学术投稿

基因重组EB病毒gp125抗原的鼻咽癌免疫荧光血清学诊断方法

薛绍礼;皮国华;谷淑燕

关键词:重组痘苗病毒, Epstein-Barr病毒gp125, 鼻咽癌
摘要:目的尝试用基因工程表达抗原建立鼻咽癌诊断血清学方法.方法用重组痘苗病毒感染细胞为抗原片,用免疫荧光法检测鼻咽癌患者、其他肿瘤患者和正常人血清抗Epstein-Barr病毒(EBV)IgA/gp125抗体,同时用传统方法检测其IgA/VCA、IgA/EA和IgA/MA抗体,将所得结果进行比较.结果其灵敏度远远高于IgA/EA,接近于IgA/MA和IgA/VCA,特异性高于IgA/MA和IgA/VCA,接近于IgA/EA.结论建立了一种可用于鼻咽癌的诊断和高发人群普查的灵敏、特异、经济、简便的方法.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • 细胞因子在子宫内膜异位症发生、发展过程中作用的研究进展

    子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是生育期妇女的常见疾病,定义为具有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆粘膜以外的身体其他部位.EMS虽为良性病变,却具有类似恶性肿瘤的远处转移和种植生长能力.近年来,EMS的发病率逐年上升,但至今为止其发病机制尚不十分清楚.普遍接受的看法认为:EMS发生、发展的全过程都存在局部盆腔的炎症反应,并伴有腹腔内环境中免疫相关细胞功能的改变[1].

    作者:董玉楠;冷维春 刊期: 2004年第05期

  • 比对试验在血细胞分析质量控制中的应用

    近年来,由于血细胞分析仪操作简单、测定快捷、结果准确、精密度好已逐渐取代传统的手工操作.随着检测项目和数量不断增加,同一实验室拥有多种品牌多型号、同品牌同型号多台仪器的情况较为普遍.

    作者:普程伟;朱鹰;尚柯;王建中 刊期: 2004年第05期

  • 降钙素原测定在小儿肠炎鉴别诊断中的应用

    目的探讨血清降钙素原(PCT)在小儿肠炎中的诊断意义.方法采用半定量固相免疫测定法测定58例小儿肠炎患者血清PCT水平.结果以血清PCT≥0.5ng/ml为细菌感染阳性阈值,则细菌性痢疾与轮状病毒性肠炎血清PCT水平相比较P>0.05,无显著性差异,特异性为94.7%.中毒型细菌性痢疾与普通型细菌性痢疾比较P<0.005,有极显著性差异.普通型细菌性痢疾的敏感性为20.0%,阳性预测值为85.7%,阴性预测值为42.9%;中毒型细菌性痢疾的敏感性88.9%,阳性预测值为88.9%,阴性预测值为94.7%.结论血清PCT在鉴别普通型细菌性痢疾与轮状病毒性肠炎时价值不大,但是PCT是细菌感染的重要指标,其诊断价值在于可反映急性细菌性痢疾的严重程度,PCT显著升高可作为中毒型细菌性痢疾的一个指标,具有一定的临床应用价值.

    作者:陈小剑;陈益平;李芳;陈晓睛 刊期: 2004年第05期

  • 血清固定梅毒患者细胞免疫研究

    目的检测血清固定梅毒患者外周血T淋巴细胞亚群及NK淋巴细胞,探讨梅毒患者血清固定与细胞免疫的相关性.方法应用流式细胞仪检测22例血清固定梅毒患者外周血T淋巴细胞亚群及NK淋巴细胞,并与30例健康人群的检测结果相对照.结果血清固定梅毒患者外周血CD3及CD4淋巴细胞均低于对照组,差异有显著性(P<0.05);而CD8及NK淋巴细胞高于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论血清固定梅毒患者存在明显的细胞免疫不平衡和免疫抑制;这种细胞免疫不平衡和抑制可能为梅毒患者血清固定的主要原因.

    作者:杨日东;蔡川川;田广南;黎小东;张文君;陈展琳;梁慕兰 刊期: 2004年第05期

  • 人血清N端脑钠肽水平参考值范围及其测定稳定性的初步调查

    目的对人血清N端脑钠肽(NT-proBNP)水平参考值范围及其测定稳定性进行初步调查.方法采用电化学发光法,测定102名健康成年人血清NT-proBNP水平,分析各项生理指标对NT-proBNP的影响,建立NT-proBNP的参考值范围,并对抗凝剂和蛋白酶抑制剂对NT-proBNP测定的影响以及NT-proBNP在不同温度下的稳定性进行初步探讨.结果NT-proBNP随着年龄增大而升高,二者相关(r=0.331,P=0.001).女性NT-proBNP水平(61.5±27.2)明显高于男性(32±22.3,P<0.01).以第97.5%位数为参考值上限,50岁以下,男性为56 pg/ml,女性为95 pg/ml;50岁以上,男性为98pg/ml,女性为116pg/ml.不同采血管测定,与血清组比,Aprotinin组略高,是血清组的1.016倍(r=1.000),EDTA组则比血清组低7.06%(r=1.000).25℃NT-proBNP活性可稳定3天,4℃可稳定5天,-20℃和-70℃NT-proBNP至少可以稳定1个月.结论年龄、性别是影响人血清NT-proBNP水平的重要生理因素,应根据不同年龄和性别设立NT-proBNP的参考值范围.NT-proBNP测定可用ED/TA抗凝管或无抗凝剂的采血管,其免疫学活性在各种温度条件下均很稳定.

    作者:史晓敏;宋以信;徐国宾;夏铁安 刊期: 2004年第05期

  • PCR技术检测弱D15型

    目的探讨采用DNA技术鉴定弱D15型.方法根据文献和GenBank报道的基因序列,针对弱D15型基因,设计一对特异性引物,并引入一对内对照引物,建立简易的聚合酶链式反应(PCR)技术检测弱D15型,之后用于检测10份Rh阴性、10份Rh阳性、10份Del样品和1例弱D15型DNA样品.结果除1例弱D15型样品检测为阳性外,其余均为阴性,显示PCR特异性检测弱D15型基因.结论PCR方法简便、快速,能准确鉴定弱D15型,可用于临床常规实验室.

    作者:周一炎;安万新;刘辉;熊文;邵超鹏 刊期: 2004年第05期

  • 细胞学联合病原微生物检测筛查宫颈癌的临床应用研究

    目的探讨Thinprep宫颈液基细胞学联合病原微生物DNA检测筛查宫颈癌临床应用价值,了解与肿瘤相关的病原微生物的感染状况.方法对552例宫颈病变者,用液基标本做薄片细胞学诊断和人乳头瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、沙眼衣原体(CT)、解尿支原体(UU)DNA检测.细胞学诊断采用TBS分级系统,阳性诊断包括意义不明确的不典型鳞状细胞(ASCUS)以上病变,诊断阳性者以阴道镜活检诊断为对照.结果细胞学检出鳞状细胞癌(SCC)5例,鳞状上皮内高度病变(HSIL)70例,鳞状上皮内低度病变(LSIL)45例,与阴道镜活检阳性符合率分别为100%(5/5)的SCC,93.3%(70/75)的HSIL,78.9%(45/57)的LSIL.PCR荧光法检出HPV、HSV-Ⅱ、CT、UU DNA感染率分别为21.0%(116/552),10.3%(57/552)、21%(116/552)、16%(88/552),92例HPV感染者细胞学诊断≥ASCUS,占病理活检阳性率的66.7%(92/138).结论宫颈液基细胞标本收集方法,一次性取材能做细胞学和病原微生物(HPV、HSV-Ⅱ、CT、UU)DNA检查.Thinprep液基细胞学联合病原微生物DNA检测,能提高宫颈癌和癌前病变的诊断率,是宫颈癌筛查的重要手段.HPV感染是宫颈癌及癌前病变发生发展的首要因素,HSV-Ⅱ、CT、UU、滴虫、霉菌感染可能是癌变过程的辅助因子.

    作者:黄卫彤;韦红卫;黄玮;吴惠珍;常正义;韦英群 刊期: 2004年第05期

  • 外周血cTnI-mRNA监测病毒性心肌损伤价值的实验研究

    目的研究外周血心肌型肌钙蛋白(cTnI)-mRNA分析在监测病毒性心肌损伤发生发展和预后中的价值.方法于BALB/c小鼠腹腔接种1×109TCID50柯萨奇病毒B3(CVB3)液诱发心肌损伤发生,分别在CVB3感染后第3、6、9、12、15、18和21天采集外周血后处死小鼠,留取鼠心脏作病理组织学检查,并以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析心肌及外周血中cTnI基因的表达状态.结果CBV3感染后,鼠心肌及循环血cTnI-mRNA表达上调,与心肌细胞发生肿胀、炎性细胞浸润、核固缩及碎裂、变性、坏死、钙化等组织学改变相关.cTnI-mRNA基因扩增,心肌组织全数阳性;外周血阳性率在对照组及感染后的第3、6、9、12、15、18和21天分别为0%、0%、0%、16.7%、40%、71.4%、83.3%和87.5%.结论病毒性心肌损伤时cTnI-mRNA上调表达,循环血cTnI-mRNA为监测心肌损伤发生发展及预后的灵敏基因标志物.

    作者:朱健华;姚登福;高增栋;吴玮;吴信华;邱历伟 刊期: 2004年第05期

  • AT基因13387-9delG突变引起遗传性抗凝血酶缺陷症的分子病理机制研究

    目的研究AT基因13387-9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制.方法用大引物法构建13387-9delG突变体AT重组表达质粒(ATM),并将其和正常AT重组表达质粒(ATN)分别用Supeffect试剂转染COS7细胞或CHO细胞,进行体外表达试验、脉冲追踪试验以及细胞免疫荧光染色.结果ATM转染的COS7细胞培养上清液中检测不到AT抗原,而在细胞裂解液中,其AT抗原仅为转染ATN的27.13%.脉冲追踪试验发现,在ATM转染的COS7细胞培养上清液中,检测不到35S标记的AT蛋白,在chase 0 min时,ATM细胞内35S标记的AT蛋白只有ATN的27.8%;在chase 180 min时,ATM细胞内35S标记的AT蛋白为0 min时的50%左右.细胞免疫荧光试验的结果表明,ATM转染的CHO细胞内荧光强度明显低于ATN转染的CHO细胞.结论编码的突变AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解,是AT基因13387-9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制.

    作者:傅启华;王文斌;丁秋兰;周荣富;武文漫;胡翊群;王学锋;严力行;王振义;王鸿利 刊期: 2004年第05期

  • 常用抗风湿药物对生化检验的干扰和影响

    目前临床上常用的药物达7 000种之多,抗风湿药物也有数十种,已经发现不少药物对临床生化检验有不同程度的干扰,可能造成检验结果的不准确性或临床上的误诊[1],因此,药物干扰临床检验分析等问题,越来越受到重视.本文探讨本地区常用的抗风湿药物:保泰松、消炎通片、阿斯匹林等药物因素对部分生化检验结果的干扰和影响.

    作者:库热西江·托呼提 刊期: 2004年第05期

  • IFN-α2b治疗慢性丙型肝炎过程中sICAM-1、sE-selectin水平的变化

    目的检测sICAM-1和sE-selectin水平的变化在判断干扰素-α 2b(IFN-α2b)治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者疗效中的意义.方法采用ELISA法检测32例CHC患者治疗前和治疗后不同时期血清sICAM-1和sE-selectin水平,全自动生化分析仪检测ALT水平.结果CHC患者治疗前血清sICAM-1和sE-selectin水平均显著高于正常对照组(P<0.01),且均与ALT活性密切正相关(r1=0.891 4,rE=0.7946);IFN-α2b治疗有效者治疗前血清sICAM-1和sE-selectin水平均显著高于无效者(P<0.01);治疗后各阶段有效者的sICAM-Ⅰ和sE-selectin水平都明显下降(P<0.001),无效者则差异不明显(P>0.05).结论血清sICAM-1、sE-selectin水平可用于CHC患者炎症活动的监测,并可作为预测IFN-α2b治疗疗效的新指标.

    作者:陈文豪;滕菁;徐文宏 刊期: 2004年第05期

  • 固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素A

    目的建立固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素A的方法.方法全血中的环孢素A采用Waters Sep-Pak C18萃取小柱提取浓缩,色谱柱Waters Nova-Pak C18;流动相乙腈:甲醇:水(320:30:150,V/V);流速0.65ml/min;检测波长206 nm,环孢素D作内标.结果方法的回收率为95.8%,相对标准差(RSD)为7.5%,线性范围为50~2 000 μg/L,r=0.999 9.结论该方法特异、敏感、准确,可用于全血环孢素A的测定.

    作者:赵虹;荣墨克;郎志刚;冀致敏 刊期: 2004年第05期

  • TDI-FP技术检测耐乙胺丁醇结核分支杆菌embB306点突变

    目的应用TDI-FP技术分析结核分支杆菌embB 306点突变与乙胺丁醇耐药性的关系,并建立一种准确、快速的诊断结核分支杆菌乙胺丁醇耐药的新方法.方法对临床82例耐多药结核病患者所感染的结核分支杆菌菌株进行常规培养和药敏实验;提取结核分支杆菌DNA,并PCR扩增205 bp的embB基因片段,消化降解掉PCR产物中残余的dNTPs和引物,进行模板指导的荧光标记终止碱基掺入反应;应用Victor2测定反应产物的荧光偏振值,分析所有样品的embB基因306位点的基因型;对分析结果进行测序验证.结果5例乙胺丁醇高度耐药患者中有3例所感染的结核分支杆菌发生embB 306的ATG→GTG突变;47例乙胺丁醇低度耐药患者中有15例为embB 306突变和未突变的混合感染;30例乙胺丁醇敏感患者的结核分支杆菌未发现embB 306突变.测序结果与实验相符合.结论embB 306突变与结核分支杆菌对乙胺丁醇产生耐药性密切有关;应用TDI-FP技术可以准确、快速简便检测embB 306突变,在结核分支杆菌耐乙胺丁醇的临床诊断中具有潜在的应用前景.

    作者:王琰;张文红;赵锦荣;白玉杰;阎小君 刊期: 2004年第05期

  • 80例贫血患者血红蛋白电泳分析

    目的通过对80例非急性失血性贫血患者血红蛋白电泳分析,探讨血红蛋白电泳在不同贫血病例中的意义.方法采用法国sebia公司HYDRASYS全自动电泳系统对80例非急性失血性贫血患者(Hb:37~93g/L,平均68g/L)进行血红蛋白电泳,测定HbA2和HbF值,并用BECKMAN-COULTER公司Gen'S血球计数仪测定各标本的血液学参数.结果非缺铁性小细胞性贫血患者与缺铁性贫血组、正常组比较HbA2明显增高,HbF正常或增高,MCV值与正常组比较明显减低,白血病患者与正常组比较HbF值可增高.结论血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中有极其重要的作用,且在其它血液疾病的鉴别诊断、疗效判断和预后分析等方面也具有一定的作用.

    作者:沈波;潘晓 刊期: 2004年第05期

  • 苯乙酸对结直肠癌细胞中C-myc基因表达的影响

    目的观察诱导分化剂苯乙酸(Phenylacetate,PA)抑制结直肠癌细胞HCT-8增殖过程中C-myc基因表达的变化.方法体外细胞培养,运用流式细胞技术观察苯乙酸对HCT-8细胞凋亡的影响.应用原位分子杂交方法观察应用PA后对HCT-8细胞C-myc mRNA表达的情况.结果PA组HCT-8细胞G1期比例从32.3%增加到61.0%,S期比例从59.6%下降到29.7%.PA治疗后HCT-8细胞C-myc mRNA表达阳性表达率为(12.05±7.92)%,显著低于非治疗组中的阳性率(55.15±21.64)%,P<0.01.通过细胞周期的检测发现,PA抑制大肠癌细胞HCT-8增殖的方式为抑制细胞周期G1期比例.结论PA通过下调结直肠癌细胞C-myc mRNA的生成以及细胞生长G1期阻滞在肿瘤诱导分化治疗方面发挥作用.

    作者:周伟民;姜涛;曲仁伟 刊期: 2004年第05期

  • 大肠杆菌类脂A及抗类脂A抗体的制备及鉴定

    目的比较不同剂量抗原、不同免疫途径类脂A抗体的产生.方法应用水解法制备出大肠杆菌的类脂A作为抗原,分别进行皮下免疫和静脉注射免疫.结果两种免疫方法所获得的抗血清效价相同,静脉免疫途径获得抗体历程时间短,抗原制备相对简单.结论就获得同等效价抗类脂A抗体的方法而言,静脉免疫途径较皮下免疫途径简易、快速.

    作者:于艳辉;陈达峰;张桂荣;张忆华 刊期: 2004年第05期

  • 尿脱落细胞DNA流式细胞术分析对膀胱癌诊断的临床意义

    目的探讨尿脱落细胞DNA分析在膀胱癌诊断中的临床意义.方法利用流式细胞仪对良性血尿、膀胱肿瘤及膀胱癌患者尿脱落细胞进行DNA倍体和SPF分析.结果良性血尿患者为正常二倍体DNA分析图谱.膀胱肿瘤患者二倍体肿瘤22例,异倍体肿瘤4例;而膀胱癌患者二倍体肿瘤8例,异倍体肿瘤38例;膀胱癌、膀胱肿瘤患者的SPF(15.53±6.54,9.37±5.05)明显高于良性血尿患者(5.67±2.48,P<0.001,P<0.001),而膀胱癌患者的SPF明显高于膀胱肿瘤(P<0.001).结论尿脱落细胞DNA分析可望成为诊断膀胱癌的一种辅助方法.

    作者:邱莲女;周永列;林慧君 刊期: 2004年第05期

  • 抗环瓜氨酸肽抗体及相关自身抗体在类风湿性关节炎诊断中的应用评价

    目的评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及其相关自身抗体对诊断类风湿性关节炎(RA)的敏感性和特异性以及在临床上的意义.方法收集112例血清标本,包括RA64例,系统性红斑狼疮(S比)20例,骨关节炎(OA)16例,强直性脊柱炎(AS)12例,正常对照30例,检测抗CCP、抗Sa、抗核周因子(APF)和类风湿因子(RF).结果4种自身抗体对诊断RA的敏感性和特异性分别为:抗CCP51.6%和97.9%;抗Sa 46.9%和100%;APF 48.4%和97.9%;RF 56.3%和83.3%;敏感性无显著性差异(P>0.05),抗CCP、抗Sa和APF诊断RA特异性无显著性差异(P>0.05),但三者均高于RF(P<0.01).RF阳性率在RA患者抗CCP阳性组和阴性组有显著性差异(P<0.01).而抗Sa和APF则无显著性差异(P>0.05).结论抗CCP是RA的又一个特异性抗体,联合检测抗CCP及RF对于RA的诊断与早期诊断具有一定的临床价值.

    作者:张建明;丁玲华;金跃;葛志中 刊期: 2004年第05期

  • 阿托伐他汀对肾小球硬化大鼠肾脏保护作用的研究

    目的观察阿托伐他汀对进行性肾小球硬化大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制.方法用免疫组织化学检测肾组织胶原Ⅳ、纤维连接蛋白(FN);用RT-PCR检测肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)和TIMP-2mRNA的表达.结果阿托伐他汀能降低肾小球硬化指数,减少胶原Ⅳ、FN表达,减少尿蛋白排泄,降低血胆固醇(P<0.01)、低密度脂蛋白和肌酐水平,增加MMP-2mRNA的表达,减少TIMP-1和TIMP-2mRNA的表达.结论阿托伐他汀可能通过减少5/6肾切除大鼠尿蛋白排泄量,纠正脂质代谢紊乱以及减轻肾小球硬化细胞外基质(ECM)的聚积等而延缓肾功能减退.

    作者:傅增泮;刘丽秋 刊期: 2004年第05期

  • 电化学发光法检测乙型肝炎患者血清标志物与HBV DNA定量关系的研究

    电化学发光技术检测乙型肝炎(乙肝)血清标志物较普通的ELISA法更为灵敏,但其检测的仍然是乙肝的表型指标,只能提供HBV存在的间接证据.随着分子生物学技术的发展,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测技术逐渐应用于临床实验诊断,直接反映了乙肝病毒的分子水平,使乙肝病毒核酸的定量测定成为可能[1].本文运用该技术检测了260例乙肝患者的血清HBV DNA含量,旨在探讨其与乙肝标志物的关系,为临床诊断、治疗及疗效观察提供新的信息.

    作者:刘宏景;李沛;刘宝根;张新萍;周丽萍 刊期: 2004年第05期

中国实验诊断学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院