学术投稿

重组人Versican G1蛋白在昆虫细胞中的表达

朱剑;黄烽;张一平

关键词:蛋白聚糖类, VG1, 杆状病毒科, 昆虫, 细胞
摘要:目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统制备人蛋白聚糖Versican G1区(VG1)的重组蛋白.方法:将编码人VG1蛋白343个氨基酸的基因插入pFastBac1载体,转化大肠杆菌DH10Bac,提取重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞,获取含重组人VG1蛋白的杆状病毒进一步感染昆虫细胞进行蛋白表达.通过Ni-NTA层析柱对重组蛋白进行纯化.免疫印迹方法对昆虫细胞培养上清中的蛋白成分进行鉴定,采用透明质酸结合实验确定重组人VG1蛋白的生物活性.结果:人VG1基因在昆虫细胞中获得高水平表达,重组人VG1蛋白具免疫原性和与透明质酸结合的生物活性.结论:昆虫细胞表达的重组人VG1蛋白具有良好的免疫原性和生物活性.
解放军医学院学报杂志相关文献
  • 重症药疹 30 例临床研究

    目的:分析重症药疹的临床资料,提供治疗经验.方法:分析我院收治的 30 例患者,年龄 10~71 岁,男女比例1.2∶ 1,进行回顾性研究.结果:所有患者均有用药史,常见致敏药物为抗生素、解热镇痛药和卡马西平.死亡率13.3%(4 例死亡),死亡原因主要是心肺衰竭和感染.患者本身的基础性疾病是引起死亡的主要危险因素,包括布-加综合征、肺结核、支气管哮喘和系统性红斑狼疮.结论:早期诊断和停用致敏药物是治疗的重要环节,激素治疗能明显控制症状和缓解病情,支持疗法和皮肤黏膜护理也发挥重要作用.

    作者:周勇;李恒进;王建平;漆军;冯峥;葛萍;温海鹰 刊期: 2004年第05期

  • 小鼠肝、脾组织病理学变化对结核DNA疫苗保护作用的评估

    目的:评价结核分枝杆菌MPT64和ESAT6 DNA疫苗的保护效果.方法:将BALB/C小鼠随机分为 5 组,分别用生理盐水(A组),载体质粒(B组),卡介苗(C组),MPT64(D组), ESAT6(E组)免疫小鼠,3 周后以结核分枝杆菌H37Rv腹腔攻击小鼠.5~10 周后,观察肝、脾组织病理改变.结果:结核分枝杆菌攻击 5 周后,A、B组肝脏病变主要表现为中度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成小结节,数量1~2/HPF.C,D,E组表现为轻-中度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成中等大小结节,数量3~7/HPF.攻击 10 周后,A、B组肝脏病变主要表现为轻度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成中等大小结节,数量3~4/HPF.C组轻度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成中等大小结节,数量7~9/HPF.D组为轻-中度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成小结节,数量4~5/HPF.E组为轻度充血,淋巴细胞聚集与上皮样细胞组成中等大小结节,数量4~8/HPF.攻击 10 周后脾脏改变:A组充血明显,脾小体增生,1 例融合;B组未见明显变化;C组脾小体增生,融合显著;D组脾小体轻度增生融合;E组脾小体中度增生,融合.结论:结核分枝杆菌MPT64和ESAT6 DNA疫苗能增加机体抵抗力,并且起效较快,ESAT6 DNA疫苗的保护效力比MPT64 DNA疫苗强,但均未超过卡介苗.

    作者:徐燕杰;吴雪琼;韩永;张俊仙;史迎昌;李洪敏;张灵霞;李忠明 刊期: 2004年第05期

  • 发育性髋关节脱位术后再脱位的治疗

    目的:探讨发育性髋关节脱位术后再脱位的治疗时机与方法.方法:手术治疗发育性髋关节脱位术后再脱位 18 例 18 个髋,再手术与第一次手术间隔时间平均1年3月.其中15个髋需要进行髋臼手术,12个髋需要股骨短缩及旋转截骨.结果:临床结果 8 个髋为优,5 个髋为良,5 个髋为可.X线片结果8个髋为优,4个髋为良,6个髋为可 .结论:发育性髋关节脱位术后再脱位的佳手术时机在1年左右,其手术方法仍然要根据患者的年龄及病理改变来决定.

    作者:许瑞江;马承宣;顾章平;卢强 刊期: 2004年第05期

  • 先天性髋脱位治疗后并发股骨头坏死研究进展

    先天性髋脱位治疗后股骨头骨骺缺血性坏死是常见的并发症之一,根据股骨头骨骺血液供应的年龄特点和髋脱位的病理变化,在不同年龄阶段采用适当的治疗方案,能使头坏死的发生率明显降低.

    作者:吴战坡;许瑞江 刊期: 2004年第05期

  • 胃癌与毗邻组织p53、Bcl-2、增殖细胞核抗原表达及相互关系

    目的:研究胃癌与毗邻组织癌基因p53、Bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)表达特点及其关系.方法:用免疫组化方法(LSAB)对 92 例胃癌与毗邻癌旁组织p53、Bcl-2、PCNA表达情况进行了检测.结果:胃癌组织p53、Bcl-2、PCNA表达在癌组织高于毗邻非癌组织.胃癌组织p53、Bcl-2、PCNA表达与胃癌分型有关.肠型胃癌高于弥漫型胃癌,而与胃癌分期和位置无关.胃癌组织p53和Bcl-2、p53和PCNA表达呈良好一致性.结论:癌基因p53突变增加,PCNA、Bcl-2过度表达在胃癌尤其在肠型胃癌的发生发展过程中成为重要的危险因素.三者生物学功能可能存在一定关系.

    作者:王思平;卢晓行;曹厚法 刊期: 2004年第05期

  • 重症监护病房资源使用和费用的产生

    目的:采用TISS评分评估重症监护病房(ICU)资源使用和费用产生.方法:前瞻性研究.ICU住院日大于 24 h 的患者.每日评估APACHEⅡ和TISS得分.患者按照TISS参数回顾性分为积极治疗组(AT)和非积极治疗组(NAT).结果:148个患者中131人(88.5%)分入AT组.AT组患者APACHEⅡ和TISS得分高于NAT组(P<0.01).所有患者平均每天的费用为(6 232.7±4 365.7)元.AT组患者总费用(32 800.5±46 723.5)元明显高于NAT组(6 852.1±6 132.4)元(P<0.01),每天的费用(6 232.7±4 365.7)元高于NAT组(2 745.8±1 541.3)元(P<0.01),平均ICU 住院日(5.4±4.2)d也高于NAT组(2.2±1.3)d(P<0.01).结论:接受AT治疗的患者病情重,总费用和每天的费用均明显高于NAT组,保证ICU收容质量可以节约资源.

    作者:何蕾;黄晓明;杨慧格;宋青;江朝光 刊期: 2004年第05期

  • Gpa1在酿酒酵母配对反应信号转导中作用机制研究进展

    酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)配对反应是由异三聚体鸟苷酸结合蛋白和有丝分裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)级联放大反应介导的.虽然由它们介导的信号转导途径已基本探明,但受体水平的下调机制尚不清楚.酵母中交配信息素应答G蛋白的α亚单位,即Gpa1,在信号转导过程中作用备受关注.笔者综述了Gpa1在酿酒酵母配对反应信号转导中作用机制的研究进展.

    作者:卢长伟;李晓辉 刊期: 2004年第05期

  • 弥漫性轴索损伤

    弥漫性轴索损伤作为颅脑损伤中的常见类型,临床多见,其死亡率和致残率均较高.近年来,国内、外学者针对弥漫性轴索损伤进行了大量的基础和临床研究,取得了丰硕成果.笔者就弥漫性轴索损伤的发生机制、病理学特征、诊断和治疗等方面的新进展作一综述.

    作者:张军;许百男 刊期: 2004年第05期

  • 休克期切痂植皮对烧伤大鼠能量代谢的影响

    目的:考察伤后不同时期切痂对烧伤大鼠能量代谢的影响. 方法:40 只成年雄性大鼠,采用30%TBSA三度烫伤模型,分为 5 组:伤前正常对照组、单纯烫伤对照组、伤后 8 h、24 h、96 h 切痂植皮治疗组,于烫伤后 168 h 处死大鼠. 结果:①烫伤后大鼠血清TNFα、花生四烯酸水平显著高于伤前,切痂后降低,其中 8 h、24 h 切痂组TNFα水平及 8 h 切痂组花生四烯酸水平显著低于单纯烫伤组.各组胰高血糖素、皮质醇水平的改变均不具显著性.②烫伤后骨骼肌ATP含量显著降低而ADP含量显著升高,EC水平略下降;切痂后ATP、EC水平均有恢复,其中 8 h、24 h 切痂组ATP含量及 8 h 切痂组EC水平显著高于单纯烫伤组.肝脏ATP含量于烫伤后亦显著低于伤前,切痂后略回升;切痂后肝脏EC水平升高,其中 24 h 切痂组EC水平显著高于单纯烫伤组.结论:严重烧伤后组织ATP、能荷水平的降低是高代谢重要表现之一,该现象与细胞因子、脂类介质水平升高有关,及早切痂植皮可促进组织能量代谢水平的尽快恢复.

    作者:李峰;郭振荣;柴家科;盛志勇;廖杰;赵玉兰;帅秀蓉 刊期: 2004年第05期

  • 猪垂体不同剂量照射后血清激素和靶腺器官的反应

    目的:探讨垂体不同单次剂量照射后的放射反应. 方法:采用依附于LINAC的SRS系统对幼年小型猪垂体一次施照,观察照射后血清睾酮、T3、T4、皮质醇水平的动态变化,并对垂体及其靶腺器官进行组织学观察. 结果:照射后血清睾酮水平的降低出现早,15 Gy 以下组在观察期末出现不同程度恢复,20 Gy 组血清睾酮和T4在实验后期呈持续低水平,血清T3和皮质醇水平未出现改变. 结论:垂体腺分泌细胞具有不同的放射敏感性,5 Gy 照射即可抑制促性腺激素分泌细胞,但 15 Gy 照射后仍能部分恢复.对于单次 20 Gy 的剂量照射,ACTH分泌细胞有较好的耐受,促甲状腺素(TSH)分泌细胞轻度受抑.

    作者:乔广宇;王迎选;周定标;汪力 刊期: 2004年第05期

  • 家兔颈动脉粥样硬化模型颈动脉内膜剥脱术后的早期再狭窄过程

    目的:观察家兔颈动脉粥样硬化模型颈动脉内膜剥脱术(CEA)后早期再狭窄随时间的变化过程,为临床预防再狭窄提供依据.方法:以干燥气体损伤(120 ml/min,持续充气 15 min)结合高脂饲料喂养 2 个月(6%花生油、2%胆固醇加入普通饲料,按每只 100 g/d 进食饲料)制作家兔颈动脉粥样硬化模型.对模型家兔进行CEA手术,分别于术后1d、5d、10d、20d、30d、40d、60d 处死取材,对组织切片进行HE染色、PCNA、α-SMA、PDGF-A、TGFβ、CD3、CD68免疫组化染色;结果:CASS模型CEA术后早期再狭窄在不同时间的主要表现为:术后 1~2 d 血栓形成;术后 5 d 以内为急性炎症,以后为慢性炎症;5~40 d 为平滑肌细胞增殖;60 d 时中膜显著内膜化不易分辨.结论:CASS模型CEA术后再狭窄大约分为 4 个时期:术后 1~2 d 为血栓形成期;术后 5 d 以内为急性炎症期;5~40 d 为平滑肌细胞增殖期;60d 为后期表现.

    作者:佟怀宇;周定标;钟定荣;石怀银 刊期: 2004年第05期

  • Nd∶YAG激光治疗支气管内膜结核24例

    1 临床资料1.1 一般资料 24 例支气管内膜结核患者,男 14 例,女 10 例,年龄 14~46 岁,平均 30 岁.其中单纯支气管内膜结核患者 5 例,并发于肺结核者 19 例.

    作者:王金河;刘金伟;王心静;裴宁;仲斌 刊期: 2004年第05期

  • 内毒素致兔急性肺损伤及磷脂酶A2致伤机制的研究

    目的:研究大肠杆菌内毒素致兔急性肺损伤(ALI)发病机制及磷脂酶A2(PLA2)激活在此病理生理过程中的致伤机制.方法:大耳白兔随机分为对照组、内毒素致伤组、内毒素致伤+氯喹干预组.静脉注射内毒素(500μg/kg)引起兔ALI,测定血清及肺组织中PLA2活性、动脉血气分析及肺组织病理改变.观察PLA2抑制剂氯喹对ALI病理生理过程的影响.结果:静注内毒素后兔出现氧分压下降 (P<0.05)、肺水肿、肺内炎细胞浸润、透明膜形成、上皮细胞及内皮细胞受损等早期ALI病理生理改变.损伤组兔血清及肺组织中PLA2活力高于静注内毒素前及正常对照组(P<0.01).氯喹干预组氧分压未见下降,血清及肺组织中PLA2活力较对照组增高(P<0.01)但低于内毒素组(P<0.05).结论:静脉注射内毒素可诱导兔早期ALI,PLA2激活在此病理生理过程中起了重要作用.应用PLA2抑制剂氯喹可抑制内毒素致伤后PLA2激活,从而缓解内毒素引起的低氧血症,减轻早期肺损伤.

    作者:江宏;汪建新;薛庆亮 刊期: 2004年第05期

  • 奥普利侬对细菌性腹膜炎致大鼠膈肌疲劳的影响

    目的:观察预防性腹腔注射奥普利侬对大白鼠细菌性腹膜炎致膈肌疲劳肌张力的影响.方法:用肓肠结扎术加穿孔(CLP)方法制成大白鼠腹膜炎模型.分组为(n=10):Ⅰ. 假手术对照组;Ⅱ. CLP组;Ⅲ. CLP+10mg·kg-1 奥普利侬(Olprinone)组;Ⅳ. CLP+20 mg*kg-1 奥普利侬组.实验时,首先用10、20、50、100 Hz(刺激电压为6V,时间为1s)直接刺激肌肉并记录数值;然后,采用 6 V、2 ms 单刺激直接刺激肌肉,并记录峰颤张力(PTT)、达峰颤搐时间(TPT)和半量松弛时间(1/2RT)值.通过公式将记录的肌张力转换成单位面积所产生的肌张力值. 结果:与对照组相比,各种刺激所引起的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组膈肌单位面积产生的肌张力显著降低(P<0.05).Ⅲ、Ⅳ组与Ⅱ组相比,两者之间没有显著差异(P>0.05).而6V、2ms单刺激所引起的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组TPT和1/2RT改变与对照组相比没有明显变化(P>0.05),PTT值明显下降(P<0.05).结论:细菌性腹膜炎可使膈肌发生疲劳,预防性单次给予奥普利侬不能缓解大白鼠CLP腹膜炎引起的膈肌疲劳.

    作者:刘培中;曹江北;米卫东;张宏 刊期: 2004年第05期

  • 重组人Versican G1蛋白在昆虫细胞中的表达

    目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统制备人蛋白聚糖Versican G1区(VG1)的重组蛋白.方法:将编码人VG1蛋白343个氨基酸的基因插入pFastBac1载体,转化大肠杆菌DH10Bac,提取重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞,获取含重组人VG1蛋白的杆状病毒进一步感染昆虫细胞进行蛋白表达.通过Ni-NTA层析柱对重组蛋白进行纯化.免疫印迹方法对昆虫细胞培养上清中的蛋白成分进行鉴定,采用透明质酸结合实验确定重组人VG1蛋白的生物活性.结果:人VG1基因在昆虫细胞中获得高水平表达,重组人VG1蛋白具免疫原性和与透明质酸结合的生物活性.结论:昆虫细胞表达的重组人VG1蛋白具有良好的免疫原性和生物活性.

    作者:朱剑;黄烽;张一平 刊期: 2004年第05期

  • 两种包扎法预防乳腺癌根治术后皮下积液的疗效观察

    目的:评价乳腺癌根治术后局部加压包扎法及弹力绷带加压包扎法预防皮下积液的效果.方法:180 例乳腺癌根治术患者随机分两组:80 例采用局部加压包扎法,100 例采用弹力绷带加压包扎法,两组均行改良根治术.结果:局部加压包扎法和弹力绷带加压包扎法出现皮下积液分别为1.3%和18.0%,出现皮瓣坏死分别为0和10%.结论:与弹力绷带加压包扎法对比,局部加压包扎法预防皮下积液及皮瓣坏死疗效可靠,效果满意.

    作者:张艳君;晋援朝;李席如;彭正;臧传波 刊期: 2004年第05期

  • 医学教育多媒体信息资源表征体系研究

    本研究以医学教育多媒体信息资源的建设为出发点,紧密给合我国医学院校、医院教学训练的实际情况,就多媒体信息资源的表征体系及分类编目提出了规范性的解决方案.

    作者:郭光友;潘新华;吕小定;梁军 刊期: 2004年第05期

  • 藻酸盐单克隆抗体的制备及鉴定

    目的:制备、筛选稳定分泌藻酸盐单抗的杂交瘤克隆.方法:应用藻酸盐 BSA 程序免疫 BALB/C 小鼠,将其脾脏与骨髓瘤细胞 SP2/0 融合,采用采用 ELISA 方法筛选阳性克隆.抗体的检测分别采用琼脂糖双向扩散试验和 ELISA 方法. 结果:得到两株分泌藻酸盐单抗的杂交瘤克隆,分别分泌 IgM 和 IgG.

    作者:王睿;柴栋;裴斐;方翼;朱曼 刊期: 2004年第05期

  • APA微囊植入小鼠体内的生物相容性和急性毒性观察

    目的:了解植入型免疫隔离膜APA(海藻酸盐-多聚赖氨酸-海藻酸盐)微囊的生物相容性和急性毒性.方法:将不同剂量的APA微囊或APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC)植入小鼠背部皮下或腹腔内,观察移植后不同时间微囊形态的变化,并观察移植后小鼠的日常活动、进食情况和体重,以断颈法将小鼠处死,取其心、肝、脾、肺、肾、小脑、小肠和肌肉等内脏器官.结果:空微囊植入小鼠皮下或腹腔 4 个月后大部分保持完好; APA-BCCs植入小鼠背部皮下或腹腔 2 个月后大部分微囊保持完好,但移植后 4 个月部分微囊被包绕或破损;大剂量、超剂量植入APA微囊的情况下,小鼠的日常活动和进食情况均正常,14 d 时肉眼见小鼠腹腔内无明显异常,病理学检查主要器官未见异常改变.结论:APA-BCCs微囊材料对肌体无明显毒副作用,具有较好的生物相容性.

    作者:李新建;薛毅珑;陆庆国;李雁凌;罗芸;崔忻;高宇红 刊期: 2004年第05期

  • 低温保存皮肤的细胞骨架研究进展

    细胞骨架是细胞质内蛋白细丝组成的网状结构,由微丝、微管、中间丝和一些辅助蛋白组成,它决定和维持细胞的形态.皮肤在低温保存时组织细胞体积发生较大变化,由于细胞骨架的存在,使其没有足够的顺应性而受损.细胞骨架是组织细胞低温损伤的重要因素,对于提高皮肤低温保存效果意义重大.

    作者:蔡宏;贾晓明 刊期: 2004年第05期

解放军医学院学报杂志

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主管:解放军总医院-解放军医学院

主办:解放军总医院-解放军医学院