1,25(OH)2D3对体外人骨髓基质细胞成脂及成骨分化的影响

程力；袁风红

关键词：1, 25(OH)2D3, 骨髓基质细胞, 增殖, 成骨分化, 成脂分化

摘要：目的观察1,25(OH)2D3对骨髓基质细胞(MSCs)的成脂及成骨分化的影响.方法以离心法分离培养人骨髓基质细胞(MSCs),以1,25(OH)2D3作为分化诱导剂对细胞进行干预,采用MTT法测细胞增殖率;测细胞浆碱性磷酸酶(ALP)含量,并用细胞碱性磷酸酶染液试剂盒及苏丹Ⅲ分别对成骨细胞和脂肪细胞进行组织化学染色,计数.结果1,25(OH)2D3干预8天后,实验组的吸光度值低于对照组,二者间有显著差异(P＜0.01).实验组经1,25(OH)2D3干预12天,胞浆ALP含量高于对照组,二者间的差异有显著性(P＜0.01).细胞染色结果表明实验组苏丹Ⅲ+细胞百分比较对照组减少,两组间有显著性差异(P＜0.05);ALP+细胞百分比较对照组增加,二者间的差异有显著性(P＜0.01).结论1,25(OH)2D3对骨髓基质细胞增殖有轻度抑制作用,促进MSCs的成骨分化,抑制其成脂分化,同时上述结果也反映了成骨细胞与脂肪细胞间存在的反变关系,从而进一步表明二者来源于同一前体细胞的可能性.

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抗人膀胱癌双特异性抗体的免疫荧光素标记及生物学活性检测

目的通过直接荧光素标记法和免疫组织化学方法对抗人膀胱癌双特异性抗体(BsAb)的免疫学活性进行检测.方法应用异硫氰酸荧光素(FITC)通过免疫荧光染色技术对抗人膀胱癌双特异性抗体进行免疫荧光标记.应用标记好的免疫荧光双特异性抗体对人膀胱癌组织的石蜡切片进行直接染色,并同时以正常膀胱粘膜标记作为对照组,通过荧光显微镜观察标记显色情况.结果免疫荧光标记后的抗体,通过凝胶过滤法收集PBS洗脱第一个荧光素结合蛋白峰,测定F/P比值约为0.82.标记后抗体对膀胱癌组织及对照组正常组织分别进行标记显色,膀胱癌组织呈黄绿色荧光,而对照组正常组织无任何荧光显色,其中膀胱癌组织切片标记显色率约为90%,正常膀胱组织切片显色率为0,两者相比较,差异极具显著性意义(P＜0.01).结论抗人膀胱癌双特异性抗体对膀胱癌组织有特异性结合能力,证实了我科所制备的抗人膀胱癌双特异性抗体具有较高的免疫生物学活性.

作者：魏巍；刘秋菊；王丽红刊期： 2004年第06期
UV诱变对金葡菌生产α毒素的影响

紫外线照射是基因诱变的因素之一.不同波长、不同照射时间会使细胞DNA发生不同的变异,其结果会给子代带来不同的个体性状;相同诱变条件,由于个体差异,变异结果也不同.[1,2]

作者：姚平；张桂荣；苏敏；刘晶刊期： 2004年第06期
氯化镉对大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PC12增殖与分化的影响

目的研究不同浓度氯化镉对鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)增值和神经生长因子(NGF)诱导下PC12细胞分化的影响.方法①采用MTT比色微量分析,观察不同浓度的氯化镉对PC12细胞增值影响.②采用形态学方法,观察不同浓度的氯化镉对NGF诱导的PC12细胞分化的影响.结果不同浓度的镉对PC12细胞的增值有明显的抑制作用,存在剂量-效应关系.不同浓度的氯化镉、不同作用时间对NGF诱导的PC12细胞分化无明显影响.结论氯化镉对PC12细胞的增值有抑制作用,而对NGF诱导的PC12细胞的分化无显著的影响.

作者：王欣；孟洪琪；凌翎；张春霞；龙英丽；林文华；叶军锋刊期： 2004年第06期
癌基因C-myc在大肠癌中的表达及临床意义的研究

目的探讨癌基因C-myc在大肠癌中的表达及临床意义.方法用免疫组织化学方法检测18例大肠癌组织及10例正常结肠粘膜组织中癌基因C-myc的表达情况,并分析其与相关临床病理因素的关系.结果癌基因C-myc蛋白表达阳性率在大肠癌组显著高于正常大肠粘膜组织.结论癌基因C-myc蛋白在大肠癌组织中高度表达,但表达程度与癌症病理分级不相关.

作者：姜涛；田晓丰；张广；任辉；张信刊期： 2004年第06期
大鼠仔鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养与鉴定

目的分离培养骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行鉴定.方法取周龄大鼠骨髓用percoll分离液分离,DMEM(含20%胎牛血清)培养、传代,碱性磷酸酶和苏丹Ⅳ染色,流式细胞仪测MSCs表面标志CD44和CD45.结果碱性磷酸酶染色和苏丹Ⅳ染色阴性,CD44、CD45表达甚微.结论所分离培养的细胞为未分化的具有较强增殖能力的细胞,可认为是间充质干细胞.

作者：杨柏梁；刘雅娟；郭丽；凌翎；将鸿阳；刘峰刊期： 2004年第06期
慢性粒细胞白血病的分子生物学实验诊断研究进展

慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leuke-mia,CML)简称慢粒,是造血干细胞的克隆恶性增生性疾病.各种年龄均可以发病,在我国占白血病中的20%,仅次于急粒和急淋而位居第三.慢粒起病缓慢,早期常无自觉症状,一般病程可分为三期,慢性期(稳定期),加速期(增殖期)和急变期,慢粒的确诊主要依据实验室检测诊断,一般可分为血象和骨髓象的细胞形态学诊断,细胞化学染色,急变期的免疫分型检测及细胞遗传学Ph染色体的检测等.现就慢粒的分子生物学检测诊断在慢粒的诊断,治疗评价,病程判断及预后的应用作一综述.

作者：张晓威；何成彦刊期： 2004年第06期
微侵袭性立体定向活检技术的临床应用研究

目的将微侵袭观念引入立体定向活检手术中并探讨其在确定脑深部或主要功能区病变的病理组织学诊断中的作用.方法在近10年立体定向手术经验的基础上,自2000年1月始将微侵袭观点引入立体定向活检手术并对155例脑深部或主要功能区病变进行了活检手术研究.结果组织病理学诊断结果为脑肿瘤118例(76.13%),炎性病变25例(16.13%),放射性坏死6例(3.87%),脑变性性疾病3例(1.94%),另有3例(1.94%)未能获得阳性病理学诊断,总阳性诊断率为98.06%.共发生并发症4例(2.58%).无死亡发生.结论立体定向活检术是一种明确颅内占位病变的组织学诊断的可靠方法,并能为临床治疗方法的选择提供依据.微侵袭技术的引入则可提高活检的阳性率并能降低并发症的发生率.

作者：于新；亓树彬；翟忠太；刘宗惠；田增民；李士月；徐永革；王亚明刊期： 2004年第06期
细菌学检查对前列腺术后尿路感染的诊断

前列腺摘除术后的尿路感染是一种长期、反复、不易治愈的感染,我们对74例前列腺术后患者,用不同标本杯采集方法进行细菌学检查,探讨一种对前列腺术后尿路细菌感染的敏感、准确的诊断方法.

作者：刘淑文；张学英；张洪雁；娄若康；刘学霞；张海涛刊期： 2004年第06期
彩色多普勒超声观测脾动脉栓塞术对门静脉高压症患者门静脉血流动力学

脾动脉栓塞术应用于临床已有二十多年,我院自2002年1月至2002年12月对23例肝硬化门静脉高压症患者行脾动脉栓塞术,栓塞术前后应用彩色多普勒超声观测门静脉系统血流动力学变化,并进行分析、探讨其临床应用价值.

作者：吕胜军；高舒华；田琦刊期： 2004年第06期
酶法测定乙酰乙酸试剂盒评价

乙酰乙酸(ACAC)是酮体的重要成分之一,约占正常人酮体总量20%,是脂肪酸通过β-氧化产生的,是一种较强的有机酸,正常含量的乙酰乙酸对人体无害,糖尿病患者由于糖的利用降低,或饥饿时由于糖的代谢障碍,大量动用脂肪,乙酰乙酸的量都会积累.乙酰乙酸即可转化成丙酮,也可以转化成β-羟丁酸.酮体形成过多会引起所谓的酮血症和酮尿症,前者血液酮体升高,后者尿液酮体升高[1].为此,我们研制酶法测定乙酰乙酸试剂盒,其基本原理如下:

作者：于永光；李晓光；吴茜刊期： 2004年第06期
系统性红斑狼疮小鼠胸腺上皮细胞的体外培养

目的培养符合实验要求的系统性红斑狼疮小鼠胸腺上皮细胞.方法剪切、胶原酶消化自发性系统性红斑狼疮小鼠(BXSB小鼠)胸腺,进行原代培养,胰蛋白酶消化法传代培养,光镜、免疫细胞化学染色进行细胞鉴定.结果经剪切、胶原酶消化的BXSB胸腺植块,在体外培养2～3天后,可见上皮样细胞从植块长出,8～15天后胸腺上皮细胞在培养瓶底部长满,细胞间通过胞浆突起连接成网孔结构.当原代培养的细胞长满瓶壁的90%左右时可传代,角蛋白染色阳性细胞纯度达95%以上.结论剪切、胶原酶消化法简便易行,可获得符合实验要求的BXSB小鼠胸腺上皮细胞,建立了稳定的系统性红斑狼疮模型鼠胸腺上皮细胞培养体系.

作者：刘波；毕黎琦刊期： 2004年第06期
检测产超广谱β-内酰胺酶细菌方法的探讨

近年来,引起临床感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)细菌的种类和数量不断增加.因其多种耐药,耐药率高,给临床治疗带来一定困难.实验室及时检出产ESBLS菌株,加强监测,防止其传播,十分必要.检测方法有多种[1],各有优缺点.NCCLS推荐的纸片筛选法和确认法以及非NCCLS推荐的双纸片协同法比较经济方便,适用于基层医院和所有医院.

作者：包秀花；许淑珍刊期： 2004年第06期
绝经后妇女血清激素水平的改变与骨质疏松症的早期诊断和危险度预测

目的分析绝经后正常和骨质疏松妇女骨代谢相关激素血清水平的改变,探讨和骨质疏松关系密切的激素,预测骨质疏松症的危险度和早期诊断.方法57名绝经3年以上的妇女,测量腰椎骨密度,分为骨质疏松组(30例)和对照组(27例).隔夜空腹取血测定血清LH,LH,E2,DHEA,DH]EA-S,SHBG,CT,PTH,25(OH)2D3,分析其血清水平的改变和骨质疏松的关系.结果绝经后妇女骨质疏松组和对照组在年龄上没有差异(57.8±4.67＆58.1±5.23).绝经后妇女血清E1,DHEA,DHEA-S的水平和年龄负相关.骨质疏松组和对照组相比,LH,SHBG显著增高(P＜0.05),DHEA,DHEAS,CT显著降低(P＜0.05),其他指标没有显著性差异.结论绝经后妇女骨代谢相关激素水平的改变和骨质疏松症的发病有着密切的关系.检测该变化可以有效的早期诊断骨质疏松症和预测其危险度.

作者：刘光耀；高忠礼；刘玉槐刊期： 2004年第06期
超声显像与钼靶检查对小乳腺癌诊断的价值

超声显像和钼靶检查用于乳腺癌的诊断见于国内外许多文章,一般认为具有较高的敏感性和特异性,而对于小乳腺癌的诊断尤其是二者的对比分析至今尚少有报道.本文选取了我院2000～2003年经超声和钼靶检查的小乳腺癌的患者,对比两种检查方法的诊断意义.

作者：徐贵颖；蔡勇；王长青刊期： 2004年第06期
牛垂体bFGF的纯化及生物、生化性能检测

我们从牛垂体中提纯了碱性成纤维母细胞生长因子(bFGF),并对其一些性能进行了研究.

作者：王晓红；孙庆霞刊期： 2004年第06期
荧光聚合酶链反应检测SENV DNA的研究与探讨

分子生物学的迅速发展和广泛应用,使得病毒性肝炎的病原学研究取得了显著的进展.但临床上仍有部分肝炎患者的病因不明.因此,不少学者推测除现有的甲～庚型肝炎病毒外还存在新型肝炎病毒,并进行了大量的流行病学的实验研究,发现存在可经肠道外传播并引起人类肝炎的致病因子[1-5].

作者：张翠萍；孙庆国；高俊芬；彭慧颉；王佳楠；桑颖刊期： 2004年第06期
冷冻保存对人精子顶体酶活性影响

目的了解冷冻对人精子顶体酶活性影响.方法分光光度比色法测定精子顶体酶活性.结果冷冻后精子顶体酶活性明显低于冷冻前(P＜0.05).结论冷冻后人精子顶体酶活性减少.

作者：刘睿智；郭航；孙妍；薛百功刊期： 2004年第06期
现代教育技术与实验诊断学创新性人才培养

实验诊断学是医学教育的重要桥梁课,学科涉及范畴十分广泛,当今科学技术迅速发展的时代,实验诊断学担负着将先进的科学技术应用与临床医学的重任.为此,传统的教学模式远远不能满足科学发展的需求,现代教育技术运用,是实验诊断学深化教学改革的突破口,是培养医学创新性人才的关键.

作者：侯治富；刘强；谷树严；王立群；王维忠刊期： 2004年第06期
顶叶区病变手指运动的脑功能磁共振成像

磁共振功能成像(functional magnetic resonanceimaging,fMRI)是通过一定的刺激使大脑皮层各功能区在磁共振设备上成像的方法,它结合了功能、影像和解剖三方面的因素,是一种在活体人脑定位各功能区的有效方法.它已经被用于认知科学、心理学、药物滥用等多个研究领域[1-3].尤其是对神经肿瘤学方面的应用已越来越受到重视[4,5].本文对2001年6月～2003年3月在我院手术治疗的15例顶叶区病变患者的脑功能磁共振成像图像进行回顾性报道.

作者：张惠茅；李祎；周生岩；阚兴亮；杨海山；来颖刊期： 2004年第06期
五分群国产试剂在雅培CD3700血细胞全自动分析仪上应用的评价试验

CD3700血细胞分析仪是雅培公司生产的五分类血细胞分析仪,该仪利用多角度偏振光散射白细胞分类技术、流式细胞术、激光检测和电阻抗法原理对血标本中白细胞、红细胞及血小板等进行分析.该仪所用试剂有:稀释液、清洗液、溶血剂及鞘液.雅培公司提倡用CD3700做血细胞分析时应用该仪配套试剂,但配套进口试剂价格昂贵.我们通过对57例体检标本在CD3700血细胞计数仪上分别用国产和进口两种试剂进行了对比试验,现报告如下.

作者：陈晓燕；吴坚；潘峰；张丽霞刊期： 2004年第06期