周一炎；安万新；刘辉；熊文；邵超鹏
目的建立固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素A的方法.方法全血中的环孢素A采用Waters Sep-Pak C18萃取小柱提取浓缩,色谱柱Waters Nova-Pak C18;流动相乙腈:甲醇:水(320:30:150,V/V);流速0.65ml/min;检测波长206 nm,环孢素D作内标.结果方法的回收率为95.8%,相对标准差(RSD)为7.5%,线性范围为50～2 000 μg/L,r=0.999 9.结论该方法特异、敏感、准确,可用于全血环孢素A的测定.
作者：赵虹；荣墨克；郎志刚；冀致敏 刊期： 2004年第05期
近年来建立的荧光定量PCR方法,为定量观察病毒水平提供了灵敏指标.为探讨乙型肝炎患者血清中乙肝病毒标志物与HBVDNA载量的关系,以及HBVDNA载量与肝功能改变的关系,我们采用这一方法对乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量进行了检测,并对以上所述的相关性进行了探讨.
作者：江浪进 刊期： 2004年第05期
目的探讨自体乙肝疫苗致敏的树突状细胞(DC)对慢性乙型肝炎(CHB)免疫治疗的作用.方法取患者外周血20ml分离单个核细胞,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)进行DC体外扩增,于培养第5天加入50μg/ml乙型肝炎疫苗,7天收获细胞.34例慢性乙肝患者根据年龄和发病时间分为治疗1、2、3组,皮内回输DC.对照组患者注射等量生理盐水,均每周1次,连续8次.于回输DC后2周检测患者血清乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量.结果培养可得到形态及功能典型的DC,治疗1、2、3组患者回输DC后血清HBV-DNA拷贝数均显著低于对照组(P＜0.01),总应答率58.8%(20/34),对照组输注前后没有明显差异(P＞0.05);治疗1组与3组相比HBV-DNA定量拷贝数降低幅度有显著性差异(P＜0.01),治疗1组与2组、2组与3组相比无显著性差异(P＞0.05).结论经乙型肝炎疫苗致敏的DC回输患者后,其血清HBV-DNA含量明显降低,且降低幅度与感染病毒时间和/或患者年龄有一定关系.
作者：赵岐刚；田小侠；张书广 刊期： 2004年第05期
目的探讨基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物TIMPs在葡萄胎恶变预测中的价值.方法采用免疫组化SP法测定39例葡萄胎(其中11例发生恶变)和17例正常相同孕周的绒毛组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达及分布.结果正常绒毛组织、葡萄胎组织的滋养细胞胞浆中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2均有表达.MMP-2、MMP-9在葡萄胎发生恶变组的表达明显强于正常绒毛组和葡萄胎未发生恶变组,而TIMP-1,TIMP-2在正常绒毛组和葡萄胎组之间表达无显著性差异.MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1在葡萄胎恶变组织中的表达强于在正常绒毛组织的表达.结论在葡萄胎清宫组织中进行MMP-2、MMP-9的检测,有望成为判断葡萄胎日后恶变的一项预测指标.
作者：傅晓华；石一复；崔金全 刊期： 2004年第05期
目的通过对80例非急性失血性贫血患者血红蛋白电泳分析,探讨血红蛋白电泳在不同贫血病例中的意义.方法采用法国sebia公司HYDRASYS全自动电泳系统对80例非急性失血性贫血患者(Hb:37～93g/L,平均68g/L)进行血红蛋白电泳,测定HbA2和HbF值,并用BECKMAN-COULTER公司Gen'S血球计数仪测定各标本的血液学参数.结果非缺铁性小细胞性贫血患者与缺铁性贫血组、正常组比较HbA2明显增高,HbF正常或增高,MCV值与正常组比较明显减低,白血病患者与正常组比较HbF值可增高.结论血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中有极其重要的作用,且在其它血液疾病的鉴别诊断、疗效判断和预后分析等方面也具有一定的作用.
作者：沈波；潘晓 刊期： 2004年第05期
目的检测sICAM-1和sE-selectin水平的变化在判断干扰素-α 2b(IFN-α2b)治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者疗效中的意义.方法采用ELISA法检测32例CHC患者治疗前和治疗后不同时期血清sICAM-1和sE-selectin水平,全自动生化分析仪检测ALT水平.结果CHC患者治疗前血清sICAM-1和sE-selectin水平均显著高于正常对照组(P＜0.01),且均与ALT活性密切正相关(r1=0.891 4,rE=0.7946);IFN-α2b治疗有效者治疗前血清sICAM-1和sE-selectin水平均显著高于无效者(P＜0.01);治疗后各阶段有效者的sICAM-Ⅰ和sE-selectin水平都明显下降(P＜0.001),无效者则差异不明显(P＞0.05).结论血清sICAM-1、sE-selectin水平可用于CHC患者炎症活动的监测,并可作为预测IFN-α2b治疗疗效的新指标.
作者：陈文豪；滕菁；徐文宏 刊期： 2004年第05期
临床上对类风湿因子(RF)与抗核抗体(ANA)的认识已有报道.RF是抗人或动物IgG分子Fc段上的自身抗体[1],ANA是自身对各种细胞核成分产生相应抗体的总称.RF阳性的发生率与ANA滴度的升高存在一定相关性,本文测定RF浓度及其ANA滴度分析各组水平分布情况,探讨它们之间的关系以作临床参考.
作者：曾少冰；宾利 刊期： 2004年第05期
目的探讨尿脱落细胞DNA分析在膀胱癌诊断中的临床意义.方法利用流式细胞仪对良性血尿、膀胱肿瘤及膀胱癌患者尿脱落细胞进行DNA倍体和SPF分析.结果良性血尿患者为正常二倍体DNA分析图谱.膀胱肿瘤患者二倍体肿瘤22例,异倍体肿瘤4例;而膀胱癌患者二倍体肿瘤8例,异倍体肿瘤38例;膀胱癌、膀胱肿瘤患者的SPF(15.53±6.54,9.37±5.05)明显高于良性血尿患者(5.67±2.48,P＜0.001,P＜0.001),而膀胱癌患者的SPF明显高于膀胱肿瘤(P＜0.001).结论尿脱落细胞DNA分析可望成为诊断膀胱癌的一种辅助方法.
作者：邱莲女；周永列；林慧君 刊期： 2004年第05期
目的应用TDI-FP技术分析结核分支杆菌embB 306点突变与乙胺丁醇耐药性的关系,并建立一种准确、快速的诊断结核分支杆菌乙胺丁醇耐药的新方法.方法对临床82例耐多药结核病患者所感染的结核分支杆菌菌株进行常规培养和药敏实验;提取结核分支杆菌DNA,并PCR扩增205 bp的embB基因片段,消化降解掉PCR产物中残余的dNTPs和引物,进行模板指导的荧光标记终止碱基掺入反应;应用Victor2测定反应产物的荧光偏振值,分析所有样品的embB基因306位点的基因型;对分析结果进行测序验证.结果5例乙胺丁醇高度耐药患者中有3例所感染的结核分支杆菌发生embB 306的ATG→GTG突变;47例乙胺丁醇低度耐药患者中有15例为embB 306突变和未突变的混合感染;30例乙胺丁醇敏感患者的结核分支杆菌未发现embB 306突变.测序结果与实验相符合.结论embB 306突变与结核分支杆菌对乙胺丁醇产生耐药性密切有关;应用TDI-FP技术可以准确、快速简便检测embB 306突变,在结核分支杆菌耐乙胺丁醇的临床诊断中具有潜在的应用前景.
作者：王琰；张文红；赵锦荣；白玉杰；阎小君 刊期： 2004年第05期
本文综合外固定、口服药物、注射药物应用于家兔的实验性骨折,以观察3组在相同时期内对该实验兔的某些可促进骨折愈合的X线影像学指标的对比,并探讨骨折后促进愈合过程快慢的变化.
作者：刘强；戴彬 刊期： 2004年第05期
电化学发光技术检测乙型肝炎(乙肝)血清标志物较普通的ELISA法更为灵敏,但其检测的仍然是乙肝的表型指标,只能提供HBV存在的间接证据.随着分子生物学技术的发展,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测技术逐渐应用于临床实验诊断,直接反映了乙肝病毒的分子水平,使乙肝病毒核酸的定量测定成为可能[1].本文运用该技术检测了260例乙肝患者的血清HBV DNA含量,旨在探讨其与乙肝标志物的关系,为临床诊断、治疗及疗效观察提供新的信息.
作者：刘宏景；李沛；刘宝根；张新萍；周丽萍 刊期： 2004年第05期
目的探讨乙肝患者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV DNA定量检测及其临床意义.方法用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,细胞计数并提取单个核细胞及相应血浆中HBV DNA,用荧光实时定量PCR法检测单个核细胞和血浆中HBV DNA含量.结果对188例乙型肝炎患者的外周血单个核细胞和相应血浆中HBV DNA定量检测,结果发现:①外周血单个核细胞HBVDNA检出率为80.3%,血浆中HBVDNA检出率为72.9%,两者检出率无差异(x2=3.13,P＞0.05),检出结果具有一致性(x2=8.252,P＜0.01).②在HBV血清学标志为HBsAg(+)HBeAg(+)到HBsAg(+)HlcAb(+)各组中,其血浆和PBMCs中HBV DNA检出率和含量均逐渐降低,各组中血浆和PBMCs中HBVDNA含量间具有相关性(P＜0.05).③在不同类型乙型肝炎患者中,除18例急性肝炎患者的血浆和PBMCs中均检出HBV DNA并含量较高外,在其余的病例中,随着病情严重,PBMCs中的检出率明显升高而血浆中的检出率明显降低;而除急性肝炎组PBMCs和血浆中HBV DNA含量不具有相关性外(P＞0.05),其它各组间均具有相关性(P＜0.05).结论PBMC中的HBV DNA持续存在在乙肝患者的发病机制起着重要作用,PBMCs中的HBV DNA检测在发病机制和治疗监测中可能有重要意义.
作者：陶志华；陈晓东；王忠永；周武；戴菁；谢耀盛；袁谦 刊期： 2004年第05期
目的尝试用基因工程表达抗原建立鼻咽癌诊断血清学方法.方法用重组痘苗病毒感染细胞为抗原片,用免疫荧光法检测鼻咽癌患者、其他肿瘤患者和正常人血清抗Epstein-Barr病毒(EBV)IgA/gp125抗体,同时用传统方法检测其IgA/VCA、IgA/EA和IgA/MA抗体,将所得结果进行比较.结果其灵敏度远远高于IgA/EA,接近于IgA/MA和IgA/VCA,特异性高于IgA/MA和IgA/VCA,接近于IgA/EA.结论建立了一种可用于鼻咽癌的诊断和高发人群普查的灵敏、特异、经济、简便的方法.
作者：薛绍礼；皮国华；谷淑燕 刊期： 2004年第05期
临床上,经常发现有的儿童晨尿中红细胞偏高,尿液离心后红细胞超过5个/HPF(10个/μl).在一天中,经过动态尿常规检测,可对血尿来源做初步分析,对下一步诊断和治疗意义很大.
作者：杨光 刊期： 2004年第05期
细胞核仁形成区嗜银蛋白的Ag-NORs是一种酸性非组蛋白,由B23、核仁素、纤维素和RNA多聚酶组成[1].可与特定的DNA部位结合,解除组蛋白对rDNA转录的抑制作用,从而促进rDNA的转录生成rRNA,可被银染的非组蛋白与rDNA的转录活性密切相关.Ag-NORs是近年来受到广泛重视并应用于肿瘤学研究的一项新指标[2].通过检测外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量可了解T淋巴细胞增殖活性,是反映机体细胞免疫功能状况的可靠手段,对肿瘤患者的鉴别诊断,疗效观察及预后评估进行了探讨.
作者：王香梅；单小云；郑昭景；徐瑞龙 刊期： 2004年第05期
目的对尿液中各种蛋白质进行分离,用于区分尿蛋白类型.方法应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)对36例儿童肾脏疾病患者新鲜晨尿进行分析.结果根据尿蛋白电泳图谱,可区分为部分选择性肾小球性、选择性肾小球性、混合性蛋白尿.36例病例中混合性蛋白尿5例,其中3例以肾小球性为主.25例为部分选择性肾小球性蛋白尿.6例为选择性肾小球性蛋白尿.结论本法具有检测敏感性好,操作简便,省时,经扫描可获半定量结果,且胶片易于保存、便于比较等优点.
作者：张敏华；沈霞 刊期： 2004年第05期
α1-MG属lipocalin家族成员[1],早由Berggard从人的尿中分离得到的一种分子量为26～33kD的棕黄色糖蛋白,在血浆中可与多种血浆蛋白共价结合形成复合物进行运输.编码该蛋白的基因很特别,该基因(AMBP)同时编码α1-MG和胰蛋白酶抑制剂--bikunin.在肝细胞中,α1-MG和bikunin被翻译成相连的前体蛋白之后被剪切开分泌入血.
作者：陆学军；李志艳；徐国宾 刊期： 2004年第05期
目的检测p73、PTEN基因在大肠癌组织中的表达,并研究其临床病理意义.方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测p73、PTEN在40例大肠癌中的表达.结果①DuckesA、B期大肠癌组织与对照组正常大肠黏膜组织p73、PTEN的表达均有非常显著性差异(P＜0.01);DuckesC、D期与A、B期p73、PTEN的表达均有非常显著性差异(P＜0.05).②p73在高、中分化腺癌组与低分化腺癌组阳性率表达无显著性差异(P＞0.05);而PTEN在高、中分化腺癌和低分化腺癌阳性率表达差异具有显著性(P＜0.05).③p73、PTEN在淋巴结转移组与无淋巴结转移组检出阳性率的差异具有显著性(P＜0.05).结论p73、PTEN的表达与大肠癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系;p73、PTEN基因是大肠癌细胞增生活跃的重要影响因素.
作者：李有柱；赵刚；所剑；王权；陈岩 刊期： 2004年第05期
目的观察诱导分化剂苯乙酸(Phenylacetate,PA)抑制结直肠癌细胞HCT-8增殖过程中C-myc基因表达的变化.方法体外细胞培养,运用流式细胞技术观察苯乙酸对HCT-8细胞凋亡的影响.应用原位分子杂交方法观察应用PA后对HCT-8细胞C-myc mRNA表达的情况.结果PA组HCT-8细胞G1期比例从32.3%增加到61.0%,S期比例从59.6%下降到29.7%.PA治疗后HCT-8细胞C-myc mRNA表达阳性表达率为(12.05±7.92)%,显著低于非治疗组中的阳性率(55.15±21.64)%,P＜0.01.通过细胞周期的检测发现,PA抑制大肠癌细胞HCT-8增殖的方式为抑制细胞周期G1期比例.结论PA通过下调结直肠癌细胞C-myc mRNA的生成以及细胞生长G1期阻滞在肿瘤诱导分化治疗方面发挥作用.
作者：周伟民；姜涛；曲仁伟 刊期： 2004年第05期
目的探讨Thinprep宫颈液基细胞学联合病原微生物DNA检测筛查宫颈癌临床应用价值,了解与肿瘤相关的病原微生物的感染状况.方法对552例宫颈病变者,用液基标本做薄片细胞学诊断和人乳头瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、沙眼衣原体(CT)、解尿支原体(UU)DNA检测.细胞学诊断采用TBS分级系统,阳性诊断包括意义不明确的不典型鳞状细胞(ASCUS)以上病变,诊断阳性者以阴道镜活检诊断为对照.结果细胞学检出鳞状细胞癌(SCC)5例,鳞状上皮内高度病变(HSIL)70例,鳞状上皮内低度病变(LSIL)45例,与阴道镜活检阳性符合率分别为100%(5/5)的SCC,93.3%(70/75)的HSIL,78.9%(45/57)的LSIL.PCR荧光法检出HPV、HSV-Ⅱ、CT、UU DNA感染率分别为21.0%(116/552),10.3%(57/552)、21%(116/552)、16%(88/552),92例HPV感染者细胞学诊断≥ASCUS,占病理活检阳性率的66.7%(92/138).结论宫颈液基细胞标本收集方法,一次性取材能做细胞学和病原微生物(HPV、HSV-Ⅱ、CT、UU)DNA检查.Thinprep液基细胞学联合病原微生物DNA检测,能提高宫颈癌和癌前病变的诊断率,是宫颈癌筛查的重要手段.HPV感染是宫颈癌及癌前病变发生发展的首要因素,HSV-Ⅱ、CT、UU、滴虫、霉菌感染可能是癌变过程的辅助因子.
作者：黄卫彤；韦红卫；黄玮；吴惠珍；常正义；韦英群 刊期： 2004年第05期
中国实验诊断学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院
