学术投稿

耐药人肺癌细胞模型D6/MVP的建立及其生物学特性

马胜林;冯建国;顾琳惠;凌雨田

关键词:肺肿瘤, 多药耐药性, 肿瘤细胞, 培养的
摘要:目的培养建立耐药肺癌细胞模型D6/MVP并研究其生物学特性.方法应用人肺癌细胞株D6(简称D6细胞),采用MVP(MMC+VDS+DDP)大剂量间歇诱导法,建立耐药人肺癌细胞模型D6/MVP(简称D6/MVP细胞),观察该细胞的生长规律;用MTT法鉴定其对多种抗癌药物的多药耐药性;以流式细胞技术检测其细胞周期分布、细胞表面多药耐药基因(MDR)的表达产物P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋自(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达等.结果经MTT法鉴定,D6/MVP细胞较D6细胞的MVP半数致死浓度(IC50)增大13.3倍.经流式细胞仪检测,D6/MVP细胞倍增时间明显延长,S期细胞减少,G2期细胞增多;P-gp和MRP的表达显著升高(P《0.01),而GSH/GST的表达无明显变化(P《0.05).结论D6/MVP细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,具有耐药细胞的基本生物学特性.
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    卵巢外腹膜浆液性乳头状癌(EPSPC)是常见的原发性腹膜苗勒氏上皮癌.国内自1996年始对EPSPC已有了报道[2],但在近年的相关报道中,该病名称仍未统一.我院1995年1月~2001年8月收治4例EPSPC患者,现报告如下,并就其临床特点、诊治及预后进行分析,旨在统一名称下,提高对EPSPC的诊治水平.

    作者:方素华;刘志成 刊期: 2003年第02期

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    目的观察四硫化四砷(TATS)治疗初治和复发急性早幼粒细胞白血病(APL)过程中细胞形态学及细胞遗传学变化,探讨其作用机制.方法应用骨髓短期培养法、染色体荧光原位杂交(FISH)技术及形态学技术,对13例初治及7例复发APL患者进行细胞遗传学和形态学分析.结果8例患者的骨髓APL细胞中均出现分化现象.20例患者中,19例在TATS治疗过程中t(15;17)阳性细胞呈逐渐下降,与形态学APL细胞百分比的下降具有相关性(r值范围0.729 8~0.998 9).19例具有t(15;17)染色体易位的患者治疗后均达血液学完全缓解(CR),16例达细胞遗传学CR,1例具有t(11;17)易位的患者未达血液学CR.结论TATS对初治及复发APL有一定的诱导分化作用,单药TATS治疗初治及复发APL患者可达到血液学和细胞遗传学缓解.应用FISH技术监测t(15;17)阳性细胞可以客观反映APL细胞变化规律.

    作者:刘辉;邱镜滢;陆道培;洪波;史惠琳;师岩;党辉;何琪 刊期: 2003年第02期

  • 奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌的研究

    目的评价奥沙利铂联合亚叶酸钙、5-氟尿嘧啶(OXA-LV5FU2)方案治疗进展及转移胃癌的疗效与安全性.方法奥沙利铂(OXA)100 mg/m2,静脉滴注2 h,第1天;亚叶酸钙(LV)200 mg/m2,静脉滴注2 h后推注5-氟尿嘧啶(5-Fu)400 mg/m2,后续5-Fu 600 mg/m2,静脉持续输注22 h,第1,2天.每2周重复,行4周期(8周)治疗后判定疗效.结果入组观察43例,其中行原发灶切除者17例,未切除者26例.可评价疗效者40例,其中完全有效(CR)4例(10.0%),部分有效(PR)13例(32.5%),稳定(SD)17例(42.5%),进展(PD)6例(15.0%).总有效率(ORR)42.5%(17/40),初治(一线)ORR 50.0%(14/28),复治(二线以上)ORR25.0%(3/12).中位无进展期(mTTP)5个月,中位总生存期(mOS)8个月.43例中不良反应为3或4度者12例,其中白细胞减少7例(16.3%),血小板减少3例(7.0%),恶心呕吐和转氨酶升高各1例(2.3%).无化疗相关死亡.结论OXA-LV5FU2方案治疗晚期胃癌疗效较高,不良反应轻而且安全.

    作者:金懋林;陈强;程凤歧;陈伟;陈黎;潘良熹;杨宇飞 刊期: 2003年第02期

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    《中华肿瘤杂志》自1997年至2001年共出版30期,其中基础研究与临床研究论著共计485篇.

    作者:姚玉萍 刊期: 2003年第02期

  • 66例胃癌腹腔冲洗细胞学的临床研究

    目的探讨腹腔游离癌细胞形成的相关因素及其与胃癌预后的关系.方法对66例胃癌患者进行术中腹腔冲洗液细胞学检测,分析其与浆膜受侵、淋巴结转移、分期等因素的相关性,并通过累积复发曲线分析预后.结果66例胃癌腹腔冲洗液细胞学阳性率为36.4%(24/66),浆膜侵犯及淋巴结转移阳性组中,腹腔游离癌细胞检出率明显高于阴性组(P《0.025).相关因素分析显示,浆膜受侵、淋巴结转移及分期,与腹腔冲洗细胞学阳性显著相关;累积复发分析显示,腹腔游离癌细胞阳性者术后腹腔复发较阴性者显著增高(P《0.01),提示预后不佳.结论腹腔脱落癌细胞形成微转移灶,是胃癌术后腹腔复发转移及降低预后的主要危险因素之一,浆膜侵犯及腹腔淋巴结转移与腹腔脱落癌细胞呈正相关.术中检测腹腔游离癌细胞有助于评价手术效果、判断预后以及为辅助治疗提供依据.

    作者:郑朝旭;袁兴华;荣维淇;孙跃民;崔修铮;赵平 刊期: 2003年第02期

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    患者女,38岁.因B超提示肝左外叶结石入院.术中见左肝叶外上段有2 cm×1 cm×1 cm结节,质硬,切除送检.巨检:1.5 cm×1 cm×0.8 cm灰红肿物一块.

    作者:高琨;邱明;宋桂云 刊期: 2003年第02期

  • 血管内皮生长因子及微血管密度在乳腺癌中的表达及意义

    目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及做血管密度(MVD)在乳腺癌组织中的表达及意义.方法应用免疫组化SP法检测8 J例原发性乳腺癌患者癌组织MVD和VEGF的表达.结果VEGF高表达者49例(60.5%),MVD计数高者35例(43.2%).VEGF、MVD与肿瘤TNM分期有关,但与年龄、肿瘤大小、雌激素受体(ER)表达及淋巴结状况无关;VEGF与MVD的表达有显著相关性.单因素预后分析显示,MVD及VEGF低表达者无病生存期(DFS)及总生存期(OS)长于高表达者.分组的单因素分析表明,VEGF与各组患者的DFS有显著相关性,与淋巴结(+)和Ⅲ期乳腺癌患者的OS有显著相关性;而MVD与淋巴结(+)患者的DFS和OS以及Ⅲ期乳癌患者的DFS有显著相关性.多元回归分析显示,MVD是风险因子,表达越高生存期越短.结论VEGF和MVD均为判断乳腺癌预后的有效指标,其中MVD可能是预测乳腺癌预后的独立因子.

    作者:李捷;宋三泰;江泽飞;刘晓晴;颜玲娣 刊期: 2003年第02期

  • 和美新二线治疗肺癌的初步临床观察

    目的观察和美新(盐酸托泊替康)二线治疗肺癌的疗效及毒副反应.方法21例患者均为二线用药.其中未行手术者11例,均为复治患者;行手术切除者8例,开胸探查2例,均于术后予以和美新化疗.和美新1.2 mg@(m2)-1@d1,静脉点滴30 min,连续4 d,21 d为一个周期.根据患者不同情况,给予1~4个周期的治疗.21例患者中,4例行顺铂(PDD)60mg/m2,d 1,联合化疗.结果21例患者中,未行手术与仅行开胸探查者13例,其中CR 2例,PR 6例,SD 3例,PD 2例,有效率61.5%.行手术切除的8例中,术后应用和美新治疗后病情稳定7例,另1例出现远处转移.全组中位生存期16个月,1年生存率为88.2%.血液系统毒性:Ⅰ~Ⅱ级白细胞减少者14例(66.7%),Ⅲ~Ⅳ级白细胞减少5例(23.8%);Ⅲ~Ⅳ级血小板减少1例(4.8%);患者发热和中性粒细胞减少1例;1例因严重骨髓抑制而死亡.非血液学毒性中,恶心8例(38.1%),呕吐3例(14.3%),脱发4例(19.1%),腹痛1例(4.8%),腹泻2例(9.5%),便秘1例(4.8%).结论和美新二线治疗肺癌有效,尤其是小细胞肺癌,毒副反应可耐受,可用于复治或耐药的肺癌患者.

    作者:张毅;支修益;赵立强;韩明;闫东杰;于大平;阮军忠;李福根;刘志东;杨声 刊期: 2003年第02期

  • 恶性纤维组织细胞瘤颈内静脉转移一例

    恶性纤维组织细胞瘤(MFH)是较常见的软组织恶性肿瘤,侵袭性强,易发生远处转移,但转移至颈内静脉者尚未见报道.我院收治1例,现报告如下.

    作者:冯正虎;张文峰;陈新明;赵怡芳 刊期: 2003年第02期

  • 关于子宫颈癌综合治疗的商榷

    子宫颈癌的综合治疗始于20世纪40~50年代,此后国内外学者进行了广泛的探索性研究,近10多年来日益受到重视,综合治疗已成为当今宫颈癌治疗的新趋势.

    作者:章文华;吴令英 刊期: 2003年第02期

  • 耐药人肺癌细胞模型D6/MVP的建立及其生物学特性

    目的培养建立耐药肺癌细胞模型D6/MVP并研究其生物学特性.方法应用人肺癌细胞株D6(简称D6细胞),采用MVP(MMC+VDS+DDP)大剂量间歇诱导法,建立耐药人肺癌细胞模型D6/MVP(简称D6/MVP细胞),观察该细胞的生长规律;用MTT法鉴定其对多种抗癌药物的多药耐药性;以流式细胞技术检测其细胞周期分布、细胞表面多药耐药基因(MDR)的表达产物P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋自(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达等.结果经MTT法鉴定,D6/MVP细胞较D6细胞的MVP半数致死浓度(IC50)增大13.3倍.经流式细胞仪检测,D6/MVP细胞倍增时间明显延长,S期细胞减少,G2期细胞增多;P-gp和MRP的表达显著升高(P《0.01),而GSH/GST的表达无明显变化(P《0.05).结论D6/MVP细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,具有耐药细胞的基本生物学特性.

    作者:马胜林;冯建国;顾琳惠;凌雨田 刊期: 2003年第02期

  • 青年和绝经女性乳腺癌VEGF、bFGF及其受体表达的差异

    目的探讨青年和绝经女性乳腺癌血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(FLK-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体(FLG)的表达特征和差异.方法以SABC免疫组化法检测40例年龄≤35岁的青年女性(青年组)和30例绝经女性(绝经组)乳腺癌组织中VEGF、FLK-1、bFGF和FLG的阳性系数值并进行比较,探讨其与腋窝淋巴结转移和临床病理特征之间的关系,同时比较两组之间各项临床指标的差异.结果青年组腋窝淋巴结转移率和VEGF、bFGF阳性系数值明显高于绝经组,差异有显著性或极显著性(P《0.05或P《0.01);腋窝淋巴结转移组的VEGF、bFGF、FLK-1和FLG阳性系数值明显高于腋窝淋巴结未转移组,差异有显著性或极显著性(P《0.05或P《0.01);VEGF、FLK-1和FLG阳性系数值在两组的TNM临床分期0~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期组间差异有显著性或极显著性(P《0.05或P《0.01).结论青年乳腺癌侵袭性强与肿瘤血管生成相关,主要表现为VEGF和bFGF高表达.

    作者:易文君;唐中华;杨竹林;喻梅英;李允山;陈干农 刊期: 2003年第02期

  • 睾丸肿瘤组织中端粒酶RNA成分的表达及其意义

    端粒酶是维持端粒长度的逆转录酶,在大多数正常人体细胞中无端粒酶活性,而在干细胞、生殖细胞和90%的恶性肿瘤细胞中有端粒酶活性.我们应用核酸原位杂交(nucleicacid in situ hybridization)技术,对睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中人端粒酶RNA(hTR)基因进行检测,旨在从分子水平上对男性睾丸肿瘤基因变异表达产物进行检测分析,探索简便、敏感、特异性高的实验方法及基因治疗的新靶点.

    作者:叶哲伟;陈晓春;童强松;邢毅飞;杨军;候琳;鲁功成 刊期: 2003年第02期

  • 砷诱导肝母细胞瘤HepG2细胞凋亡机理研究

    目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞凋亡的机理及其对细胞核基质相关蛋白--前髓白血病蛋白(PML)表达的影响.方法HepG2细胞培养于MEM培养基中,用不同浓度As2O3分别处理24或96h.运用原位末端脱氧核苷转换酶(TdT)标记法(TUNEL)和DNA阶梯法检测细胞凋亡.以激光共振聚交显微镜及Western杂交观察PML的表达.结果TUNEL阳性的凋亡细胞及DNA阶梯片段可见于As2O3处理组.用2 μmol/L As2O3处理的HepG2细胞核基质蛋白内PML表达减弱.激光共振聚交图像显示,经2 μmol/L As2O3处理的HepG2细胞核中,PML蛋白的表达明显减弱;用5 μmol/LAs2O3处理后,PML在HepG2细胞核中的微小点状表达几乎消失.结论As2O3在体外可明显抑制HepG2细胞生长,其诱导HepG2细胞凋亡的作用依时间及剂量不同而异.As2O3可降解HepG2细胞核中PML蛋白,且PML的表达降低与细胞凋亡密切相关.核基质相关蛋白PML可能是As2O3作用的靶蛋白.

    作者:于鼎;王子慧;朱立元 刊期: 2003年第02期

  • 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的研究

    目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对肝癌细胞凋亡的诱导作用.方法采用原位杂交方法检测肝癌组织、肝癌细胞株以及正常肝组织中TRAILR的表达.采用不同浓度TRAIL蛋白处理肝癌细胞株HepG2和SMMC7721,应用流式细胞仪和原位末端标记,观察经药物处理前后该细胞株的凋亡发生率.结果60例肝癌组织及20例正常肝组织均表达死亡受体DR5和DR4,但肝癌组织DR表达量显著强于正常肝组织.54例(90.0%)肝癌组织不表达诱捕受体DcR1,25例(41.7%)肝癌组织不表达DcR2,而20例正常肝组织均表达DcR.肝癌组织中DR的高表达及DcR的低表达,不同于正常肝组织中DR的低表达及DcR的高表达,两者间差异有显著性.两种肝癌细胞株中均可检测到DR5、DR4、DcR2的表达,但DcR1表达缺失.肝癌组织中DR的表达与肿瘤的分化、肿瘤分期有关,低分化的肿瘤DR表达减少(P《0.01),Ⅲ、Ⅳ期肿瘤DR表达显著低于Ⅰ、Ⅱ期(P《0.05).DR表达与患者的性别、年龄、HBsAg阳性与否、AFP水平、肿瘤大小以及是否转移无关.经TRAIL(100ng/ml)处理24h,肝癌细胞凋亡发生率约10%,而Jurkat细胞凋亡率达70%以上,胆管癌细胞QBC939凋亡发生率约50%.结论肝细胞肝癌普遍存在TRAILR的表达,并存在受体类型的表达差异.但单一的TRAIL治疗只能有限的诱导肝癌细胞HepG2、SMMC7721发生凋亡,HCC对TRAIL诱导的凋亡存在耐药现象.

    作者:何松青;陈彦;陈孝平;张万广;王海平;赵永忠;王少发 刊期: 2003年第02期

  • TRAIL联合化疗药物诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

    肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TNF related apoptosisinducingligand,TRAIL)是TNF家族的成员之一,与TNF和FASL不同的是,它仅诱导转化细胞、肿瘤细胞和病毒感染细胞发生调亡,对正常细胞则无明显的杀伤作用[1].

    作者:周慧明;陈智;陈公英;李敏伟 刊期: 2003年第02期

  • 磷酸化JNK介导全反式维甲酸诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡

    目的探讨全反式维甲酸(ATRA)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制.方法应用3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察ATRA对细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪分析ATRA对Y79细胞周期的影响;以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡;用Western blot分析c-jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化.结果ATRA可明显抑制Y79细胞的生长,1 μmol/L处理36 h时,3H-胸腺嘧啶掺入率下降达40%,Y79细胞被阻滞于G0/G1期,并出现Sub-G1峰.ATRA可诱导Y79细胞凋亡,此凋亡过程可被JNK的阻断剂Curcumin阻断;在此过程中,JNK被激活并磷酸化.结论ATRA可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由磷酸化的JNK介导,提示ATRA可能是一种潜在的抗Rb化疗药物.

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    原发性肝癌由于发现时多为中晚期,且多伴有肝硬化、肝炎以及由此所致的肝功能损害,因此,对于肝癌强调进行综合治疗.

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  • 食管癌的定期、扩大淋巴结清扫及综合治疗

    食管癌从全世界范围来看,仍然是预后暗淡的疾病,它的诊断治疗和基础研究虽在不断进步,但迄今效果仍然不能令人满意.

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