学术投稿

万用调节炉在冷冻制片技术中的应用

朱育连

关键词:冷冻切片, 组织制片, 万用调节炉
摘要:目前术中快速冷冻切片检查已成为大多数病理科的常规工作,手术中等待快速冷冻病理报告,根据病变性质决定手术方式和范围.随着临床诊断要求的不断提高,对术中快速冷冻切片诊断准确性的要求越来越高,这就更需要提高冷冻切片的质量和速度.冷冻切片染色和某些特殊染色过程中常需提高温度来缩短制片时间及染色质量等.现在许多病理科在冷冻制片过程还在使用乙醇灯、电吹风、微波炉等加热工具,或苏木精放烤箱预温等方法.乙醇灯加热温度不好控制,组织易烤焦;苏木精预温不方便操作,还容易使苏木精使用期缩短而造成成本的浪费.本文现介绍一种稳定、经济、方便的调节炉,既可节省大量的经费和电能,还节省工作室空间,为技术人员带来方便,提高制片质量和制片速度,本实验室经1年多时间的使用,效果满意.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用

    送检胸腹水标本通常处理方法是离心后涂片,95%乙醇固定染色后显微镜下阅片.在实际工作中发现该方法制出的切片镜下观察细胞不集中,且数量不多,如果发现可疑细胞,诊断医师则需冒很大风险去诊断该病.因此,我们把细胞沉渣石蜡切片及免疫组化技术应用于胸腹水的制片中,经过反复实验,发现送检胸腹水离心后,将沉淀物再处理,然后常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色后,细胞明显增多且集中,大大提高阳性诊断率,也提高诊断医师的阅片速度.

    作者:杨小苗;申成香;司有谊;怀建国 刊期: 2014年第08期

  • 原发性肝细胞癌中干细胞标志物的表达与上皮细胞-间质转化的关系

    目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中肝干细胞标志物的表达及其与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化法检测72例HCC中肝干细胞标志物CK19、EpCAM、CD133、CD90的表达及其与EMT相关蛋白E-cadherin、vimentin和Snail的关系.结果 HCC组织中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率分别为31.9%(23/72)、40.3% (29/72)、51.4% (37/72)、41.7%(30/72),有镜下癌栓和门静脉癌栓组中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率均高于无镜下癌栓和无门静脉癌栓组,Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤数目多发的HCC中EpCAM、CD133、CD90阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期和单发的HCC;<46岁、组织学Ⅲ+Ⅳ级、血清AFP≥350 ng/ml的HCC中CK19阳性率高于其相应对照组.E-cadherin与其余两种EMT标志物均呈负相关(vimentin:r=-0.572,P=0.004;Snail:r=-0.597,P=0.003),CK19、Ep-CAM、CD90阳性HCC组中vimentin阳性强度均高于阴性组,CD133阳性HCC组中E-cadherin阳性强度低于CD133阴性组,vimentin、Snail阳性强度均高于CD133阴性组.结论 与CK19、EpCAM、CD90相比,CD133阳性的肝癌干细胞与EMT的关系更加密切,CD133可作为同时针对HCC肝干细胞和EMT的治疗靶点.

    作者:徐军;胡勇;王健;王星星;程兰兰;余宏宇 刊期: 2014年第08期

  • 非特指性外周T细胞淋巴瘤中EBER、 LMP1的表达及与预后的关系

    目的 探讨非特指性外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,not otherwise specified,PTCL-NOS)中EBER、LMP1的表达及与患者预后的关系.方法 采用原位分子杂交(in situ hybridization,ISH)技术和免疫组化法分别检测81例PTCL-NOS及59例对照组[48例血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)和11例结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T cell lymphoma,ENK/TCL)]中EBER和LMP1的表达,并分析EBER表达与PTCL-NOS患者临床病理特征及预后的关系.结果 (1)81例PTCL-NOS中,EBER阳性率为43.2% (35/81);35例EBER阳性的PTCL-NOS病例中免疫组化得分1分+2分者共29例,占EBER阳性病例的82.9%(29/35),3分+4分者共6例,占17.1% (6/35).EBER表达与PTCL-NOS患者年龄、性别、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平及临床分期均无明显相关性(P>0.05).(2)81例PTCL-NOS组织中,LMP1蛋白阳性率为22.2%(18/81).LMP1蛋白表达与EBER表达具有一致性,但EBER阳性率明显高于LMP1 (P <0.05).(3)33例PTCL-NOS获得临床随访资料,随访时间1~63个月,中位生存期为23个月,总生存率为33.3%(11/33).Kaplan-Meier生存曲线分析显示,EBER阳性组的生存率明显低于EBER阴性组(P<0.05).结论 EB病毒(EBV)感染可能是PTCL-NOS发生、发展中重要但非根本性的因素.EBER-ISH检测EBV感染具有较高的敏感性和特异性.EBV感染对PTCL-NOS患者的预后判断具有重要意义.

    作者:詹鹤琴;朱雄增 刊期: 2014年第08期

  • 细胞块p16联合高危型HPV检测在ASCUS患者分流管理中的作用

    目的 探讨细胞块p16联合高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)检测在未明确意义的非典型鳞状上皮(atypical squamous cell of undetermined significance,ASCUS)患者分流管理中的作用.方法 选取108例子宫颈液基细胞学诊断为ASCUS的病例,同时行HR-HPV杂交捕获法Ⅱ(hybrid capture 2,HC2)检测及免疫组化p16染色,均行阴道镜下活检.结果 (1)p16表达率和HR-HPV检出率在炎症组、湿疣/CIN1、CIN2、CIN3组中分别为12.5% (6/48)和31.25%(15/48)、60.53% (23/38)和84.21% (21/38),84.62% (11/13)和92.31%(12/13)、100% (9/9)和100% (9/9),组间差异有统计学意义(P<0.001);湿疣/CIN1组与CIN2/3组间p16表达率分别为60.53% (23/38)、90.91% (20/22),差异有统计学意义(P<0.0125).(2)p16联合HR-HPV检测、单纯行p16和HR-HPV检测在ASCUS中分流子宫颈病变的敏感性和阴性预测值分别为98.33% (59/60)、71.67% (43/60)、88.33% (53/60),97.06% (33/34)、71.19% (42/59)、82.5% (33/40),差异均有统计学意义(P<0.05).p16 +/HC2+者高级别病变检出率(44.19%,19/43)与p16-/HC2+者(8%,2/25)比较差异有统计学意义(P <0.001).结论 p16蛋白可以作为一种辅助诊断CIN的免疫组化标志物.细胞块p16联合HR-HPV检测可以有效分流ASCUS中的子宫颈病变患者.

    作者:戈文舜;任丽芳;李美平;蔡红光;杨惠英;张鹏;鲁波;包磊 刊期: 2014年第08期

  • 乳腺浸润性微乳头状癌与浸润性导管癌免疫组化及临床病理特征的比较

    目的 探讨乳腺浸润性微乳头状癌(invasive/infiltrating micropapillary carcinoma,IMPC)的临床病理学特征、免疫表型及预后.方法 采用免疫组化EnVision两步法对30例IMPC及39例浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)标本进行检测,观察、分析二者的病理改变并复习相关文献.结果 IMPC镜下特征性表现为肿瘤细胞呈桑椹状、微乳头状或小腺管样,癌巢与周围间质形成明显的空隙.30例IMPC患者中,单纯IMPC占43.33%,伴有IDC及导管内癌占56.67%;IMPC的淋巴结转移率为86.7%,显著高于IDC(56.4%);ER、PR、c-erbB-2、p53、Ki-67、CD44V6在IMPC和IDC中的阳性率分别为90%、80%、66.67%、53.3%、63.33%、86.67%和69.9%、56.4%、48.72%、53.85%、79.49%、94.87%,IMPC中ER、PR的阳性率显著高于IDC,二者相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 IMPC与IDC相比,具有较高的淋巴结转移率,预后相对较差,ER、PR高表达并不代表其预后较好,其高转移潜能与ER、PR、c-erbB-2、p53、Ki-67、CD44V6的表达及肿瘤大小无关,可能与微乳头状的生长方式有关.

    作者:梁月勉;王维娜 刊期: 2014年第08期

  • 维吾尔族妇女子宫颈病变中CTGF、 IL-1β、 Agr和AdipoR1表达与HPV16感染的相关性

    目的 探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、蛋白聚糖聚合物(aggrecan,Agr)和脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)在维吾尔族妇女子宫颈病变中的表达与HPV16感染、子宫颈癌分化程度的关系.方法 采用免疫组化SP法检测CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1在喀什维吾尔族17例子宫颈炎和46例子宫颈癌组织中的表达;采用PCR技术检测相应标本中HPV16的感染.利用图像分析软件IPP 6.0半定量检测子宫颈病变中CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1的累积光密度(IOD SUM)值.结果 PCR检测结果显示子宫颈癌中HPV16阳性者22例,阴性者24例;子宫颈炎中HPV16阳性者5例,阴性者12例.CTGF在子宫颈癌组中的表达低于子宫颈炎组(P<0.01).IL-1β、Agr在子宫颈癌组的表达高于子宫颈炎组(P<0.01).CTGF在HPV16阳性子宫颈癌组的表达高于HPV16阴性组(P<0.05).AdipoR1在HPV16阳性子宫颈炎组的表达高于HPV16阴性组(P<0.05).CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1在子宫颈癌中的表达与分化程度无相关性(P>0.05).结论 与子宫颈炎组织相比,子宫颈癌中CTGF表达量下降,IL-1β和Agr表达量上升,在子宫颈癌的发生、发展中起一定的作用,其检测结果对维吾尔族妇女子宫颈癌诊断有一定的参考价值.

    作者:海力曼·衣拉洪;贾索尔·肖克热提;阿力木·伊力亚斯;阿力甫江·海力力;海米提·阿布都力木 刊期: 2014年第08期

  • 多功能超声波组织处理仪在消化道内窥镜活检组织批量处理中的应用

    消化道内窥镜活检组织在日常病理外检工作中占有很大的比例,常需要病理医师在短时间甚至当日作出明确诊断,以便临床医师及时对患者进行后续治疗.超声波组织处理仪应用于快速石蜡制片,大大缩短了组织处理的时间,制片效果与常规制片无明显差异.但以往的超声波组织处理仪只可以同时对单例或少数几例标本进行操作,不适用于内窥镜活检组织的批量处理,已不能满足日益增长的病理外检工作需要.本文应用多功能超声波组织处理仪(JYCL-2超声波组织处理仪)进行消化道内窥镜活检组织的批量处理,取得满意的效果,现介绍如下.

    作者:王璇;章如松;魏雪;何燕;陈辉;卢梅英;周晨光;周晓军;马恒辉 刊期: 2014年第08期

  • RKIP基因启动子甲基化与胃癌侵袭转移及预后的关系

    目的 探讨胃癌组织中RKIP基因启动子甲基化情况与胃癌生物学行为及其预后的关系.方法 采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测98例胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中RKIP基因启动子甲基化情况;Kaplan-Meier法评估胃癌患者术后5年生存率;COX比例风险模型分析RKIP基因启动子甲基化对患者预后的影响.结果 胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中RKIP基因启动子的甲基化阳性率分别为45.9%和4.1%(P<0.05);RKIP基因启动子甲基化与胃癌分化程度、UICC分期及淋巴结转移有关(P<0.05).RKIP基因启动子甲基化阳性组患者5年生存率(20.56%)显著低于阴性组(60.38%)(P<0.05);RKIP基因启动子甲基化是胃癌患者的独立预后因素.结论 RKIP基因启动子的异常甲基化与胃癌的发生、发展、侵袭、转移有关,其可作为预测胃癌患者预后的生物学指标.

    作者:李冬霞;千智斌;李永真;李巧香 刊期: 2014年第08期

  • 10%中性缓冲福尔马林固定组织HE染色的改良方法

    目前免疫组化技术和分子病理技术已被广泛应用,为确保检测结果的准确性,选用10%中性缓冲福尔马林固定病理组织1.在实际工作中,10%中性缓冲福尔马林固定的组织常规HE染色效果不如普通10%福尔马林,尤其是染液用过一段时间后现象更为明显.为提高10%中性缓冲福尔马林固定的组织HE染色的效果和延长染液的使用寿命,本科室将常规HE染色方法进行改良,取得满意的效果,现介绍如下.

    作者:陈世梁;卢志承;陈春吉;吴文川 刊期: 2014年第08期

  • 万用调节炉在冷冻制片技术中的应用

    目前术中快速冷冻切片检查已成为大多数病理科的常规工作,手术中等待快速冷冻病理报告,根据病变性质决定手术方式和范围.随着临床诊断要求的不断提高,对术中快速冷冻切片诊断准确性的要求越来越高,这就更需要提高冷冻切片的质量和速度.冷冻切片染色和某些特殊染色过程中常需提高温度来缩短制片时间及染色质量等.现在许多病理科在冷冻制片过程还在使用乙醇灯、电吹风、微波炉等加热工具,或苏木精放烤箱预温等方法.乙醇灯加热温度不好控制,组织易烤焦;苏木精预温不方便操作,还容易使苏木精使用期缩短而造成成本的浪费.本文现介绍一种稳定、经济、方便的调节炉,既可节省大量的经费和电能,还节省工作室空间,为技术人员带来方便,提高制片质量和制片速度,本实验室经1年多时间的使用,效果满意.

    作者:朱育连 刊期: 2014年第08期

  • 不同孵育温度对免疫组化染色结果的影响

    手工操作目前仍是大部分基层病理科免疫组化操作的主要方法,由于实验条件难以标准化从而影响免疫组化切片染色质量,常给诊断带来困难,甚至会引起严重的不良后果.本文现介绍一种恒温水浴法,可获得满意的染色效果.

    作者:龚圣勇;魏万敏;田龙;宋芳 刊期: 2014年第08期

  • 乳腺颗粒细胞瘤

    1 临床资料本次读片资料由中国医学科学院/北京协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所病理科提供,通讯读片编号B9-4.患者女性,49岁,发现左侧乳腺肿物2个月.体检:左侧乳腺内上象限扪及一直径2.5 cm质硬肿块,边界欠清,活动可,腋窝淋巴结未触及.CT示:乳腺内上象限见一肿物,大小2.2 cm ×2.1 cm,边界清楚,浅分叶,密度均匀.MRI示:乳腺内上象限见一肿物,大小2.5 cm×2.3 cm ×2.3 cm,浅分叶,短毛刺,考虑恶性.因疑为恶性,遂行左侧乳腺肿物完整切除术,切除组织送病理检查.

    作者:郑闪;王晓亮;吕宁 刊期: 2014年第08期

  • 星形细胞瘤中MGMT甲基化与IDH1突变的相关性

    目的 检测星形细胞瘤中DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)的甲基化状态,分析其与IDH1突变的关系并评估二者对患者预后的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测176例星形细胞瘤中MGMT的甲基化状态;采用直接测序法和免疫组化法检测IDH1突变,并应用Log-rank检验比较不同分子标记对患者生存曲线的影响.结果 138例星形细胞瘤进行MGMT基因甲基化检测,72.46% (100/138)病例检测结果有效,57%肿瘤发生MGMT高甲基化.Ⅱ、Ⅲ级星形细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中MGMT的甲基化率显著高于原发性GBM(P=0.023 2).伴有IDH1突变的星形细胞瘤中MGMT的高甲基化率(29/37)显著高于无IDH1基因突变(28/63)病例(P=0.000 9).MGMT甲基化结合IDH1突变是患者预后较好的分子标记(P=0.000 0).结论 星形细胞瘤中MGMT的高甲基化状态与IDH1突变呈明显正相关;IDH1突变结合MGMT甲基化状态检测能更好地预测胶质瘤患者的预后.

    作者:邵立伟;李永笑;潘怡;齐雪岭;钟延丰;常青 刊期: 2014年第08期

  • 胃癌及癌前病变组织中Nanog和Oct-4的表达及意义

    目的 探讨肿瘤干细胞特异性标志物Nanog和Oct-4在各种胃组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测80例胃癌组织、80例癌旁组织及30例癌前病变组织中Nanog和Oct-4的表达及相关性.结果 胃癌组织中Oct-4的阳性率明显高于癌旁组织及癌前病变组织(P<0.05),胃癌组织中Nanog的阳性率明显高于癌前病变组织(P<0.05).Nanog 和Oct-4在低分化胃癌组中的表达明显高于高+中分化胃癌组(P<0.05),浸润深度(T1 +T2)、淋巴结转移(N1)及无远处转移的胃癌组织中Nanog和Oct-4阳性率明显低于浸润深度(T3+T4)、淋巴结转移(N2+ N3)及伴远处转移的胃癌组织(P<0.05或P<0.01).胃癌组织中Nanog和Oct-4的表达呈正相关(rs=0.558 7,P<0.01).结论 Nanog和Oct-4的表达与胃癌肿瘤干细胞的各种生物学行为相关,二者联合检测可作为胃癌敏感性、特异性的标志物和治疗靶点.

    作者:刘劼;徐阿曼;陆震;袁笑;郭涛;汪礼坤 刊期: 2014年第08期

  • 肋骨软骨母细胞瘤1例

    患者男性,42岁.因“反复左侧胸痛5个月余”入院.查体:左侧第七肋隆起伴压痛;本院64排CT重建示:左第七肋骨占位伴溶骨性破坏,灶性区域见钙化灶,边缘有一条薄的硬化带(图1、2),考虑为骨巨细胞瘤.术中见:左侧第七肋肿块大小2cm×1.5 cm×1.5 cm,质地硬,界限清楚,临床考虑肋骨肿瘤.

    作者:周泉;尹满香;叶孝乾;肖纯 刊期: 2014年第08期

  • FISH技术在93例自然流产绒毛及胎儿组织中的应用

    染色体异常包括胚胎染色异常和夫妇染色体异常,是自然流产常见的原因,其中胚胎染色异常是导致自然流产发生的主要原因[1].采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对自然流产的绒毛及胎儿组织中的13、16、18、21、22、XY染色体数目异常进行检测,FISH具有成功率高、准确、省时,对检测标本限制低等优点[2].而如何确保FISH的制片质量尤为重要,本文着重介绍FISH技术操作在3种类型流产组织中的应用体会.

    作者:刘少颜;杨嶽鑫;谭学贤;罗秋萍 刊期: 2014年第08期

  • 涎腺癌组织中EGFR和HER-2表达及临床意义

    目的 探讨黏液表皮样癌、腺样囊性癌和腺泡细胞癌中EGFR和HER-2基因/蛋白表达及临床意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测80例涎腺癌(黏液表皮样癌30例、腺样囊性癌30例、腺泡细胞癌20例)和30例良性多形性腺瘤中EGFR和HER-2蛋白表达;采用荧光原位杂交技术检测涎腺癌中EGFR和HER-2基因扩增.结果 (1)涎腺癌中EGFR和HER-2蛋白阳性率分别为71.25%和32.5%,高于良性多形性腺瘤组(P均<0.05),其中以黏液表皮样癌中EGFR和HER-2蛋白阳性率高,EGFR蛋白的表达强度高(P均<0.05).(2)EGFR和HER-2蛋白表达与涎腺癌患者性别、年龄、肿瘤大直径、肿瘤分化程度、组织学亚型无关(P均>0.05);涎腺癌中EGFR和HER-2蛋白表达无相关性(rs =0.166,P>0.05).(3)涎腺癌中EGFR基因高多体扩增的总阳性率为18.75% (15/80),其中黏液表皮样癌13例,腺样囊性癌2例,阳性率分别为43.3%和6.7%,相应蛋白表达强度均为(++)或(+++),表达强度和基因扩增之间呈明显正相关(rs =0.491,P<0.01);涎腺癌中未检测到HER-2基因扩增及17号染色体多体.(4)EGFR蛋白(++/+++)组和基因扩增组患者的生存时间比蛋白(-/+)组和无基因扩增组均明显缩短(P均<0.05).结论 黏液表皮样癌高频率、高强度表达EGFR,并发生高多体基因扩增,可作为其分子靶向治疗的靶点.黏液表皮样癌、腺样囊性癌和腺泡细胞癌中HER-2蛋白弱表达,未检测到基因扩增.

    作者:王红霞;陈昊;闫蓉;张昶;徐宏志 刊期: 2014年第08期

  • Pokemon对霍奇金淋巴瘤细胞凋亡作用的探讨

    目的 探讨霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)中Pokemon、p53蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化MaxVision法检测60例HL和20例淋巴结反应性增生(benign lymph nodes hyperplasia,BLH)组织中Pokemon、p53蛋白的表达,并用TUNEL法检测瘤细胞凋亡.结果 60例HL中Pokemon阳性率为68.33%,明显高于BLH组(30.00%)(P<0.05);p53在60例HL中的阳性率为61.67%,明显高于BLH组(20.00%).HL和BLH组的凋亡指数(apoptosis index,AI)值分别为3.55±0.10、4.55 ±0.12,组间比较差异有显著性(=4.052,P<0.05).HL中Pokemon阳性表达组的AI值(3.53±0.10)显著低于Pokemon阴性表达组(4.16 ±0.68),差异有统计学意义(P<0.05).结论 Pokemon高表达与HL的发病机制有关,Pokemon可能通过调节p53细胞凋亡通路,参与HL的发生、发展.

    作者:李梅;魏万里;李科;胡早秀;徐开敏 刊期: 2014年第08期

  • 舌根左侧恶性黑色素瘤切除12年后淋巴结转移1例

    患者女性,48岁,因“发现舌根处有一无痛性黑色肿块”入院.体检:肿块隆起于舌根左侧表面,黑色,大小0.4 cm×0.3 cm×0.2cm,全身皮肤未发现黑色素瘤病变.胸部CT、全身骨扫描和腹部超声检查未发现远处转移灶.遂行病灶局部切除及左颈淋巴结清扫术.

    作者:施启丰;崔成军;蔡颖 刊期: 2014年第08期

  • 前列腺基底细胞癌3例临床病理分析

    目的 探讨前列腺基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)的临床病理学特征、免疫表型、病理诊断及鉴别诊断.方法 采用HE及免疫组化法对3例前列腺BCC进行观察,并复习相关文献.结果 患者发病年龄分别为39、69及75岁.镜下见瘤细胞较小,异型性较轻,瘤细胞呈巢状、小梁状或筛状排列,巢及小梁边缘的瘤细胞可呈栅栏状排列.肿瘤呈浸润性生长.免疫表型:瘤细胞表达CK(34βE12)、p63及CK5,不表达PSA和P504s.结论 诊断前列腺BCC需结合临床资料、HE形态和免疫表型,其生物学行为可表现出较强的侵袭性.

    作者:朱长乐;司海鹏 刊期: 2014年第08期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会