学术投稿

人体体液脱落细胞冷冻切片的可行性分析与临床应用

余合林;余晗;杨湘伟;谭云艳

关键词:体液细胞学, 冷冻切片, 石蜡切片, 快速诊断
摘要:体液细胞学检查是基层医院病理科的常规工作之一,多数病理医师采用离心后取沉淀物直接涂片染色观察细胞的形态。由于直接法观察细胞数量有限,且体液中脱落的微小组织涂片时染色不佳,影响阳性检出率。常规细胞石蜡切片将体液沉淀物制成切片后观察微小组织,耗时长(至少48 h )。为提高阳性检出率并能在短时间内得出结果,本文对人体体液细胞快速冷冻切片进行探讨和临床应用,现介绍如下。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 子宫颈病变组织中HPV 16感染与TLR4介导的PI3 K/AKT信号通路相关蛋白表达的关系

    目的:探讨子宫颈病变中Toll样受体4(Toll-like receptors 4, TLR4)介导的PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达与人乳头状瘤病毒(human papillomavirus HPV)16感染的关系。方法采用免疫组化SP法检测152例慢性子宫颈炎、子宫颈上皮内瘤变(cervical intra-epithilial neoplasia, CIN)以及子宫颈鳞状细胞癌组织中TLR4、PI3K、AKT、NF-κB蛋白的表达;抽提石蜡组织总DNA,用PCR法检测组织中HPV 16的感染情况。结果在慢性子宫颈炎、CIN和子宫颈鳞状细胞癌组织中TLR4、PI3K、AKT和NF-κB 蛋白阳性率分别为32.0%、59.4%、77.8%,28.0%、56.3%、73.0%,24.0%、56.3%、79.4%,8.0%、48.4%、81.0%,并且随着子宫颈病变的加重表达增强(P<0.05);HPV 16在3组子宫颈病变组织中的感染率分别为8.0%、48.4%和81.0%(P<0.05)。 TLR4、PI3K、NF-κB蛋白及HPV 16均与子宫颈癌分化程度有关(P<0.05);PI3K和AKT与临床分期密切相关,NF-κB与淋巴结转移有关(P<0.05);在CIN和子宫颈鳞状细胞癌组织中TLR4分别与HPV 16(r=0.303,P=0.015;r=0.633,P=0.000)和PI3K(r=0.254,P=0.045;r=0.386,P=0.003)密切相关;在子宫颈鳞状细胞癌组织中PI3K与AKT密切相关(r=0.298,P=0.018)。结论 HPV 16感染上调TLR4在CIN中的表达,TLR4介导的PI3K/AKT信号通路共同作用对子宫颈上皮从炎症→CIN→子宫颈癌过程中发挥重要作用,HPV 16的感染可能是影响通路分子表达改变的前提条件。

    作者:石海燕;左艳丽;林齐睿;李巧稚;胡维维 刊期: 2014年第11期

  • WHO(2014)子宫体肿瘤组织学分类

    作者:许春伟(译);张博;薛卫成(审校) 刊期: 2014年第11期

  • 筛选并初步分析不同 HER-2水平的人乳腺癌 BT474细胞内miRNAs差异性表达

    目的:检测两株人乳腺癌细胞BT474和BT474/siRNA HER-2微小RNA( miRNAs)的表达,初步筛选与HER-2相关差异性表达的miRNAs。方法用干扰RNA技术沉默人乳腺癌细胞株BT474中HER-2基因的表达,利用miRNA芯片技术比较两株细胞BT474和BT474/siRNA HER-2内miRNAs的表达。结果差异倍数>2且P<0.05,与HER-2相关的miRNAs有338个;其中110个miRNAs上调,228个miRNAs下调。结论用miRNA芯片技术可以筛选人乳腺癌BT474细胞在不同HER-2水平差异性表达的miRNAs,进一步分析筛选,有望在乳腺癌中寻找到与HER-2相关的miRNAs。

    作者:朱桂璐;许成辰;吴正升;吴强 刊期: 2014年第11期

  • 全外显子组测序发现 Merkel细胞癌存在RB基因突变

    Merkel细胞癌是一种罕见的高度侵袭性的皮肤神经内分泌肿瘤,约80%的病例与Merkel细胞多瘤病毒( MCV)感染有关,病毒大 T 抗原持续表达可能是其发生机制之一。MCV阳性与阴性的Merkel细胞癌在临床表现和形态学上存在重叠,目前分析大多关注MCV阳性Merkel细胞癌的发生机制,对阴性病例则认识不足。本文应用外显子组测序分析5例MCV阳性和3例MCV阴性的Merkel细胞癌样本的基因变异情况。结果发现两组病例在点突变、DNA拷贝数改变、插入缺失以及染色体重组等变异的总数上差异无显著性。此外,研究发现RB1信号途径相关基因存在频发突变,3例MCV阴性病例均出现RB1基因无义突变导致截短蛋白产生,而阳性病例则未发现此突变类型。免疫组化结果证实病例均存在RB1异常调控。作者认为,大T抗原持续表达和宿主体细胞突变均能导致 RB1信号通路失调,可能是MCV阳性与阴性肿瘤表型相似的原因,提示Merkel细胞癌存在病毒依赖和非依赖两种发生机制。

    作者:张冲冲;林慧(摘译);余英豪(审校) 刊期: 2014年第11期

  • 超薄切片染色方法的改进及体会

    在透射电子显微镜(transmission electron microscopy, TEM)(简称电镜)检查中,为确保检查的效率及拍片质量,所提供的超薄切片除应具备厚薄适中、平整、无刀痕和颤痕特征外,还需干净、结构反差效果好。由于生物样品本身结构的反差低,需经过重金属染色才能在电镜下显示清晰的超微结构。利用重金属离子对不同细胞结构的结合能力不同,使细胞内各结构对电子产生不同的散射能力,显示在荧光屏上,产生不同的反差[1]。以往实验均采用铀-铅双染法进行染色,由于该染色方法影响因素较多,结果常不稳定,故人们对染色液、染色方法和染色工具做了许多改进与探索[2,3]。近几年来河南中医学院病理实验中心对传统的染色方法“漂浮式滴染法”进行了改良[4],在关键的细节上给予注意和处理,有效地获得无污染的切片,现将具体方法及体会介绍如下。

    作者:刘湘花;董修兵;孙丽敏;马超;李瑞琴 刊期: 2014年第11期

  • 统计学符号书写要求

    统计学符号按GB/T 3358.1-1993《统计学名词及符号》的规定一律采用斜体排印。(1)样本的算术均数用英文小写x-,中位数用M;(2)标准差用英文小写s;(3)标准误用英文小写sx-;(4)t检验用英文小写t;(5)F检验用英文大写F;(6)卡方检验用希文小写χ2;(7)相关系数用英文小写r;(8) q检验用英文小写q;(9)概率用英文大写P( P值前应给出具体检验值,如t值、F值等);(10)比值比用英文大写OR;(11)95%可信区间用95% CI表示。

    作者: 刊期: 2014年第11期

  • 30例乳腺外Paget病的临床病理及预后分析

    目的:探讨乳腺外Paget病( extramammary Paget’ s disease, EMPD)的临床病理特点及影响其预后的因素。方法回顾性分析30例EMPD的临床病理资料,复习存档HE切片,采用EnVision两步法对20例EMPD进行免疫组化染色。随访患者的生存状况,分析临床病理参数与预后的关系,并行统计学分析。结果30例EMPD中男性26例,女性4例,发病年龄53~88岁,中位年龄70岁。眼观:皮损呈湿疹样改变;镜检:表皮内见数目不等的Paget细胞呈单个散在、巢状或腺样分布;免疫表型:20例均表达CK7,不表达CK5/6、p63。23例获得随访资料,其中复发8例,4例复发后死亡,复发8例中6例切缘阳性。统计学分析显示,有真皮层浸润组和无真皮层浸润组(P<0.01和P<0.05)、有淋巴结转移组和无淋巴结转移组(P<0.01)、切缘阳性组和切缘阴性组(P<0.01和P<0.05)的复发率和病死率的比较差异均有统计学意义。患者年龄、病变范围与预后无明显相关性(P>0.05)。结论 CK7是Paget细胞较敏感和特异的免疫标志物,肿瘤伴表皮下浸润、淋巴结转移、切缘阳性是患者预后不良的指征。

    作者:刘颖;张新华;余波;石群立 刊期: 2014年第11期

  • 肝细胞癌中PcG相关蛋白RYBP的表达及临床意义

    目的:探讨PcG相关蛋白RYBP在肝细胞癌( hepato-cellular carcinoma, HCC)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化法检测75例HCC及癌旁组织中RYBP的表达,分析其与HCC临床病理特征的关系。结果 RYBP在HCC中表达明显低于癌旁组织,阳性率分别为33.3%(25/73)、65.3%(49/73),RYBP表达与患者性别、年龄、病理分级、临床分期、肿瘤数目、淋巴结转移无明显相关性(P>0.05),与肿瘤直径及血清AFP水平有相关性(P<0.05)。结论 PcG相关蛋白 RYBP 表达降低可能与 HCC密切相关。

    作者:闫萌;谭盛葵;肖胜军;侯巧燕 刊期: 2014年第11期

  • 抗酸染色中碱性品红用量分析

    抗酸染色主要使用对象是抗酸菌中的抗酸杆菌,其属于分枝杆菌。结核分枝杆菌是引起人和动物结核病的病原体,常侵犯全身各组织及器官,尤其是以肺、淋巴结等多见。由于其内含大量脂质,故对一般染液不易着色,从而影响诊断及治疗。常规抗酸杆菌染色多采用传统的Ziehl-Neelsen法[1],但染液放置一段时间后易出现沉淀,滴染时切片上染液残渣易造成污染。本科室在配制染液时通过对碱性品红用量的调整及对比染色,能较好的显示抗酸杆菌,现报道如下。

    作者:徐开军;孙涛 刊期: 2014年第11期

  • 妊娠期阴道葡萄状肉瘤1例

    患者,21岁。因发现阴道内肿物7个月余、肿物明显增大10天入院。患者行孕前体检时外阴、阴道、子宫颈等女性生殖系统均未发现显著异常,于7个月前自然分娩时阴道突出一肿物,未予任何治疗,10天前患者出现腹痛、阴道黄色分泌物增多、大腿内侧疼痛,遂至当地医院就诊,发现肿块较前有明显增大,为求进一步诊治,遂入河南省人民医院治疗。妇检:阴道前壁、右侧壁可触及质软包块,上达穹窿,下达阴道口,大小10 cm ×8 cm。彩超示:盆腔右下方靠近会阴部似可见低回声团。

    作者:许梅;赵跃武;任颖;薛霜;孔令非 刊期: 2014年第11期

  • 男性乳腺黏液癌1例

    患者男性,33岁,因发现左侧乳腺肿块2年入院。实验室检查:催乳素48.19 ng/ml,孕酮1.0 ng/ml。乳房B超:左侧乳腺区探及一33 mm ×15 mm大小低回声团(图1),肿瘤边界清楚,内部回声不均,内可见少许液性暗区。彩色多普勒超声( CDFI):团块内见少许点状血流信号。弹性图像(主要用于评价病变的质地)显示:病灶范围内绿色和蓝色所占比例相近(弹性评分为3分)。遂于2012年11月13日行左侧乳腺肿块切除术,11月27日再次行左侧乳腺癌改良根治术。

    作者:施倩;毛卫波;朱忆凌 刊期: 2014年第11期

  • 婴幼儿和儿童软组织中间型肿瘤的病理诊断

    婴幼儿和儿童软组织中间型肿瘤的主要特征:(1)病变主要涉及纤维母细胞/肌纤维母细胞肿瘤(如婴儿纤维瘤病、脂肪纤维瘤病、巨细胞纤维母细胞瘤和婴儿纤维肉瘤),更原始的间叶细胞(如婴幼儿原始黏液样间叶性肿瘤),肌纤维瘤病[原来归入纤维母细胞/肌纤维母细胞性肿瘤,而WHO (2013版)软组织肿瘤分类将其归入血管周细胞肿瘤中],以及部分血管内皮细胞肿瘤(如乳头状淋巴管内血管内皮瘤、Kaposi型血管内皮瘤);(2)其生物学行为属中间类型,具有局部浸润性、破坏性或偶尔转移性;(3)病变主要好发于四肢、躯干或头颈部;(4)多为先天性,主要发生于婴幼儿或儿童,少部分可发生于成人。

    作者:赖日权;王蔚 刊期: 2014年第11期

  • 双侧鼻腔软骨肉瘤1例

    患者女性,31岁,因反复鼻塞、流涕、打喷嚏2年入院,自感嗅觉减退,无明显头疼、头晕等不适。专科检查:外鼻无畸形,鼻前庭未见异常,鼻腔黏膜明显充血,水肿,右侧鼻腔明显狭窄,双侧鼻腔可见大量脓性分泌物,鼻中隔向右偏曲,双侧中鼻道可见表面光滑暗红色肿物,与双侧鼻中隔黏膜及下鼻甲粘连,并延伸至后鼻孔,鼻咽部无异常新生物及分泌物。 MRI示:鼻腔内见不规则等T1、混杂长T2占位病灶,病变向后部分突入后鼻孔, T2 WI内见不规则条状低信号。边界尚清楚,病变大小3.7 cm ×3.6 cm,增强后不均匀强化(图1、2)。

    作者:宋新兰;付娟娟 刊期: 2014年第11期

  • 子宫颈鳞状细胞癌组织中LC3B的表达及其与Ki-67表达的相关性

    目的:探讨自噬标志物LC3B蛋白在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其与细胞增殖蛋白Ki-67表达的相关性。方法采用免疫组化SP法检测16例正常子宫颈和126例子宫颈鳞状细胞癌组织中LC3B及Ki-67的表达。结果 LC3B蛋白在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达低于正常子宫颈上皮,差异有统计学意义(P<0.05);LC3B与 Ki-67表达呈负相关(rs =-0.248,P<0.05)。结论子宫颈鳞状细胞癌中LC3B的表达降低,自噬活性减弱可能促进早期子宫颈鳞状细胞癌细胞的增殖,该发现为进一步探究自噬在子宫颈癌发生、发展中的作用提供临床参考依据。

    作者:赵洪萍;周颖;万安;赵卫东 刊期: 2014年第11期

  • 胃血管球瘤3例临床病理特征

    目的:探讨胃血管球瘤的病理学特征和鉴别诊断。方法回顾性分析3例胃血管球瘤的病理学形态特点和鉴别诊断。结果3例胃血管球瘤中男性1例,女性2例。发病年龄小者40岁,大者60岁。肿瘤部位:发生于胃窦2例,胃体1例。肿瘤大直径均<2 cm。组织学类型均为经典型。镜下见瘤细胞围绕薄壁血管呈巢团状或梁索状排列,瘤细胞呈圆形,均匀一致,胞质透亮,可见小核仁。核分裂象不易见,未见坏死。免疫表型:瘤细胞表达actin和SMA。结论胃血管球瘤属于罕见的良性肿瘤,需与胃肠间质瘤、平滑肌瘤、胃神经内分泌肿瘤和副神经节瘤相鉴别。

    作者:吴若实;王丽丽;韩安家 刊期: 2014年第11期

  • 论文修改注意事项

    1论文“题目”是否精炼、准确,一般不超过25个字;2论著的“中英文摘要”是否符合结构式要求,综述类论文用指示性摘要,各项描述是否准确,内容有无交叉,要删繁就简;3“前言”是否简明扼要,与“讨论”部分有无重复,“材料与方法”和“结果”的内容有无交叉。

    作者: 刊期: 2014年第11期

  • 如何提高组织切片技术水平

    在常规组织制片中,切片是重要的技术之一,其质量好坏直接影响标本的观察效果[1]。好的切片机是整个制备过程的重要环节,要制备1张好的切片,病理工作人员必须将技术、知识和技巧进行完美的结合。首先,待切样品的质量是关键因素,而样品质量取决于前期处理工作的准确无误,包括固定、脱水、包埋等[2];必须选择正确型号的切片机以及合适的钢刀或一次性刀片;切片时需认真考虑样品类型、大小、厚度,兼顾操作者的便利性和舒适性。其次,要切出高质量的切片,操作者丰富的经验必不可少。操作者必须懂得切片机的工作原理,对机器进行精细调节以达佳效果;能应对常见故障,消除一些潜在的影响因素[3];无论使用钢刀还是一次性刀片,切缘必须锋利,且不能有任何缺口或杂质附着。

    作者:马恒辉;周晓军 刊期: 2014年第11期

  • xTAG液相芯片技术用于肺癌 EGFR基因突变检测的临床适用性

    目的:分析肺癌EGFR基因第18~21号外显子突变,以Sanger测序法为参照,探讨xTAG液相芯片用于临床样本检测的适用性。方法随机选择1139例Ⅰ~Ⅳ期肺癌组织标本,提取DNA,分别采用xTAG液相芯片法和Sanger测序法检测EG-FR基因第18~21号外显子突变情况,评价xTAG液相芯片法检测的敏感性和特异性。结果液相芯片法:共1134例患者获得基因突变检测结果,Sanger测序法:共1105例患者获得基因突变检测结果,检测成功率分别为99.56%和97.01%。以San-ger测序法为参照,xTAG液相芯片法检测的敏感性和特异性分别为99.59%和94.54%,两种方法均检出少数样本存在双外显子突变。两种方法检测出的突变型别完全吻合。结论采用xTAG液相芯片法可有效检测肺癌EGFR基因突变,实现突变分型,且相对测序法更方便、高效,适合临床推广应用。

    作者:郭元杰;汪威;付莎;刘芳;郭婧;邵建永 刊期: 2014年第11期

  • 卵巢和输卵管原发癌肉瘤2例临床病理分析

    目的:探讨卵巢和输卵管原发癌肉瘤的临床病理学特征及鉴别诊断。方法采用免疫组化EliVision法对2例分别原发于卵巢和输卵管的癌肉瘤进行染色,并复习相关文献。结果例1,57岁,双侧卵巢均可见占位性病变,肿瘤组织由恶性的上皮和间叶成分构成。免疫表型:肿瘤上皮及间叶成分均表达CK和vimentin,不表达desmin、CD34和HCG。部分淋巴结可见转移瘤。例2,57岁,左侧输卵管腔内见一占位性病变,肿瘤组织由恶性的上皮和间叶成分共同构成。免疫表型:上皮成分表达CK和vimentin,间叶成分表达vim-entin,不表达CK。结论原发性卵巢和输卵管癌肉瘤少见。需与未成熟性畸胎瘤、分化差的癌、卵巢及输卵管肉瘤等鉴别。该肿瘤病程进展快,患者预后差。

    作者:向亚莉;韩安家 刊期: 2014年第11期

  • 小细胞肺癌中M3R的表达及意义

    目的:观察毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic cholinergic receptor 3, M3R)在小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)中的表达,探讨M3R表达与SCLC分期及临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化SP两步法检测60例SCLC(局限期和广泛期各30例)癌组织中M3R的表达,与正常肺组织对比观察M3R表达的差异;回顾性分析所有SCLC病例的病史、体征、支气管镜、胸部CT、颅脑CT、骨扫描、腹部CT等检查,电话随访患者的生存时间。结果 M3R在SCLC中的表达明显高于正常肺组织;M3R在局限期和广泛期SCLC中的表达差异无统计学意义;M3R表达与患者年龄、性别、淋巴结转移无关,与是否吸烟有关;Kaplan-Meier生存曲线显示:M3R阴性者的生存期较阳性者长,差异有统计学意义。结论 SCLC癌组织中M3R的表达水平明显高于正常肺组织,M3R表达与SCLC预后有相关性。

    作者:何花;马爱玲;张淑香 刊期: 2014年第11期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会