王洪梅；杜丽萍；徐海凌；苏涛；初玉云
目的 了解医院住院患者血培养中分离的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性革兰阴性杆菌的分布及耐药情况.方法 2005年10月-2008年10月住院患者的血液细菌培养标本经BacT/Alert 3D血液细菌培养仪培养,分离所得菌株用法国生物梅里埃公司API系统和德灵的Microscan进行鉴定和K-B法做药敏.结果 在13 766份标本中,1468份标本培养阳性,阳性率为10.6%;其中革兰阴性杆菌734株,占50.0%,革兰阳性球菌476株,占32.4%,真菌233株,占15.9%,其他25株,占1.7%,分离率居前3位的革兰阴性杆菌是大肠埃希菌149株(20.2%)、肺炎克雷伯菌119株(16.2%)和铜绿假单胞菌85株(11.6%),ESBLs阳性的大肠埃希菌80株和肺炎克雷伯菌36株分别占大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的53.7%和30.3%,其药敏结果耐药率较高.结论 3年医院的血液感染病原菌以革兰阴性菌为主,其中ESBLs阳性革兰阴性杆菌的耐药率严重,对血培养中产ESBLS的革兰阴性杆菌感染及耐药性监测,是防治医院感染的重要手段.
作者：杨帆；刘智勇；韩林妍；罗阳；陆家栋；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 应用染色体特异性探针对尿脱落细胞进行FISH分析膀胱移行细胞癌的染色体畸变.方法 选用3、7、9、17号染色体特异性探针对50例膀胱移行细胞癌患者尿液的脱落细胞进行荧光原位杂交研究,并同时做细胞学检查.结果 膀胱癌患者尿液脱落细胞中3、7、9、17号染色体数目畸变阳性率分别为28%、32%、56%和38%,其中9号染色体畸变率较高,但与膀胱癌的分级无明显相关关系;3、7和17号染色体数日畸变与膀胱癌的分期密切相关.结论 膀胱癌的发生发展与染色体的畸变有关,应用FISH检测膀胱癌患者尿液细胞染色体数目畸变,可以作为膀胱癌诊断、预后判断的一项辅助方法,该方法具有快速、准确、灵敏度高的优点.
作者：汪广杰；张晓莉；陈志文；罗阳；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 观察外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对铜绿假单胞菌耐药水平的影响,并扩增外排泵蛋白编码基因.以探讨细胞膜主动外排作用与铜绿假单胞菌耐药的关系.方法 用琼脂二倍稀释法测定150株铜绿假单胞菌对四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素,头孢噻肟、亚胺培南和美罗培南的低抑菌浓度(MIC),并观察在含5 mg/L CCCP存在条件下MIC值的变化;用PCR法扩增外排泵编码基因oprM、mexB和mexR.结果 150株铜绿假单胞菌中,有56.0%的菌株外排泵表型试验阳性,以四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、头孢噻肟、亚胺培南和美罗培南作为底物,分别有17、6、12、29、35、18、31株菌在5 mg/L CCCP的条件下MIC值降低≥4倍,其中有56.0%的菌株同时对2种的药物有明显的外排作用;主动外排机制不仅存在耐药菌株,而且也存在于敏感菌株,但CCCP对耐药菌株的影响更大;oprM、mexB和mexR外排泵基因普遍存在于铜绿假单胞菌中.结论 主动外排作用是铜绿假单胞菌多药耐药的重要原因之一,主动外排泵抑制剂在体外能降低多种抗菌药物对铜绿假单胞菌的MIC,外排泵抑制剂在克服细菌的耐药性方面有一定的应用前景.
作者：周明明；彭定辉；周铁丽；李超；吴庆；陈栎江；吴莲凤 刊期： 2009年第14期
目的 研究振动排痰机对颅脑损伤患者降低肺部感染的作用.方法 对2008年1-11月颅脑损伤患者90例,随机分为试验组(45例)和对照组(45例),试验组使用BT-2008多功能振动排痰机促进排痰,对照组采用传统的人工叩击法促进患者排痰.结果 试验组与对照组患者日均排痰量分别为(40.70±4.10)ml与(35.50±3.40)ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组患者有效排痰率分别为85.00%与55.00%,差异有统计学意义(P<0.01);两组患者肺部感染发生率分别为4.50%与17.78%,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者住院天数分别为(17.65±3.81)d与(28.27±3.16)d,差异有统计学意义(P<0.01).结论 正确应用振动排痰机可减少颅脑损伤患者肺部感染的发生,缩短住院时间,对控制医院感染取得良好效果.
作者：邓利平 刊期： 2009年第14期
目的 了解5382株医院感染病原菌的临床分布及其对常用抗菌药物的耐药情况,指导临床合理应用抗菌药物.方法 收集医院2007年1-12月临床住院患者标本,进行病原微生物的分离、鉴定和药物敏感试验,同时对葡萄球菌属和革兰阴性杆菌分别进行MRSA、ESBLs的检测.结果 在12571份标本中共分离出医院感染病原微生物5382株,其中G-细菌3390株,占62.98%;G+细菌953株,占17.71%,真菌1039株,占19.31%;除真菌外的4343株病原菌中,位列前5位的细菌分别是铜绿假单胞菌(20.5%)、鲍氏不动杆菌(11.2%)、大肠埃希菌(10.8%)、肺炎克雷伯菌(8.6%)、金黄色葡萄球菌(8.3%);病原菌分离阳性率较高的临床科室依次为神经外科、呼吸内科、ICU、肝胆外科和儿科;病原菌耐药结果显示,金黄色葡萄球菌对克林霉素类、喹诺酮类、四环素类抗菌药物的耐药性较高,耐药率均约50.0%,但对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷的敏感度较高;G-菌对亚胺培南、美罗培南、阿奇霉素的耐药率较低,对其他常用抗菌药物的耐药率均30.0%.结论 医院感染病原菌主要为条件致病菌,仍以革兰阴性杆菌为主,病原菌耐药率普遍较高,真菌感染所占比例仍较高;因此,重视病原学检查及药敏监测,有助于临床合理选择和使用抗菌药物.
作者：张波；府伟灵；蒋滢；刘智勇；龚雅利；张晓兵 刊期： 2009年第14期
目的 探讨磷酸盐缓冲液(PBS)中Na+浓度值对乙型脑炎病毒(JEV)基因传感器检测系统的影响.方法 漏声表面波(LSAW)基因传感器表面固定终浓度为1.0μmol/L的乙型脑炎病毒探针,然后分别在pH 7.6的10 mmol/L PBS缓冲液(含Na+浓度值0.1～0.6 mol/L)中和终浓度为1.0 μmol/L的JEV靶序列杂交,分别记录相位变化及反应所需时间.结果 杂交反应引起的相位变化是先上升后趋于缓和的趋势,以0.3 mol/L Na+浓度为分界线;杂交平衡时间同相位变化一致,当PBS中Na+浓度为0.3 mol/L,杂交反应的平衡时间为33 min.结论 随着Na+浓度的升高,杂交反应引起的相位变化呈典型的饱和曲线趋势,PBS中Na+浓度0.3 mol/L,杂交反应平衡时间33 min,是LSAW-JEV基因传感器杂交的适反应条件.
作者：徐清华；陈伟；王云霞；罗阳；丁毅；施建峰；曹亮；陈鸣；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 构建一种压电石英晶体微天平(QCM)DNA传感器多聚T尾型探针敏感膜制备新方法,同时对其重要影响因素进行优化探讨.方法 设计一种多聚T尾型探针,固定在压电QCM DNA传感器晶振表面,对探针固定浓度.杂交温度和杂交时间等因素进行实验研究,进一步将构建的多聚T尾型探针DNA传感器和普通探针DNA传感器用于铜绿假单胞菌检测,比较两种传感器的频率响应性能,同时对该压电QCM DNA传感器的再生性能进行研究.结果 探针佳固定浓度为2.0 μmol/L,适杂交温度为40℃,适杂交时间为90 min;多聚T尾型探针DNA传感器的响应性能显著大于普通探针DNA传感器(P<0.05),可以重复使用7次.结论 基于多聚T尾型探针的压电QCM DNA传感器,具有杂交效率高、技术难度低、频率响应性能高等优点,在压电QCM DNA传感器基因检测领域有较好的应用前景.
作者：夏涵；黄君富；王丰；陈鸣；黄庆；王珏；陈庆海；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 建立一种快速检测血液感染病原菌的方法.方法 选取7种常见血液感染病原菌,在其16S rRNA末端和23S rRNA始端的保守区设计通用引物,对16S-23S rRNA基因间区进行扩增,然后将PCR产物的电泳图谱进行机器码识别,以鉴定病原菌.结果 通用引物能扩增出7种病原菌,且每种菌具有不同片段长度(bp):大肠埃希菌(716、808),金黄色葡萄球菌(732、827),铜绿假单胞菌(833),表皮葡萄球菌(630、722、817),肺炎链球菌(606),肺炎克雷伯菌(550、705、797),粪肠球菌(591、693);此图谱可经机器码识别,对各种病原菌进行快速鉴定.结论 采用通用引物PCR和机器码识别技术可简便、快速、特异地鉴定常见血液感染病原菌.
作者：刘春江；黄君富；黄庆；夏涵；潘虹；蔡晋；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 了解医院呼吸道标本非发酵菌感染的菌群分类及药敏检测情况,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法 对医院2006年1月-2008年12月呼吸道标本分离出的2177株非发酵菌,采用法国生物梅里埃公司API-20NE进行细菌鉴定及K-B纸片扩散法进行药敏试验分析,用WHONET5.4软件分析药敏结果.结果 在分离出的2177株非发酵菌中,铜绿假单胞菌分离率蛀高占34.9%,其次为鲍氏不动杆菌占28.4%,嗜麦芽寡养单胞菌占11.4%,检出的非发酵菌对所监测的抗菌药物均有不同程度的耐药.结论 非发酵菌的检出率高,且呈多药耐药趋势,临床治疗应根据药敏试验合理使用抗菌药物,以提高感染的治愈率,同时对于减少耐药菌株的发生具有重要意义.
作者：姚春艳；张晓兵；董彦芳；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 为降低骨科外固定架使用中术后感染的发生率,自行研制出扣合式全环外固定装置并进行其力学稳定性测试.方法 运用Solidworks软件设计外固定架,并用三维有限元方法和万能材料试验机对设计的全环外固定架进行测试,判断其抗轴向、侧向、扭转力稳定性,进而对全环外固定架的各项参数进行生物力学优化.结果 在力学性能上,发明的扣合式全环外同定装置在抗轴向稳定性上与现有的半环槽式外固定架差异无统计学意义(P0.05),但是前者在抗侧向、扭转力稳定性上要显著性由于后者(P<0.05);综合上述结果,证明发明的扣合式外固定装置的力学稳定性显著性优于半环槽式外固定架;其稳定性随着固定圆环个数、圆环间距、克氏针夹角的增加而增加,当克氏针夹角达到90度时固定效果好.结论 扣合式全环外固定架在保留半环外固定架安装便捷的基础上,极大提高了其力学稳定性,不仅可极大缩短手术时间,减少围手术期医院感染的发生,而且可降低骨折愈合过程中发生针道感染的发生率.
作者：罗阳；张雪；王旭全；侯天勇；张泽华；叶青；汪广杰；府伟灵 刊期： 2009年第14期
2005年开始我们分别采用了两种不同方式的下收下送,从节省时间、减少人力资源等取得了明显的效果.1 下收下送方式1.1 改革前床位数1500张,10个人分为5个下送组,下送车10辆,人均服务150张床位.每个小组2人,两辆车,1人收污染物品,1人发无菌物品.1个下送小组负责8～10个科室,每个小组上午和下午分别占用90 min,每到1个科室都要与科室的护士当面清点污染物品后再接收无菌物品,后双方签字.在每个科均要停留10～15 min.
作者：孙艳华；赵庆兰 刊期： 2009年第14期
目的 探讨雌激素受体基因启动子区异常甲基化作为白血病早期诊断分子标志物的可能性.方法 应用MSP和RT-PCR检测40例急性白血病患者(未治疗)外周血雌激素(ER)受体启动子甲基化及其表达状态,Western-blot检测白血病细胞株以5'-Aza-Dc去甲基化前后蛋白表达的差异.结果 6种白血病细胞株以5'-Aza-Dc去甲基化后ERα蛋白表达明显增强,97.5%的急性白血病患者ERα-A启动子呈甲基化状态并导致其表达异常.结论 白血病细胞的雌激素受体基因启动子(ERα-A)存在异常甲基化现象并导致其基因表达沉默,可能为白血病的致病机制分析提供了一个新的方向,提示ERα-A基因启动子CPG岛的甲基化有可能成为白血病的新的参考标志物.
作者：姚婕；张晓兵；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 探讨新型的漏声表面波(LSAW)传感器检测系统构建时,人乳头状瘤病毒(HPV)靶序列浓度对其杂交效应和反应时间的影响.方法 LSAW传感器表面先固定上1.0 μmol/L的肽核酸(PNA)探针,观察终浓度为1 pg/L～1 mg/L的HPV靶序列DNA与探针进行杂交所引起的相位变化及反应所需时间,并对相位下降值与靶序列浓度做线性回归,确定其线性范围.结果 随着靶序列浓度从1 pg/L增加到1 mg/L,杂交反应引起的相位下降值呈先增加后趋于缓和的趋势,以100μg/L为分界线,而杂交平衡时间并没有显现出一定的变化趋势;在1 pg/L～100μg/L的HPV靶序列浓度范围内,相位变化与靶序列浓度的线性回归方程为△P=2.3392 1gC+14.584,相关系数r2=0.9622.结论 随着靶序列浓度的升高,杂交反应引起的相位下降值呈典型饱和曲线趋势,靶序列浓度的线性检测范围为:1 pg/L～100μg/L.
作者：陈鸣；李书君；府伟灵；陈伟；张烨；王云霞；徐清华；丁毅；曹亮 刊期： 2009年第14期
目的 利用pSOS-HUS系统构建针对小鼠碱性调宁蛋白(h1-calponin)的RNA干扰载体并对其干扰效率进行验证.方法 利用在线软件设计三段针对小鼠h1-calponin cDNA的寡核苷酸(A、B、C)片段,经退火成为双链后分别装入pSOS-HUS载体,得到载体调宁蛋白-PS-A/B/C,再将h1-calponin cDNA插入该载体和GFP一起融合表达,得到调宁蛋白RNAi-A/B/C 3个载体;对上述载体经酶切和测序鉴定后,转染至HEK293T细胞株,通过倒置荧光显微镜观察GFP荧光强度来判断上述载体的干扰效果.结果 经酶切和测序证明针对小鼠h1-ealponin的3个RNA干扰载体构建成功,荧光显微镜下观察显示,和空载体pSOS-HUS(未插入RNA干扰片段)相比,A组的荧光强度减弱明显,B的基本不变,C的荧光强度稍有减弱.结论 成功构建了针对h1-calponin的RNA干扰载体.
作者：孙启获；苏楠；陈锚锚；金旻；赵玲；陈林 刊期： 2009年第14期
我院从2008年4月30日-7月10日收治手足口病患儿206例,医院感染管理科对手足口病患儿诊疗、护理过程中进行了一系列探索,取得了一定成效.
作者：王伟玲；姜纪华 刊期： 2009年第14期
目的 探讨在子宫颈上皮内瘤变(CIN)中hTERC(human telomerase RNA gene component)基因荧光原位杂交的拷贝数扩增情况和高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测,作为宫颈癌早期诊断标志物的预测意义.方法 应用荧光原位杂交(FISH)方法,检测hTERC基因在72例宫颈脱落细胞中hTERC基因拷贝数的变化,用第二代杂交捕获法(HC-2)检测每一患者的2种HR-HPV DNA(HPV16/18),并同病理诊断结果比较;应用荧光标记探针GLP TERC/CSP 3;宫颈癌细胞株Hela和正常骨髓淋巴细胞为阳性对照,正常宫颈细胞为阴性对照.结果 在72例脱落细胞中,hTERC基因CINⅡ的阳性表达率为60.00%,CINⅢ的阳性率为83.33%,与正常或炎症/CIN Ⅰ差异有统计学意义(P<0.05);hTERC基因在宫颈癌细胞株HeLa和正常骨髓淋巴细胞中基因扩增阳性;HR-HPV DNA检测阳性32例,炎症/CIN Ⅰ的阳性表达率为42.86%,CIN Ⅱ的阳性表达率为70.00%,CINⅢ的阳性率为66.67%,宫颈癌的阳性率为75.00%,hTERC基因FISH检测对宫颈上皮内瘤变的阳性预测值(PPV)和特异性(Sp)明显高于HC-2 HR-HPV DNA检测.结论 hTERC基因参与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生发展,作为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标志物之一,TERC基因的FISH检测比HC-2 HR-HPVDNA检测能够更可靠地鉴别宫颈良恶性病变,二者联合检测将为提高宫颈癌的早期诊断率提供更有效、更合理的方案.
作者：向阳；张晓莉；罗阳；徐清华；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 探讨通用引物PCR扩增多种创伤感染细菌16S-23S rDNA间区的可行性,为开展常见创伤感染细菌基因诊断做好准备.方法 以细菌16S-23S rDNA间区为靶序列,在16S rDNA 3'端与23S rDNA 5'端保守区自行设计通用引物,筛选5种常见创伤感染细菌,提取其基因组DNA并进行PCR扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序.结果 5种细菌基因组DNA PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图谱与预期一致,经测序比对后得到了证实.结论 该通用引物可以实现对多种创伤感染细菌16S-23S rDNA间区进行PCR扩增,为下一步进行基因诊断打下了坚实的基础.
作者：蔡晋；夏季；罗阳；王珏；许正林；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)核心区的突变模式.方法 在核酸序列比对的基因上,设计靶向HBV各基因型核心区的通用引物.PCR扩增血清病毒DNA,经DNA测序和随后的序列分析,检测和分析核心区的突变模式.结果 在34例可检测样本中,共有23例患者存在HBV核心区突变;其中,基本核心启动子区(BCP)的A1762T(50.0%)和G1764A(52.9%)是常见的突变位点,并且,通常表现为双碱基突变;其次是核心(C)基因区的L60V氨基酸突变(17.6%);就各基因区的突变频率而言,BCP区、前核心(Pre-C)区和C基因区突变患者分别有18、6、10例,其中,BCP区通常表现为A1762T和G1764A双突变(94.7%),pre-C区以G1896A为常见(83.3%),C基因区则主要是L60V的氨基酸单突变(50.0%).结论 HBV核心区常见的突变形式是BCP区A1762T和G1764A的碱基双突变;由于HBV核心区基因具有复杂的突变模式,因此,研究HBV核心区基因突变模式对HBV感染的病情预测和预后判断具有重要的临床应用价值.
作者：黄庆；王贵宇；黄君富；潘虹；李君；府伟灵 刊期： 2009年第14期
目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及流行趋势,评价痰热清注射液联合万古霉素治疗MRSA感染性肺炎的疗效.方法 对2001-2007年某医院痰标本微生物学培养资料进行分析,了解金黄色葡萄球菌菌株构成,MRSA的流行趋势及其耐药性,采用随机对照,将100例MRSA感染性肺炎患者平均分为2组,分别予万古霉素、痰热清注射液+万古霉素注射液治疗.结果 3244株金黄色葡萄球菌中,MRSA 3082株,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)162株,MRSA分离率有随时间增加的趋势(P<0.05);78.07%MRSA来自医院感染;MRSA对万古霉素耐药率为0,对其他抗菌药物广泛耐药,与MSSA耐药率比较差异有统计学意义(P<0.01);中药痰热清+万古霉素联合治疗MRSA感染性肺炎疗效明显优于单纯万古霉素(P<0.01).结论 MRSA是院内肺部感染的重要致病菌;除万古霉素外,MRSA对其他抗菌药物广泛耐药,中药痰热清与万古霉素联合治疗MRSA感染性肺炎具有良好疗效.
作者：宋志香；芦苇；陈亮；王爽；李兴广 刊期： 2009年第14期
我院于2006年4月起对手工清洗后的再生医疗器械的润滑剂使用方法进行探索改进,取得了良好的效果,现将结果报道如下.
作者：孙睛宏；王光荣；王丽 刊期： 2009年第14期
中华医院感染学杂志
主管:中国人民解放军总医院
主办：中华预防医学会 中国人民解放军总医院
