学术投稿

逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-Ⅰ在软骨细胞中的表达

宋之明;张绍昆;孙洋;任琦

关键词:人胰岛素样生长因子-Ⅰ, 逆转录病毒载体, 软骨细胞, 基因转移
摘要:目的 探讨逆转录病毒载体介导人胰岛索样生长因子-Ⅰ(human insulin-like growth factor-I,hIGF-I)体外转染兔软骨细胞后软骨细胞hIGF-I的表达情况及其生物学行为变化.方法 将构建的含有目的 基因的逆转录病毒载体pLNc-IGF-GFP体外转染兔关节软骨细胞,经G418筛选阳性克隆,采用RT-PCR及免疫化学染色检测转染软骨细胞中hIGF-I的表达情况,并在荧光显微镜下观察标记基因GFP的表达情况.采用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学染色、二甲基驱甲蓝法及ELISA法对转染hIGF-I后的软骨细胞的增殖能力及表型进行检测.结果 G418筛选后获得的软骨细胞阳性克隆,经RT-PCR和免疫细胞化学检测表明hIGF-1基因在mRNA和蛋白质水平得到稳定表达,荧光显微镜下观察转染的软骨细胞可激发出绿色荧光,证明转染成功.转染软骨细胞株的增殖能力、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的分泌水平,在转染后6 w内均高于同时间点未转染的软骨细胞,差异具有显著性(P<0.05).结论 逆转录病毒载体能有效地将hIGF-I基因转染至兔软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃,能够在较长时间维持软骨细胞表型,为进一步研究软骨缺损的组织工程修复和基因治疗打下基础.
中国老年学杂志相关文献
  • NMDA受体参与β淀粉样蛋白介导的突触可塑性损伤研究进展

    阿尔茨海默症(AD)已成为继心脏病、癌症以及脑卒中之后导致人类死亡的主要疾病.目前AD的具体发病机制仍然没有被完全阐述清楚,越来越多的研究证据显示,与学习认知功能相关的神经元突触可塑性异常在AD发病过程中扮演着重要的角色.其中以N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体发挥的作用为关键,其亚单位在AD病理过程中的作用在医学界引起了广泛关注.故研究NMDA受体介导的突触可塑性损伤机制对阐明AD发病机制具有重要意义.

    作者:陆周一;徐淑君;鲍晓明;王钦文 刊期: 2011年第10期

  • 汶川地震青川灾区老年人精神疾病流行病学调查

    目的 了解汶川地震青川灾区老年人精神疾病患病情况.方法 分层随机抽取青川灾区城区和农村1 043例60岁以上老年人,使用自编<一般情况调查表>一般问卷12项(GHQ-12)以及(SCID-I/P)病人版为筛查和诊断工具.结果 调查对象中各种精神疾病患者178例,时点患病率17.1%,且女性显著高于男性(χ<'2>=8.42,P<0.01);农村显著高于城市(χ<'2>=26.50,P<0.01).各类精神疾病中以创伤后应激障碍的时点患病率高50例(4.8%);焦虑障碍49例(4.7%);抑郁障碍38例(3.6%).老年人房屋是否受损垮塌与精神疾病有相关性(χ<'2>=3.94,P<0.05).结论 汶川地震青川灾区老年人存在明显的精神障碍,尤其是农村和女性,在进一步开展老年人心理卫生服务时应有针对性策略和措施.

    作者:杨新;胡天超;郭丽蓉 刊期: 2011年第10期

  • 46~80岁男性左心房内径参考值与地理环境的因子分析

    目的 通过探讨男性左心房内径与地理环境的关系,拟定46~80岁男性左心房内径参考值的标准.方法 收集了全国205个单位8 226例健康46~80岁男性左心房内径参考值资料,运用相关分析法分析左心房内径参考值与地理环境之间的相关性,多元线性回归和因子分析两种方法 分别建立模型,然后通过T检验选取优模型,得出其与地理环境的关系.结果 左心房内径参考值与地理环境之间有很显著的相关性,用因子分析的方法 比较出一个优的回归方程:Y=28.07-0.000 087 72X<,1>-0.000 060 27X<,2>+0.000 844 9X<,3>+0.011 99X<,4>+0.000 129 5X<,5>+0.027 21X<,6>+0.495X<,7>±2.88.Y是46~80岁男性左心房内径参考值(mm),X<,1>是海拔高度(m)、X<,2>是年日照时数(h)、X<,3>是年平均气沮(℃),X<,4>是年平均相对湿度(%)、X<,5>是年降水量(mm)、X<,6>是气温年较差(℃)、X<,7>是年平均风速(m/s),2.88是剩余标准差.并通过克里格(Kriging)插值法精确地内插出中国46~80岁男性左心房内径参考值的地理分布图.结论 如果想要获得某地的46~80岁男性左心房内径参考值,可以通过方程计算得出结果,从地理分布图也可得到中国任何地方46~80岁男性左心房内径的参考值.

    作者:井静;葛淼;向思亭;王欣;张亚平;闫燕春 刊期: 2011年第10期

  • 吸烟对COPD患者稳定期T细胞功能的影响

    目的 评价吸烟对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者稳定期T细胞功能的影响.方法 测定吸烟的COPD患者稳定期支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和外周血CD<'+><,3>、CD<'+><,4>、CD<'+><,8>T细胞和CD<'+><,4>/CD<'+><,8>水平.结果 COPD患者稳定期BALF中CD<'+><,3>、CD<'+><,4>、CD<'+><,8>、CD<'+><,4>/CD<'+><,8>,外周血中CD<'+><,3>、CD<'+><,4>、CD<'+><,8>与正常组比较均有明显差异(P<0.05);其中以持续吸烟患者BALF中CD<'+><,4>/CD<'+><,8>下降为明显(P<0.05).结论 COPD患者在稳定期免疫功能仍下降,其中以持续吸烟的COPD患者气道免疫功能下降显著.

    作者:陈菁;徐清;杨硕;刘梦琳;聂红;孙洁民 刊期: 2011年第10期

  • mB7-1修饰的B16细胞体外诱导免疫效应

    目的 探讨mB7-1基因修饰的B16细胞的体外抗瘤效应.方法 提取小鼠脾细胞mRNA,PCR法获得mB7-1片段,与pcDNA3连接,并进行酶切鉴定及测序.重组质粒经脂质体介导转染鼠B16细胞,检测基因表达,MTT法检测CTL杀伤作用.结果 完成mB7-1-pcDNA3重组载体连接及鉴定,基因测序与GenBank一致,并转染至B16细胞,检测到基因表达.经mB7-1修饰B16细胞可诱导淋巴细胞产生明显抑瘤效应.结论 应用本文方法 可获得mB7-1修饰B16细胞系,为研究其抗瘸效应莫定了基础.

    作者:金洪娟;王权;所剑 刊期: 2011年第10期

  • 三种缓泻剂治疗老年功能性便秘的疗效

    常用于功能性便秘治疗的药物分为刺激性泻剂、容积性泻剂、润滑泻剂、渗透性泻剂、促动力药物、微生态制剂等.各类药物在临床运用中各有利弊.对于老年人而言,选用缓泻剂更为安全有效<'[1,2]>.本文同时观察三种常用缓泻剂聚乙二醇4000、乳果糖和麻仁丸对老年人功能性便秘的疗效和安全性,从而为临床提供依据.

    作者:王瑞萍;李轶炜;王煜 刊期: 2011年第10期

  • 血浆脑钠肽结合组织多普勒超声对老年左室肥厚患者的鉴别诊断价值

    目的 探讨血浆脑钠肽(BNP)结合组织多普勒超声对老年高血压性肥厚型心肌病(HHCME)、肥厚型心肌病(HCM)和高血压性心脏病(或高血压性左室肥厚,H-LVH)鉴别诊断的价值.方法 分析比较年龄均>60岁的HHCME(29例)、HCM(25例)、H-LVH(34例)患者的一般临床特征、心电图、超声心动图及血浆BNP的差异.其中心脏超声指标有左房内径(LAd),室间隔厚度(IVST),左室后壁厚度(LNPWT),左室舒张末内径(LVEDd),左室射血分数(LVEF),主动脉瓣钙化,收缩期二尖瓣前叶向前运动(SAM)现象,E峰/A峰,E峰/E'峰.结果 三组患者年龄、性别组成、心率比较,差异无统计学意义(P均>0.05);HHCME组高血压病史较HCM组长(P<0.05),但二者血压水平无显著性差异(P>0.05);H-LVH组的房性心律失常及室性心律失常明显少于另两组(P<0.05).HHCME组中LVEF、E/A<1的例数、E/E'、BNP大于HCM组、H-LVH组(P<0.05),其中E/E'与BNP有较好的相关性(r=0.62,P<0.05).HCM组中LAd、IVST、SAM例数大于HHCME组、H-LVH组(JP<0.05).H-LVH组中LVEDd、主动脉瓣钙化例数大于HHCME组、HCM组(P<0.05),其中IVST与LVPWT有较好的相关性(r=0.77,P<0.05).结论 血浆BNP结合组织多普勒对老年左室肥厚患者的鉴别具有重要的价值,HHCME组舒张功能明显减退,老年HCM组也有舒张功能不全,而老年H-LVH组舒张功能尚可,其中HHCME组的血浆BNP明显升高,可能是诊断HHCME的独立标志物.

    作者:邓敏;顾翔;陈勇;张旭东;马勇;周炳元;鲍正宇;陈军;何胜虎 刊期: 2011年第10期

  • 鞘内注射甲泼尼龙治疗多发性硬化的疗效

    目的 探讨甲泼尼龙鞘内注射治疗多发性硬化(MS)的疗效及安全性.方法 将101例MS按主要治疗方法 分为鞘内注入甲泼尼龙(MPS)组、MPS冲击组及常规地塞米松组(DXM),比较治疗后各组不同时间的Kurtzke扩展致残量表(EDSS)评分减少数及副作用的发生率.结果 鞘内注入MPS组治疗早期EDSS评分减少较其他两组显著,尤其对于脊髓受累为主的MS患者EDSS评分改善更为明显.结论 鞘内注入MPS与两种常规方法 比较见效快,建议用于脊髓受累为主的急性期MS.

    作者:董艳玲;李吕力;李瑶宣;梁浩;滕晓茗;肖继东;张德敏 刊期: 2011年第10期

  • 辽西高血压高发地区人群脉压与脑卒中的相关性

    目的 研究辽宁省彰武县农村人群脉压等血压相关指标与脑卒中的关系.方法 应用随机抽样的方法 对辽宁省彰武县5 208人进行一般情况、血压、脑卒中患病情况的调查并进行统计学分析.结果 脑卒中组与非卒中组按照脉压水平分级后,其组间差别有显著意义(P<0.01),脑卒中组男女脉压分布趋势一致.30岁后各年龄组按照脉压水平分级后,脑卒中组与非卒中组组间差异明显(P<0.05).收缩压、舒张压、脉压、平均动脉压两组间均存在显著差异(P<0.01).随脉压的增大,脑卒中OR值增加.结论 此地区人群脑卒中患病率与脉压具有明显的相关性,而且患病危险性随脉压增高而增加.不同性别间无明显差别.

    作者:薛维爽;张俊湖;滕伟禹;王海龙;时景璞;付凌雨;李辉;董卫;董亚珞;周波;李继光 刊期: 2011年第10期

  • YKL-40——一个新的心血管生物标志物

    自从弗雷明翰心脏研究结果报道C-反应蛋白(CRP)作为心血管生物标志物后,人们相继开展了许多有关心血管疾病标志物的研究.至今,CRP仍被认为是敏感的非特异的炎症标志物,但是研究还发现了一些新的炎症标志物,例如白介素(IL)-18、基质金属蛋白酶-9、脂联素和CD40配体<'[1]>.几丁质酶-3样蛋白-1(chtinase-3-like-1 protein,YKL-40)是与心血管疾病相关的另一种新的炎症标志物,参与内皮功能障碍和新生血管形成,并且可能直接参与动脉粥样硬化的过程,从而导致心血管疾病.

    作者:宗同岩;蔡九英;宋晓坤;占育 刊期: 2011年第10期

  • AGEs对糖尿病大鼠骨质疏松的作用机制

    目的 探讨AGEs对骨质疏松症的作用机制.方法 取SD大鼠腹腔内注射STZ诱导建立糖尿病骨质疏松动物模型,观察AGEs血清学、骨密度、骨组织中BMP-2基因、骨密度及骨代谢的变化.结果 糖尿病大鼠BMD、生物力学指标、骨组织形态计量学反映成骨活性的参数均降低,AGEs水平较正常对照组明显升高(P<0.05).糖尿病组BMP-2 mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组明显降低.血清AGEs与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,相关系数分别为-0.715(P<0.05)、-0.621(P<0.05).结论 糖尿病大鼠血清AGEs含量显著增高,与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,AGEs和BMP-2均参与了糖尿病骨质疏松的发生发展.

    作者:薛昊罡;冷冰;马恩元;蒋维海;崔双;单广宇;苗婷婷 刊期: 2011年第10期

  • 直肠癌Dixon术后局部复发相关因素分析

    研究报道,直肠癌根治性手术后的局部复发率在10%~30%左右[1].直肠癌经腹直肠切除吻合术(Dixon术)术后局部复发率虽然不高,但其病死率高达80%~90%,成为直肠癌术后主要致死原因.随着患者对生活质量要求的提高以及国内对直肠癌手术技术的改进,直肠下段癌包括距肛门3~4 cm肿瘤也尽可能实现Dixon,由此而产生的术后局部、尤其是吻合口复发的发生率相对增多.在局部复发的病例中,只有22%~47%可以再次手术,改行不保留肛门的腹会阴联合切除术(Mi-les术),但再次手术后的5年生存率仅10%,全部复发的病例再次治愈的机会仅3%~5%,预后极差,严重影响了治疗效果[2].因此,如何在保证疗效的前提下行保肛手术,降低Dix-on术后局部复发率具有重要的临床意义.关于手术操作可能引起的脱落于肠腔、腹腔中的癌细胞是否为直肠癌术后局部复发的危险因素的临床研究未见报道.本文对术后局部复发可能的危险因素进行统计分析,并特别对术中肠腔、腹腔冲洗液中的肿瘤细胞进行定量分析,探索直肠癌行Dixon术后局部复发的可能相关因素.

    作者:郑晓川;梁乃超;王军生;张桂清 刊期: 2011年第10期

  • 中年女性肥厚型心肌病消融术后心肌酶变化

    中年女性肥厚梗阻型心肌病较常见,仅次于冠心病,以左心室(右心室)呈非对称性的室间隔肥厚为特征,导致主动脉前庭收缩期压力阶差(LVOTPG),致心律失常和猝死较常见<'[1]>.目前常用药物、双腔起搏器等治疗方法,但存在药物不良反应、起搏无效等问题<'[2]>.经皮冠状动脉室间隔消融术是治疗肥厚型梗阻性心肌病的一种新术式,其实质是经皮穿刺进入,使用化学方法使室间隔肥厚程度减轻,主动脉前庭增宽,达到降低收缩期压力阶差、改善患者临床症状、提高生存质量的目的<'[3]>.本文拟监测消融术后心肌酶的变化及相应不良反应的发生情况.

    作者:陈晓丽;张辉;郭丽红;姜华 刊期: 2011年第10期

  • 逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-Ⅰ在软骨细胞中的表达

    目的 探讨逆转录病毒载体介导人胰岛索样生长因子-Ⅰ(human insulin-like growth factor-I,hIGF-I)体外转染兔软骨细胞后软骨细胞hIGF-I的表达情况及其生物学行为变化.方法 将构建的含有目的 基因的逆转录病毒载体pLNc-IGF-GFP体外转染兔关节软骨细胞,经G418筛选阳性克隆,采用RT-PCR及免疫化学染色检测转染软骨细胞中hIGF-I的表达情况,并在荧光显微镜下观察标记基因GFP的表达情况.采用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学染色、二甲基驱甲蓝法及ELISA法对转染hIGF-I后的软骨细胞的增殖能力及表型进行检测.结果 G418筛选后获得的软骨细胞阳性克隆,经RT-PCR和免疫细胞化学检测表明hIGF-1基因在mRNA和蛋白质水平得到稳定表达,荧光显微镜下观察转染的软骨细胞可激发出绿色荧光,证明转染成功.转染软骨细胞株的增殖能力、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的分泌水平,在转染后6 w内均高于同时间点未转染的软骨细胞,差异具有显著性(P<0.05).结论 逆转录病毒载体能有效地将hIGF-I基因转染至兔软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃,能够在较长时间维持软骨细胞表型,为进一步研究软骨缺损的组织工程修复和基因治疗打下基础.

    作者:宋之明;张绍昆;孙洋;任琦 刊期: 2011年第10期

  • 90例局部晚期宫颈癌放射治疗的临床分析

    宫颈癌的发病事和死亡率仅次于乳腺癌,是女性生殖道常见的恶性肿瘤,发病有逐年低龄化趋势.放射治疗是宫颈癌的主要治疗手段.本文对我院90例局部晚期宫颈癌体外照射加<'192>Ir高剂量率腔内照射治疗的疗效及放射反应进行回顾性分析.

    作者:吴洪芬;江志兰;罗秀芬;刘士新 刊期: 2011年第10期

  • 康奈尔医学指数评价三峡库区老年精神健康状况

    目的 探讨三峡库区老年人身心健康的现状,提高医疗保健的预见性、有效性、针对性.方法 采用多级分层随机抽样方法,应用康奈尔医学指数(CMI)对三峡库区604名老年人身心状况进行测验.结果 38.1%的库区老年人存在身心健康障碍,随着年龄增加有递增趋势.受教育程度高、有配偶老年人身心健康状况较好(P<0.05).躯体症状与精神症状呈正相关(r=0.629,P<0.01).结论 库区老年人总体身心健康状况较好,但仍有一些身心问题值得关注.

    作者:程雪;蒙华庆;刘智;邱建国;杨辉;汪波;宁洁;周建初 刊期: 2011年第10期

  • 丧偶事件对老年人的影响

    目的 了解丧偶事件对老年人生理、心理和社会三个层面的影响,为增强丧偶老年人的适应能力提供参考.方法 采用北京老龄化多维纵向数据,对样本进行横向和纵向对比.结果 老年人丧偶前的自评健康状况显著高于丧偶后(P<0.05).丧偶老年人的抑郁量表得分14.77,有偶老年人抑郁量表得分8.69.丧偶老年人抑郁量表得分显著高于有偶老年人(P<0.05).老年人丧偶前后的家庭类型有显著差异(P<0.05).缩论丧偶事件对老年人的健康状况和家庭关系均有显著影响.

    作者:米峙 刊期: 2011年第10期

  • 老年心脏病患者术后延迟机械通气危险因素分析及处理

    老年人因其特殊生理特点,身体重要器官代偿能力差,手术耐受性差,因此心脏病术后并发症明显增多,术后延迟机械通气严重影响病人预后[1,2].了解导致术后延迟机械通气的危险因素,可以从多个角度加以预防,能够降低术后延迟机械通气的发生率,改善病人预后.

    作者:谢艾妮;董念国;张凯伦 刊期: 2011年第10期

  • 康脑液2号对局灶性脑缺血再灌注大鼠的治疗作用及其机制

    目的 观察康脑液2号对局灶性脑缺血再灌注(I/R)大鼠的治疗作用.方法 150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组,康脑液2号高、中、低剂量组.线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.大鼠缺血2 h,于再灌注24 h后观察神经功能,再灌注1、3、7,14,21 d,HE染色观察病理变化,免疫组织化学法观察各组大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)表达,再灌注21 d免疫组织化学法标记CD105检测血管密度.结果 与模型组相比,康脑液2号治疗组神经功能及病理改变明显改善.各种促血管生成因子明显多于模型组(P<0.05或P<0.01),脑组织血管显著增多(P<0.05或P<0.01).结论 康脑液2号能治疗脑I/R大鼠,可能促进脑I/R大鼠缺血周围区域血管新生.

    作者:梁起保;薛茜;赵秀芳;石会娟;邹玉安 刊期: 2011年第10期

  • 芝麻素对大鼠非酒精性脂肪肝的预防作用

    目的 观察芝麻素对大鼠实验性非酒精性脂肪肝病的预防作用并对可能的机制进行探讨.方法 健康雄性SD大鼠40只按体重随机分为5组,正常对照组、高脂模型组、芝麻索低、中、高剂量组.9 w后处死动物取肝脏,测肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);逆转录PCR检测肝组织肝细胞色素P450(CYP)2E1 mRNA表达水平变化;肝组织切片观察肝脏病理改变.结果 芝麻素能降低肝脏各脂质指标,提高SOD活性,降低MDA含量,抑制CYP2E1的表达,减轻肝组织脂肪变性程度.结论 芝麻素对非酒精性脂肪肝有一定的预防作用.

    作者:代利;李绣花;赵新平;董小霞;倪淑华 刊期: 2011年第10期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅