马会杰；马慧娟；李茜；袁芳；张翼
目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者蛋氨酸合酶(MTR)A2756G、蛋氨酸合酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性与甲氨蝶呤(MTX)治疗的疗效和不良反应相关性.方法 采用实时荧光定量PCR方法 检测107例单用MTX的RA患者的MTR A2756G及MTRR A66G基因多态性,并与其治疗疗效和不良反应结合分析.结果 MTR A2756G及MTRR A66G的单基因多态性与RA患者服用MTX的疗效及不良反应无相关性(P>0.05).两基因联合作用分析显示,同时是MTR AG型和MTRR AG/GG型者较同时是MTR AA型和MTRR AA型的RA患者对MTX治疗效果差(OR=0.19,95%可信区间为0.04～0.88),差异有统计学意义(P=0.03),没有发现两者联合作用与其不良反应有相关性(P>0.05).结论 MTR和MTRR基因多态性可能对于RA患者服用MTX的疗效存在预示作用.
作者：申世华；徐建华；徐胜前；连莉；李迎伟；肖会 刊期： 2009年第08期
Visfatin由Fukuhlara等[1]2005 年发现,主要由内脏脂肪分泌.具有促进脂肪形成、降低血糖等类胰岛素作用,与肥胖、2型糖尿病有着密切联系.吡格列酮改善胰岛素抵抗的部分机制可能是通过调节脂肪因子的产生[2].本研究通过高脂喂养建立肥胖SD大鼠实验模型,用吡格列酮干预来观察其对visfatin表达的影响,探讨吡格列酮改善胰岛素敏感性的可能作用机制.
作者：吕齐欢；王佑民；丁晓洁；程媛 刊期： 2009年第08期
功能核磁共振技术的飞速发展,使药物作用前后神经元的活动状况能够通过脑血氧含量变化间接反映出来.这使得药理学家可以借助核磁共振技术,评价药物对脑区和网络空间的作用.目前,应用于人类受试者的神经药理学磁共振研究涉及的药物,主要集中在单胺能与胆碱能神经传递的激动剂与抑制剂方面.该文主要介绍药物磁共振成像(phMRI)的基本概念和实验中常用的任务,同时结合多巴胺能药物的研究,综述了phMRI的新研究进展.
作者：吴润果；邱蕾；郑璐；张占军；罗跃嘉；王永炎 刊期： 2009年第08期
目的 观察依托咪酯(etomidate,Eto)所致遗忘作用与GABAA受体或NMDA受体的关系.方法 小鼠腹腔注射Eto(3 mg*kg-1),建立遗忘模型,在跳台实验和避暗实验中分别观察不同剂量的荷包牡丹碱或NMDA侧脑室注射对遗忘小鼠错误次数(error times,ET)、跳台潜伏期(step down latency,SDL)、步入潜伏期(step through latency,STL)的影响.结果侧脑室注射荷包牡丹碱(2、4 μg)可减少Eto所致遗忘小鼠的ET,延长SDL和STL.侧脑室注射NMDA对Eto所致遗忘小鼠的ET、SDL和STL均无影响.结论 GABAA受体是依托咪酯所致遗忘作用的重要靶位,NMDA受体则不是其作用靶位.
作者：王丹；戴体俊；马涛；孟晶 刊期： 2009年第08期
目的 探讨钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)藻蓝蛋白(C-phycocyanin,CPC)对体外人宫颈癌细胞(HeLa细胞)凋亡的影响及分子机制.方法 首先通过MTT法检测藻蓝蛋白对HeLa细胞增殖的影响,然后通过电镜观察藻蓝蛋白处理后的细胞的凋亡形态,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA结构变化,流式细胞仪显示不同浓度藻蓝蛋白对HeLa细胞的细胞周期变化的影响,免疫组化法检测藻蓝蛋白对细胞表面凋亡相关基因表达的影响,检测凋亡相关的caspase的活性及细胞色素C的释放,以揭示藻蓝蛋白诱导HeLa细胞凋亡的作用机制.结果与未用藻蓝蛋白作用的对照组相比,藻蓝蛋白组的HeLa细胞存活率明显降低,并存在浓度剂量效应.藻蓝蛋白处理后的细胞呈现典型的凋亡形态,如细胞皱缩、细胞膜微绒毛消失、起泡,染色体密集,形成凋亡小体.凋亡细胞的DNA出现断裂,呈梯状的电泳带(DNA ladder),分子量为180～200 bp及其倍体.并且发现藻蓝蛋白处理后的处于亚二倍体峰HeLa细胞数蛋白浓度随藻蓝蛋白浓度的增高而明显增多.另外藻蓝蛋白能促进HeLa细胞内促凋亡基因(Fas、ICAM-1)的表达并抑制抗凋亡基因(Bcl-2)的表达,从而促进细胞内凋亡信号的传导.藻蓝蛋白可以激活caspase酶并可促进凋亡蛋白--细胞色素C从线粒体到细胞质释放.结论 钝顶螺旋藻藻蓝蛋白具有诱导体外HeLa细胞凋亡的作用,通过促进凋亡信号在HeLa细胞内的传导从而达到抗肿瘤的效果.
作者：李冰；褚现明；高美华；张学成 刊期： 2009年第08期
熊果酸(Ursolic acid, UA),又名乌索酸,乌苏酸,属a-香树脂醇(a-amyri)型五环三萜类化合物.在自然界分布非常广泛,据目前所知,至少存在于26个科70多种天然植物中[1].大量的研究表明,UA具有广泛的药理作用和重要的生物活性,尤其在抗炎、护肝、抗肿瘤以及机体免疫调节等方面已经显现出令人关注的药理特性[2,3].体内药代动力学研究表明, UA的生物利用度低[4],口服吸收情况较差,而且其在体内吸收转运的方式和机制也并不清楚.Caco-2细胞系来源于人结肠类腺癌细胞,其结构和生化作用类似于人小肠上皮细胞,含有与小肠刷状缘上皮相关的转运系统以及一
作者：程晓华；熊玉卿 刊期： 2009年第08期
多糖具有较强的免疫调节及抗肿瘤作用,已经成为肿瘤治疗的研究热点之一.目前,从海洋中获得了越来越多结构新颖、作用独特的活性多糖,有望成为肿瘤治疗中新的药物资源,该文通过对国内外相关文献进行检索,综合了国内外近年来的研究,对近年来海洋多糖的抗肿瘤作用机制的研究进展作一概述.
作者：周庆峰；李明月；那广水；李成伟 刊期： 2009年第08期
目的 观察异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨可能的机制.方法 采用SD新生大鼠进行心肌细胞原代培养.实验分为5组:正常对照组、t-BHP组和异丙酚1、10、30 μmol·L-1组.分光光度计法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物岐化酶(SOD)活性;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞线粒体活性,罗丹明123(Rhodamine123)荧光染色、流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Western blot法检测caspase-3的表达.结果与正常对照组相比,100 μmol兰州大学基础医学院生理学教研室;甘肃省新药临床前研究重点实验室·L-1的t-BHP处理心肌细胞4 h后,细胞内GSH水平明显下降(P<0.05),MDA含量增加(P<0.01),抗氧化酶SOD活性降低(P<0.01),细胞线粒体活性降低(P<0.01),线粒体膜电位ΔΨm明显下降(P<0.01),细胞凋亡率和caspase-3 的表达明显升高(P<0.01);异丙酚10、30 μmol·L-1能减少过氧化氢所致的细胞中MDA含量升高;提高SOD活性和GSH水平;提高线粒体活性、膜电位;抑制心肌细胞凋亡和caspase-3 的表达升高(P﹤0.05,P﹤0.01).结论 异丙酚能减弱过氧化氢所致的心肌细胞凋亡,其作用机制可能是通过减少活性氧自由基导致的细胞膜氧化损伤、提高线粒体活性、维持线粒体的膜电位,从而抑制心肌细胞凋亡的发生.
作者：赵松；解丽君；张建新；李兰芳 刊期： 2009年第08期
目的 探讨p38/Fas/FasL信号途径在戊地昔布诱导裸鼠食管癌移植瘤细胞凋亡中的调控作用.方法 建立食管癌裸鼠移植瘤模型,给予戊地昔布4 wk.剥离瘤结节,计算瘤体体积和肿瘤生长抑制率;HE染色检测裸鼠移植瘤的结构变化;FCM法检测移植瘤中的细胞凋亡率;免疫组织化学和FCM法检测p-p38、Fas和FasL蛋白的表达变化;RT-PCR检测移植瘤中p38mRNA表达变化.结果①戊地昔布可明显降低肿瘤重量,肿瘤生长抑制率为45.80%.②戊地昔布可增加肿瘤细胞的凋亡率.③戊地昔布可上调p38 mRNA和蛋白的表达;同时凋亡基因Fas和FasL蛋白表达升高.④肿瘤组织的凋亡率与p-p38、Fas、FasL蛋白表达呈正相关;p-p38与凋亡基因Fas、FasL蛋白表达之间均呈正相关.⑤给予戊地昔布后,裸鼠胃肠上皮细胞形态没有异常.结论 激活p38MAPK信号转导途径,从而上调凋亡相关基因Fas/FasL的表达,可能是戊地昔布诱导食管癌细胞凋亡的机制之一.
作者：张玉军；刘淑霞；刘青娟；左连富；刘俊茹；郭建文；吴海江；王晓月 刊期： 2009年第08期
目的 探讨姜黄素(curcumin,Cur)抗人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺血/再灌注(I/R)损伤的作用机制.方法 建立缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型,MTT法检测不同的缺氧和复氧时间对内皮细胞的损伤作用及Cur对HUVEC的保护作用;预先给予Cur(5 μmol·L-1),用免疫荧光和Western blot法检测H/R对HUVEC微管相关蛋白LC3、溶酶体酶cathepsin B、L及促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2表达的影响.结果 Cur(1.25～5 μmol·L-1)可剂量依赖性的保护H/R的HUVEC;H/R能增加LC3、cathepsin B、Bax/Bcl-2的表达,并且使cathepsin L发生核转位;而用Cur预处理后,在进一步增强LC3表达的同时,明显抑制cathepsin B和Bax/Bcl-2的表达及cathepsin L的核转位现象.结论 Cur能有效提高HUVEC在缺血/再灌注损伤中的存活率,并通过诱导其自噬活性、抑制cathepsins以及Bax/Bcl-2的表达保护内皮细胞.
作者：华文敏；梁中琴；方韵；顾振纶；郭次仪 刊期： 2009年第08期
目的 探讨洛伐他汀(lovastatin)保护内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的机制.方法 EPCs与洛伐他汀或者血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor, LOX-1)的特异性阻断抗体(LOX-1 mAb)预处理24 h后,再与氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, oxLDL)孵育48 h.然后,检测EPCs迁移、粘附和管状结构形成能力.为探讨洛伐他汀的作用机制,检测EPCs生成一氧化氮(nitric oxide, NO)的量,内皮型一氧化氮合酶( endothelial nitric oxide synthase, eNOS)和LOX-1蛋白及mRNA表达.结果 oxLDL抑制EPCs迁移、粘附及管状结构形成能力,降低NO产生、eNOS蛋白及mRNA表达,增加LOX-1蛋白及mRNA表达.洛伐他汀和LOX-1 mAb恢复EPCs功能,逆转oxLDL对NO、eNOS及LOX-1的调节.结论 洛伐他汀通过调节eNOS和LOX-1而保护EPCs免受oxLDL的损害.
作者：马凤霞；任倩；韩忠朝 刊期： 2009年第08期
目的 观察依那普利(enalapril,Ena)抗异丙肾上腺素(Isoprenaline,Iso)诱导的心肌纤维化作用并探讨其作用机制.方法 异丙肾上腺素皮下注射致心肌纤维化模型,经Ena低、中、高(2.5、5.0、10.0 mg·kg-1)3个剂量组和阳性对照药卡托普利(100.0 mg·kg-1)治疗后观察其对心肌组织胶原变化、心室重量(HW/BW)和心室重量指数(LVI)、羟脯氨酸含量及免疫组化和Western blot检测TGF-β1表达的影响.结果 Ena不同剂量组均能够降低心肌组织胶原含量(P＜0.05或P＜0.01),降低HW/BW和LVI(P＜0.05或P＜0.01),降低羟脯氨酸含量(P＜0.05或P＜0.01),减少TGF-β1在心肌组织中的表达(P＜0.05或P＜0.01),减轻心肌纤维化.结论 Ena通过抑制TGF-β1表达抗Iso诱导的心肌纤维化.
作者：孙红霞；杨世杰 刊期： 2009年第08期
目的 研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS) 诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞相关基因表达的变化.方法 MTT法、流式细胞术分别分析DADS对MGC803细胞的抑制作用与细胞周期分布的影响;功能基因芯片检测周期相关差异表达基因;Western blot、RT-PCR验证周期相关基因的表达.结果 MTT法、流式细胞术证明DADS可明显抑制MGC803细胞增殖并诱导G2/M期阻滞.基因芯片结果显示,30 mg·L-1DADS作用MGC803细胞4 h后,表达上调的基因有CDC45L、CDK5R1、p21、CUL4A、GADD45α、RAD17、TP53,下调的基因是ANAPC5、ATR、BRCA1、CCNA2、CCNB2、CCNE1、CCNE2、CDC16、CDC6、CDK5RAP1、GTF2H1、MCM5、RAD9A、RGC32.RT-PCR显示30 mg·L-1 DADS处理MGC803细胞4、8、12 h后,p21、GADD45α时间依赖性的表达增强(P<0.05),CyclinB1呈时间依赖性的表达降低(P<0.05).TP53在4、8、12 h后与对照组比较表达明显增强(P<0.05).Western blot结果表明,30 mg·L-1DADS作用MGC803细胞6、12、24 h后,p53、GADD45α、p21蛋白表达上调,CyclinB1蛋白表达下调(P<0.01).结论 DADS诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞是由多基因协同作用的结果,可能通过两种途径共同调节完成的.
作者：黄炎；姜浩；周建国；王莉；陆丽峰；石莺；唐海林；林敏；凌晖；苏琦 刊期： 2009年第08期
目的 研究神经节苷脂(GM)对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及可能机制.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,♂ SD大鼠,随机分成假手术组、模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组,缺血48 h后各组大鼠神经功能缺陷评分,测定脑组织一氧化氮(NO)的含量,检测脑细胞凋亡率,分析脑缺血区诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和Caspase-3 mRNA的表达.结果与假手术组比较,模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组神经功能缺陷评分、NO含量、凋亡率、iNOS和Caspase-3表达量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组和GM低剂量治疗组比较,GM中、高剂量治疗组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);模型对照组和GM低剂量治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05),GM中剂量治疗组和高剂量治疗组之间差异也无统计学意义(P>0.05).结论 神经节苷酯减少iNOS生成,抑制细胞凋亡,对缺血神经细胞产生保护作用.
作者：陈新峰；陈春美 刊期： 2009年第08期
目的 为新药发现阶段α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选提供实用的微量筛选方法 .方法 以α-葡萄糖苷酶为酶源,96孔板为载体,在生理pH值和温度的条件下,用正交试验法研究酶浓度、底物浓度、反应时间对酶活力的影响,确定酶反应佳条件.在确定筛选模型运行条件后,对阳性药物和492种贵州民族药植物提取物进行筛选研究.结果 采用正交试验法成功构建了实用灵敏的α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型.492种植物提取物筛选结果表明,有145种提取物的抑制率达到了50%以上.结论 本研究构建的α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型具备了简便、快速、灵敏、高效、经济的优点,适用于大规模筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂.
作者：杨付梅；孙黔云 刊期： 2009年第08期
目的 探讨侧脑室内注射吗啡预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及可能的信号机制.方法 建立模型大鼠,随机分为两个部分:①分为4组,每组6只:对照组(CON组),在缺血/再灌注前30 min内,侧脑室内微量泵注射0.9%生理盐水5 min,停止注射5 min,重复3次;预处理组(MPC组),在缺血/再灌注前30 min内,侧脑室内注射吗啡(1 μg·kg-1)5 min,停止5 min,重复3次;钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP)+预处理组(TFP+MPC组),在吗啡预处理前10 min一次侧脑室内给予TFP(浓度为20 g·L-1)5 μl;另设TFP自身对照组(TFP组).②分为3组,每组6只:假手术组(Sham组),CON组和MPC组均同第一部分.观察指标包括:平均动脉压(MAP)、心率(HR),计算平均动脉压和心率乘积(RPP);心肌缺血危险区(AAR)、梗死区(IS)的体积、心肌梗死面积以IS/AAR表示;检测血浆降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide, CGRP);测定海马组织钙调蛋白;测定下丘脑室旁核、心肌缺血区和非缺血区P物质的表达.结果与CON组相比,MPC组的IS和IS/AAR均明显下降(P<0.01),TFP+MPC组分别与TFP组和CON组相比差异无显著性(P>0.05),而均明显高于MPC组(P<0.01);CON组分别与Sham组和MPC组相比,其下丘脑室旁核、心肌缺血区和非缺血区P物质表达均明显增高(P<0.01,P<0.05);MPC组血浆降钙素基因相关肽CGRP水平与海马钙调蛋白的表达均明显高于其它各组(P<0.01).结论 侧脑室内注射吗啡预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与钙调蛋白介导释放CGRP和痛觉的干预有关.
作者：陆姚；范礼斌；张野；翁立军；李锐；程新琦；陈志武 刊期： 2009年第08期
目的 观察水芹总酚酸对2.2.15细胞HBV-DNA、cccDNA的抑制作用.方法 药物稀释成500、250、125 mg·L-1加入2.2.15细胞进行培养,每4 d换含同浓度药物培养液;分别收集d 4、8以及停药后4 d的细胞,试剂盒提取HBV-DNA、cccDNA,荧光定量PCR(FQ-PCR)测定其含量,观察水芹总酚酸对其抑制作用.结果 水芹总酚酸对HBV-DNA和cccDNA都具有很好的抑制作用,在细胞培养的d 8其高、中剂量(500、250 mg·L-1)的抑制作用达到大: HBV-DNA为62.3%和47.7%,cccDNA为62.7%和61.3%,且在停药后3 d仍保持较高的抑制率(P<0.05).结论 水芹总酚酸可以有效的抑制2.2.15细胞HBV-DNA、cccDNA的表达,抗病毒作用明显,且无明显的停药反跳现象.
作者：王选举；黄正明；杨新波；宋建国 刊期： 2009年第08期
目的 研究眼镜蛇毒金属蛋白酶atrase A对人内皮细胞的作用.方法 采用MTT法、SRB法、形态学观察分别检测atrase A对人微血管内皮细胞生长的影响;内皮细胞经atrase A处理后,ELISA法检测内皮细胞释放IL-8、ICAM-1、MCP-1、E-selectin的变化,萤光发光法检测各组caspase-8、caspase-3/7的表达情况.经尾静脉给予大鼠atrase A后,检测大鼠血清中ICAM-1、IL-8、TNF-α的变化情况.结果 Atrase A(400、40 mg·L-1)对内皮细胞的生长具有明显的抑制作用.而MTT法结果显示,atrase A对高接种密度的内皮细胞基本上没有影响;镜检结果显示,atrase A(400、40 mg·L-1)可使贴壁生长的内皮细胞解离悬浮.而4 mg·L-1的atrase A对内皮细胞的生长没有影响.高剂量atrase A(400 mg·L-1)可诱导内皮细胞IL-8、ICAM-1、MCP-1释放增加,而低剂量atrase A(4 mg·L-1)对各炎症介质的表达没有影响.Atrase A还可诱导内皮细胞caspase-8、caspase-3/7的表达,12 h达峰值.经尾静脉分别给予2 240 μg·kg-1和400 μg·kg-1的atrase A后,高剂量组SD大鼠血清中ICAM-1、IL-8、TNF-α表达增加;而低剂量组中没有明显变化.结论 眼镜蛇毒金属蛋白酶atrase A可抑制内皮细胞生长,诱导内皮细胞释放炎症介质和凋亡.
作者：叶巧玲；孙黔云；李敏 刊期： 2009年第08期
谷氨酸的过量释放在多种神经系统疾病的发生发展过程中发挥着重要作用.虽然离子型谷氨酸受体拮抗剂在动物模型中取得了一定的治疗效果,但因其同时阻断了正常的兴奋性传递,限制了这类化合物的临床应用;而mGluRs通过突触前机制抑制谷氨酸的释放,有望成为某些神经系统疾病治疗的新靶点.该文就近年来国内外mGluRs在这些神经疾病中的研究进展作一综述.
作者：龙锐；杜俊蓉 刊期： 2009年第08期
目的 观察H2S对氯化钴 (CoCl2) 诱导的H9C2心肌细胞缺氧性损伤的影响,探讨其作用机制.方法 用CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型.NaHS(H2S的供体)在CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min加入培养基中,作为预处理.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Cleaved Caspase-3的表达;GSSG试剂盒检测GSSG/(GSSG+GSH) 的比值;双氯荧光素 (DCFH-DA) 染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧 (ROS);罗丹明123 (Rh123)染色荧光显微镜照相检测线粒体膜电位 (MMP).结果在400～800 μmol·L-1浓度范围内,CoCl2处理H9C2心肌细胞36 h,呈剂量依赖性地降低细胞存活率.在600 μmol·L-1 CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min,应用400 μmol·L-1 NaHS可明显地抑制CoCl2对细胞的损伤作用,使细胞存活率明显升高,细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3表达降低;并使H9C2心肌细胞内GSSG/(GSH+GSSG) 比值及ROS水平明显降低,同时明显地改善MMP.结论 H2S能明显地对抗化学性缺氧诱导的心肌细胞损伤,此保护作用与其降低GSSG/(GSH+GSSG)比值和ROS水平,改善MMP,抑制Caspase-3活化等机制有关.
作者：廖新学；杨春涛；杨战利；李建平；王礼春；黄雪；郭瑞鲜；陈培熹；冯鉴强 刊期： 2009年第08期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
