宗峰；倪惠娟；解卫平；王虹
目的 对比评价西红花苷和西红花酸在小鼠体内抗氧化活性.方法 采用硅胶柱层析从栀子中分离西红花酸和西红花苷纯品,普通昆明小鼠灌胃给药西红花酸和西红花苷,剂量分别是西红花酸6.25、12.5和25.0 mg·kg~(-1)和西红花苷18.7、37.5和75.0 mg·kg~(-1)·d~(-1),采用测定普通小鼠体内抗氧化指标(SOD、GSH-Px、TAOC和MDA)的方法 对比评价西红花酸和西红花苷-1体内抗氧化活性.结果 两种化合物都能明显提高小鼠肾脏和肝脏的SOD, 肝脏的GSH-Px,心脏和肾脏的TAOC,降低血浆的MDA.结论 西红花酸和西红花苷-1具有相似的体内抗氧化活性,其主要活性部位可能是肝脏和肾脏.
作者：陈阳；杨婷；黄娟；田西；赵璨；蔡乐；冯丽娟；张浩 刊期： 2010年第02期
目的 探讨新型萘酰亚胺-多胺缀合物NNINspm对多胺转运体的识别及诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制.方法 以MTT法检测细胞毒性;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位的变化;高内涵活细胞成像系统检测NNINspm对多胺转运体识别及Akt易位的影响;Western blot检测NNINspm对cytochrome C、14-3-3、Bad、Bcl-xL、mTOR、p70S6K、Cdk4 、p27~(kip1)、Akt、Caspase-3、Caspase-9等蛋白表达的影响.结果 NNINspm具有良好的多胺转运体识别能力及肿瘤细胞靶向性,其通过抑制Akt磷酸化从而引起一系列的信号分子发生改变,如14-3-3蛋白与Bad解离并与Bcl-xL结合,随后引起cytochrome C释放及caspase-9及caspase-3活化并终诱导细胞凋亡;此外,NNINspm诱导mTOR和p70S6K脱磷酸化,Cdk4下调及 p27~(kip1)上调并终诱导细胞周期阻滞于G_0/G_1期.结论 NNINspm通过PI_3K/Akt信号途径诱导肝癌HepG2细胞凋亡.
作者：谢松强；李骞；张亚宏；王建红；赵瑾；王超杰 刊期： 2010年第02期
精神兴奋剂是一类能够兴奋中枢和外周神经系统并容易产生依赖性的精神活性物质.大量研究表明,单胺类神经递质尤其是多巴胺在精神兴奋剂的行为效应和精神兴奋剂依赖过程中发挥重要作用,而多巴胺转运体控制着神经元内多巴胺的稳态和多巴胺神经通路的传递,因此多巴胺转运体在精神兴奋剂的奖赏和行为刺激效应中具有重要作用.
作者：吴光晓；苏瑞斌；李锦 刊期： 2010年第02期
目的 分析人乳腺癌细胞株MCF-7及其紫杉醇耐药株MCF-7/Taxol中的紫杉醇结合的差异蛋白质,探索抗肿瘤药物新靶点.方法 合成生物素化紫杉醇,HPLC-MS联用法检测合成产物.SRB法检测生物素化紫杉醇的生物活性,免疫磁珠偶联后与MCF-7及其MCF-7/Taxol的全细胞蛋白液反应,获得紫杉醇结合蛋白,SDS-PAGE电泳获得差异蛋白条带,LC-MS/MS分析,Western blot鉴定差异结合蛋白.结果 成功合成生物素化紫杉醇,生物素化紫杉醇的生物活性和紫杉醇相当.经过蛋白电泳分析,MCF-7/Taxol的紫杉醇结合蛋白较MCF-7多一差异条带,LC-MS/MS分析提示数个目标蛋白,经过Western blot验证差异条带中有Heat shock protein HSP 90、Dermcidin Precursor、Actinin.结论 成功获得了MCF-7和MCF-7/Taxol之间的紫杉醇细胞差异结合蛋白,对这些蛋白作用机制的的深入探索,可能为抗肿瘤药物的研究寻找到新的靶点蛋白,发现新的肿瘤耐药机制.
作者：张正华；梁晓华；吴学勇；侯凯生；张小平；吕中伟 刊期： 2010年第02期
目的 研究钙调素拮抗剂0-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)增强阿霉素诱导乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR细胞的杀伤作用及其相关机制.方法 用MTT法测定阿霉素、EBB单独及联合用药对阿霉素杀伤乳腺癌多药耐药细胞系(MCF-7/ADR)及其亲代细胞系(MCF-7)的作用的IC50值,用不同浓度EBB处理MCF-7/ADR细胞后用FACS法分析EBB对阿霉素诱导细胞凋亡及对mdr1 mRNA和P-gp蛋白水平表达的影响,通过激光共聚焦显微镜观察EBB处理前后及用EBB预处理24和48 h后MCF-7/ADR和MCF-7细胞内阿霉素浓度的改变.结果 MTT结果 显示EBB对MCF-7和MCF-7/ADR都具有抗肿瘤活性;EBB还能协同提高阿霉素的细胞毒作用,MCF-7组两药相互作用指数(CDI)值为0.73,MCF-7/ADR组CDI值为0.49,其对耐药细胞的协同作用更为明显.随EBB剂量增加,低剂量阿霉素诱导MCF-7/ADR细胞凋亡增加而且P-gp蛋白表达水平逐渐下降,细胞内阿霉素浓度逐渐提高,而且用EBB预处理MCF-7/ADR细胞24和48 h后细胞内阿霉素和罗丹明浓度也逐渐提高.结论 EBB是有效的肿瘤细胞化疗药物,它不但能直接抑制P-gp功能还具有下调P-gp蛋白表达的作用,从而有效逆转MCF-7/ADR细胞的耐药现象,协同增强化疗药物对耐药细胞的杀伤作用.
作者：赵英新；刘荣；范冬梅；任思楣；李崴；师锐赞；张砚君；杨铭 刊期： 2010年第02期
目的 检测成人肝癌组织是否表达褪黑素受体(melatonin receptor,MR),并探讨其结合特性.方法 免疫组化法检测肝癌组织MR两种亚型(MT1、MT2)的表达和分布.采用放射配体结合法检测肝癌组织MR特异性结合和动力学特性.结果 免疫组化结果 显示,成人肝癌组织MT1和MT2均呈聚集型粽黄色颗粒阳性染色,主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核中表达少.放射配体结合结果 表明,成人肝癌组织存有~(125)I标记的褪黑素(~(125)I-Mel)特异结合位点,大结合容量(B_(max))值为(0.29±0.07) pmol·g~(-1) protein,平衡解离常数(K_d)值为(48.7±6.5) pmol·L~(-1),动力学分析表明该特异性结合特点为可饱和及可逆性结合.结论 成人肝癌组织表达MR,包括MT1和MT2,其结合特性为低结合容量、高亲和力、可饱和性及可逆性.
作者：亢晓彬；马勇；魏伟 刊期： 2010年第02期
目的 研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制.方法 采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-PCR法检测survivin、p21 mRNA表达.结果 冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的生长抑制作用,荧光显微镜和透射电镜下均见到典型的凋亡形态学改变,流式分析出现亚G_1峰并显示G_2/M期周期阻滞.RT-PCR分析结果 显示p21 mRNA表达增加而survivin mRNA表达减少.结论 冬凌草甲素通过诱导凋亡和G_2/M期周期阻滞来抑制人胰腺癌SW1990细胞生长,其分子机制可能与survivin和p21调节的信号途径有关.
作者：宋芳；冯一中；蒋小岗；顾振纶；郭次仪 刊期： 2010年第02期
目的 建立人碳酸酐酶Ⅱ(hCA Ⅱ)抑制剂筛选技术,并用于评价新hCA Ⅱ抑制剂.方法 以大肠杆菌表达的hCA Ⅱ作为酶源,按照酶反应体系构建原则,在pH 7.6和25℃的条件下,以碳酸酐酶分解对硝基酚乙酸酯引起348 nm处光吸收增加来计算酶活力.在确定碳酸酐酶抑制剂筛选条件后,对35个靶向碳酸酐酶的新化合物进行了hCA Ⅱ的抑酶活性评价.结果 采用大肠杆菌表达的hCA Ⅱ为酶源,成功建立了hCA Ⅱ抑制剂筛选技术,该技术具有可靠、快速、简便的优点,发现10个新化合物对hCA Ⅱ的抑制率大于醋氮酰胺,9个新化合物对hCA Ⅱ的抑制率与醋氮酰胺相当.结论 hCA Ⅱ抑制剂筛选技术可用于hCA Ⅱ抑制剂的大规模筛选,为发现高效、高亚型选择性的碳酸酐酶靶向性药物奠定基础.进一步深入研究这19个化合物有望获得高效、低副作用的急性高原病防治药物.
作者：肖忠海；段瑞峰；崔文玉；汪海 刊期： 2010年第02期
嘌呤和嘧啶核苷酸作用的P2受体分为G蛋白偶联型的P2Y受体和配体门控离子通道型的P2X受体.研究表明,骨骼肌细胞有多种P2X和P2Y受体亚型表达.嘌呤信号在肌肉萎缩症的肌肉再生中具有重要的作用,与肌肉萎缩症、肌腱炎等骨骼肌疾病有关,并可能为治疗与肌肉有关的疾病提供新的治疗策略.
作者：徐昌水；高云；梁尚栋 刊期： 2010年第02期
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型糖基化磷蛋白,广泛存在于各种组织和体液中,具有多种生物学活性,整合素α_v β_3是其主要受体.OPN主要参与细胞的增殖、分化、迁移及黏附.目前国内外对OPN的研究主要集中在骨吸收、血管生成、动脉粥样硬化、消化系统、泌尿系统、创面愈合、皮肤纤维化、肝纤维化、肾纤维化等方面,而在肺纤维化方面的研究报道较少,现将OPN与肺纤维化的关系作一综述.
作者：贺海彪；顾振纶；蒋小岗；周文轩；郭次仪 刊期： 2010年第02期
目的 探讨SHR大鼠在高血压发展进程中,不同血管内皮功能损伤程度及抗高血压药物对其的修复.方法 以SHR为模型,7～24 wk(wk:周龄)给予卡托普利(3.375 g·kg~(-1)·d~(-1)),停药观察至32 wk.6、18、24和32 wk时分别进行病理学切片检查胸主动脉、肠系膜上动脉和心尖小动脉形态结构,及胸主动脉和肠系膜上动脉乙酰胆碱(ACh)浓度依赖性血管舒张功能检测(n=6).结果 SHR在18 wk时胸主动脉、肠系膜上动脉和小动脉均出现结构病变,并随时间逐渐加重,三级动脉中胸主动脉病变较之严重,表现为内皮细胞脱落和中膜增厚;随年龄增大SHR胸主动脉和肠系膜上动脉ACh依赖性舒张度均下降,但胸主动脉舒张度降低幅度大于肠系膜上动脉(P=0.10,18 wk;P<0.01,24、32 wk);卡托普利能抑制18 wk SHR胸主动脉舒张度的降低(P<0.05 vs SHR),但对肠系膜上动脉没有该作用.结论 伴随SHR高血压的发病进程,体内各级动脉内皮细胞均发生损伤,内皮依赖性舒张功能降低,大动脉内皮功能损伤出现早,程度也往往高于中、小动脉,抗高血压药物可抑制大动脉内皮功能障碍,但对中、小动脉内皮功能损伤无作用.
作者：王现珍；蒋嘉烨；陆家凤；罗珊珊；王勋；卞卡；可燕 刊期： 2010年第02期
目的 观察不同剂量阿霉素诱导大鼠膈肌急性损伤时膈肌收缩特性的变化与大鼠膈肌细胞骨架蛋白和肌浆网钙泵表达变化的关系.方法 一次性腹腔注射阿霉素制备急性膈肌损伤动物模型,♂ SD大鼠随机分成:阿霉素低剂量组(10 mg·kg~(-1))、中剂量组(20 mg·kg~(-1))和高剂量组(40 mg·kg~(-1))及对照组,每组10只.对照组用生理盐水腹腔注射.3 d后剖胸取膈肌,应用体外灌流大鼠膈肌肌条方法 ,分别测量其单收缩张力(Pt)、大强直张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT) ,张力大上升速度(+dt/dt_(max))及张力大下降速度(-dt/dt_(max)).应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定膈肌骨架蛋白肌联蛋白(titin)、伴肌动蛋白(nebulin)和肌浆网钙泵(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase,SERCA)mRNA的表达.结果 与对照组相比,阿霉素中、高剂量模型组大鼠膈肌Pt,Po,±dt/dt_(max)下降(P<0.01),CT、1/2RT延长(P<0.01).阿霉素中毒大鼠膈肌各基因表达较对照组相比分别降低(P<0.01).结论 阿霉素中毒大鼠膈肌细胞膈肌骨架蛋白titin、nebulin和SERCA mRNA表达下调,并可能与膈肌张力改变有关.
作者：胡杰；于影；高琴；关宿东 刊期： 2010年第02期
目的 观察天山花楸叶总黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注 (I/R) 损伤的保护作用,探讨其作用机制.方法 采用改良的Langendorff逆行恒压灌流方法 ,建立大鼠离体心脏I/R损伤模型,观察天山花楸叶总黄酮(4.0、6.0 mg·L~(-1))对心脏I/R损伤后心功能、心肌组织中超氧岐化酶 (SOD) 活性和丙二醛(MDA)含量变化的影响.利用DPPH、羟自由基、超氧阴离子、脂质过氧化反应体系,检测了天山花楸叶总黄酮 (6.25、12.5、25、50、100 mg·L~(-1))体外抗氧化能力.结果 天山花楸叶总黄酮(6.0 mg·L~(-1))可明显改善离体心脏I/R损伤后左心室发展压(LVDP)和左室压力升高或降低大速率 (± dp/dt_(max)),明显增加冠脉流量;天山花楸叶总黄酮(6.0 mg·L~(-1))处理后I/R损伤心肌组织中SOD活性升高,MDA含量减少.天山花楸叶总黄酮(6.25～100 mg·L~(-1))可浓度依赖性地清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基,并抑制脂质过氧化反应.结论 天山花楸叶总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤具有明显保护作用,与其具有较强的抗氧化活性有关.
作者：付伟；刘婷；杨彩玉；王婷；郑秋生；唐辉；王振华 刊期： 2010年第02期
血管内皮细胞和平滑肌细胞是血管壁两种主要细胞,两者在结构上和功能上有着密切的关系,动脉粥样硬化的发生源于循环因子和血管壁细胞间的相互作用,内皮细胞损伤等所导致的分泌功能失调和平滑肌细胞的异常增殖而引起的血管腔狭窄和痉挛是动脉粥样硬化等多种血管疾病发生发展的共同病理基础.本文从动脉粥样硬化病理状态下血管内皮分泌的生长因子、细胞因子、血管活性物质对平滑肌细胞增殖影响的新研究进展做一综述.
作者：李磊；戴敏 刊期： 2010年第02期
目的 研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的生长、凋亡及其对p21和survivin分子表达的影响.方法 应用MTT法检测苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的抑制作用,采用流式细胞仪研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,应用Western blot 和RT-PCR 检测p21和survivin基因的转录和表达.结果 实验表明苯丁酸钠对Tca8113细胞株增殖有明显的抑制作用;流式细胞仪检测显示苯丁酸钠诱导Tca8113细胞株G_1期阻滞和细胞凋亡;苯丁酸钠能使p21的mRNA及蛋白质表达升高,同时survivin的mRNA及蛋白质表达下降.结论 苯丁酸钠通过刺激p21表达增加和抑制survivin的表达,从而抑制Tca8113细胞株增殖,诱导细胞G_1期阻滞和细胞凋亡; 并且p21 mRNA水平的上升和survivin mRNA水平的下降变化呈负相关(r_s=-0.548,P<0.01),二者蛋白表达的变化亦如此(r_s=-0.514,P<0.01).
作者：潘德顺；陈伟强 刊期： 2010年第02期
目的 探讨氨甲喋呤[(±)MTX]及其对映体[(+)MTX、(-)MTX]对ECV304细胞的生长抑制作用并探讨其机制.方法 采用培养的ECV304细胞,应用MTT比色法分析其活性;用光学显微镜观察细胞的形态学变化;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期.结果 在0.1～150 μmol·L~(-1)范围内,(+)MTX、(-)MTX和(±)MTX作用于ECV304细胞24、48、72 h,均抑制细胞ECV304增殖,但抑制强度依次为(+)MTX>(±)MTX>(-)MTX,倒置显微镜观察不同浓度(±)MTX、(+)MTX和(-)MTX作用ECV304细胞不同时间后,出现细胞体积变小、核固缩等形态学改变.用10 μmol·L~(-1)的(+)MTX、(-)MTX和(±)MTX作用ECV304细胞48 h后,PI单染流式细胞术检测ECV304细胞周期的影响,表明MTX消旋体及单一体干扰ECV304细胞DNA合成.结论 (+)MTX和(-)MTX对ECV304细胞的抗增殖作用具有化学结构的立体选择性,(+)MTX的抗ECV304细胞增殖作用明显强于(-)MTX.
作者：郭立方；王荣；贾正平；施有琴；谢华；张娟红；武晓玉 刊期： 2010年第02期
目的 观察蒺藜皂苷单体B(TTSMB)对大乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用.方法 分离出生1～3 d大鼠心肌细胞,培养72 h后随机分为:正常对照组(Control)、缺氧/复氧模型组(H/R)、蒺藜皂苷组(GSTT)、蒺藜皂苷单体B(TTSMB )10、1、0.1 nmol·L~(-1)组.观察细胞形态学变化,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养基中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)释放量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,并采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率及应用Western blot检测TTSMB对凋亡相关蛋白caspase-3的作用.结果 与对照组比较,H/R组心肌细胞存活数明显减少,心肌细胞培养液中CK、LDH、AST释放量增加(P<0.01),SOD活力下降,MDA含量升高(P<0.01);与模型组比较,TTSMB 10、1、0.1 nmol·L~(-1)组存活心肌细胞数明显增多(P<0.05,P<0.01),心肌细胞培养液中CK、LDH、AST含量降低,SOD活力增加、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞凋亡率明显下降,caspase-3表达亦下降.结论 TTSMB可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,抑制心肌细胞凋亡,具有心肌细胞保护作用,其机制与抗自由基作用有关.
作者：张爽；李红；杨世杰 刊期： 2010年第02期
目的 观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对糖基化终末产物(AGEs)诱导肾小管上皮细胞(HKC)转分化及JAK/STAT信号通路的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆.分别采用白蛋白和AGEs进行刺激.采用Western印迹检测SOCS-1、α-SMA、E-钙黏着糖蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(collagen I,Col I)、信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞上清液中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达.结果 与对照组相比,AGEs组肾小管细胞α-SMA和Col I蛋白表达明显上调,细胞培养上清中TGF-β_1含量增加,α-SMA mRNA的表达增加,而E-cadherin蛋白和mRNA表达下调.SOCS-1过表达能够抑制AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA和Col I的表达及STAT1和STAT3的磷酸化,减少TGF-β_1的含量,下调AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA mRNA的表达,同时能够逆转AGEs刺激引起的HKC细胞E-cadherin蛋白和mRNA的下调表达.结论 SOCS-1过表达抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的.
作者：史永红；任韫卓；赵松；郝军；姚芳；刘巍；吴海江；段惠军 刊期： 2010年第02期
目的 检验猫眼草水煎液的致突变性;改进经典的Ames试验体系使之适应于中药体外致突变性检验.方法 通过经典的Ames试验检测猫眼草的体外致突变性;通过哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验检测猫眼草的致畸作用;改进的Ames试验通过增设含补充组氨酸(含量对应于猫眼草水煎液中组氨酸浓度)的阴性对照,排除样品中组氨酸成分对试验结果 的影响.结果 猫眼草水煎液在经典的Ames试验中为强阳性;对哺乳动物骨髓细胞染色体致畸作用为阴性;在改进的Ames试验中猫眼草水煎液的致突变性为阴性.结论 经典的Ames试验不适合猫眼草水煎液致突变性检测,改进后的Ames实验体系适合.猫眼草水煎液在体外和体内均没有致突变性.
作者：金建玲；张辉；刘波；蔡玉品；高培基 刊期： 2010年第02期
目的 研究蜂毒素(Melittin)对胃上皮癌细胞SGC-7901细胞生长及细胞周期阻滞的影响.方法 采用罗丹明B(SRB)染色法观察Melittin对SGC-7901细胞株生长曲线的影响;用流式细胞仪检测Melittin对该细胞周期阻滞的影响;RT-PCR检测细胞周期相关基因mRNA的表达.结果 Melittin(1、2、4、8×10~(-3)μg·L~(-1))体外给药24 h,能抑制SGC-7901细胞的增殖活性(P<0.05 or P<0.01);Melittin(4、8×10~(-3) μg·L~(-1))作用SGC-7901 24 h后,能明显阻滞该细胞株于G_2/M期;并且降低G_2/M期相关基因CylinB1-CDK1-Cdc25c mRNA的表达.结论 Melittin具有抑制胃上皮癌细胞SGC-7901增殖的作用,其机制可能与干扰该细胞G_2/M期相关基因的转录有关.
作者：吴宝明；李俊；吕雄文；金涌；赵斌；黄艳；王怡苹；楼蓉；王朋景 刊期： 2010年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
