学术投稿

bFGF真核表达载体的构建及其在MSCs中的稳定表达

杨春辉;杜珍武;卜丽莎;尹维田

关键词:碱性成纤维生长因子, 骨髓间充质干细胞, 基因稳定表达
摘要:目的 构建人碱性成纤维生长因子(bFGF)真核表达载体,观察其在人骨髓间充质干细胞(MSCs)内的表达.方法 应用RT-PCR从人胎盘组织中扩增出bFGF,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上.利用脂质体将基因转染MSCs内,利用G418进行基因的表达筛选,通过RT-PCR和Western blot进行基因表达的检测.结果 扩增出人bFGF基因成功构建在bFGF-pcDNA3.1真核表达载体上.经G418筛选转染的MSCs存活十代以上.经RT-PCR及Western blot检测发现转染bFGF-pcDNA3.1真核表达载体的MSCs能够大量稳定表达bFGF.结论 构建的bFGF-pcDNA3.1真核表达载体可在MSCs内得到稳定的表达.
中国老年学杂志相关文献
  • 微创血肿抽吸治疗对脑出血兔神经元特异性烯醇化酶的影响

    目的 探讨微创血肿抽吸治疗脑出血兔神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量变化在预后评估中的价值.方法 分别进行血肿体积、Zea Longa评分、血清NSE浓度检测.结果 ①与对照组比较治疗组在治疗后3、7 d血肿体积明显缩小(P<0.001),神经功能缺失体征评分差异显著(P<0.05);②与对照组比较,治疗组治疗后3、7 d血清NSE水平显著降低(均P<0.001);③血清NSE浓度既与血肿体积呈正相关,也与预后呈正相关.结论 早期微创血肿抽吸治疗可显著降低血肿体积和血清NSE水平,改善预后.提示NSE是预测早期神经功能损害和恢复的可靠指标.

    作者:余震;唐玲;陈莉芬;张东平;胡长林 刊期: 2009年第06期

  • 脑卒中病人的自我护理能力及影响因素分析

    脑卒中是一类严重威胁老年人健康和寿命的常见疾病,具有发病率高、病死率高、致残率高等特点,给家庭和社会带来沉重的负担.随着医学模式的转变和健康观念的提升,人们逐渐认识到要维持和促进健康,不能完全依赖家庭和专业人员的照顾,更多的是需要自我保健和自我护理,为自己制订科学、合理的照顾及适应方式.因此,本研究通过对老年脑卒中患者进行随访,观察其预后情况并对影响因素进行分析,从而改善患者预后,提高其自我护理能力及生活质量,同时为临床决策提供科学依据.

    作者:赵文慧;孙华 刊期: 2009年第06期

  • 老年胶质瘤患者的围手术期的治疗体会

    老年胶质瘤患者相对较少,且病理类型以低级别为主,所以老年患者的复发周期相对较长,因此更应该重视老年胶质瘤患者术后的生存质量.本文回顾了我科自2005年1月至2008年1月收治的149例老年胶质瘤患者治疗过程.

    作者:刘宝斌;朱晓波;许海洋;王修哲;赵刚 刊期: 2009年第06期

  • 腹型肥胖的流行病学筛查新指标体系

    目的 腹型肥胖对代谢综合征(MS)诊断意义重大,本研究旨在探讨诊断腹型肥胖的创新指标.方法 采取多层随机抽样调查的方法在长春市周边的人群中随机抽样3 335例,根据中国成人血脂异常防治指南关于MS诊断标准分为MS患者组、高危人群组、正常对照组,初步检测所需指标,按公式计算三项筛选指标,并进行组间比较.结果 MS患者组及高危人群组三项指标均明显高于正常对照组.结论 通过初步研究,本研究三项创新指标在MS人群和高危人群及正常人群具有统计学差异,说明此三项指标设计合理、科学.

    作者:张斯棋;孔俭;何淑梅;高海梅 刊期: 2009年第06期

  • bFGF真核表达载体的构建及其在MSCs中的稳定表达

    目的 构建人碱性成纤维生长因子(bFGF)真核表达载体,观察其在人骨髓间充质干细胞(MSCs)内的表达.方法 应用RT-PCR从人胎盘组织中扩增出bFGF,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上.利用脂质体将基因转染MSCs内,利用G418进行基因的表达筛选,通过RT-PCR和Western blot进行基因表达的检测.结果 扩增出人bFGF基因成功构建在bFGF-pcDNA3.1真核表达载体上.经G418筛选转染的MSCs存活十代以上.经RT-PCR及Western blot检测发现转染bFGF-pcDNA3.1真核表达载体的MSCs能够大量稳定表达bFGF.结论 构建的bFGF-pcDNA3.1真核表达载体可在MSCs内得到稳定的表达.

    作者:杨春辉;杜珍武;卜丽莎;尹维田 刊期: 2009年第06期

  • 快速老化小鼠行为学增龄性研究

    目的 对快速老化小鼠SAMP8老化征象、焦虑状况及学习记忆能力的增龄性变化进行系统研究,为推广该模型在老化研究中的应用提供较全面的实验依据.方法 选用雄性4、8、12月龄SAMP8,以同龄同性别正常老化的SAMR1为对照,应用老化度评分、广场实验、高架十字迷宫实验及Morris水迷宫测试SAMP8的老化度、焦虑度和学习记忆等行为学的增龄性变化.结果 与SAMR1比较,SAMP8在4月龄尚未表现出明显的学习记忆障碍(P>0.05),8月龄、12月龄明显加重(P<0.05,P<0.01);活动度检测发现8月龄SAMP8活动度增加显著(P<0.01),对危险的识别度降低(P<0.001);12月龄的SAMP8进一步加重,并存在明显的增龄性老化体征(P<0.001)和焦虑情绪.结论 SAMP8随增龄存在快速老化的特征,证实SAMP8是研究老化、老年性痴呆等疾病的理想模型.

    作者:王枫;陈洪;于淼;孙晓江 刊期: 2009年第06期

  • 心理干预对老年原发性高血压患者生活质量的影响

    目的 探讨心理干预对社区老年原发性高血压(EH)患者生活质量的影响.方法 用前瞻随机对照方法,对79例社区老年EH患者追踪心理干预1年半,以世界卫生组织生活质量量表简表(WHOQOL-BREF)每半年对研究对象进行1次评定.结果 第一次随访干预组的生理领域、心理领域、环境领域的生活质量均较对照组高(P<0.01),第二、三次随访干预组各领域的生活质量都比对照组高(P<0.01;P<0.05).干预组第一次随访时生理领域、社会领域生活质量较随访前下降(P<0.01),环境领域较随访前增高(P<0.05);第二次随访时的生理领域分值、社会领域分值较随访前下降(P<0.01,P<0.05),心理领域分值、环境领域分值较随访前增高(P<0.01,P<0.05);第三次随访时生理领域分值较随访前下降(P<0.01),心理领域分值、环境领域分值较随访前增高(P<0.01,P<0.05).对照组各领域的生活质量3次随访期间与随访前相比都显著下降(P<0.01,P<0.05).结论 以社区为基础的心理干预可改善老年EH患者的生活质量.

    作者:关念红;程敏锋;王相兰;胡三红;张晋碚 刊期: 2009年第06期

  • 健身锻炼对老年人体质及生活质量的影响

    目的 探讨健身锻炼对老年人生理及心理健康的影响.方法 选择杭州市萧山区老年大学学员为研究对象,根据锻炼强度分为3组,对基本情况及SF-36生活质量量表进行问卷调查,同时对部分生理及体质指标进行测定.结果 绝大部分老年人认为锻炼对身体大有好处或有好处.中心性肥胖各组间差异显著,体质总分和各单项评分较大强度组与中等强度组均大于运动不足组,其中综合评分和握力有非常显著的差异(P<0.01),闭眼单立和肺活量有显著性差异(P<0.01),SF-36量表3组间总分、生理职能、躯体疼痛、总体健康、活力和社会功能各项有显著性差异(P<0.05).用logistic回归分析影响生活质量和体质水平的因素,锻炼强度均是相关因素.肥胖及血压水平各组间无差异.结论 健身锻炼能提高老年人身心健康.

    作者:蒋园园;李毅本;杨振莉;王冬飞 刊期: 2009年第06期

  • 老年骨髓增生异常综合征患者的临床特点和预后分析

    目的 探讨老年骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者的临床特点、临床转归及影响其预后的相关因素,评估国际预后积分系统(IPSS)在老年MDS预后中应用的意义.方法 选取2000年1月~2006年12月老年MDS患者(≥60岁)病例31例,因病采用不同治疗方案并追踪其临床病情变化情况.同期选取50例非老年性MDS患者(<60岁)作为对照.所有生存率采用寿命表法,所有生存率函数曲线均采用Kaplan-Meier法分析.结果 31例老年MDS患者中位发病年龄为65岁.初诊时48.39%的患者有全血细胞减少,35.48%的患者合并感染.按WHO分型难治性白细胞减少伴多系增生异常(RCMD)和伴原始细胞增多的难治性蛋白-Ⅱ型(RAEB-Ⅱ)比例高,共占84.62%.按1976年法、美、英三国制定的白血病分类法(FAB分型)RAEB患者比例高,占61.29%.骨髓细胞形态学提示各系均有不同程度病态造血,以二系病态造血多见(54.84%).19例骨髓活检患者中57.89%出现病态造血,47.37%出现幼稚前体细胞异常定位(ALIP)现象.13例患者进行细胞遗传学检查,染色体异常率为38.46%.截止随访结束,死亡26例(83.87%),中位生存期12.448个月,61.54%患者死于感染.老年组总存活期(overall survival,OS)显著低于非老年组患者(P<0.000 1).IPSS不同危险组别的老年组(P=0.004 5)和非老年组(P<0.000 1)的总存活期均有显著差异.对各项临床指标的单因素分析结果表明,IPSS染色体分组(P=0.002 4)和血小板计数(P=0.041)是影响老年MDS预后的重要因素.不同治疗方法对老年MDS患者总存活期未见有明显区别(P=0.912).结论 老年MDS患者以预后相对较差亚型常见,感染是其初诊及死亡的常见原因.相比非老年性患者,老年性MDS患者有显著较差的预后,IPSS及其染色体分组仍是判断老年MDS预后的重要指标.

    作者:隗佳;陈燕 刊期: 2009年第06期

  • 盐酸小檗碱抗实验性心律失常的研究

    目的 观察盐酸小檗碱对快速型室性心律失常的治疗作用.方法 采用氯仿诱导小鼠的室性心律失常模型和结扎大鼠左冠状动脉前降支诱导室性心律失常模型,利用BL-420生物机能实验系统持续监视动物Ⅱ导联心电图,预先给药10 d后,观察盐酸小檗碱对各种室性心律失常的治疗作用.结果 氯仿诱导小鼠的室性心律失常模型中,盐酸小檗碱高剂量组(240 mg/kg)室颤发生率降低40%,室颤持续时间缩短[(12.1±9.6)s vs (18.8±13.3)s],存活时间明显延长[(170.2±102.3)s vs(100.5±52.8)s],与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);结扎大鼠左冠状动脉前降支诱导室性心律失常模型中,盐酸小檗碱高剂量组(200 mg/kg)降低了缺血期内室速、室颤的发生率,缩短了室颤的持续时间[(60.7±20.9)s vs(123.4±32.1)s],与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 盐酸小檗碱对快速型室性心律失常具有良好的对抗作用.

    作者:王春艳;王桂茹;李晶;徐志刚;宋艳芳;吴德俊;陈立 刊期: 2009年第06期

  • 老年人玻璃体基底部的形态学特征

    目的 探讨老年人玻璃体基底部的形态学特征,揭示其在基底部视网膜病变中的作用.方法 55对(110只)眼库眼球,机械法分离玻璃体皮质与视网膜至周边部黏连区,吲哚美辛(ICG)标记其后缘,显示玻璃体基底部的形态.结果 完全性玻璃体后脱离(cPVD)终止于基底部后缘,鼻侧宽于颞侧;基底部后缘有玻璃体视网膜黏连和视网膜撕裂.结论 老年人基底部形态受cPVD影响;cPVD及局部玻璃体视网膜黏连,可造成视网膜撕裂.

    作者:于朝华;王静 刊期: 2009年第06期

  • HGF/c-Met系统在大鼠肝纤维化转归中作用及其机制

    目的 研究HGF/C-met 系统在肝纤维化发生和转归过程中的表达水平,探讨其逆转纤维化的作用机制.方法 60只雄性 Wistar大鼠应用硫代乙酰胺(TAA)饮用水喂养,制备肝纤维化模型.42只大鼠模型制备成功后,随机分为 7 组,每组6只.每隔2 w处死一组大鼠,留取血清检测肝功能,并检测肝组织中羟脯氨酸含量,HE和天狼星红染色,进行组织学观察,同时应用RT-PCR技术检测HGF及其受体c-Met的表达量,以正常大鼠6只为对照.结果 肝纤维化各组HGF/c-Met mRNA表达显著高于正常对照组,随着停止应用TAA时间的延长,肝功能、组织学改变、羟脯氨酸含量及HGF/c-Met的mRNA表达水平均逐渐恢复,且与停药时间呈正相关关系.结论 肝损伤发生后,通过增加HGF/c-Met系统的表达水平,可促进肝细胞再生,逆转肝纤维化.

    作者:刘金霞;孙殿兴;曹治宸 刊期: 2009年第06期

  • rLent/NT4-NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响

    目的 探讨神经保护肽慢病毒(rLent/NT4-NAP)感染老年性痴呆(AD)大鼠鼻黏膜后分泌表达NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响.方法 选择无菌级雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、慢病毒组,每组10只.Aβ1-40联合转移生长因子β1(TGFβ1)注入各实验大鼠左侧海马区制备AD动物模型,利用水迷宫实验检测大鼠记忆能力,利用原位杂交方法观察大鼠海马内NF-κB mRNA和caspase-3 mRNA的表达.结果 AD组与正常组、假手术组比较,逃避潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);慢病毒组与AD组比较逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);慢病毒组与正常组、假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05).原位杂交结果示:AD组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平明显升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).慢病毒组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平与AD组比较明显降低(P<0.01);与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 rLent/NT4-NAP感染AD大鼠鼻黏膜后能够分泌表达 NAP;NAP能够下调AD大鼠海马NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA的表达,抑制细胞凋亡,对AD大鼠海马神经元具有保护作用.

    作者:白晶;吴江;杨弋;杨薇 刊期: 2009年第06期

  • 甘温除大热法对冠心病患者炎性因子的干预作用

    目的 观察中药黄芪对不同年龄段冠心病(CHD)患者的临床疗效.方法 选择42例CHD患者,根据年龄分为中青年组(35~59岁,20例)、老年组(60~77岁,22例).2组CHD患者在常规治疗基础上加用中药黄芪,每日30 g,4 w为一个疗程,共治疗三个疗程,分别在治疗前后测定其血清C反应蛋白(CRP)含量.结果 经黄芪治疗后,CRP水平较治疗前均有不同程度的下降(P<0.01).其中老年组CRP水平下降更为明显,与中青年组比较差异显著(P<0.05).结论 中药黄芪能够有效地抑制CHD患者的血清CRP水平,对老年患者疗效尤其显著.

    作者:孙萍;赵莉;刘艳;燕芳芳;刘运芳;赵玉霞 刊期: 2009年第06期

  • 儿童与老年血行播散性肺结核临床比较

    血行播散性肺结核是一种病情十分严重的结核病,及时诊断、治疗是关键,为了解儿童与老年血行播散性肺结核在起病方式、病变类型、合并肺外结核病情况,本文就两组临床资料予以分析.

    作者:王慧娟 刊期: 2009年第06期

  • 老年孤立性心房颤动临床特点的长期随访分析

    心房颤动(AF)是临床上常见的有重要意义的心律失常,可发生在有或无原发心脏病基础上,长期持续性心动过速可引起心脏扩大,甚至心功能不全,而快速心室率被控制后,心脏功能可部分或完全恢复,称谓心动过速性心肌病(TCM)[1].任何年龄均可发生,但很少有对老年人长期追踪报道.本研究对24年中收集并随访的55例慢性孤立性AF患者进行了回顾研究.

    作者:王亚真;陈昕;苏轮;薛俊仙 刊期: 2009年第06期

  • PPARγ基因多态性与2型糖尿病脂代谢的关系

    目的 探讨PPARγ基因多态性与2型糖尿病患者脂代谢异常的关系.方法 本研究共纳入191例2型糖尿病患者.以rs1875796为遗传标记,应用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测PPARγ基因rs1875796的基因型.应用氧化酶法测定入组患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平.结果 2型糖尿病患者PPARγ基因rs1875796的等位基因频率与TC、HDL-C和LDL-C水平无明显相关.但经性别分层后,女性2型糖尿病患者的TC、LDL-C水平与PPARγ基因rs1875796的等位基因频率呈显著性相关(分别为χ2=9.378,P=0.002和χ2=11.187,P=0.000 8).携带C等位基因个体的TC水平和LDL-C水平明显高于携带T等位基因的个体.结论 女性2型糖尿病患者TC、LDL-C水平与PPARγ基因ts1875796多态性可能有关.

    作者:李蕴博;杜丹华;郭晖;高鹏 刊期: 2009年第06期

  • 欧瑞姆护理程序在胃镜下治疗消化道息肉中的应用

    胃肠息肉是常见、多发性消化道疾病,因可发生癌变和出血,故发现后应予切除[1],为了提高胃镜下高频电凝、电切上消化道息肉的安全、有效性,本研究以美国护理理论家Dorothea E.orem博士提出的护理模式为依据、以该护理程序为指导,对本组患者实施整体护理干预,观察效果.

    作者:崔爱群 刊期: 2009年第06期

  • 老年上皮性卵巢癌组织中磷酸化AKT和P-gp表达与化疗反应及预后的关系

    目的 探讨老年上皮性卵巢癌组织中磷酸化-AKT(p-AKT)和P-糖蛋白(P-gp)表达与卵巢癌化疗反应及预后的关系.方法 采用免疫组化SP法检测63例上皮性卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中p-AKT和P-gp表达,分析其与化疗反应的关系,同时对预后进行多因素的Cox生存分析.结果 p-AKT和P-gp在上皮性卵巢癌组织中阳性表达率分别为52.4%和31.7%,显著高于正常卵巢组织(P<0.01),且p-AKT和P-gp表达存在相关性.p-AKT和P-gp表达阳性组的化疗反应率显著高于p-AKT和P-gp表达阴性组(P<0.001).多因素生存分析显示,年龄≥60岁、手术病理分期、术后残留灶直径≥2 cm是影响患者预后的独立危险因素.结论 p-AKT和P-gp阳性表达与上皮性卵巢癌组织化疗耐药有关,p-AKT过表达对P-gp阳性表达可能具有促进作用,在卵巢癌化疗耐药中起重要作用,对合理制定化疗方案、预测化疗反应性及估计预后具有积极的指导意义.

    作者:舒畅;方艳秋;徐鹏;张晓霞;许淑芬;齐亚灵;刘磊;谭岩 刊期: 2009年第06期

  • 菟丝子水提物对衰老模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

    目的 探讨菟丝子水提物对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响.方法 将Wistar大鼠30只,随机分为青年对照组,衰老模型组,模型给药组,制作D-半乳糖衰老模型,模型给药组同时灌服菟丝子水提物.观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性的变化.结果 菟丝子水提物可提高心肌线粒体SOD的活性、降低MDA的含量;并且使呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性明显升高.结论 菟丝子水提物能提高心肌线粒体抗氧化能力,改善线粒体能量代谢障碍,维护线粒体功能.

    作者:张丽;张鹏霞;王昭;朴金花;张涛;徐辉 刊期: 2009年第06期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅