学术投稿

未脱钙耳蜗组织树脂包埋与切片方法

张文丽;李倩;郭静;王瑞敏;杨方;田发明;刘业民

关键词:未脱钙, 耳蜗, 树脂包埋
摘要:耳蜗是一螺旋形骨管,与外壁的螺旋韧带相连,含有弹性纤维基膜、蜗轴的骨螺旋板等骨质结构.传统的制样方法是对耳蜗组织进行逐级脱钙[1,2],但脱钙的样品制备操作费时,难度较大,脱钙后组织成分有部分丢失,超微结构受到不同程度的损伤,尤其会导致膜性结构病理假象,给耳蜗样品观察带来困难.一些学者对未脱钙骨的制作技术进行改进[3-6],但对未脱钙耳蜗电镜技术探讨较少.本文在传统透射电镜样品制备基础上进行改进,省去脱钙操作步骤,采用未脱钙方法,以多聚甲醛与戊二醛的混合液灌注固定大鼠,增强固定液在耳蜗的渗透力,保证良好固定;用环氧树脂Epon混合包埋剂梯度浸透包埋、钻石刀连续大切片方法,取得较为满意的效果,现介绍如下.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • CD109的研究进展

    CD109是一种细胞表面抗原,为糖基化磷脂酰肌醇(glyco syl phosphatidylinositol,GPI)联结的糖蛋白,属于含硫酯的α2巨球蛋白/补体C3、C4、C5超家族.CD109是TGF-β/Smads信号通路中新的辅助受体,在人类角质形成细胞中CD109可负性调节TGF-β信号.新研究表明,CD109在某些肿瘤和皮肤疾病的发生、发展中发挥着重要作用,已成为当前研究的热点.

    作者:刘欣欣;冯爱平;陈善娟 刊期: 2013年第10期

  • 肢端雀斑样黑色素瘤27例临床病理分析

    目的 探讨肢端雀斑样黑色素瘤(acral-lentiginous melanoma,ALM)的病理形态学特征、组织发生、诊断及鉴别诊断、治疗及预后等.方法 采用HE及免疫组化EnVision两步法对27例ALM进行染色,并复习相关文献.结果 27例患者中男性17例,女性10例,年龄40 ~ 82岁,平均年龄65岁,男女比为1.7∶1.病变位于足端23例,手端4例,肿块直径0.2 ~8 cm.在水平生长期异形的黑色素细胞位于表皮基底层,进展期则浸润真皮深部.通常肿瘤细胞核大、可见核仁,染色质较粗,胞质嗜酸性,其内可见黑色素颗粒.免疫表型:肿瘤细胞S-100、HMB-45、Melan-A、BCL-2、Nodal和cyclin D1均呈强阳性.结论 ALM主要见于无毛发被覆的肢端部位,如手掌、足底和甲下区,是黄种人与黑种人常见的黑色素瘤类型,高峰发病年龄70~80岁.ALM确诊依靠病理检查.

    作者:徐新运;王益华 刊期: 2013年第10期

  • 以皮肤包块为首发症状的先天性白血病1例

    患儿男,出生1个月17天,因发现胸腹包块1个月入院.家长诉患儿1个月前发现胸、腹各有一包块,逐渐增大.系第2胎,第2产,足9个月,出生体重3.3 kg,Apgar评分不详.混合喂养,生长发育同适龄儿,按时预防接种.父母非近亲结婚,身体健康.体查:T 36.8℃,P 100次/min,R 30次/min,体重4.2 kg.精神可,心肺未见异常.腹平软,肝肋下1 cm,质软,脾肋下未触及,肠鸣音正常.专科检查:左侧胸部见一隆起包块,大小3 cm×2 cm,表面皮肤发红,无破溃,无液体渗出,质地稍硬,边界清楚,无触压痛.

    作者:吴艳;杨文萍;徐红艳;曾松涛;黄慧 刊期: 2013年第10期

  • 雷帕霉素诱导自噬对结肠癌细胞侵袭、迁移的影响及其可能机制

    目的 观察雷帕霉素(rapamycin,RAPA)诱导结肠癌SW480细胞自噬后对细胞侵袭、迁移能力的影响,并探讨其可能的机制.方法 采用免疫荧光观察自噬泡,透射电子显微镜观察细胞超微结构,免疫印记法检测LC3水平,Boyden小室观察细胞的侵袭,划痕实验观察细胞迁移,流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 RAPA处理后结肠癌细胞发生自噬,且自噬水平随处理时间的延长而升高;RAPA诱导自噬组侵袭能力增强(P<0.01),且迁移能力增加(P<0.05);RAPA处理组细胞内ROS水平增高.结论 RAPA可诱导结肠癌细胞发生自噬,使细胞侵袭力增强、迁移力增加,且涉及胞内ROS水平的改变.

    作者:向琳;杨爱军;刘伟;王晨昱;张春雨;田莉;李敏 刊期: 2013年第10期

  • Formins蛋白在肿瘤及其他疾病中的研究进展

    Formins蛋白是细胞蛋白骨架中微丝组成的重要成分,通过调控微丝的成核活动、改建肌动蛋白骨架而影响细胞分裂、细胞黏附、细胞迁移等运动,与大肠癌、前列腺癌及乳腺癌等肿瘤的发生、发展密切相关.现重点阐述Formins蛋白在肿瘤及相关疾病中的研究进展.

    作者:罗佳;章敬成;刘繁荣 刊期: 2013年第10期

  • 全身多发淋巴结内间皮细胞弥漫性增生1例及文献复习

    目的 探讨淋巴结内间皮细胞增生的临床特点、病理诊断及发病机制.方法 对1例全身多发淋巴结内间皮细胞弥漫性增生组织进行组织形态学观察及免疫组化EnVision法染色,并复习相关文献.结果 镜下见淋巴结结构正常,弥漫增生的上皮样细胞充满扩张的淋巴窦腔,细胞黏附性差,胞界清晰,胞质丰富嗜酸,小泡状核,核仁小而明显,未见核分裂象.免疫表型:Calretinin、CK5/6、D2-40、MC及CKpan均阳性,S-100、HMB45、Melan-A、TTF-1、CDX-2、Villin、ALK、CD30、CD20、CD3、CD1a及CD68均阴性.对患者随访26个月,未见原发恶性病灶,预后良好.结论 淋巴结内间皮细胞弥漫性增生十分罕见,易误诊为恶性肿瘤,诊断时需紧密结合临床特征及免疫表型,避免过度治疗.

    作者:刘霞;彭李博;卓士超;党宏;周晓军;沈勤 刊期: 2013年第10期

  • 人脑胶质细胞瘤中凋亡分子14-3-3蛋白亚型的表达

    目的 探讨14-3-3蛋白各亚型在人脑胶质瘤中表达及其与肿瘤病理分级的关系.方法 采用免疫组化ABC法检测14-3-3蛋白各亚型在80例人脑胶质瘤和10例正常脑组织标本中的表达.结果 在正常脑组织中14-3-3蛋白7个亚型主要表达于神经元,但是ε、ζ和θ亚型在胶质细胞中弱表达.大部分胶质瘤组织中β、ε、ζ、η和θ亚型均有表达,且它们的免疫反应评分随着肿瘤的级别增高而增高(P<0.05).结论 β、ε、ζ、η和θ在人脑胶质瘤的发生中可能起着重要的作用,尤其是β和η亚型.

    作者:曹磊;安凤莲;曹卫东;别小华;王涛;黄新 刊期: 2013年第10期

  • 2μm激光前列腺切除术后犬前列腺部尿道创伤修复的病理组织学观察

    目的 观察2μm激光前列腺切除术后前列腺部尿道创伤修复的病理组织学改变,探讨前列腺术后前列腺部尿道再上皮化(re-epithelialization)的可能来源细胞.方法 选择15只成年家犬行2μm激光前列腺汽化切除术,分别于术后3天、1~4周序贯取材,行HE染色观察犬前列腺部尿道的病理组织学改变,采用免疫组化法检测高分子量细胞角蛋白(CK34βE12)、p63、PSA及尿斑蛋白(Uroplakin)表达.结果 术后3天手术创面未见上皮覆盖,创面凝固性坏死下见前列腺细胞增生,免疫组化标记CK34βE12、p63及PSA提示增生细胞主要为前列腺基底细胞;术后1周创面下见增生的前列腺基底细胞并鳞状化生,部分区域可见增生的前列腺基底细胞向创面迁移并覆盖创缘致创面再上皮化形成,未见创缘周围膀胱颈尿路上皮向创面中心增殖爬行现象;术后2周创面再上皮化过程基本完成,并于术后3~4周向尿路上皮分化.结论 2μm激光前列腺切除术后犬前列腺部尿道再上皮化可能来源于残余的前列腺组织,前列腺基底细胞可能是该修复过程的主要细胞.

    作者:曹颖;罗光恒;罗蕾;杨秀书;刘军;孙兆林;夏术阶 刊期: 2013年第10期

  • 肾原始神经外胚层肿瘤1例

    患者男性,20岁,外伤后左侧腰部疼痛半个月就诊.B超示左肾混合性回声区,大小14.1 cm ×10.2 cm,边界尚清,结合病史疑肾挫裂伤.肾脏增强CT显示:左肾囊性巨大占位(图1),性质待排.临床考虑肾囊肿并出血可能,于2011年2月18日行腹膜后镜左肾探查+囊肿去顶术,术中见:左肾中极背侧一8 cm× 10 cm大小囊状肿物,包膜光滑,囊液浑浊、呈暗红色,内见机化血凝块.

    作者:陈佳菁;邱建龙 刊期: 2013年第10期

  • 小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中Annexin A7蛋白的表达及意义

    目的 观察Annexin A7(ANXA7)蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株(Hca-F、Hca-P)中的表达水平,分析其在两种细胞株中的表达及意义.方法 采用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞仪检测ANXA7在细胞株Hca-F和Hca-P中的表达.结果 免疫细胞化学结果显示,ANXA7表达于Hca-F细胞胞核和胞质,以胞核为主,在Hca-P中表达位于胞质;Western blot结果显示,ANXA7在Hca-F、Hca-P中的表达相对值分别为0.09 ±0.01和0.23 ±0.02,ANXA7在Hca-F细胞中的表达明显低于Hca-P,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪结果显示,ANXA7在Hca-F细胞中的相对荧光强度值(57.71±9.85)显著高于Hca-P(17.61±1.00),差异有统计学意义(P <0.001).结论 ANXA7在Hca-F、Hca-P中的差异性表达可能与肿瘤淋巴道转移能力相关.

    作者:张竹青;卢书明;赵志英;唐建武 刊期: 2013年第10期

  • 胃癌组织中RAD51及CHK1的表达及意义

    目的 探讨RAD51及细胞周期检测点激酶1(cell cycle checkpointkinase 1,CHK1)在胃癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测67例胃癌组织和21例正常胃黏膜组织中RAD51及CHK1蛋白表达,并分析其与胃癌临床病理征特的关系.结果 胃癌组织中RAD51及CHK1蛋白表达明显高于正常胃黏膜组织(P<0.05).RAD51蛋白表达与胃癌的病理分化程度、侵犯深度、有无淋巴结转移有关(P<0.05).CHK1蛋白表达与胃癌病理分化程度有关(P<0.05).胃癌组织中RAD51和CHK1蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论 RAD51及CHK1蛋白在胃癌组织中呈高表达,二者在胃癌发生、发展及生物学行为中可能起到重要作用.

    作者:闫静波;卫茹 刊期: 2013年第10期

  • 大肠癌组织中PTEN、iNOS、COX-2的表达及相关性

    目的 观察人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tension homolog deteted from chromosome 10,PTEN)、iNOS、COX-2在大肠癌中的表达及相互关系,探讨三者在大肠癌发生、发展及转移过程中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测58例大肠癌中PTEN、iNOS、COX-2的表达,分析PTEN与iNOS、COX-2表达之间的相关性和临床意义.结果 (1)大肠癌组织中PTEN的阳性率为46.6%(27/58),显著低于正常大肠组织(P<0.01);iNOS、COX-2阳性率分别为79.3%(46/58)、79.3%(46/58),显著高于正常大肠组织(P<0.01).(2) PTEN表达和淋巴结转移相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤大小及浸润深度差异无统计学意义.(3)大肠癌组织中PTEN的表达与iNOS表达之间呈负相关(P<0.05),PTEN的表达与COX-2表达之间亦呈负相关(P<0.05).结论 PTEN与iNOS、COX-2在大肠癌发生、发展过程中起重要作用,PTEN基因表达的缺失可能会上调iNOS、COX-2的阳性率,对肿瘤血管的形成产生协同作用,从而增加大肠癌发生转移的机率.

    作者:包健荣;姚卫康;冯一中 刊期: 2013年第10期

  • 注射针刀切吸组织与细胞在体表肿块穿刺活检中的应用

    细针吸取细胞病理学(fine needle aspiration cytopathologY,FNAC)检查因其简便快捷安全、不需要特殊设备以及价格低廉而被临床广泛使用,尤其适用于基层医院.但也有其局限性,因穿刺针较细,较小肿瘤不易准确到达病变组织,诊断准确率较低,与病理组织学相比,对病变组织结构和细胞层完整性判断存在一定差距[1].本文现介绍一种注射针刀用于体表肿块穿刺切吸组织及细胞病检的方法,效果良好,现报道如下.

    作者:蔡洪英;邓纯敏;梁崇恩 刊期: 2013年第10期

  • EB病毒感染相关的儿童散发性伯基特淋巴瘤中miR-127和miR-155表达及意义

    目的 探讨miR-127、miR-155在EB病毒(epstein-barr virus,EBV)阳性/阴性的儿童散发性伯基特淋巴瘤(Burkitt's lymphoma,BL)中的表达.方法 采用原位杂交和qRT-PCR技术检测40例儿童BL及15例扁桃体组织2株细胞株(Raji和Ramos)的EBER及miR-127、miR-155表达情况.结果 (1)40例BL儿童中16例EBER阳性,15例扁桃体EBER均阴性.(2)miR-127在EBV阳性的BL中的表达(2.68±2.95)比EBV阴性的BL(0.36 ±0.24)及扁桃体组织(1.23±4.09)高,差异有显著性(P <0.05);Raji和Ramos比较,miR-127表达显著升高(t=-13.038,P=0.000).(3)miR-155在EBV阳性BL(22.50 ±56.84)和阴性BL(15.89 ±51.57)中表达差异无显著性(P>0.05);与扁桃体组织相比表达(0.31±0.54)上调(P<0.05);Raji和Ramos比较,miR-155表达显著升高(t=-3.337,P=0.008).结论 miR-127和miR-155的高表达与儿童BL的发病机制密切相关,miR-127高表达与EBV感染相关,可能起着类似癌基因的作用.

    作者:林云;杨文萍;黄慧;徐红艳;吴艳;曾松涛;熊枫;肖强 刊期: 2013年第10期

  • 胃癌组织中HER-2基因扩增和蛋白的表达

    目的 探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测胃癌组织微阵列中HER-2基因扩增和蛋白表达的一致性.方法 将80例胃癌组织制成组织芯片,采用FISH和IHC法分别检测HER-2基因扩增和蛋白的表达,并对两种检测方法的一致性进行分析.结果 在80例胃癌组织芯片中,HER-2基因扩增的阳性率为7.5%,蛋白过表达(IHC(H))阳性率约为6.3%.FISH和IHC结果行一致性分析,Kappa值=0.92(P <0.001),IHC检测可以很好地反映FISH结果.结论 FISH和IHC法检测胃癌组织微阵列中HER-2基因扩增和蛋白表达具有高度一致性.

    作者:于雪梅;李新军;吴戈;付明霞;张建;赵松林 刊期: 2013年第10期

  • 骨巨细胞瘤侵袭性生物学行为的病理学研究进展

    骨巨细胞瘤(giant cell tumor,GCT)是一种低度恶性潜能肿瘤,其固有特征包括浸润性生长、细胞增生活跃、凝固性坏死、继发性动脉瘤样骨囊肿及出现反应性骨,依据形态学难以预测GCT的生物学行为.Campanacci和Enneking影像学分级虽有助于判断骨GCT的局部浸润,但不能预测其侵袭、复发与转移的关系.该文现对骨GCT侵袭性生物学行为的病理学研究进展作一综述.

    作者:冉祥英;张惠箴;蒋智铭 刊期: 2013年第10期

  • 冷冻组织包埋剂在浆膜腔积液细胞块制作中应用

    浆膜腔积液(胸水、腹水、心包积液等)脱落细胞学检查是病理科诊断恶性肿瘤的重要方法之一.为完善传统细胞学制作方法上的一些不足,近年来,浆膜腔积液脱落细胞石蜡块的制作显得尤为重要.本组巧用冷冻组织包埋剂(OCT)可溶于水的性能,尝试将其做为浆膜腔积液离心沉淀后细胞的支架,再经过脱水、透明、浸蜡形成细胞块,此方法操作简便,既富集了细胞,提高了恶性瘤细胞阳性检出率,同时也有利于恶性肿瘤类型的鉴别,现介绍如下.

    作者:程新宇;吴璠;孙虓;金丹;白阳;王星;王翠芳 刊期: 2013年第10期

  • 口腔鳞状细胞癌组织中miR-15b的表达及意义

    目的 探讨microRNA-15b(miR-15b)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织及其对应癌旁组织中的表达及其临床诊断意义.方法 收集46例经病理证实为OSCC组织及对应的癌旁组织,分别提取组织内的mRNA,采用qRT-PCR技术检测组织中miR-15b的表达;分析OSCC癌灶组织内miR-15b表达及与临床病理参数的相关性.结果 OSCC癌灶组织内miR-15b表达与对应癌旁组织相比明显下降(P=0.004 1);OSCC癌灶组织内miR-15b表达与患者WHO病理分级有关(P =0.042),而与患者性别、年龄、TNM分期、吸烟、淋巴结转移及癌灶组织内炎症细胞浸润均无相关性(P>0.05).结论miR-15b在OSCC癌灶组织内低表达,且与肿瘤分化相关;miR-15b有望成为OSCC早期诊断的潜在指标.

    作者:泥艳红;黄晓峰;侯亚义;胡勤刚 刊期: 2013年第10期

  • 脑膜血管周细胞瘤29例临床病理分析

    目的 探讨脑膜血管周细胞瘤(meningeal hemangiopericytoma,M-HPC)临床病理学特征.方法 采用HE和免疫组化EnVision法对29例M-HPC进行临床病理分析并复习相关文献.结果 29例M-HPC患者中男性20例,女性9例,年龄14~82岁,中位年龄48岁.肿瘤位于幕上17例,小脑幕4例,幕下5例,其余3例位于脊髓.患者临床表现为头痛、四肢和(或)头面部麻木、视力下降等.组织学观察,首发病灶中21例(72%)为WHOⅡ级,8例(18%)为WHOⅢ级.肿瘤特征性的富于细胞,由圆形、卵圆形至梭形瘤细胞构成,间质富含“鹿角形”薄壁分支血管,部分肿瘤组织内尚见小灶性分布、疏松水肿样的少细胞区.Ⅲ级病例瘤细胞异型性及细胞密度增加,核分裂象增多,并可见坏死.免疫表型:瘤细胞弥漫表达vimentin、CD99,灶性弱表达CD34,部分病例表达BCL-2,个别病例表达SMA、EMA及S-100,不表达GFAP,Ki-67增殖指数2% ~ 45%,平均10%.网状纤维染色示肿瘤富含网状纤维并包绕在瘤细胞周围.结论 M-HPC属少见脑肿瘤,临床及影像学无特征性,病理诊断时须与伴有血管外皮瘤样结构的其他肿瘤相鉴别,生物学行为属WHOⅡ/Ⅲ级,术后复发率高且易转移.

    作者:陈远钦;吴玲玲;张锦;石群立;周晓军;马恒辉;马捷 刊期: 2013年第10期

  • 颅内间变型血管外皮细胞瘤合并肺及骨多部位转移1例并文献复习

    目的 探讨颅内间变型血管外皮细胞瘤(anaplastic hemangiopericytoma,AHPC)的临床、影像、病理、鉴别诊断及治疗方法.方法 回顾性分析1例颅内AHPC合并肺及骨多部位转移并复习相关文献.结果 颅内AHPC合并肺及骨多部位转移病例罕见.颅脑MRI显示混杂信号,部分病例可见“硬膜尾征”,其内有明显血管流空征象,脑DSA检查示肿瘤血供丰富.临床、影像学特征易与脑膜瘤混淆.组织病理学特点为密集排列的梭形细胞围鹿角样血管周生长.免疫组化及特殊染色支持AHPC,合并肺及骨多部位转移.结论 颅内AHPC是少数可转移至中枢神经系统以外的颅内原发肿瘤,具有高复发和高转移倾向,包括肺、骨、肝等易转移靶器官,病灶应彻底切除并辅以放、化疗.

    作者:闫风彩;周全;昌红 刊期: 2013年第10期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会