学术投稿

细胞阵列的制备及其应用

苏宝山;杨军

关键词:细胞培养, 阵列, 染色法
摘要:细胞培养技术是分子生物学研究的重要手段,对细胞爬片进行蛋白和核酸水平的原位检测则是细胞学研究的常用方法.但是,目前对细胞爬片样本进行的免疫细胞化学、原位杂交等原位染色过程中,一般均为单张手控式染色,由于细胞爬片面积小、难固定、易破碎、染色效率低等成为制约细胞爬片快速检测的重要因素.随着生物芯片技术的快速发展和生物芯片家族的壮大,特别是抗体芯片(阵列)、组织芯片(阵列)等以高通量、高效率、同质化检测为特征的新型生物芯片技术的出现,使得传统细胞爬片的制备和检测也必须走向高通量、高效率、同质化的道路.我们采用自行研制的一种黏附剂点样器,在一张载玻片上以规则的阵列方式固定了多达24张0.5 cm×0.5 cm细胞爬片样本的细胞阵列片,而这一阵列技术可根据实验研究的不同要求进行任意组合设计,可同时对几十张细胞爬片样本进行同质化处理,减少了实验误差,明显提高了实验成功率.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 胰腺腺泡细胞癌14例临床病理分析

    目的探讨胰腺腺泡细胞癌的临床病理学特点及其鉴别诊断.方法复习14例胰腺腺泡细胞癌手术切除标本的病理切片并做相应的免疫组化染色,5例做电镜观察.结果患者平均年龄55岁,男性9例,女性5例.肿瘤平均大小为6 cm×5 cm×4.5 cm,与周围组织境界清楚,切面呈灰褐色.镜检:肿瘤细胞排列呈腺泡状、条索状、小梁状或实性排列.细胞核大小一致,核仁清楚.细胞质丰富,呈颗粒状.免疫组化染色14例均弥漫表达抗胰蛋白酶和淀粉酶,神经内分泌标记物NSE和CgA少数细胞呈散在阳性,而胰岛素和胰高血糖素均为阴性.14例中6例于术后8~18个月内复发,4例发生肝脏、肺等远处转移.14例患者术后均死于肿瘤,存活时间13~36个月,平均24个月.结论胰腺腺泡细胞癌属于高度恶性肿瘤,在细胞学形态和免疫表型方面均与胰腺导管细胞肿瘤以及胰腺内分泌肿瘤不同.

    作者:石怀银;韦立新;李向红;笪冀平 刊期: 2005年第04期

  • Van Gieson染色液的配制及染色体会

    Van Gieson染色简称VG染色,是一种成熟的结缔组织染色方法,用于区别胶原纤维和肌纤维.其操作简单,结果可靠,是实验室常规特染方法之一.VG染色液配制的关键主要是酸性品红和苦味酸饱和液的比例.一些文献资料记载差异比较大,我们拟通过实验找出其佳配制比例.

    作者:郑集义 刊期: 2005年第04期

  • KIT和RCC在肾嫌色细胞癌和透明细胞癌颗粒细胞亚型中鉴别诊断中的价值

    肾嫌色细胞癌、透明细胞癌颗粒细胞亚型(GRCC)和肾嗜酸细胞瘤三者的鉴别在病理诊断中一直比较困难.作者应用免疫组化方法分别检测了11例肾嫌色细胞癌、12例肾嗜酸细胞瘤和6例GRCC中KIT、CD10、RCC和RON的表达,并探讨了上述指标在这3种肾上皮性肿瘤中的鉴别诊断价值.

    作者:黄文斌;陈洁宇;周晓军 刊期: 2005年第04期

  • 美国病理医师认证

    要想成为美国的病理医师,必须经过医学病理学专业认证.美国和加拿大的病理医师认证及其机构,与我国的现行状况存在着根本的差别.本文对美国的病理医师认证及其机构做简要介绍.

    作者:余英豪;郭文焕 刊期: 2005年第04期

  • 乳腺浸润性筛状癌临床病理分析

    目的探讨乳腺浸润性筛状癌(invasive cribriform carcinoma, ICC)的临床病理和免疫表型特点.方法复习8例乳腺ICC的临床病理资料,并将其组织学特征、免疫表型和预后与浸润性导管癌进行比较.结果乳腺ICC发病平均年龄42.9岁,多表现为无痛性乳房肿块,影像学微钙化常见.组织学特征是不规则癌细胞团巢呈筛状结构浸润性生长,瘤细胞核级低~中等,多数病例核分裂象少见,胞质顶浆分泌和间质成纤维细胞增生易见,常并存筛状型导管原位癌和小管癌.免疫表型显示CK34βE12高表达而CK5/6阴性,肌上皮标记阴性.8例中经典型6例、混合型2例,其发病年龄、组织学分级、腋淋巴结转移率、c-erbB-2和Ki-67阳性率均低于浸润性导管癌,近期随访结果显示预后优于浸润性导管癌. 结论乳腺ICC作为WHO新确定的浸润性癌类型,预后较好,需要与筛状型导管原位癌和腺样囊性癌等鉴别,免疫组化染色有助于确诊.

    作者:郎志强;魏兵;李新军;步宏;张红英;陈卉娇;刘柏龄;杨可 刊期: 2005年第04期

  • 转移性恶性黑色素瘤细针吸取细胞学形态观察

    恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)是皮肤恶性肿瘤的重要类型,由于肿瘤早期体积小,病变部位较隐匿,常常不被注意.临床常见出现转移病灶才引起注意的病例.我们对重庆市肿瘤医院1997年以来经手术切除组织病理学诊断为转移性MM、且手术前已作细针吸取细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)检查的病例共19例的涂片的细胞形态进行回顾性阅片,以探讨FNAC在诊断转移性MM中的价值.

    作者:何长青;李进 刊期: 2005年第04期

  • 乳腺癌中环氧化酶-2的表达及其与VEGF、MVD、MMP-9、 TIMP-1的关系

    目的研究乳腺癌组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达及其与VEGF、MVD、MMP-9和TIMP-1的相互关系,探讨其在乳腺癌发生和浸润中的生物学意义. 方法应用S-P法检测65例浸润性乳腺癌组织中COX-2、VEGF、MMP-9、TIMP-1及血管内皮标记物CD34的表达情况,并观察7 例导管原位癌(DCIS)、45例癌旁乳腺组织中COX-2的表达. 结果 65例浸润性乳腺癌、7例DCIS均表达COX-2,其中浸润性乳腺癌中COX-2高表达率为66.2%(43/65), 而45例癌旁组织中21例有COX-2弱表达,两者之间差异有显著性(P<0.01).COX-2与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、腋窝淋巴结转移均无相关性,但COX-2在浸润性乳腺癌中的表达与VEGF、MMP-9、TIIMP-1及MVD均呈正相关(P<0.05). 结论 COX-2可能与乳腺癌组织中微血管形成和细胞外基质代谢有关.

    作者:周士珍;吴强;吴正升;凌晓光;杨枫 刊期: 2005年第04期

  • 大鼠ATG肾炎和人IgA肾病肾组织中XⅧ型胶原的表达

    目的观察XⅧ型胶原在大鼠抗Thy-1系膜增生性肾小球肾炎(ATG)模型和人IgA肾病肾组织中表达,探讨XⅧ型胶原在肾小球肾炎及肾脏硬化中的作用. 方法尾静脉注射兔抗Thy-1血清制备大鼠ATG模型;Western blot检测大鼠ATG肾皮质组织中XⅧ型胶原、Ⅳ型胶原蛋白的表达变化;原位杂交确定XⅧ型胶原mRNA在ATG大鼠肾脏中的细胞定位;免疫组化ABC法观察XⅧ型胶原蛋白在人IgA肾病肾组织的分布,并对其染色强度作定量分析. 结果大鼠ATG模型中随着病变的进展肾皮质组织中XⅧ型胶原、Ⅳ型胶原蛋白的表达都呈先持续增加而后回落的趋势;原位杂交显示XⅧ型胶原mRNA在ATG大鼠肾组织中的表达细胞呈多样性;免疫组化结果证实XⅧ型胶原是一种基膜胶原蛋白,在人IgA肾病的细胞外基质沉积中表达显著增加.结论 XⅧ型胶原是一种基膜成分,肾脏内多种细胞均可表达XⅧ型胶原,其分布与Ⅳ型胶原相似.

    作者:杨静;蒋涛;李慧;赵仲华;张秀荣;张农 刊期: 2005年第04期

  • 活检病理诊断进展研讨会通知

    作者: 刊期: 2005年第04期

  • 高糖对人肾系膜细胞GSH-PX和PDGF-B表达影响及茶多酚干预作用

    目的探讨高糖条件下系膜细胞氧化失衡与血小板源性生长因子-B(PDGF-B)表达之间的关系,通过抗氧化剂茶多酚证实氧化应激在早期糖尿病中的作用.方法将培养的系膜细胞分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组,分别在0、12、24、36、48 h采用分光光度法检测上清液还原型谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,以及免疫细胞化学法和RT-PCR法检测0、12、36 h的PDGF-B mRNA和蛋白的表达情况.结果①高糖条件下GSH-PX活性下降,抗氧化能力下降,氧化失平衡;茶多酚可增加抗氧化酶GSH-PX的活性.②高糖组系膜细胞PDGF-B mRNA和蛋白的表达比正常对照组均增加(P<0.05);茶多酚干预组比高糖组有明显下降(P<0.05).结论高糖能促进系膜细胞活性氧和PDGF-B的表达增加,茶多酚可抑制该作用.

    作者:王筠;邓红;曾玉;苏宁 刊期: 2005年第04期

  • S-P法免疫组化染色探讨

    免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的抗体上的显色剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色.检测系统持续快速的发展,使免疫组化技术在现代病理诊断中的应用日益广泛,已成为常规病理诊断中不可缺少的辅助手段.但是免疫组化染色方法众多,对不同检测系统的认识和掌握,对取得好的实验结果至关重要.S-P法(链霉卵白素-过氧化物酶连结法)是20世纪90年代出现的检测系统,其灵敏度高,操作简便,价格较低,但容易出现背景染色.近年作者为减少S-P法背景着色做了许多工作,效果较稳定.现将方法介绍如下.

    作者:王群姬 刊期: 2005年第04期

  • 原发与继发性胶质母细胞瘤中survivin表达及其意义

    目的探讨survivin蛋白在原发与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中的表达及其临床病理学意义.方法分别应用免疫组化和TUNEL方法,检测56例GBM(30例原发和26例继发)中survivin的表达和细胞凋亡情况,比较survivin在原发与继发性GBM中的表达差异; 分析survivin表达与GBM临床病理学参数之间的相关性.结果 56例GBM中, 原发GBM中83%(25/30例)呈survivin阳性, 继发性GBM中仅46%(12/26例)呈阳性,二者差异有显著性(P<0.01).在15例配对的继发性GBM与其初发的低级别胶质瘤中,survivin的表达基本一致,7例survivin阳性表达的继发性GBM,其对应的7例低级别胶质瘤中,有6例同时出现survivin阳性;而且多数(4/5例)由间变性胶质瘤(III级)发展而成的继发性GBM出现了survivin的阳性表达,其阳性率明显高于由Ⅱ级胶质瘤演变而成的继发性GBM(3/10例).另外,大多数(80%)瘤体直径>5 cm的GBM 呈survivin阳性,并多表现为低的细胞凋亡指数. 结论 Survivin的阳性表达可能通过其抗凋亡效应,在绝大多数原发性GBM的发生、发展中起了十分重要的作用, 但可能只涉及部分继发性GBM的恶性演变;在继发性GBM发生、发展中,survivin阳性表达可能与其初发胶质瘤的病理级别有关.

    作者:耿军;谢丹;黎志勋;黄纲;陈晓雷;吴新建;刘泳冬;耿瑞明;文剑明 刊期: 2005年第04期

  • 浅表宫颈阴道肌纤维母细胞瘤的临床病理学观察

    目的探讨浅表宫颈阴道肌纤维母细胞瘤(superficial cervicovaginal myofibroblastoma, SCVM)的临床病理学特点、免疫表型、超微结构和鉴别诊断. 方法对1例发生于阴道和穹隆部的SCVM进行组织学观察、免疫组化标记和电镜检测. 结果患者,63岁,因阴道分泌物增多1个月并扪及有肿物自阴道口突出就诊.妇检于阴道右前壁上方和阴道左上穹隆处可见直径分别为3 cm和1.1 cm的带蒂肿块.大体上,肿块均呈椭圆形,边界清晰.低倍镜下,肿瘤位于黏膜下,呈卵圆形,与周围组织分界清楚,但无包膜.位于肿瘤浅表或周边区域内的瘤细胞成分相对稀疏,间质呈黏液样或水肿样;位于中心区域内的瘤细胞相对密集,细胞之间可见纤细、致密的胶原纤维.高倍镜下,瘤细胞由形态基本一致、淡嗜伊红染的梭形细胞和星状细胞组成,瘤细胞无明显的异型性,核分裂象罕见(<2个/50 HPF).在瘤细胞稀疏、间质呈黏液样的区域内,瘤细胞多呈短条束状、网格状、花边状或筛孔状排列,或排列紊乱,偶见多核性细胞;在瘤细胞密集、间质富含胶原纤维的区域内,瘤细胞多呈条束状或波浪状排列,并与胶原纤维的走向一致.肿瘤内含有散在分布的薄壁血管,间质内可见丰富的肥大细胞,并见少量的慢性炎细胞浸润.免疫组化标记显示,瘤细胞强阳性表达vimentin、desmin、ER和PR,灶性表达CD34,不表达EMA、α-SMA、MSA、h-caldesmon、NF、S-100蛋白、CD57和calretinin等.电镜检测显示瘤细胞部分具肌纤维母细胞分化. 结论 SCVM是一种起自于女性阴道和宫颈黏膜下浅表基质的良性间叶性肿瘤,其独特的组织学形态提示SCVM可被视为一种新的病种.免疫表型和超微结构均显示瘤细胞具肌纤维母细胞分化.SCVM应注意与同样好发于女性下生殖道的一些间叶性病变相鉴别.

    作者:郜红艺;杨文涛;王坚 刊期: 2005年第04期

  • 睾丸原发性类癌1例报道及文献复习

    1 材料与方法患者,34岁,偶感右侧阴囊部坠胀不适6天,自查发现右侧睾丸明显较左侧睾丸大,而且较左侧硬.B超示右侧睾丸实质性占位性肿块;CT示右侧睾丸增大,实质性占位,考虑为肿瘤.体检:右侧阴囊皮肤无红肿,右侧睾丸大小5 cm×3.8 cm,质地较硬,无压痛;肛门、前列腺未见异常,腹股沟淋巴结及全身体表淋巴结未触及肿大.临床诊断:右侧睾丸肿瘤,行右侧睾丸切除术.术中见右侧睾丸内肿块3.1 cm×2.8 cm,质地较硬.标本经常规石蜡切片,HE染色,并做PCK、NSE、CgA、Syn、PLAP、vimentin和AFP免疫组化(S-P法)标记.

    作者:宗阳如;何峰容;车东媛 刊期: 2005年第04期

  • 对恶性组织细胞增生症的新认识

    在1997年WHO淋巴与造血组织肿瘤分类中只有组织细胞肉瘤,而备受人们关注的恶性组织细胞增生症或恶性组织细胞增生病(malignant histiocytosis, MH)的名称不见了[1], 引起了病理与临床学家不解或疑问.提出的疑问有:(1)MH发生了什么变化?(2)对MH的新认识是什么?(3)今后MH是否真的完全消失了呢?上述问题如不澄清易导致病理与临床诊断上的矛盾,从而影响疾病的治疗.为此作者收集相关资料,介绍如下.

    作者:朱梅刚 刊期: 2005年第04期

  • 肺原发性脑膜瘤1例并文献复习

    肺原发性脑膜瘤(primary intrapulmonary meningioma)是一种十分罕见的良性肿瘤,多见于中老年人,临床上无明显症状,常在胸部X线检查时无意中发现.Kemnitz等[1]于1982年首次描述,迄今已有20余例报道,国内报道较少,我院曾诊治1例,本文结合文献对该肿瘤的临床病理特点、诊断与鉴别诊断进行分析探讨.

    作者:张仁亚;张景玉;宋化著;韩方征;纪宇华 刊期: 2005年第04期

  • 细胞阵列的制备及其应用

    细胞培养技术是分子生物学研究的重要手段,对细胞爬片进行蛋白和核酸水平的原位检测则是细胞学研究的常用方法.但是,目前对细胞爬片样本进行的免疫细胞化学、原位杂交等原位染色过程中,一般均为单张手控式染色,由于细胞爬片面积小、难固定、易破碎、染色效率低等成为制约细胞爬片快速检测的重要因素.随着生物芯片技术的快速发展和生物芯片家族的壮大,特别是抗体芯片(阵列)、组织芯片(阵列)等以高通量、高效率、同质化检测为特征的新型生物芯片技术的出现,使得传统细胞爬片的制备和检测也必须走向高通量、高效率、同质化的道路.我们采用自行研制的一种黏附剂点样器,在一张载玻片上以规则的阵列方式固定了多达24张0.5 cm×0.5 cm细胞爬片样本的细胞阵列片,而这一阵列技术可根据实验研究的不同要求进行任意组合设计,可同时对几十张细胞爬片样本进行同质化处理,减少了实验误差,明显提高了实验成功率.

    作者:苏宝山;杨军 刊期: 2005年第04期

  • 脑胶质瘤中纤维连接蛋白及其整合素β1受体的表达

    目的探讨脑胶质瘤中纤维连接蛋白(FN)及其整合素β1受体蛋白(β1 integrin)表达的临床病理联系. 方法用免疫组化S-P法检测56例胶质瘤组织中FN和整合素β1的表达情况,并进行相关临床病理分析. 结果 (1)胶质瘤组织间质血管壁FN染色随级别增高而增厚(P<0.01),且血管厚度在复发病例组明显高于无复发组(P<0.05).恶性程度高的Ⅲ级与Ⅳ级胶质瘤组织中还可见基质弥散阳性染色. (2)FN和整合素β1在胶质瘤中阳性表达率分别为30.36% (17/56)和39.29% (22/56),并均随肿瘤级别增加而增高(P<0.05,P<0.01), 两者表达存在相关性(rs=0.312,P<0.05).复发病例FN和整合素β1阳性表达率(68.42%,57.89%)均高于无复发组(10.81%,29.73%)(P<0.01,P<0.05).结论 FN及其整合素β1受体在胶质瘤组织中的高表达促进了胶质瘤的恶性进展,两者可能成为有价值的判断胶质瘤恶性程度及预后的指标.

    作者:郭滟;任大宏;熊密;杨静 刊期: 2005年第04期

  • 骶尾部血管球瘤1例

    患者,女性,31岁,肛周阵发性疼痛半年余,结肠镜示直肠后壁外压性隆起.查体:截石位6点、距肛缘5 cm处直肠后壁触及2 cm×2 cm大小肿块,质硬、有压痛、无波动感.手术所见:于骶骨尖前方取横形切口,肿物位于骶骨前方软组织中,直径约2 cm,包膜完整,质硬、界清.

    作者:刘洪;苏力夫;贾军乐 刊期: 2005年第04期

  • 《女性生殖道病理学》已翻译出版

    作者: 刊期: 2005年第04期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会