/L转染组中As2O3对肿瘤细胞生长抑制率明显高于5-Fu组(56.40±1.27%vs 43.49±0.83%,P<0.05).结论:Survivin ASODN转染食管鳞癌细胞能下调Survivin蛋白的表达,诱导食管鳞癌细胞凋亡,抑制细胞增值,增加食管鳞癌细胞对化疗药物As2O3的敏感性.
作者:赵晶;刘铁夫;董春燕;博挽澜 刊期: 2005年第12期
目的:分析细菌性肝脓肿合并糖尿病的病因、临床特点、诊治及转归.方法:采用回顾性调查,分析我院确诊的48例细菌性肝脓肿合并糖尿病的病因、所伴随的基础疾病、临床特征、诊治及转归.结果:细菌性肝脓肿合并糖尿病多见于男性,以右叶(70.8%)及多发(75.0%)为常见,临床表现并不典型,所有病例均运用有效抗生素控制炎症及用胰岛素控制血糖,本组19例(39.6%)及时行B超或CT引导下的穿刺抽脓或置管引流.本组2例(4.2%)死因为感染及多脏器功能衰竭.结论:细菌性肝脓肿合并糖尿病的临床表现并不典型,诊断较为困难,对糖尿病伴发热者应高度重视,控制血糖,及时治疗胆系感染是预防本病发生的重要措施.
作者:姜海琼;王兴鹏 刊期: 2005年第12期
目的:研究胆囊息肉样病变预测定性诊断对治疗的临床价值.方法:对胆囊息肉样病变采用B超检查进行多因素公式预测定性诊断,并分别采用中西医结合非手术与手术治疗.手术治疗161例和预测定性良性非手术治疗的67例,进行前瞻检验和远期随访.结果:判别公式D<2.5为恶性,D<0为良性,0<D<2.5为癌危息肉.前瞻和回顾性检验符合率91.2%和93.3%,无胆囊癌漏诊.对胆囊息肉定性准确性97.1%,特异性91.3%.定性为良性的中西医结合治疗有效率58%,远期随访未见恶变.术前定性选择治疗的生存质量和预后优于对照组(P<0.01).结论:判别公式用于对胆囊息肉样病变的预测定性诊断,有可操作性和较高准确性,用以选择治疗方法,可提高远期疗效和生存质量.
作者:杜运生;赵志华;史美媛;李晓青;秦玉霞;郭美锐;郭振武 刊期: 2005年第12期
目的:检测食管癌高发区河南省林州市食管鳞癌及相应癌旁正常上皮组织的脆性组氨酸三联体(fragile histidinetriad,FHIT)蛋白和mRNA表达情况,从而探讨FHIT与该地区食管癌发生发展的关系.方法:采用卵白素-生物素-辣根过氧化物酶复合物(ABC)免疫组织化学染色法检测了42对食管癌高发区河南省林州市手术标本的癌组织和癌旁组织中FHIT蛋白表达水平.采用反转录PCR方法检测了16对食管癌和癌旁正常组织中FHIT基因mRNA表达状况.结果:FHIT蛋白在食管癌组织中缺失表达(24/42,57.1%)或弱表达(18/42,42.9%),与癌旁正常上皮组织中FHIT蛋白情况(40/42,95.2%)差异显著(P<0.05).低分化癌组织中FHIT蛋白阴性表达率为(13/15,87%),分化癌组织阴性表达率为(11/27,41%),二者有显著性差异(P<0.05).癌组织FHIT mRNA表达阳性率(4/16,25%)显著低于癌旁组织(12/16,75%)(P<0.05).结论:FHIT基因可能在该地区食管癌的发生发展过程中起重要作用,是重要的抑癌蛋白,其表达减弱或缺失增加了食管癌的易感性.
作者:李吉学;李燕杰;秦艳茹;安继业;王启鸣;余炜伟;王立东 刊期: 2005年第12期
目的:探讨腺腔内坏死碎片(intraglandular necrotic debris,IND)在大肠黏膜活检诊断中的意义.方法:收集经纤维结肠镜取活检的大肠黏膜标本113例(327块组织)和手术标本29例,观察IND与非肿瘤性疾病、腺瘤和腺癌之间的关系. 结果:在非肿瘤性疾病组中IND的出现率为4%、腺瘤组为11%、腺癌组为51%.IND的数量在非肿瘤及腺瘤组中少于5个,在腺癌组中大多数在5个以上.结论:IND与大肠肿瘤性病变有关,特别是与腺癌有关,IND在大肠黏膜活检早期癌的诊断中有重要意义.
作者:金仁顺;张英哲;沈哲式;朴东明 刊期: 2005年第12期