胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞的培养及鉴定

王磊；曾水林；雷志年；朱建宝；李涛；闫福麟

关键词：细胞, 培养的, 大鼠, 中脑

摘要：目的:探讨胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的分离、培养、传代及鉴定的方法.方法:分离E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织,用机械吹打方法形成细胞悬液,接种到含有表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、碱性成纤维生长因子(fibroblast growth factor-basic,bFGF)、B27(B27 suplement)的DMEM/F12(1∶ 1)的无血清培养液中培养,待形成原代克隆球后,用有限稀释法进行单细胞克隆和传代扩增,以获得大量来源相同的NSCs克隆球,并且进行Brdu和Nestin检测;然后取培养细胞诱导分化后行GFAP,NeuN,TH检测.结果:E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织细胞培养两周后可以形成较多的悬浮生长的神经球,经单细胞克隆和传代扩增后得到大量的同源细胞克隆球.经过Brdu和Nestin的免疫细胞化学检测90%以上的细胞呈阳性;诱导分化后细胞呈GFAP,NeuN阳性,少量细胞呈TH阳性.结论:从E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织分离得到的细胞具有不断增殖和自我更新的能力,是胚胎大鼠中枢神经系统的NSCs,并可以分化为TH阳性神经元.

解放军医学院学报杂志相关文献

颅内动脉瘤破裂的早期综合治疗

目的:探讨颅内动脉瘤破裂早期行显微手术治疗与血管内栓塞治疗的效果.方法: 250例颅内动脉瘤破裂在 3 d 内早期经显微手术或血管内栓塞治疗,其中115例显微手术, 135例经血管内栓塞.随访3～30个月.术前术后均行TCD监测.结果:显微手术115例,院内死亡5例,半年后优78例,良27例,差3例,植物生存1例,死亡1例,总死亡率5.22%.135例血管内治疗,院内死亡5例.半年后,栓塞组优95例,良30例,差4例,死亡1例,总死亡率4.44%.结论: 要重视颅内动脉瘤破裂的早期临床综合治疗,其中显微手术与血管内栓塞治疗各有所长,还不能相互取代.有些病例需二者结合效果更好.

作者：王东成；王东军；贺民；毛伯镛刊期： 2006年第04期
FDP 预处理对离体大鼠心脏LVEDP和 MDA、SOD的影响

目的:观察1,6-二磷酸果糖(fructose 1,6-bisphosphate,FDP)预处理对离体大鼠心肌组织MDA、SOD的变化, FDP对心肌缺血再灌注损伤的保护效果.方法:用Wistar大鼠建立Langendorff模型,实验随机分为2组,灌注液应用Krebs-Ring液和Krebs-Ring液加FDP 5mmol·L-1两组分别分成缺血前期、缺血期和再灌注期,每8只大鼠1组,共6组.进行对照组和FDP组对比,观察指标左室舒张末压(LVEDP)、心肌组织丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果:对照组大鼠缺血再灌注后LVEDP明显增高(P＜0.05).MDA增高以对照组缺血期为明显,且对照组缺血期及再灌注期与FDP组缺血期和再灌注期相比较差异显著(P＜0.01、P＜0.05).对照组缺血期、再灌期与缺血前期相比较差异明显(P＜0.05).FDP组缺血期、再灌期与缺血前期比较无明显差异.SOD活性FDP组均较对照组增强且具有显著差异(P＜0.01).结论:FDP预处理对心肌具有良好的保护效应,具有明显增加心肌组织对缺氧的耐受,减轻缺血再灌注损伤,减少脂质过氧化物-氧自由基的生成,促进心功能的恢复.

作者：刘福林；周玉娟；刘春颖；武变瑛刊期： 2006年第04期
HLA-DRB和-DQB1基因位点与Eales病的初步研究

目的:探讨北方汉族HLA-DRB和-DQB1基因位点与Eales病及病情严重性的相关性.方法:应用病例-对照相关分析方法,采用PCR-序列特异性引物基因分型技术对北方汉族30名健康个体和21例Eales病患者(均无血缘关系)进行HLA-DRB和-DQB1进行遗传相关分析.结果:Eales病患者中DRB1*04的频率为(0.57)显著高于对照组(0.20), χ2=7.46, P＜0.01,比数比(OR)为5.33.DRB1*11的频率(0.05)显著低于对照组(0.30), χ2=4.99,P＜0.05,OR为0.17.DRB1*04阳性患者终平均视力明显低于DRB1*04阴性患者,并且DRB1*04阳性患者行玻璃体切割手术治疗的频率高于DRB1*04阴性患者,但二者没有统计学差异(P＞0.05).结论:北方汉族HLA-DRB等位基因与Eales病相关,DRB1*04可能与Eales病易感相关;DRB1*11可能在发病中有保护作用.

作者：马成；王瑛；魏世辉；杨素霞；刘辉刊期： 2006年第04期
正畸与修复联合治疗成人双侧下颌第一磨牙缺失伴前牙反雅(牙合)

1 对象和方法1.1 对象唐山市工人医院口腔正畸科门诊下颌第一磨牙缺失伴前牙反牙合的患者10例,其中男性4例,女性6例,年龄18～36岁,入选条件:①双侧下颌第一恒磨牙缺失,距治疗时间为2～10年;

作者：杨湲波；董青；杨金晖；刘明昕刊期： 2006年第04期
铜绿假单胞菌耐药性与五种抗假单胞菌抗生素使用量相关性研究

目的:通过调查某三级甲等医院1994～2003年铜绿假单胞菌对五种抗生素的耐药性与这些药物的年用量,探讨用药量和耐药性之间的相关性.方法:纸片扩散法进行药敏试验并对1994～2003年5种抗生素的年用药频度(DDDs)与铜绿假单胞菌的耐药率进行相关性分析.结果: 10年来铜绿假单胞菌对5种抗生素的耐药率逐年增长,而且耐药率增加均大于12.5%.亚胺培南和环丙沙星用量与铜绿假单胞菌对这两种药物耐药率的变化呈显著正相关,与该菌对哌拉西林的耐药率也有相关性.结论:亚胺培南和环丙沙星的年用量不仅与铜绿假单胞菌对这两种抗生素的耐药率其呈显著正相关,并且与哌拉西林的耐药率也呈正相关性.

作者：罗燕萍；沈定霞；裴保香；徐雅萍；白立彦刊期： 2006年第04期
十二指肠白点综合征29例分析

1 临床病例 1998～2004年我院经胃镜检查诊断十二指肠白点综合征(duodenal white spot syndrome, DWSS)29例,并在白点处黏膜取材,进行病理活检并用快速尿素酶法检测胃窦部幽门螺旋杆菌 (helicobacter pylori,H.pylori或HP).

作者：王志刚刊期： 2006年第04期
正畸托槽临床黏接强度的研究及其影响因素

托槽是固定矫治器中重要部件,随着固定矫治技术日益成熟,托槽的黏接强度受到临床工作者的重视.笔者总结学者们近年来对于托槽黏接强度的研究,阐述了黏接强度的影响因素,供临床工作者参考.

作者：王琤；曾文贵；王东辉刊期： 2006年第04期
狗咬伤致罕见筋膜间室综合征伴重症感染1例

1 临床病例男性患者, 46岁.于2005年2月左腕部被自家狗咬伤,左腕部掌背侧各有一犬齿痕,伤后在当地医院肌注TAT及狂犬疫苗.

作者：袁贤赟；梁雨田；崔赓刊期： 2006年第04期
特重烧伤患者肺部感染的治疗

目的:探讨特重烧伤伴吸入性损伤患者的肺部感染有效的治疗方法.方法:总结6例特重烧伤伴吸入性损伤和肺爆震伤患者的肺部感染的临床资料.结果: 6名伤员在伤后 3.5～6 d 内出现肺部感染,其中5名需气管切开及呼吸机辅助通气, 3例接受机械通气 2.5 d 后出现肺部感染.经过综合治疗,所有患者的肺部感染均得到治愈.结论:早期合理应用抗生素,防治呼吸机相关性肺炎,应用纤维支气管镜检查及治疗,加强呼吸道管理和营养支持,积极处理创面都是治疗特重度烧伤伴吸入性损伤患者的肺部感染的有效方法.

作者：张伟；宋斌；孙建忠刊期： 2006年第04期
重度慢性阻塞型肺疾病缓解期血凝状态及抗凝干预疗效观察

1 对象和方法1.1 分组 2002年8月～2005年4月经确诊为重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)缓解期的住院及门诊患者42例,均符合2002年8月<慢性阻塞型肺疾病诊治指南>的诊断标准.

作者：徐蔚东；张永娟；李潍林；王兴霞刊期： 2006年第04期
特发性室性心动过速1例

1 临床病例男性患者, 31岁,因发作性心悸2年,活动后气短11个月来院就诊.于2年前无明显诱因突发心悸,无其他不适.常规心电图示:

作者：马淑英；王春兰；栾桂芹；魏留臣刊期： 2006年第04期
某军队医院内科门诊神经症性症状患者医院满意度的影响因素

目的:研究某军队医院内科门诊患者神经症性症状的流行规律和具有此类症状患者的医院满意度及影响因素.方法:从某三家军队医院内科门诊随机抽取502名患者.用Zung 焦虑自评表,Wakefield 抑郁自评表,Albert惊恐障碍和躯体化障碍评估手册,一般情况调查表评估研究对象.心理科医生、内科医生依据DSM-Ⅳ对502名患者进行鉴别诊断.结果: 502名患者中, 2/3为躯体疾病不伴有神经症性症状, 1/3为有神经症性症状.其中有神经症性症状患者中,已确诊为各种神经症的占34.5%,确诊为躯化障碍的占8.33%,确诊为躯体疾病伴神经症性症状的占57.14%.神经症性症状组自认医院满意度显著低于躯体疾病不伴有神经症性症状组.结论:军队医院内科门诊患者的心理问题严重,神经症性症状患者自认医院满意度低.神经症性症状严重程度,自认疾病程度、特殊检查次数、累积就诊次数、累积医疗费用、药物治疗情况对此类患者的医院满意度影响较大.可以通过采用加强精神卫生服务意识和观念、重视对精神卫生知识的学习和运用等对策干预目前军队医院内科门诊的这一现状.

作者：宁淑娥；李艳秋；李萍；李维华刊期： 2006年第04期
冠状动脉微栓塞致心衰模型的研究进展

冠状动脉微栓塞所得的心衰模型不需开胸,效果稳定,能较好的模拟心衰自然演变的病理生理改变,日益受到业内重视.本文综述了该动物模型的历史发展、制作方法、评价指标、特点和模型的建立机制.

作者：米亚非刊期： 2006年第04期
海战伤致急性肾衰的机制和救治研究进展

急性肾功能衰竭是海战伤的常见并发症,其独特发病机制涉及海水浸泡后导致的严重低温、高渗性脱水、加重的感染、低氧血症等,使急性肾衰的发病率和严重程度均明显高于陆地战伤.在治疗中CRRT是一种非常有效的急救手段,可针对海战伤情特点进行救治,在海战伤中有广阔的应用前景.

作者：李昕刊期： 2006年第04期
大鼠视神经切开减压和鞘膜切开减压疗效的对比实验

目的:用荧光金逆行标记法评价视神经切开减压对SD大鼠视神经不完全损伤的疗效.方法:夹持大鼠左眼视神经30s建立不完全损伤模型,分视神经切开减压(ONID)和视神经鞘膜切开减压(ONSD)两组,应用荧光金逆行标记法,对比两组在术后1月、 2月、 3月、 6月时存活视神经节细胞(RGC)的数量,评价ONID的疗效.结果:ONID组术后各时间点RGC记数均高于ONSD组,差异有显著性(P＜0.05).结论:ONID对不完全损伤的视神经有保护作用.在延长节细胞存活方面,ONID较传统的ONSD更有效.

作者：刘婉莹；张卯年；鞠躬；黄厚斌刊期： 2006年第04期
肺泡上皮Ⅰ型细胞与肺损伤

肺泡上皮Ⅰ型细胞在特点及功能上均不同于Ⅱ型细胞,由于Ⅰ型细胞在整个肺泡区中所占比例及其与血管内皮的特殊关系,使得它在肺的多种基本功能中的作用不容忽视.另外,对Ⅰ型细胞的分化来源、基因表达、信号传导以及特异性表面蛋白的研究所得,将给急性肺损伤的诊断及治疗带来新的启示.

作者：朱敏立刊期： 2006年第04期
高血压病患者血浆脑钠素与左室舒张功能的关系

目的:探讨高血压病患者血浆脑钠素(BNP)水平变化及其意义.方法:选择高血压病患者31例(患者组)及健康查体者20例(正常对照组),采用固相免疫放射分析法检测血浆BNP浓度.超声多普勒结合组织多普勒显像(TDI)测定左室结构、左室舒张功能及左室舒张末压(E/Em).结果:①与正常对照组相比,高血压病患者组BNP浓度升高,左房内径(LA)增大、室间隔(IVS)和左室后壁(LVPW)增厚,有显著差异(P＜0.01);但左室内径和左室射血分数(EF)无明显差异(P＞0.05).②患者组A峰升高、E/A比值和Em降低、E/Em侧升高,有显著差异(P＜0.01).结论:高血压病患者BNP浓度明显升高, 检测BNP水平将有助于了解高血压病患者心脏结构和功能的改变.

作者：戴华；莫艳波；武彩娥；肖文良刊期： 2006年第04期
瑞芬太尼对声带息肉摘除术患者血管紧张素Ⅱ的影响

目的:研究瑞芬太尼在声带息肉手术麻醉中的应用.方法:选择ASA Ⅰ～Ⅱ级、择期行声带息肉手术患者160例,随机分为2组,R组采用瑞芬太尼诱导和维持麻醉,F组采用芬太尼诱导和异氟醚吸入维持麻醉,观察2组麻醉诱导及维持期血流动力学变化、血管紧张素Ⅱ和苏醒期苏醒质量及相关时间.结果:瑞芬太尼麻醉术中循环波动较小,苏醒及清醒快,术后并发症少.结论:瑞芬太尼可安全有效地用于声带息肉手术的麻醉.

作者：洪道先；徐海霞；马传根刊期： 2006年第04期
循证医学及其文献检索

介绍循证医学的概念、国内外发展及其现状,强调采用好的研究证据为临床实践服务;并详细地阐述了循证医学文献的来源与检索,其证据包括原始研究证据、二次研究证据、三级来源.

作者：王含晖刊期： 2006年第04期
G12亚型G蛋白对M3乙酰胆碱受体介导的磷脂酶D调控

目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3 mAChR)并介导PLD的激活.方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3 mAChR介导的PLD及PLC活性.结果:Gα12、Gα13亚型野生型及功能增强型蛋白的过度表达,导致胞内M3 mAChR介导的PLD活性明显升高(P＜0.001);而过度表达Gα12、Gα13功能缺陷型蛋白,则使胞内M3 mAChR介导的PLD活性明显降低(P＜0.001);但Gαq野生型及功能增强型蛋白的过度表达仅影响胞内PLC活性,对M3 mAChR介导的PLD激活没有影响.结论:M3 mAChR介导的胞内PLD激活极有可能是Gα12、Gα13而不是Gαq亚型G蛋白.

作者：韩黎；吴桂芝；吴旭琴；孟玉芬刊期： 2006年第04期