学术投稿

离子强度对乙型脑炎病毒基因传感器检测系统的影响

徐清华;陈伟;王云霞;罗阳;丁毅;施建峰;曹亮;陈鸣;府伟灵

关键词:离子强度, 乙型脑炎病毒, 漏声表面波, 基因传感器, 相位
摘要:目的 探讨磷酸盐缓冲液(PBS)中Na+浓度值对乙型脑炎病毒(JEV)基因传感器检测系统的影响.方法 漏声表面波(LSAW)基因传感器表面固定终浓度为1.0μmol/L的乙型脑炎病毒探针,然后分别在pH 7.6的10 mmol/L PBS缓冲液(含Na+浓度值0.1~0.6 mol/L)中和终浓度为1.0 μmol/L的JEV靶序列杂交,分别记录相位变化及反应所需时间.结果 杂交反应引起的相位变化是先上升后趋于缓和的趋势,以0.3 mol/L Na+浓度为分界线;杂交平衡时间同相位变化一致,当PBS中Na+浓度为0.3 mol/L,杂交反应的平衡时间为33 min.结论 随着Na+浓度的升高,杂交反应引起的相位变化呈典型的饱和曲线趋势,PBS中Na+浓度0.3 mol/L,杂交反应平衡时间33 min,是LSAW-JEV基因传感器杂交的适反应条件.
中华医院感染学杂志相关文献
  • 脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌效果监控

    为确保医疗安全,减少医院感染的发生,按消毒技术法规操作,严把无菌物品质量关,对灭菌效果进行了物理、化学和生物监测,取得了良好的监控效果.

    作者:张琼 刊期: 2009年第14期

  • 爱护佳洗手液手部消毒的应用

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    作者:王金萍 刊期: 2009年第14期

  • 临床检验工作人员职业暴露的危险与防护

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    作者:胡冬梅 刊期: 2009年第14期

  • 免疫PCR检测HIV-1 p24抗原的初步评价

    目的 对免疫PCR HIV-1 p24抗原检测体系的检出限、特异性和重复性等指标进行初步评价.方法 用建立的免疫PCR体系检测p24抗原,讨论检测方法的特异性、检出限和重复性指标,将空白对照的非特异性扩增条带用荧光密度值(FI)定量,初步提出特异性扩增下限的判定方法.结果 将非特异性扩增荧光密度值的(+3s)作为特异性扩增信号的判定下限,免疫PCR检测p24抗原的检出限为0.1 ng/L.结论 检测方法的检测限、特异性与重复性能满足HIV-1 p24抗原检测的需要.

    作者:郑姬;府伟灵;蒋天伦 刊期: 2009年第14期

  • 2008年下呼吸道感染病原菌分布与耐药性分析

    目的 了解医院2008年痰培养阳性标本病原菌分布和耐药性规律.方法 采用MicroScan板条或API鉴定系统鉴定病原菌,用K-B法及VITEK2进行药敏试验,用WHONET5.4软件分析病原菌的耐药性.结果 2008年医院痰培养阳性标本主要分布在脑外科、重症监护病房、呼吸内科及儿科等;下呼吸道感染的主要病原菌前8位依次为铜绿假单胞菌(20.0%)、白色假丝酵母菌(18.0%)、鲍氏不动杆菌(10.7%)、金黄色葡萄球菌(6.5%)、肺炎克雷伯菌(6.0%)、阴沟肠杆菌(4.0%)、流感嗜血菌(3.8%)、嗜麦芽寡养单胞菌(3.5%);耐药性分析结果显示,未发现耐万古霉素葡萄球菌菌株,但对其他多种抗菌药物耐药;肠杆菌科细菌对美罗培南、亚胺培南和头孢哌酮较敏感;非发酵菌中,铜绿假单胞菌和嗜麦芽寡养单胞菌对大部分抗菌药物耐药,不动杆菌属对美罗培南、亚胺堵南、头孢哌酮和米诺环素较敏感.结论 呼吸道感染病原菌对多药耐药性较高,应引起重视,并合理选择抗菌药物.

    作者:潘虹;刘春江;黄庆;汪广杰;龚雅莉;府伟灵 刊期: 2009年第14期

  • 腔镜清洗及灭菌方法的实验研究

    目的 探讨腔镜清洗、灭菌的佳方法.方法 按照随机的原则将临床使用过的腔镜分为环氧乙烷灭菌人工清洗组、环氧乙烷灭菌机洗组、过氧化氢等离子灭菌人工清洗组、过氧化氢等离子灭菌机洗组,研究各组清洗、灭菌的效果.结果 人工刷洗加超声组清洗合格率为97.5%,机器清洗组合格率为73.3%,人工清洗组清洗合格率明显高于机器清洗组(P<0.05);环氧乙烷灭菌组和过氧化氢灭菌组均达到理想的灭菌效果,等离子灭菌时间短于环氧乙烷灭菌时间,但准备工作较繁琐,准备时间长于环氧乙烷灭菌,同时生物监测结果时间需要48 h;而环氧乙烷灭菌的灭菌时间长于过氧化氢等离子灭菌,但准备工作简单,准备时间较短,生物监测只需4 h.结论 人工刷洗加超声清洗腔镜是较理想的腔镜清洗方法,具有可靠、耗时短、节水等优点;环氧乙烷灭菌和过氧化氢等离子灭菌均达到理想的灭菌效果,两种灭菌方法各有优缺点,医院应该根据自己实际情况选择合适的灭菌方法.

    作者:王洪梅;杜丽萍;徐海凌;苏涛;初玉云 刊期: 2009年第14期

  • 鲍氏不动杆菌医院感染株的分布特征及耐药趋势

    鲍氏不动杆菌可引起各种呼吸系统、尿道、创面感染甚至败血症.近年来本菌从临床标本分离率亦有上升的趋势,为了解医院鲍氏不动杆菌的分布及耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物,现报道如下.

    作者:陈美荣;曹晶晶 刊期: 2009年第14期

  • HIV抗体不确定标本的鉴别诊断研究

    目的 阐明HIV抗体不确定结果的血清学特征,比较条带免疫印迹法(LIA)、HIV病毒载量(VL)和HIV-lp24抗原检测3种实验方法对HIV不确定标本的鉴别效果,明确蛋白免疫印迹法(WB)的非特异性发生率,为修订我国艾滋病检测技术规范提供依据.方法 检测56例HIV抗体不确定病例的92份标本,以随访后的HIV血清学状况为金标准,判断不同的方法在鉴别不确定结果方面的效果.结果 92份标本中有88份呈现14种不确定的条带模式,p24、gp160以及gpl60p24是常见模式,其余9种呈散在分布,31例中27例随访阴性,4例发生HIV抗体阳转,阳转率26.7%;WB的非特异反应率87.1%,LIA的非特异反应率为3.2%,病毒载量的检测未出现非特异性反应,HIV-1 P24抗原的漏检率为9.2%.结论 只有出现gp160+p24带型的病例发生HIV抗体阳转,其余带型均表现为非异性反应,LIA、VL两种方法能够有效地判断现有的HIV不确定标本的感染状况.

    作者:王海燕;杨晓莉;王莉;马艳华;曹广亚;郭素菊;辛武;陈激扬;李军;李清波;罗效梅;鲍作义;李敬云 刊期: 2009年第14期

  • 综合医院动物实验室的感染管理

    目的 通过加强动物实验室的感染管理,保证屏障内动物实验区及动物饲养区达到相应的环境要求.方法 对实验室采取严格规范的医院感染管理;空气净化系统进行标准的管理与维护;建立健全屏障设施的各项管理制度,对SPF区采取一系列的消毒灭菌措施,严格执行气流、人流、物流和动物流的标准操作规程等.结果 医院屏障环境动物实验室建成肩用2年多来,温度、湿度、换气次数、气流速度、压强梯度、菌落数、噪声等各项监测指标均达到国家规定标准.结论 只要管理措施得力有效,就能保证屏障设施内环境的持续净化和动物质量的标准化.

    作者:何华 刊期: 2009年第14期

  • 离子强度对乙型脑炎病毒基因传感器检测系统的影响

    目的 探讨磷酸盐缓冲液(PBS)中Na+浓度值对乙型脑炎病毒(JEV)基因传感器检测系统的影响.方法 漏声表面波(LSAW)基因传感器表面固定终浓度为1.0μmol/L的乙型脑炎病毒探针,然后分别在pH 7.6的10 mmol/L PBS缓冲液(含Na+浓度值0.1~0.6 mol/L)中和终浓度为1.0 μmol/L的JEV靶序列杂交,分别记录相位变化及反应所需时间.结果 杂交反应引起的相位变化是先上升后趋于缓和的趋势,以0.3 mol/L Na+浓度为分界线;杂交平衡时间同相位变化一致,当PBS中Na+浓度为0.3 mol/L,杂交反应的平衡时间为33 min.结论 随着Na+浓度的升高,杂交反应引起的相位变化呈典型的饱和曲线趋势,PBS中Na+浓度0.3 mol/L,杂交反应平衡时间33 min,是LSAW-JEV基因传感器杂交的适反应条件.

    作者:徐清华;陈伟;王云霞;罗阳;丁毅;施建峰;曹亮;陈鸣;府伟灵 刊期: 2009年第14期

  • 漏声表面波生物传感器检测系统构建时靶序列浓度的影响

    目的 探讨新型的漏声表面波(LSAW)传感器检测系统构建时,人乳头状瘤病毒(HPV)靶序列浓度对其杂交效应和反应时间的影响.方法 LSAW传感器表面先固定上1.0 μmol/L的肽核酸(PNA)探针,观察终浓度为1 pg/L~1 mg/L的HPV靶序列DNA与探针进行杂交所引起的相位变化及反应所需时间,并对相位下降值与靶序列浓度做线性回归,确定其线性范围.结果 随着靶序列浓度从1 pg/L增加到1 mg/L,杂交反应引起的相位下降值呈先增加后趋于缓和的趋势,以100μg/L为分界线,而杂交平衡时间并没有显现出一定的变化趋势;在1 pg/L~100μg/L的HPV靶序列浓度范围内,相位变化与靶序列浓度的线性回归方程为△P=2.3392 1gC+14.584,相关系数r2=0.9622.结论 随着靶序列浓度的升高,杂交反应引起的相位下降值呈典型饱和曲线趋势,靶序列浓度的线性检测范围为:1 pg/L~100μg/L.

    作者:陈鸣;李书君;府伟灵;陈伟;张烨;王云霞;徐清华;丁毅;曹亮 刊期: 2009年第14期

  • 利用pSOS-HUS系统构建针对小鼠h1-calponin的RNA干扰载体

    目的 利用pSOS-HUS系统构建针对小鼠碱性调宁蛋白(h1-calponin)的RNA干扰载体并对其干扰效率进行验证.方法 利用在线软件设计三段针对小鼠h1-calponin cDNA的寡核苷酸(A、B、C)片段,经退火成为双链后分别装入pSOS-HUS载体,得到载体调宁蛋白-PS-A/B/C,再将h1-calponin cDNA插入该载体和GFP一起融合表达,得到调宁蛋白RNAi-A/B/C 3个载体;对上述载体经酶切和测序鉴定后,转染至HEK293T细胞株,通过倒置荧光显微镜观察GFP荧光强度来判断上述载体的干扰效果.结果 经酶切和测序证明针对小鼠h1-ealponin的3个RNA干扰载体构建成功,荧光显微镜下观察显示,和空载体pSOS-HUS(未插入RNA干扰片段)相比,A组的荧光强度减弱明显,B的基本不变,C的荧光强度稍有减弱.结论 成功构建了针对h1-calponin的RNA干扰载体.

    作者:孙启获;苏楠;陈锚锚;金旻;赵玲;陈林 刊期: 2009年第14期

  • 产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的检出率与药敏分析

    目的 探讨铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检出率并分析其药敏谱.方法 收集深圳南山区2007年6月-2008年6月共323株铜绿假单胞菌,采用法国生物梅里埃公司ATB-Expression细菌鉴定;药敏试验采用ATBPSE5药敏试剂条测试;对亚胺培南和美罗培南同时耐药菌株用改良纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶.结果 共分离出323株铜绿假单胞菌,产金属β-内酰胺酶46株(14.3%);铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率高达45.4%和26.3%,多黏菌素E对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌依然有非常好的效果,敏感率达到96.9%;铜绿假单胞菌泛耐状况不容忽视.结论 加强金属β-内酰胺酶检测,按照药敏试验选择治疗药物,以防止菌株扩散是非常重要的.

    作者:谢小军;吴少苑;王冲;曾忠铭 刊期: 2009年第14期

  • 4632例患儿中常见的病原菌及其分布

    为了解小儿内科息儿的病原菌及其分布,对本院2007年1月-2008年9月入住小儿内科的4632例患儿的临床资料进行调查,现将结果报道如下.

    作者:蒋景华 刊期: 2009年第14期

  • 门诊注射室护患纠纷的原因分析与防范

    我们对我院门诊注射室从2004-2007年发生的护患纠纷进行分析,从中吸取教训,不断改进,使护患纠纷明显减少,获得患者好评.

    作者:李茜;郝花;朱慧兰 刊期: 2009年第14期

  • 通用引物PCR扩增创伤感染细菌16S-23S rDNA间区的研究

    目的 探讨通用引物PCR扩增多种创伤感染细菌16S-23S rDNA间区的可行性,为开展常见创伤感染细菌基因诊断做好准备.方法 以细菌16S-23S rDNA间区为靶序列,在16S rDNA 3'端与23S rDNA 5'端保守区自行设计通用引物,筛选5种常见创伤感染细菌,提取其基因组DNA并进行PCR扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序.结果 5种细菌基因组DNA PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图谱与预期一致,经测序比对后得到了证实.结论 该通用引物可以实现对多种创伤感染细菌16S-23S rDNA间区进行PCR扩增,为下一步进行基因诊断打下了坚实的基础.

    作者:蔡晋;夏季;罗阳;王珏;许正林;府伟灵 刊期: 2009年第14期

  • 结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用

    目的 探讨结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放(TB-IGRA)定量试验用于临床诊断结核的实验价值.方法 收集患者血清及痰标本,ELISA法定量检测血清特异性γ-干扰素的含量、ELISA法定性检测血清HIV抗体、胶体金法检测结核抗体,FQPCR检测痰中结核分枝杆菌核酸.结果 TB-IGRA的敏感度为90.24%,特异度为93.34%;82例肺结核病患者中,痰涂片镜检、结核分枝杆菌DNA和结核抗体检测的阳性率分别为:64.63%、76.83%和40.24%,经卡方检验,TB-IGRA与另3种方法阳性率差异有统计学意义(P<0.05、<0.01、<0.01).结论 TB-IGRA较灵敏、特异,是一种诊断肺结核的有价值的检测方法.

    作者:张华;黄圣文;罗振元 刊期: 2009年第14期

  • 超广谱β-内酰胺酶阳性革兰阴性杆菌在血培养中的分布及耐药性分析

    目的 了解医院住院患者血培养中分离的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性革兰阴性杆菌的分布及耐药情况.方法 2005年10月-2008年10月住院患者的血液细菌培养标本经BacT/Alert 3D血液细菌培养仪培养,分离所得菌株用法国生物梅里埃公司API系统和德灵的Microscan进行鉴定和K-B法做药敏.结果 在13 766份标本中,1468份标本培养阳性,阳性率为10.6%;其中革兰阴性杆菌734株,占50.0%,革兰阳性球菌476株,占32.4%,真菌233株,占15.9%,其他25株,占1.7%,分离率居前3位的革兰阴性杆菌是大肠埃希菌149株(20.2%)、肺炎克雷伯菌119株(16.2%)和铜绿假单胞菌85株(11.6%),ESBLs阳性的大肠埃希菌80株和肺炎克雷伯菌36株分别占大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的53.7%和30.3%,其药敏结果耐药率较高.结论 3年医院的血液感染病原菌以革兰阴性菌为主,其中ESBLs阳性革兰阴性杆菌的耐药率严重,对血培养中产ESBLS的革兰阴性杆菌感染及耐药性监测,是防治医院感染的重要手段.

    作者:杨帆;刘智勇;韩林妍;罗阳;陆家栋;府伟灵 刊期: 2009年第14期

  • 改进润滑干燥方法增强消毒效果

    我院于2006年4月起对手工清洗后的再生医疗器械的润滑剂使用方法进行探索改进,取得了良好的效果,现将结果报道如下.

    作者:孙睛宏;王光荣;王丽 刊期: 2009年第14期

  • 维持性血液透析患者医院感染临床分析与预防措施

    目的 了解慢性肾衰竭维持性血液透析患者医院感染的情况,探讨其相关危险因素及预防措施.方法 回顾性分析2005年1月-2006年12月,血液透析患者中符合医院感染诊断标准的临床资料.结果 89例血液透析患者发生感染44例,医院感染率49.43%;血透患者是医院感染的高发人群,感染发生的高发部位为呼吸道(52.27%),其次为中心静脉置管相关感染(25.00%)、尿路感染(15.91%)及肠道感染(6.82%);原发病为糖尿病肾病,贫血越严重,白蛋白越低、年龄越大者医院感染率越高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 加强血透室及相关医护人员医院感染管理的培训,加强对血透室血液透析的规范化管理,明确感染的危险因素,并采取相应防治措施,是减少血透患者医院感染的关键.

    作者:于敏;王姣;史耀勋;陈芝;刘晓玲;王汉斌;文娜 刊期: 2009年第14期

中华医院感染学杂志

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主管:中国人民解放军总医院

主办:中华预防医学会 中国人民解放军总医院