郭涌斐；孙懿；赵欣；蒲小平
非编码 RNA 是一类具有多种功能而不翻译蛋白质的RNA。它除了 rRNA、tRNA 外，还包括 MicroRNA、lncRNA、snoRNA 等。 MicroRNA 和 lncRNA 在血管损伤、重塑和老化中的调控机制越来越受到人们重视。 MicroRNA 和 lncRNA不仅参与氧化应激、炎症、细胞增殖、迁移、表型转换等方面的调控，也参与基因表达各方面的调控，包括转录、加工、转录后修饰和染色质重塑。这些调控与动脉粥样硬化、高血压、心肌梗死、脑卒中、肺动脉高压和糖尿病血管病变等血管系统疾病密切相关，为血管系统疾病的基因诊断与治疗提供新靶点、新思路、新方法。
作者：马婧；凌霜；党延启；倪荣镇；郭慧宁；李玉凤；王淑荣；许锦文 刊期： 2016年第01期
目的：用斑马鱼胚胎探究环磷酰胺、乙酰水杨酸、盐酸四环素、乙酸地塞米松、阿扎胞苷5种已知对人类胚胎致畸药物的毒性和安全性。方法挑选4 hpf 发育正常的受精卵,采用水浴染毒法,将药物添加到人工海水中,每种药物分别设置5个浓度组,另设空白对照组和溶剂对照组,观察给药120 hpf 后斑马鱼的死亡情况,统计各实验组斑马鱼胚胎的死亡数、畸形数,并求出120 hpf 时斑马鱼胚胎的死亡率、畸形率、半数致死浓度(LC50)、半数致畸浓度(EC50)、致畸指数(TI)。并利用公式： TI = LC50/ EC50计算出阳性药物的致畸指数。根据已经测得的 LC50,求出各药物的大非致死浓度(MNLC),分别设置1/10 MNLC 、1/3 MNLC, MNLC 和LC104个浓度,以沙利度胺为阳性对照,维生素 C 为阴性对照,人工海水为空白对照,0．5% DMSO 为溶剂对照,28．5℃下作用至120 h,每天观察胚胎的发育情况,统计胚胎死亡及畸形状态。结果5种药物的 LC50从大到小依次为：环磷酰胺>阿扎胞苷>盐酸四环素>乙酰水杨酸>乙酸地塞米松。EC50从大到小依次为：环磷酰胺>盐酸四环素>阿扎胞苷>乙酰水杨酸>乙酸地塞米松。环磷酰胺、乙酰水杨酸、盐酸四环素、乙酸地塞米松、阿扎胞苷 TI 值分别为1．92,1．11,1．05,1．44,2．99。结论斑马鱼胚胎模型可用于初步评价药物的发育毒性和安全性。
作者：许冰洁；张立将；李春启；宣尧仙 刊期： 2016年第01期
目的：二甲双胍已成为治疗2型糖尿病的一线药物,前期研究结果提示固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regula-tory element binding protein-1c,SREBP-1c)抑制胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)基因转录表达,在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中起关键作用。该研究探讨SREBP-1c 在二甲双胍改善高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用及机制。方法经500μmol·L -1 PA 处理的 L6细胞被二甲双胍(1、10 mmol·L -1)干预24 h 后,采用2-NBDG方法检测其葡萄糖摄取水平,Western blot 检测 SREBP-1c、FAS、p-IRS-1( Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT( Ser473)、AKT 的蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测二甲双胍对SREBP-1c 和 IRS-1基因转录的调控。 CHIP 定量分析二甲双胍处理后 SREPB-1c 蛋白与 IRS-1启动子区域的相互作用。结果 L6肌管细胞经 PA 处理后,糖摄取下降,SREBP-1c 及其下游分子 FAS 表达升高,胰岛素信号通路相关分子 p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT(Ser473)/ AKT 表达下降；不同浓度二甲双胍干预后,L6肌管细胞糖摄取呈剂量依赖性增加,SREBP-1c、FAS 表达下降,而 p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT(Ser473)/ AKT 表达升高。双荧光素酶报告基因实验结果显示二甲双胍抑制 SREBP-1c 启动子活性,增加 IRS-1启动子活性。 CHIP 结果显示二甲双胍使 SREBP-1c 蛋白结合到 IRS-1启动子区域的量下降约30%。结论二甲双胍通过抑制 SREBP-1c 改善高脂诱导的骨骼肌胰岛素抵抗。
作者：吴文君；汤孙寅炎；时俊锋；尹雯雯；曹殊；朱大龙；毕艳 刊期： 2016年第01期
目的：研究新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)诱导人白血病 K562细胞分化作用的蛋白质组学机制。方法1×10-6 mol·L -1的 ATPR 及 ATRA 分别作用于人白血病K562细胞48 h 后,收集细胞并提取总蛋白,纯化之后使用胰蛋白酶酶解,固相萃取法脱盐,高分辨率液相色谱质谱联用仪检测肽段,使用 Proteome Discoverer 1．2软件寻找出差异表达的蛋白质,利用生物信息学 DAVID 数据库、KEGG 数据库、STRING 数据库,分析鉴定出的差异蛋白质所具有的分子功能、所参与的生物学过程等信息。结果 ATPR 组特异性的蛋白质鉴定出120个,ATRA 组特异性蛋白质有143个,两者共有蛋白422个。 DAVID 分析显示 ATPR 特异性蛋白质主要参与39个生物学过程,包括蛋白质和大分子的代谢、蛋白质转运和定位等。 KEGG 分析发现,ATPR 组特异性蛋白质主要参与新陈代谢过程、PI3K-Akt 信号通路、TGF-β信号通路等其他癌症相关信号通路。 STRING 蛋白相互作用网络分析显示 ATPR 特异性蛋白质,如 EIF3A、EIF6、RPL3、RPL8、RPL13、RPL7A、RPL21、RPS3、RPS14、NACA、BTF3、NHP2L1、PPP2CA 蛋白与其他≥10个相关蛋白存在直接相互作用关系。结论 ATPR 组特异性中心蛋白质均参与对细胞生长增殖、诱导细胞分化和凋亡等过程的调控,这些蛋白质间的相互作用网络及特异性中心蛋白质是 ATPR 诱导 K562细胞分化作用的可能机制。
作者：孟遥；张冬玲；夏泉；葛金芳；陈飞虎 刊期： 2016年第01期
目的：探究 G 蛋白偶联受体 TGR5在大鼠肾小球系膜细胞中的表达以及高糖条件下对纤维连接蛋白(fibronectin, FN)以及转化生长因子( transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白水平的影响,探索其在糖尿病肾病中可能发挥的作用。方法高糖(30 mmol·L -1 glucose,HG)条件下,用特异性激动剂 INT-777激活 TGR5,或者对 TGR5进行过表达、干扰处理,通过 Western blot 来检测大鼠肾小球系膜细胞中TGR5的表达情况以及 FN、TGF-β1蛋白水平的变化。结果在大鼠肾小球系膜细胞中存在 TGR5的表达；与对照组相比,激活 TGR5后,由高糖引起的 FN、TGF-β1蛋白水平的上升受到抑制(P <0．01,P <0．05)；另一方面,干扰 TGR5后, FN、TGF-β1的蛋白水平与对照组相比异常升高,差异有统计学意义(P <0．01,P <0．05)。结论在大鼠肾小球系膜细胞中,TGR5可以抑制由高糖引起的 FN、TGF-β1蛋白水平的升高,在糖尿病肾病的发生发展中可能发挥保护作用。
作者：熊凤霄；杨志英；王少贵；陈诚；黄河清 刊期： 2016年第01期
目的：研究人乳腺癌斑马鱼移植瘤模型的建立方法及其相关的蛋白表达。方法分别选用 MCF-7、 T-47D、MDA-MB-231细胞系显微注射至斑马鱼幼鱼体内,考察不同乳腺癌细胞系在斑马鱼体内的定植迁移、细胞数量变化、细胞分布以及对斑马鱼肠下静脉丛(subintestinal veins, SIVs)的影响,建立乳腺癌斑马鱼移植瘤模型；并考察 JAK 抑制剂对斑马鱼移植肿瘤的影响,并对相关蛋白表达的情况进行蛋白印迹分析。结果在接种细胞数大于每只200时,斑马鱼的肿瘤模型成功率大于比例0．90；MB-231移植瘤在斑马鱼体内具有明显的迁移特征,这种特征可被 JAK 抑制剂 tofac-itinib 抑制(P <0．01)；同时 tofacitinib 可明显减少移植瘤模型体内 MB-231的数量(P <0．01)；移植瘤可促进 SIVs 增生,酪氨酸抑制剂 PTK787可明显地抑制移植瘤引起的 SIVs的生长(P <0．01)；蛋白印迹结果显示,4 d 斑马鱼胚胎自身HER2有表达,T-47D 斑马鱼模型组组织中 HER2表达增加；MB-231斑马鱼模型组组织中 VEGFa 高表达；tofacitinib 处理后的移植瘤其 p53表达增强。结论人源肿瘤通过微量显微注射方法可成功建立斑马鱼乳腺癌移植瘤模型,该模型可用于抗肿瘤药物的初步筛选研究。
作者：陈锡强；韩利文；王希敏；王荣春；侯海荣；刘可春；彭维兵；孙晨；韩建 刊期： 2016年第01期
目的：观察高糖环境中肾小管上皮细胞胆固醇代谢变化以及花青素对其干预作用。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),随机分为正常糖组、高糖组、甘露醇组、花青素1(C3G)干预组及花青素2(Cy)干预组。采用 MTT 法观察花青素对细胞活力的影响；Amplex Red 荧光法和 Filipin染色检测细胞内外胆固醇水平；RT-qPCR 和 Western blot 检测三磷酸腺苷结合区转运蛋白 A1(ABCA1)的表达。结果与正常糖组比较,高糖培养的肾小管上皮细胞内出现胆固醇蓄积,细胞上清中的胆固醇含量明显下降； RT-qPCR 和Western blot 检测发现三磷酸腺苷结合区转运蛋白 A1(AB-CA1)的表达高糖组均低于正常对照组,差异有统计学意义(P <0．05)。花青素1(C3G)干预组及花青素2(Cy)干预组相比较高糖组,ABCA1的蛋白和 RNA 表达均明显提高,胆固醇胞内蓄积明显减少。结论高糖可诱导的肾小管上皮细胞三磷酸腺苷结合区转运蛋白 A1表达降低,导致胆固醇外流减少,从而造成胆固醇胞内蓄积；花青素减少胆固醇胞内蓄积部分可能是通过上调 ABCA1的表达实现的。
作者：杜春阳；史永红；朱艳；任韫卓；吴海江；韦金英；吴明；肖夏；段惠军 刊期： 2016年第01期
目的：观察基质相互作用分子1( stromal interaction molecule 1, STIM1)在肺动脉高压组织中的表达,并探讨STIM1对动脉平滑肌细胞增殖的影响及机制。方法一次性腹腔注射野百合碱(MCT)建立肺动脉高压大鼠模型；实时定量 PCR 和蛋白印迹分别测定肺动脉高压大鼠肺组织STIM1 mRNA 和蛋白的表达；采用基因转染技术建立 STIM1瞬时高表达的动脉平滑肌 A7R5细胞模型；用 CCK-8法测定细胞增殖能力；用蛋白印迹测定 Akt/ mTOR 通路分子的表达。结果与对照组相比,MCT 组的右心室收缩压(RVSP)和右心重量指数(RVMI)均明显增高(P <0．01),形态学观察可见肺小动脉平滑肌层明显增厚,管腔减小；MCT 组大鼠STIM1 mRNA 和蛋白表达量分别是对照大鼠的2．19和1．66倍；STIM1瞬时过表达的动脉平滑肌细胞与对照组相比,生长速度加快；STIM1过表达可明显增加 Akt、mTOR、p70-S6K和4E-BP1的磷酸化水平,而对它们的蛋白水平没有影响。结论肺动脉高压发病中存在 STIM1的过表达,STIM1可促进动脉平滑肌细胞增殖,其机制与上调 Akt/ mTOR 信号转导通路相关。
作者：张明芳；齐元麟；王丹；王情；陈富华；林默君 刊期： 2016年第01期
血管平滑肌细胞( vascular smooth muscle cells, VSMCs)异常增殖是支架后再狭窄(in-stent restenosis, ISR)的主要病理过程。近年来研究表明,莪术提取物具有抑制VSMCs 增殖,进而抑制支架后再狭窄的作用,其发挥作用的有效成分主要有姜黄素和β-榄香烯,其可能的机制与抑制血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1, HO-1)表达、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK) MAPK、Akt 信号通路,阻滞细胞周期进程相关。该文就近年来莪术提取物调控支架后再狭窄 VSMCs 增殖的研究进展作一综述。
作者：冒慧敏；刘剑刚；赵福海；史大卓；刘秀华 刊期： 2016年第01期
目的：探讨 siRNA 沉默 DNMT1基因对人急性 T 淋巴细胞性白血病 Molt-4细胞增殖、凋亡及组蛋白调控的影响。方法将 DNMT1特异性 siRNA 经 LipofectamineTM2000转染Molt-4细胞后,应用 RT-PCR 检测 Molt-4细胞 DNMT1 mRNA表达,MTT 法绘制细胞生长曲线；流式细胞术分析细胞凋亡。 Western blot 检测 Bcl-2、procaspase-3、P15蛋白表达以及组蛋白甲基化、乙酰化状态的改变。结果 DNMT1 siRNA可沉默 DNMT1基因的表达,并呈现浓度依赖性；抑制 Molt-4细胞增殖,诱导细胞凋亡。经0、30、60、120 nmol·L -1 DN-MT1 siRNA 作用24h 后,细胞凋亡率分别为(4．27±1．42)%,(15．25±1．54)%,(35．63±2．54)%,(66．27±3．02)%,差异具有统计学意义(P <0．05)。 DNMT1 siRNA可上调 P15的表达；下调 Bcl-2、procaspase-3的表达,下调组蛋白 H3K9甲基化水平,上调组蛋白 H3K4的甲基化水平,而组蛋白 H3乙酰化水平无明显变化。结论 DNMT1 siR-NA 可以有效地抑制 Molt-4细胞中 DNMT1的表达,下调组蛋白 H3K9甲基化水平,上调组蛋白 H3K4的甲基化水平,从而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。
作者：陈淑瑜；黄轶群；游育红；马旭东 刊期： 2016年第01期
目的：构建携带 N 末端 Strep(NS)蛋白标签的表达载体；在表达载体中构建衣原体 RNA 聚合酶亚基重组蛋白并表达。方法采用 PCR 的方法,通过引物引入 NS 蛋白标签和新的多克隆位点替代 pET21c-DH 质粒中原有的 T7蛋白标签和多克隆位点,选择新引入的 Not I 酶切位点进行 PCR产物的环化自连,转化 DH-5α细菌后筛选阳性菌株,PCR 法和基因测序法鉴定新构建的表达载体；在新构建表达载体的BamH I 和 Sal I 位点之间分别插入衣原体 RNA 聚合酶核心酶的α、β、β′亚基,获得表达 NS-α、NS-β、NS-β′融合蛋白的表达载体,转化表达菌株 ArcticExpress,筛选阳性表达菌株,并用考马斯亮蓝染色、Western blot 等法鉴定融合蛋白的表达情况。结果成功构建了携带 NS 蛋白标签的 pET21c-NS-MCS 载体,并成功将其应用于衣原体 RNA 聚合酶核心酶亚基融合蛋白的构建及表达。结论获得稳定表达 NS-α、NS-β、NS-β′融合蛋白的表达载体,为研究衣原体基因转录调控奠定了良好的基础。
作者：石禹；吉宏张；包小峰 刊期： 2016年第01期
芒果苷又称知母宁、芒果素，主要存在于漆树科和龙胆科植物中。因其是多酚酸类化合物，具有较强的抗氧化活性和多种药理作用。近年来，国内外大量研究报道芒果苷的各种药理学活性，包括抗糖尿病及其并发症、调节脂代谢异常、抗肿瘤、心血管保护、抗高尿酸血症、神经保护、抗氧化、抗炎、解热和镇痛、抗菌、抗病毒、抗辐射、保肝、促进骨骼发育、抗过敏和免疫调节等广泛的药理作用，具有进一步研究和开发的可能性。该文对近年来国内外芒果苷药理学作用的研究进展归纳、分析和总结，为进一步的药物研究和开发提供参考。
作者：杨海光；方莲花；杜冠华 刊期： 2016年第01期
目的：观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子 E2相关因子2( Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法120只 SD 大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,各组给予相应处理。在 d 1、3、7三个时间点取脑组织进行检测,免疫组织化学法检测血浆Ⅷ因子相关抗原(vWF),测定微血管密度(MVD)。采用 Real-time PCR 和 Western blot 法检测大鼠脑组织中 Nrf2、HO-1基因及蛋白表达。结果①与假手术组比,模型组 vWF 阳性表达微血管在 d 3时表达明显升高(P<0．05),给药组 d 7与模型组比较差异有显著性( P <0．05)；②假手术组 Nrf2、HO-1mRNA 及蛋白呈少量表达,模型组 Nrf2蛋白表达水平 d 3与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P <0．01),各给药组能上调 Nrf2mRNA 及蛋白表达,其中 Nrf2mRNA 在 d 7,Nrf2蛋白表达在 d 1及 d 7上调明显,与同时间点模型组比较差异具有统计学意义(P <0．01)。模型组 HO-1mRNA 及蛋白在 d 7与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P <0．05),各给药组 HO-1mRNA 在 d 3,HO-1蛋白在 d 3及 d 7上调明显,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P <0．05,P <0．01)。结论补阳还五汤精简方促进脑缺血后血管新生,这一作用可能与调控 Nrf2/ HO-1信号途径的表达有关。
作者：佘颜；王宇红；邵乐；夏相宜；刘芳；蔡光先 刊期： 2016年第01期
目的：研究左旋金黄紫堇碱(l-SLR)的抗精神分裂症作用。方法采用 NMDA 受体拮抗剂 MK-801在动物模型上诱发精神分裂症的阳性症状、阴性症状及认知损伤；评价了化合物 l-SLR 对 MK-801诱发的精神分裂症的作用；并评价了 l-SLR 对小鼠锥体外系功能的影响。结果 MK-801(0．3 mg·kg -1, ip)引起大鼠前脉冲抑制损伤,l-SLR(10、15 mg·kg -1, ip)能抑制 MK-801引起的大鼠前脉冲抑制损伤；l-SLR(30 mg·kg -1, ip)能抑制多巴胺受体激动剂阿扑吗啡(2 mg·kg -1, sc)引起小鼠的攀爬行为,说明 l-LSR 对 MK-801及阿扑吗啡诱发的精神分裂症阳性症状有抑制作用。 l-SLR(30 mg·kg -1, ip)能抑制 MK-801(0．2 mg·kg -1, ip)引起的小鼠群居接触抑制及 MK-801诱发的小鼠认知损伤,说明 l-SLR 能改善 MK-801诱发的精神分裂症阴性症状和认知障碍。经典抗精神分裂药氟哌啶醇在治疗剂量下(0．8 mg ·kg -1, ip)诱发小鼠木僵行为,l-SLR 在抗精神分裂的剂量下(30 mg·kg -1,ip)不会诱发木僵行为。结论化合物 l-SLR 对精神分裂症的阳性症状、阴性症状以及认知障碍均有效,而且其在有效剂量时对锥体外系的影响明显小于氟哌啶醇和 l-SPD。
作者：高赟赟；米桂芸；刘帅；杨征 刊期： 2016年第01期
目的：采用人胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞(hu-man embryonic stem cells derived cardiomyocytes, hESC-CM)联合实时细胞分析系统(real- time cell analysis Cardio,RTCA Cardio),建立一种体外药物心脏毒性早期筛选方法。方法将 hESC-CM 接种到 RTCA Cardio E-Plate 96孔板,分析心肌细胞的搏动频率、幅度和搏动节律不规则性指数确定细胞佳接种密度及检测时间,建立体外药物心脏毒性早期筛选方法。在此基础上,分别采用0.1% DMSO 作为溶剂对照及具有抗心律失常作用的药物奎尼丁(0．2、0．78、3．13、12．5、50和100μmol·L -1)作为阳性对照进行了验证。结果0．1% DMSO 对 hESC-CM 的生长指数(cell index,CI 值)、搏动特征图谱及搏动频率和幅度均无影响。而与溶剂对照组相比,奎尼丁浓度≥3．13μmol·L -1时影响细胞 CI 值和特征性搏动图谱,抑制细胞搏动频率和幅度,且具有浓度依赖性,浓度越高细胞搏动信号恢复所需时间越长,对搏动频率和幅度的抑制作用越明显。结论采用 hESC-CM 联合 RT-CA Cardio 系统建立的体外药物心脏毒性早期筛选方法可以检测出奎尼丁对心肌细胞搏动状况的影响,该方法可作为一种高通量筛选工具用于临床前药物心脏毒性早期筛选。
作者：赵琪；汪溪洁；王淑颜；马璟 刊期： 2016年第01期
我们曾经报告,相对分子质量2 ku、5 ku 直链甲氧基聚乙二醇( mPEG)修饰的脑啡肽( Tyr-Gly-Gly-Phe-Met,ENK)半衰期延长、清除率下降、镇痛药效增强[1]。在此基础上,本文对 D-Ala 替换 ENK 第2、5位氨基酸([D-Ala2,D-Ala5]-ENK,DADAE)、及其5 ku 分子质量 mPEG 修饰双重结构改造的合成脑啡肽类似物进行了镇痛药效分析。
作者：张另沾；刘乐；文曙；赵铁华 刊期： 2016年第01期
目的：建立测定大鼠血浆中1,8-二川芎嗪基大黄酸浓度的 HPLC 方法,并对大鼠尾静脉注射给药1,8-二川芎嗪基大黄酸后,研究其在大鼠体内的药代动力学。方法采用大黄素为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后进行 HPLC 分析,流动相为甲醇-0．1%甲酸水(78∶22,V/ V),流速为1．0 mL·min -1,检测波长为275 nm。大鼠单剂量静脉注射2、4、8 mg·kg -11,8-二川芎嗪基大黄酸后,测定给药后不同时间点大鼠血浆中1,8-二川芎嗪基大黄酸的浓度,并对其血药浓度-时间曲线采用 DAS 2．1软件拟合,计算药动学参数。结果1,8-二川芎嗪基大黄酸在0．05-10．00 mg·L -1血浆浓度范围内线性关系良好(r =0．9962),定量下限为0．05 mg·L -1,提取回收率均大于88%,日内和日间差异 RSD 均小于6%,方法学考察均符合要求。1,8-二川芎嗪基大黄酸按2、4和8 mg·kg -1静脉注射给药后,在大鼠体内的 T1/2分别为(68．35±1．36)、(69．32±2．21)、(69．32±2．03) min,AUC0- t 分别为(101．03±24．9),(144．79±3．29),(231．92±19．30) min·mg·L -1。结论本实验所建立的HPLC 方法操作简便、快速、专属性强,可用于1,8-二川芎嗪基大黄酸血药浓度分析及其药代动力学研究。
作者：彭兆亮；李洁；樊玲；王雪琦；黄鹏；栗进才；汪电雷；陈亚军；王淑君；汪珊珊；张悦 刊期： 2016年第01期
目的：观察白藜芦醇对腰5脊神经结扎( L5 spinal nerve ligation ,SNL)大鼠的镇痛作用及其相关机制。方法90只♂ SD 大鼠随机分为6组(n =15)。正常组；假手术组；疼痛组；高、中和低剂量白藜芦醇组。正常组不做处理,假手术组仅暴露腰5脊神经,其余各组行 SNL。高、中、低剂量组分别将300、30、3μg 白藜芦醇溶于10μL 的100%二甲基亚砜溶剂中,于 SNL 术后 d 4经鞘内导管给药,每天1次,连续给药4 d。术后1、3、5、7、9、11、14 d 测定各组大鼠热缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)。行为学测试结束后处死大鼠,取腰段脊髓。 Western blot 检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和乙酰化 p65蛋白的表达水平,采用免疫荧光法测定脊髓背角活化的核因子κB (NF-κB)表达。结果与假手术组比较,疼痛组大鼠术后PWL 明显降低(P <0．05),SIRT1蛋白含量明显减少(P <0．05),乙酰化 p65蛋白含量和活化的 NF-κB 表达明显增多(P <0．05)。与疼痛组比较,高、中剂量组大鼠给药后 PWL和 SIRT1蛋白含量明显升高(P <0．05),乙酰化 p65蛋白含量和活化的 NF-κB 表达明显减少(P <0．05)。结论鞘内注射白藜芦醇可缓解神经病理性疼痛,其机制可能与激活SIRT1,促进 p65去乙酰化,从而抑制 NF-κB 活化有关。
作者：王依慰；刘清珍；陈春龙；支亦博；章洁；李伟彦 刊期： 2016年第01期
目的：观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮抑制梗阻性实验动物肾脏细胞增殖的作用及机制。方法结扎大鼠单侧输尿管(UUO)制备肾间质纤维化动物模型,给予依普利酮100 mg·kg -1·d -1治疗,10 d 后摘取肾脏,观察大鼠肾脏组织病理改变。采用免疫组化、Western blot 方法检测增殖细胞核抗原( PCNA)、血清糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果肾脏病理显示,UUO 组大鼠肾脏有明显的细胞外基质(ECM)积聚,有大量炎性细胞浸润,肾小管扩张明显,上皮细胞脱落,依普利酮可明显减轻其细胞增殖及 ECM 的沉积；免疫组化和Western blot 结果显示,UUO 组大鼠肾脏 PCNA、SGK-1、TGF-β1表达明显增强；依普利酮可下调其表达。结论依普利酮可通过下调 SGK-1的表达,抑制梗阻性肾病细胞增殖,减少ECM 的沉积,减缓肾脏纤维化的进程,减轻肾脏损伤。
作者：吴丽敏；陈立祥；梁丽娟；王筝；王淼；刘少伟；熊云昭；王萱；许庆友 刊期： 2016年第01期
目的：评价灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙的体内外溶血作用。方法采用肉眼观察法和紫外分光光度法，观察灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙浓度梯度为5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100 mg·L -1的溶液在体外对2%兔红细胞悬浮液的溶血反应；采用血液生化指标测定方法，分别检测灰毡毛忍冬花蕾提取物2．275 g·kg -1(生药)和1．137 g· kg -1(生药)组、灰毡毛忍冬皂苷乙0．110 g·kg -1和0．055 g ·kg -1组、川续断皂苷乙0．020 g·kg -1和0．010 g·kg -1组以及生理盐水组，在小鼠尾静脉给药前及连续给药7 d 后，血液中红细胞数、网织红细胞数、血红蛋白含量。结果在体外溶血试验中，各给药组溶血率均<5%，与对照组相比均未见明显的溶血现象(P >0．05)；在体内溶血试验中，各组小鼠用药前后，血液红细胞数、网织红细胞数、血红蛋白含量均处于正常范围内，且其数值在给药前后无差异( P >0．05)。结论在本试验条件下，灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙，在体外和体内试验均未导致溶血。
作者：汪宏锦；王红玉；何然；吴俊杰；徐晓玉 刊期： 2016年第01期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
