刘灿仿；祁金龙；张海林；贾庆忠
细胞色素P450酶3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)属于细胞色素P450酶家族,参与多种化合物代谢及相互作用,是药物(尤其是口服药物)筛选和代谢研究的重要对象.该文按年代顺序对国外文献中CYP3A4高表达细胞模型的建立及在药物代谢中的应用进行综述,旨在将这一有价值的模型引入到新药研究中.
作者：李蒙；朱传江 刊期： 2012年第01期
目的 从前列腺素E2(PGE2)受体EP2和β-arrestin 2的表达分布变化特点,探讨PGE2诱导大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)异常增殖的分子机制以及芍药苷(Pae)的作用.方法 组织块培养法培养大鼠FLS,3H-TdR参入法检测FLS增殖情况,放免法测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)浓度,流式细胞术检测FLS胞膜EP2受体水平,Western blot法检测FLS EP2和β-arrestin 2总蛋白和胞膜蛋白的表达.结果 PGE2（125 μg·L-1）刺激24 h,诱导FLS的异常增殖,降低细胞内cAMP浓度和胞膜EP2受体水平,但上调胞膜β-arrestin 2表达和FLS中EP2、β-arrestin2的总表达,Pae可抑制FLS过度增殖,恢复cAMP水平和胞膜EP2表达,下调胞膜β-arrestin 2和总EP2、β-arrestin 2水平.结论 Pae可能通过抑制β-arrestin 2的表达和转膜,减少EP2受体内吞而升高cAMP,抑制FLS在PGE2作用下的异常增殖.
作者：汪庆童；马昱琨；黄蓓；魏伟 刊期： 2012年第01期
目的 探讨依达拉奉(edaravone,Eda)对溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)所致家兔血管内皮损伤的影响及机制.方法 家兔胸主动脉环分别与LPC(5 mg·L-1)和Eda(25～100 μmol·L-1)单独孵育或共孵育,分别检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应和硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应,血管组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性.结果 5 mg·L-1 LPC孵育血管环30 min,明显抑制了乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应,但没有影响硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应,降低了血管组织中NO含量和SOD活性而增加了MDA含量.25～100 μmol·L-1 Eda分别孵育血管环15 min,再与5 mg·L-1 LPC共同孵育30 min,明显改善LPC所致的血管舒张功能的损害,升高了血管组织中NO含量和SOD活性而降低了MDA含量.结论 Eda对LPC所致的血管内皮依赖性舒张功能的损伤具有明显的保护作用,该效应可能与其抗氧化作用有关.
作者：邓华菲；何汉江 刊期： 2012年第01期
目的 研究PI3K/Akt信号通路是否参与二氮嗪后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤.方法 60只♂ SD大鼠随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、I/R组、二氮嗪(D组)、wortmannin组(W组)、二氮嗪+wortmannin组(D+W组).建立大鼠在体心脏I/R模型,除S组外,其余各组均缺血30 min,再灌注120 min.再灌注前5 min,5组分别依次经股静脉输注0.1% DMSO、0.1% DMSO、二氮嗪7 mg·kg-1、wortmannin 15 μg·kg-1和二氮嗪7 mg·kg-1,其中D+W组于给予二氮嗪前5 min输注wortmannin 15 μg·kg-1.记录缺血前、缺血30 min和再灌注120 min时心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP);再灌注末,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积、TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率、Western blot分析p-Akt表达水平.结果 各组缺血前心功能指标HR、LVDP、LVEDP无差异(P>0.05).再灌注120 min后,与I/R组相比,D组和D+W组LVDP明显升高、LVEDP明显降低(P<0.01或<0.05),梗死面积与凋亡率降低(P<0.01或0.05),D组p-Akt表达水平升高(P<0.01);与D组比,D+W组LVDP降低(P<0.05),梗死面积与凋亡率增高(P<0.05),p-Akt表达水平降低(P<0.01).结论 二氮嗪后处理部分通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠在体心肌I/R损伤.
作者：赵其宏；张颖；梁启胜；栾恒飞；叶英；曾因明 刊期： 2012年第01期
目的 建立基于Nrf2-ARE通路的报告基因筛选模型,筛选抗辐射复方四物汤加味方中的活性成分.方法 将抗氧化反应元件插入萤火虫荧光素酶载体pGL4.26,构建重组质粒pGL4-ARE,与海肾荧光素酶载体pRL-TK共同转染HEK-293细胞,检测四物汤加味方中刺五加皂苷E、金丝桃苷、五味子乙素等12个主要的化学成分对Nrf2-ARE通路的激活作用.结果 在四物汤加味方中,白藜芦醇(50 μmol·L-1以上)和金丝桃苷(100 μmol·L-1以上)的抗氧化活性强,与空白对照组比较差异有显著性(P<0.01);红景天苷也有较好的效果,500 μmol·L-1以上可提高诱导表达倍数(P<0.01 ).结论 白藜芦醇、金丝桃苷、红景天苷是四物汤加味方中的主要抗氧化活性成分.
作者：邵帅；马增春；洪倩；王宇光；王小彦；高月 刊期： 2012年第01期
目的 研究松果体素对培养的大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流(Igly)的调控.方法 在培养的大鼠海马神经元上,采用全细胞膜片钳技术,研究松果体素对甘氨酸激活的全细胞电流的调控.结果 松果体素以浓度依赖的方式可逆地抑制Igly,并且这种抑制作用是非竞争性的,松果体素的抑制作用没有特异的亚基选择性.结论 松果体素能以非竞争的方式直接抑制甘氨酸受体介导的电流,这种抑制作用可能对海马区域神经网络的兴奋性产生影响.
作者：程新萍；开远忠；吴旭；刘雅静；周江宁 刊期： 2012年第01期
目的 观察美洛昔康对慢性应激大鼠抑郁行为的影响.方法 采用慢性温和不可预见性应激(chronic mild unpredictable stress,CUMS)方法建立大鼠抑郁模型.美洛昔康(1、3和5 mg·kg-1)和舍曲林(5 mg·kg-1)在造模完成后灌胃给药,每天1次,连续20 d.旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠行为学变化,生化酶学方法检测大鼠海马和皮层超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量变化,酶联免疫吸附法检测大鼠海马和皮层细胞因子白介素(IL)-1β、白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量变化.结果 与正常组比较,慢性应激大鼠在强迫游泳实验中静止不动的次数增加(P<0.01),旷场实验中水平和垂直运动减少(P<0.05),海马和皮层SOD活性及IL-6含量降低(P<0.05),MDA及IL-1β、TNF-α含量增加(P<0.05).与模型组比较,美洛昔康能明显改善CUMS大鼠的抑郁行为,升高海马和皮层中SOD活性及IL-6含量(P<0.05)以及降低大鼠海马和皮层MDA及IL-1β、TNF-α含量(P<0.01).结论 美洛昔康对CUMS诱导的大鼠抑郁行为有明显的改善作用,其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激有关.
作者：罗文；马庆阳；韦丽佳；王健峰；郭远新；罗映；余华荣；杨俊卿 刊期： 2012年第01期
目的 研究体外大鼠肝星状细胞(HSC)中血小板衍生生长因子(PDGF)信号通路的激活对于HSC表达细胞外基质(ECM)的影响.方法 分离、纯化大鼠原代HSC并体外培养;以MTT实验检测PDGF对HSC增殖的作用;以Western blot和Real-time PCR方法分别检测PDGF对PDGF-βR与CTGF、ECM成分α-SMA、α1(I)collagen和fibronectin,以及调控ECM降解平衡的MMP-2和TIMP-1表达的影响.结果 MTT实验结果表明PDGF以剂量依赖性和时间依赖性的方式促进HSC的增殖.PDGF可以促进其受体PDGF-βR和CTGF的蛋白与mRNA表达.PDGF还可明显上调ECM成分α-SMA、α1(I)collagen和fibronectin的表达.此外,PDGF影响ECM的降解平衡,表现为TIMP-1的表达上调,而MMP-2的表达下调.结论 PDGF/PDGF-βR信号转导途径可明显促进HSC活化与ECM生成,抑制ECM降解.所得结果可以为药物阻滞PDGF信号转导从而抑制肝纤维化提供依据.
作者：张峰；雷娜；张晓平；陆茵；王爱云；陈文星；郑仕中 刊期： 2012年第01期
α-细辛醚是中药石菖蒲挥发油中的主要活性成分,具有平喘、解痉、抗痫[1]、醒脑、杀虫、抗真菌等作用,临床主要用于治疗癫痫、支气管炎、小儿肺炎、老年性痴呆等.
作者：鲁光华；李玉洁；朱艳琴 刊期： 2012年第01期
microRNAs是近年来发现的内源性非编码单链RNA小分子,在心血管系统中具有特异性的表达谱,通过降解mRNA或抑制蛋白质翻译调控转录后基因的表达.microRNAs在动脉粥样硬化形成的病理过程中,参与血管内皮细胞的损伤与修复;细胞炎性因子、生长因子等信号分子的表达与释放和血管平滑肌细胞的增殖与迁移等环节,从而调控动脉粥样硬化的发生发展.
作者：袁绪胜；戴敏 刊期： 2012年第01期
目的 研究三七茎叶皂苷对大鼠离体心脏缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及其作用机制.方法 SD大鼠36只,随机分为6组(n=6),分别是空白对照组、模型组、阳性给药组(地奥心血康70 mg·kg-1)、三七茎叶皂苷低、中、高剂量组(20、40、80 mg·kg-1).阳性给药组和三七茎叶皂苷给药组大鼠每日灌胃给药1次,连续给药7 d,空白对照组和模型组同时给予同体积生理盐水.末次给药60 min后,分离心脏置于Langendorff离体灌流装置上,平衡15 min后,全心停灌25 min,再灌注60 min,造成心肌缺血/再灌注损伤模型.于大鼠左心房插入水囊导管,记录三七茎叶皂苷对血流动力学指标的影响,测定再灌注60 min后灌流液中乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)的活性及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、LDH、CK活性及丙二醛(MDA)的含量.HE染色观察组织形态学改变.结果 三七茎叶皂苷不同剂量组(20、40、80 mg·L-1),可明显改善缺血/再灌注所致大鼠的心功能损伤,减少灌流液中LDH、CK释放和组织中MDA的产生,增加SOD、GSH-Px的活性.HE染色结果显示,阳性给药组与三七茎叶皂苷高、中、低剂量组均不同程度的减轻了I/R造成的心肌损伤.结论 三七茎叶皂苷对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与改善心肌舒缩功能,清除氧自由基,减少脂质过氧化反应有关.
作者：任小宇；孙桂波；张强；徐惠波；孙晓波 刊期： 2012年第01期
目的 研究内源性中叶素(IMD)与心肌细胞肥大间的相互作用关系.方法 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)孵育乳鼠心肌细胞构建心肌肥大模型.应用Western blot及放射免疫法测定心肌细胞IMD产生和分泌,实时定量PCR(Real-time PCR)方法检测心肌细胞IMD及其受体系统降钙素受体样受体/受体活性修饰蛋白(CRLR/RAMPs)基因表达的变化.并以[3H]-亮氨酸([3H]-Leu)摄入及脑钠素(BNP)基因表达作为心肌细胞肥大的指标.结果 AngⅡ孵育下调心肌细胞IMD生成、表达,并影响其受体系统的基因表达.反过来,利用IMD抗体及其受体阻断剂阻断内源性IMD的生物学效应可增强AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应.结论 内源性IMD及其受体系统参与了心肌肥大的发生、发展,对其生成、表达的干预有可能成为今后防治心肌细胞肥大的新途径.
作者：杨靖辉；马存根；齐永芬；唐朝枢 刊期： 2012年第01期
五味子是一味常用的中药材.近年来,国内外对其抗肿瘤活性成分及作用机制研究日趋活跃.目前认为五味子主要抗肿瘤成分为多糖和木脂素.五味子抗肿瘤机制有多个方面,包括诱导肿瘤细胞凋亡、提高机体的免疫调节作用、抗氧化、清除自由基作用、抗突变和逆转肿瘤细胞的多药耐药性.该文对五味子抗肿瘤活性成分和作用机制进行综述,以促进五味子研究的开展及临床上更好的应用.
作者：任丽佳；李林；殷放宙；蔡宝昌 刊期： 2012年第01期
目的 研究SHP-2对人胃癌细胞SGC-7901细胞克隆增殖的影响.方法 采用重组腺病毒Ad-GFP(GFP)、Ad-GFP-SHP-2(WT)转染SGC-7901细胞;采用蛋白印迹技术(Western blot)检测SHP-2蛋白的表达;同时进行集落形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力.另外,观察SHP-2抑制剂NSC-87877作用后,对SGC-7901集落形成的影响.结果 当胃癌细胞感染复数为150时,转染成功的细胞数占总细胞数的0.9.WT组SHP-2蛋白过表达.WT组的平板克隆数明显高于SGC-7901亲本细胞组 (Control 1) 和 GFP组,P<0.05.SHP-2抑制剂组(NSC-87877)的平板克隆数及软琼脂克隆数分别明显低于SGC-7901亲本细胞组 (Control 2),P<0.05.结论 SHP-2对SGC-7901细胞克隆增殖有明显促进作用.
作者：汪钊；张丽景；侯媛媛；徐长庆；田野；张力 刊期： 2012年第01期
蛋白质巯基亚硝基化(S-nitrosylation,SNO)是指一氧化氮(NO)对蛋白质的半胱氨酸残基进行可逆性氧化还原修饰,这种修饰是NO在体内发挥作用的重要途径之一.近年来研究表明蛋白质SNO可以参与多种生理和病理过程,特别是一些靶蛋白的SNO参与神经退行性疾病发病过程及相关机制的研究倍受关注,该文对这方面近期研究进行概述.
作者：齐孟和；胡金凤；宁娜；云彩麟；陈乃宏 刊期： 2012年第01期
目的 探讨白介素-1β(IL-1β)在缓激肽(BK)开放血脑屏障(BBB)过程中的作用及其机制.方法 缓激肽处理C6细胞后,动态观察培养液中IL-1β含量(放射免疫法)、C6细胞内热休克因子1(HSF1)蛋白的表达(Western blot法)及IL-1β的mRNA水平(RT-PCR法).利用伊文思蓝检测C6恶性胶质瘤大鼠经颈内动脉给予IL-1β及缓激肽后血脑屏障的通透性.结果 缓激肽作用于C6细胞后,培养液中IL-1β的含量明显增加,于120 min含量多,其后开始减少.C6细胞内HSF1的表达及IL-1β的mRNA水平也在给予缓激肽后明显增加,并分别于干预后的30 min和60 min达高峰后逐渐减少.缓激肽与IL-1β单独作用于C6动物后均可引起胶质瘤大鼠的血脑屏障通透性增加,且IL-1β对肿瘤模型动物血脑屏障通透性的影响与C6细胞培养液中IL-1β的含量相一致.结论 IL-1β可能介导了缓激肽开放血脑屏障的作用,此作用可能是由于缓激肽诱导C6细胞内HSF1的表达增加,增加的HSF1促进神经胶质瘤细胞释放IL-1β所致.
作者：秦丽娟；薛一雪；谷艳婷；张志勇；张田；孙娜；王东春；宋鸿艳 刊期： 2012年第01期
目的 研究Caspase抑制剂F1013对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠急性肝损伤模型的治疗作用,并对其机制进行初步探讨.方法 60只♂ BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组、阳性药组(NAC 155 mg·kg-1)和F1013(5,2.5,1.25 mg·kg-1)给药组.除对照组外,其余组小鼠均尾静脉注射ConA建立小鼠急性肝损伤模型,造模后2 h,阳性药组腹腔注射NAC,F1013给药组和模型组分别皮下注射F1013和溶媒.造模后8 h留取血清检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(T-Bil)含量和TNF-α水平,肝组织进行HE染色,并检测肝细胞凋亡率.结果 在ConA诱导小鼠急性肝损伤模型,F1013组均明显改善肝脏病理组织损伤;明显降低血清ALT、AST、T-Bil和TNF-α水平及肝细胞凋亡率(P<0.01或P<0.05).结论 F1013对ConA所致小鼠急性肝损伤具有较好的治疗作用,其机制可能与减少TNF-α的产生及抗肝细胞凋亡有关.
作者：邓利娟；李湛军；罗楹；范慧红 刊期： 2012年第01期
目的 建立光化学法诱导大鼠冠状动脉血栓致心肌梗死模型.方法 大鼠分为激光和化学单独刺激组、联合刺激组和重组葡激酶处理组,通过注射光敏剂四氯四碘荧光素二钠(虎红)后激光照射冠状动脉形成血栓致心肌梗死动物模型,比较各组血管栓塞程度以及心电图Ⅱ导联ST段高度变化选择出佳模型.并用该模型评价重组葡激酶溶栓作用效果.结果 相对于单独刺激组,联合刺激组心脏激光照射处均出现明显损伤病灶.HE染色心肌细胞肿胀,排列紊乱,动静脉内均见血栓.心电图出现不同程度心律失常,ST段抬高.其中注射40 mg·kg-1虎红后照射15 min心律失常出现时间较早,心电图ST段抬高幅度高、维持时间长,而且死亡率低,为本研究中佳光化学法冠状动脉血栓模型.重组葡激酶处理组能够部分溶解动静脉血管内血栓,减小血栓面积(P<0.01),抑制ST段抬高(P<0.05～0.01).结论 该文建立了佳光化学法诱导大鼠冠状动脉血栓模型,适于溶栓药物研发评价.
作者：郝春华；王维亭；宋书辉；赵专友；汤立达 刊期： 2012年第01期
目的 观察小剂量氯胺酮对吗啡耐受褐家鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 (PC-12) δ阿片受体-1 (DOR-1) 和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位 (NR2B) 表达的影响,探讨氯胺酮防止吗啡耐受的相关机制.方法 建立PC-12吗啡耐受细胞模型,以时间分辨荧光免疫分析法测定cAMP含量、Real-Time PCR技术检测细胞DOR-1和NR2B表达,观察吗啡、氯胺酮及吗啡与氯胺酮联合作用上述指标的变化.结果 ① 10μmol·L-1吗啡作用于PC-12细胞48 h,cAMP含量明显升高,提示成功建立了吗啡耐受细胞模型;②小剂量氯胺酮(0.5 μmol·L-1)能防止吗啡耐受发生;③ 吗啡耐受细胞DOR-1的表达较对照组下降,NR2B的表达较对照组增加.小剂量氯胺酮(0.5 μmol·L-1)对DOR-1和NR2B表达无影响,但可逆转吗啡引起的DOR-1表达下调以及NR2B表达上调.结论 小剂量氯胺酮可防止吗啡耐受发生,其机制可能与抑制吗啡引起的DOR-1表达下调及NR2B表达上调有关.
作者：张秀宁；文迪；徐贯杰；孟雁欣；丛斌；赵申明；马春玲 刊期： 2012年第01期
目的 从细胞水平探讨阴离子交换蛋白3(AE3)在心肌细胞缺氧预处理(APC)保护作用中的意义以及与NO通路的关系.方法 以原代培养的SD新生乳鼠心肌细胞为研究对象,建立缺氧/复氧(A/R)损伤和缺氧预适应保护模型.心肌细胞随机分为4组,Control组、A/R组、APC组和NO合成酶抑制剂L-NAME组.RT-PCR和Western blot法分别测定AE3的mRNA和蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,生化自动分析仪测定LDH、CPK活性.结果 A/R处理后,心肌细胞AE3 mRNA转录及蛋白表达较Control组略增加.APC组AE3 mRNA转录及蛋白表达不仅均较Control组转录明显上调,而且较A/R组也明显上调.但预先加入NO合成酶抑制剂L-NAME则可抑制APC处理时AE3的表达增强,并取消APC的心肌保护作用.结论 AE3可能通过NO通路参与了心肌细胞APC的保护作用.
作者：廖章萍；刘丹；王淑霞；李文娟；陈和平；何明 刊期： 2012年第01期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
