学术投稿

由漱口液提取人基因组DNA量与质的分析

刘海军;秦雪娇;张林娜;陈红梅;郭永园

关键词:漱口液, DNA, 遗传研究
摘要:目的 评价一种新的基因样本获取办法用于大样本遗传学研究.方法 通过邮寄的方法获得病人的漱口液(mouthwash)共492份,用氯-酚法提取其中脱落的口腔上皮细胞中的DNA,测定提取数量;通过聚合酶链反应(PCR)用提取的DNA 扩增大分子红视蛋白DNA片段,并将纯化的DNA产物进行转化生长因子β诱导因子的部分片段基因测序,以评定DNA提取质量.结果 每份样本的DNA提取量中位数为52.63 μg(10%及90%界值分别为16和143.25 μg),其中10~20 ng的DNA即可获得好的PCR扩增产物,并能得到清晰的基因测序结果.结论 用邮寄的方法,采用生理盐水做漱口液,采集口腔黏膜上皮细胞,从中提取的人类DNA的数量和质量均理想,在实际应用中结果可靠.
中国老年学杂志相关文献
  • rLent/NT4-NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响

    目的 探讨神经保护肽慢病毒(rLent/NT4-NAP)感染老年性痴呆(AD)大鼠鼻黏膜后分泌表达NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响.方法 选择无菌级雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、慢病毒组,每组10只.Aβ1-40联合转移生长因子β1(TGFβ1)注入各实验大鼠左侧海马区制备AD动物模型,利用水迷宫实验检测大鼠记忆能力,利用原位杂交方法观察大鼠海马内NF-κB mRNA和caspase-3 mRNA的表达.结果 AD组与正常组、假手术组比较,逃避潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);慢病毒组与AD组比较逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);慢病毒组与正常组、假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05).原位杂交结果示:AD组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平明显升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).慢病毒组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平与AD组比较明显降低(P<0.01);与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 rLent/NT4-NAP感染AD大鼠鼻黏膜后能够分泌表达 NAP;NAP能够下调AD大鼠海马NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA的表达,抑制细胞凋亡,对AD大鼠海马神经元具有保护作用.

    作者:白晶;吴江;杨弋;杨薇 刊期: 2009年第06期

  • 老年人玻璃体基底部的形态学特征

    目的 探讨老年人玻璃体基底部的形态学特征,揭示其在基底部视网膜病变中的作用.方法 55对(110只)眼库眼球,机械法分离玻璃体皮质与视网膜至周边部黏连区,吲哚美辛(ICG)标记其后缘,显示玻璃体基底部的形态.结果 完全性玻璃体后脱离(cPVD)终止于基底部后缘,鼻侧宽于颞侧;基底部后缘有玻璃体视网膜黏连和视网膜撕裂.结论 老年人基底部形态受cPVD影响;cPVD及局部玻璃体视网膜黏连,可造成视网膜撕裂.

    作者:于朝华;王静 刊期: 2009年第06期

  • 带状疱疹后神经痛的治疗

    带状疱疹后神经痛(PHN)是指带状疱疹皮损消退后,受累区皮肤疼痛持续3个月以上,因其发生率高(9%~13%带状疱疹患者可出现带状疱疹后神经痛、60岁以上老龄患者带状疱疹后神经痛发病率可高达50%~75%[1])、持续时间长(可达3.5年).迄今仍有50%的带状疱疹后神经痛患者未得到合理、有效的治疗[2],所以其治疗尤为重要,现综述如下.

    作者:刘春梅;赵桂香;张红岩;李惠敏 刊期: 2009年第06期

  • PPARγ基因多态性与2型糖尿病脂代谢的关系

    目的 探讨PPARγ基因多态性与2型糖尿病患者脂代谢异常的关系.方法 本研究共纳入191例2型糖尿病患者.以rs1875796为遗传标记,应用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测PPARγ基因rs1875796的基因型.应用氧化酶法测定入组患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平.结果 2型糖尿病患者PPARγ基因rs1875796的等位基因频率与TC、HDL-C和LDL-C水平无明显相关.但经性别分层后,女性2型糖尿病患者的TC、LDL-C水平与PPARγ基因rs1875796的等位基因频率呈显著性相关(分别为χ2=9.378,P=0.002和χ2=11.187,P=0.000 8).携带C等位基因个体的TC水平和LDL-C水平明显高于携带T等位基因的个体.结论 女性2型糖尿病患者TC、LDL-C水平与PPARγ基因ts1875796多态性可能有关.

    作者:李蕴博;杜丹华;郭晖;高鹏 刊期: 2009年第06期

  • 菟丝子水提物对衰老模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

    目的 探讨菟丝子水提物对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响.方法 将Wistar大鼠30只,随机分为青年对照组,衰老模型组,模型给药组,制作D-半乳糖衰老模型,模型给药组同时灌服菟丝子水提物.观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性的变化.结果 菟丝子水提物可提高心肌线粒体SOD的活性、降低MDA的含量;并且使呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性明显升高.结论 菟丝子水提物能提高心肌线粒体抗氧化能力,改善线粒体能量代谢障碍,维护线粒体功能.

    作者:张丽;张鹏霞;王昭;朴金花;张涛;徐辉 刊期: 2009年第06期

  • α-亚麻酸对大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响

    目的 探讨α-亚麻酸对第二代大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响.方法 以富含α-亚麻酸的青花椒籽油饲料饲喂SD大鼠两代,Morris水迷宫测定仔代大鼠的学习记忆能力,电子显微镜观察仔代大鼠海马神经元超微结构的变化.结果 青花椒籽油组大鼠学习记忆能力有一定程度提高;青花椒籽油组海马神经元蛋白质合成增强,细胞分化程度增加.结论 富含α-亚麻酸的青花椒籽油对大鼠大脑具有一定的营养和保健作用.

    作者:田枫;齐晓旭;郑振辉 刊期: 2009年第06期

  • bFGF真核表达载体的构建及其在MSCs中的稳定表达

    目的 构建人碱性成纤维生长因子(bFGF)真核表达载体,观察其在人骨髓间充质干细胞(MSCs)内的表达.方法 应用RT-PCR从人胎盘组织中扩增出bFGF,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上.利用脂质体将基因转染MSCs内,利用G418进行基因的表达筛选,通过RT-PCR和Western blot进行基因表达的检测.结果 扩增出人bFGF基因成功构建在bFGF-pcDNA3.1真核表达载体上.经G418筛选转染的MSCs存活十代以上.经RT-PCR及Western blot检测发现转染bFGF-pcDNA3.1真核表达载体的MSCs能够大量稳定表达bFGF.结论 构建的bFGF-pcDNA3.1真核表达载体可在MSCs内得到稳定的表达.

    作者:杨春辉;杜珍武;卜丽莎;尹维田 刊期: 2009年第06期

  • 环磷腺苷葡胺治疗老年心肌梗死后心功能不全的临床观察

    老年心肌梗死后心功能不全是由冠状动脉供血不足及心肌坏死导致的心肌代谢不良等多种因素所致.梗死后存活的心肌损伤严重,心功能不全常反复发作,进一步加重了心肌损伤,尽管治疗心功能不全的药物不断研发及治疗手段不断进展,但临床效果仍不满意,复发的频次、心功能的改善及总死亡率并没有发生根本改变[1].本组56例在常规应用利尿剂,血管扩张剂及洋地黄类等药物的治疗基础上,应用环磷腺苷葡胺(MAC)治疗心肌梗死后心功能不全的患者取得了满意效果,现报告如下.

    作者:张仲君;马英华;苗嵩;韩津梁 刊期: 2009年第06期

  • 快速老化小鼠行为学增龄性研究

    目的 对快速老化小鼠SAMP8老化征象、焦虑状况及学习记忆能力的增龄性变化进行系统研究,为推广该模型在老化研究中的应用提供较全面的实验依据.方法 选用雄性4、8、12月龄SAMP8,以同龄同性别正常老化的SAMR1为对照,应用老化度评分、广场实验、高架十字迷宫实验及Morris水迷宫测试SAMP8的老化度、焦虑度和学习记忆等行为学的增龄性变化.结果 与SAMR1比较,SAMP8在4月龄尚未表现出明显的学习记忆障碍(P>0.05),8月龄、12月龄明显加重(P<0.05,P<0.01);活动度检测发现8月龄SAMP8活动度增加显著(P<0.01),对危险的识别度降低(P<0.001);12月龄的SAMP8进一步加重,并存在明显的增龄性老化体征(P<0.001)和焦虑情绪.结论 SAMP8随增龄存在快速老化的特征,证实SAMP8是研究老化、老年性痴呆等疾病的理想模型.

    作者:王枫;陈洪;于淼;孙晓江 刊期: 2009年第06期

  • 难治患牙根管内封氢氧化钙加碘仿的临床疗效观察

    根管治疗术作为一种常规治疗方法广泛应用于临床中.患牙经过根管预备,传统的根管内封药[甲醛甲酚(FC)]后大部分患牙可以治愈.但对一些病程长、长期渗出、疼痛、根尖周区破坏较大的难治病例疗效不理想.我科对常规根管内封药后仍有疼痛或大量渗出的患牙,行氢氧化钙加碘仿根管内封药[1],现将疗效观察报道如下.

    作者:黄滔 刊期: 2009年第06期

  • HGF/c-Met系统在大鼠肝纤维化转归中作用及其机制

    目的 研究HGF/C-met 系统在肝纤维化发生和转归过程中的表达水平,探讨其逆转纤维化的作用机制.方法 60只雄性 Wistar大鼠应用硫代乙酰胺(TAA)饮用水喂养,制备肝纤维化模型.42只大鼠模型制备成功后,随机分为 7 组,每组6只.每隔2 w处死一组大鼠,留取血清检测肝功能,并检测肝组织中羟脯氨酸含量,HE和天狼星红染色,进行组织学观察,同时应用RT-PCR技术检测HGF及其受体c-Met的表达量,以正常大鼠6只为对照.结果 肝纤维化各组HGF/c-Met mRNA表达显著高于正常对照组,随着停止应用TAA时间的延长,肝功能、组织学改变、羟脯氨酸含量及HGF/c-Met的mRNA表达水平均逐渐恢复,且与停药时间呈正相关关系.结论 肝损伤发生后,通过增加HGF/c-Met系统的表达水平,可促进肝细胞再生,逆转肝纤维化.

    作者:刘金霞;孙殿兴;曹治宸 刊期: 2009年第06期

  • 欧瑞姆护理程序在胃镜下治疗消化道息肉中的应用

    胃肠息肉是常见、多发性消化道疾病,因可发生癌变和出血,故发现后应予切除[1],为了提高胃镜下高频电凝、电切上消化道息肉的安全、有效性,本研究以美国护理理论家Dorothea E.orem博士提出的护理模式为依据、以该护理程序为指导,对本组患者实施整体护理干预,观察效果.

    作者:崔爱群 刊期: 2009年第06期

  • 老年孤立性心房颤动临床特点的长期随访分析

    心房颤动(AF)是临床上常见的有重要意义的心律失常,可发生在有或无原发心脏病基础上,长期持续性心动过速可引起心脏扩大,甚至心功能不全,而快速心室率被控制后,心脏功能可部分或完全恢复,称谓心动过速性心肌病(TCM)[1].任何年龄均可发生,但很少有对老年人长期追踪报道.本研究对24年中收集并随访的55例慢性孤立性AF患者进行了回顾研究.

    作者:王亚真;陈昕;苏轮;薛俊仙 刊期: 2009年第06期

  • 睾酮对衰老心肌细胞及细胞周期调控因子的作用

    目的 探讨不同剂量睾酮对心肌细胞衰老的干预作用及其可能机制.方法 用1 μmol/L、 100 nmol/L、10 nmol/L三种剂量睾酮干预自然衰老的小鼠心肌细胞,应用流式细胞仪检测各组细胞周期分布,用RT-PCR及Western印迹检测各组细胞p16INK4a、cyclinD1 mRNA、蛋白及去磷酸化RB蛋白的表达.结果 与衰老心肌细胞相比,1 μmol/L、100 nmol/L、10 nmol/L睾酮干预细胞G0/G1期比例明显降低(P<0.05),这一作用具有剂量依赖性.睾酮干预可上调cyclinD1mRNA及蛋白表达,下调p16INK4a mRNA及蛋白表达,并使去磷酸化RB蛋白表达下降(P<0.05),而这些作用均可被雄激素受体阻断剂而不被雌激素受体阻断剂所阻断(P<0.05).结论 睾酮可剂量依赖性的抑制小鼠心肌细胞衰老,这一作用部分是通过睾酮上调cyclinD1表达,下调p16INK4a及去磷酸化RB蛋白表达而实现的.

    作者:邢晓雯;吴赛珠;阮云军;何天民;刘新强;赖文岩 刊期: 2009年第06期

  • 心理行为干预对帕金森病患者家属心理状况及社会支持度的影响

    目的 探讨心理行为干预对帕金森病(PD)患者家属心理状态及社会支持度的影响效果.方法 对68名PD患者家属进行为其4 w的心理行为干预,采用症状自评量表(SCL-90)、抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)以及社会支持评定量表,将干预后的评分与对照组进行比较.结果 4 w干预后,PD患者家属SCL-90躯体化、抑郁、焦虑和偏执指标,以及SDS 、SAS得分和社会支持度均较对照组明显改善(P<0.05).结论 心理行为干预可有效改善PD患者家属的心理状况,提高其社会支持度.

    作者:苑杰;王静;徐士军;郝秀凤 刊期: 2009年第06期

  • 微创血肿抽吸治疗对脑出血兔神经元特异性烯醇化酶的影响

    目的 探讨微创血肿抽吸治疗脑出血兔神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量变化在预后评估中的价值.方法 分别进行血肿体积、Zea Longa评分、血清NSE浓度检测.结果 ①与对照组比较治疗组在治疗后3、7 d血肿体积明显缩小(P<0.001),神经功能缺失体征评分差异显著(P<0.05);②与对照组比较,治疗组治疗后3、7 d血清NSE水平显著降低(均P<0.001);③血清NSE浓度既与血肿体积呈正相关,也与预后呈正相关.结论 早期微创血肿抽吸治疗可显著降低血肿体积和血清NSE水平,改善预后.提示NSE是预测早期神经功能损害和恢复的可靠指标.

    作者:余震;唐玲;陈莉芬;张东平;胡长林 刊期: 2009年第06期

  • 急性期脑梗死152例血管分析

    目的 观察缺血性脑卒中早期血管造影显示的血管狭窄或闭塞的比率和分布.方法 选择发病12 h以内中度至重度缺血性脑卒中患者,头颅CT排除出血,行全脑血管造影.使用血管直径和血管床灌注评分(TIMI)判断血管狭窄程度.分析受累血管数目、血管狭窄部位以及血管狭窄形态.结果 共收集了152例患者,平均 58岁,其中男性118例.发病至血管造影时间(500±160)min.头颅CT显示陈旧性梗死灶57例,可疑低密度2 例,其余正常.血管造影显示102例患者有血管狭窄或闭塞.50例(33%)血管造影正常.基底动脉受累为常见.多部位和多血管受累达24例(16%).结论 脑梗死急性期显示大部分患者有肯定的脑血管狭窄或者闭塞.应当根据血管病变程度、部位和同时受累的血管数目选择治疗方法和治疗途径.

    作者:庞猛;王守春;朱辉;杨弋;冯加纯 刊期: 2009年第06期

  • 由漱口液提取人基因组DNA量与质的分析

    目的 评价一种新的基因样本获取办法用于大样本遗传学研究.方法 通过邮寄的方法获得病人的漱口液(mouthwash)共492份,用氯-酚法提取其中脱落的口腔上皮细胞中的DNA,测定提取数量;通过聚合酶链反应(PCR)用提取的DNA 扩增大分子红视蛋白DNA片段,并将纯化的DNA产物进行转化生长因子β诱导因子的部分片段基因测序,以评定DNA提取质量.结果 每份样本的DNA提取量中位数为52.63 μg(10%及90%界值分别为16和143.25 μg),其中10~20 ng的DNA即可获得好的PCR扩增产物,并能得到清晰的基因测序结果.结论 用邮寄的方法,采用生理盐水做漱口液,采集口腔黏膜上皮细胞,从中提取的人类DNA的数量和质量均理想,在实际应用中结果可靠.

    作者:刘海军;秦雪娇;张林娜;陈红梅;郭永园 刊期: 2009年第06期

  • 老年岩斜坡区脑膜瘤手术治疗体会

    斜坡位于颅底中央区,位置深在,有脑干及许多重要的神经、血管结构穿行其中.岩骨-斜坡区的肿瘤为颅内肿瘤中手术难度大的一种,尤其是脑膜瘤,具有基底宽、血运丰富,质地硬韧且常与脑干黏连紧密,且被神经血管包绕的特点,手术难度极大.关于岩斜坡区的手术入路,比较常用的有经乙状窦前入路、单纯经幕上颞枕下入路及幕上下联合入路等.我科自1997年至2007年共收治60岁以上的老年岩斜坡区脑膜瘤病人13例,早期3例经颞枕下入路,中期的4例经乙状窦前入路,后期的6例均经颞枕下入路,现将治疗体会报告如下.

    作者:许海洋;赵刚;朱晓波 刊期: 2009年第06期

  • 老年人慢性咳嗽68例病因及频率分布特点分析

    慢性咳嗽常给诊断和治疗带来困难[1],影响患者的生活质量.探讨老年人慢性咳嗽的病因及频率分布特点,有助于其诊断和治疗.1 对象与方法1.1 对象 2006年6月~2007年5月因持续性咳嗽连续在本院呼吸科门诊就诊的患者共185例.入选标准:年龄≥16岁,咳嗽病程>8 w,无喘息、咯血、发热等症状,包括抗生素在内的一般治疗无效,肺部体检无啰音;

    作者:李建华;宋丰贵 刊期: 2009年第06期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

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