卢今;伍长娟;杨肖琳;高雷;陈礼明;金涌
目的 探讨成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马内突触结合蛋白(SytⅠ)的表达及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复可能的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,免疫组织化学方法分析甲减组、替代治疗组、正常对照组大鼠海马内SytⅠ的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3(triiodothyronine, T3)、T4(tetraiodothyronine, T4)显著低于正常对照组(P<0.05);海马CA1、CA3和齿状回(dentate gyrus,DG区)SytⅠ的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平(P>0.05);SytⅠ的蛋白表达水平在DG区分子层明显增加,达到正常水平(P>0.05);其他区域与甲减组比较无增加,仍明显低于正常对照组(P<0.05).结论 成年期甲减降低海马内SytⅠ蛋白表达,短期替代治疗可使血清甲状腺素恢复正常,部分SytⅠ的蛋白表达恢复.
作者:何景周;刘春蕾;朱宁宁;朱德发 刊期: 2008年第05期
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) 和其受体(VEGFR:FLT-1、FLK-1)在大肠癌组织中的表达以及与大肠癌临床病理之间的关系.方法 应用免疫组织化学SP法,检测82例大肠癌及14例正常大肠组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达,分析大肠癌组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达与大肠癌临床病理参数之间的关系.结果 大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率与正常大肠组织比较差异有显著性(P<0.05).VEGF的表达在有无淋巴结转移组和不同的Duke's分期中差异亦有显著性(P<0.05).FLT-1和FLK-1在大肠癌组织的阳性表达呈显著正相关,(rs=0.457,P=0.000).结论 VEGF和受体FLT-1、FLK-1与大肠癌的发生密切相关,VEGF与大肠癌的预后有关.
作者:吴文清;丁丽红;曹立宇;潘美华;张洪福 刊期: 2008年第05期
目的 制备抗重组人内抑素(ES)单克隆抗体(McAb)并进行鉴定.方法 利用重组人ES为抗原,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与同源小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,间接ELISA法对细胞培养上清进行筛检,对能稳定分泌抗重组人ES的细胞株,进行扩大培养.体内诱生法制备腹水并对其初步鉴定.结果 获得3B4、1D10、1G5、2D10,4株能稳定分泌抗重组人ES McAb的杂交瘤细胞株,并对3B4和1D10两株给予鉴定,其免疫亚型为IgG2a、IgG3.腹水ELISA效价为10-6、10-5.通过蛋白免疫印迹法和免疫组化证明抗体有特异性和敏感性.结论 成功制备分泌抗重组人ES的杂交瘤细胞株,为研究人ES的表达及相关领域奠定了基础.
作者:魏文杰;陈飞虎;沈际佳;廖法学;朱绍春 刊期: 2008年第05期
目的 探讨调强放射治疗( IMRT)简化剂量学验证的方法.方法 用电离室在人体等效模体中测量靶区五个参考点的绝对剂量与相应点计划计算的剂量比较;用慢感光胶片插在模体内,测量调强计划横断面的剂量分布与治疗计划系统(TPS)相应横断面剂量的分布比较.结果 肿瘤照射剂量的测量结果基本上和计划结果相一致.测量的绝对剂量误差在4%以内;靶区的横断面剂量分布也较准确.结论 IMRT剂量验证是临床实施IMRT 过程中质量保证的重要措施.
作者:洪浩;汪志;唐虹;崔恩萍 刊期: 2008年第05期
目的 观察人正常子宫平滑肌细胞经细胞因子刺激后生物学特性变化,探讨细胞因子在子宫肌瘤发病中的作用.方法 分离培养健康育龄妇女外周血单个核细胞,经十二蔻佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)联合刺激获取富含细胞因子的条件培养液,后者与人正常子宫平滑肌细胞建立共培养体系.采用免疫荧光观察雌激素受体α(ER-α)表达,MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR法检测纤连蛋白(Fibronectin,FN)和胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)mRNA表达量,比较刺激前后细胞的生物学特性变化.结果 细胞因子刺激组ER-α及细胞外基质FN和Collagen-ⅠmRNA表达水平增多,与未刺激人正常子宫平滑肌细胞组比较差异有显著性(P<0.05),与子宫肌瘤细胞组比较差异无显著性(P>0.05);细胞增殖能力三组细胞间差异无显著性(P>0.05).结论 细胞因子诱导人正常子宫平滑肌细胞生物学特性发生肌瘤细胞样改变;子宫腔局部细胞因子水平在子宫肌瘤发病中起重要作用.
作者:李彩荣;凌斌;冯定庆;周颖;李敏 刊期: 2008年第05期
目的 构建Panton-Valentine杀白细胞毒素(PVL) lukS-PV基因表达载体,并在大肠杆菌中表达相应蛋白.方法 提取PVL阳性金黄色葡萄球菌的基因,PCR方法扩增lukS-PV,A-T克隆至pGEM-T载体上,经PCR、双酶切和测序鉴定后,亚克隆到pET28a(+)表达载体上,鉴定并转化至Rosetta(DE3)plys表达宿主菌中,用IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定.结果 构建了lukS-PV-pGEM-T和lukS-PV-pET28a(+)重组质粒,经PCR扩增和限制性内切酶BamHI和XhoI双酶切均得到939bp的目的 片段,基因测序与GENEBANK中的PVL的序列一致,宿主菌表达带HIS标签的重组LukS-PV蛋白.结论 成功克隆lukS-PV基因和构建重组表达质粒,并在宿主菌中成功表达重组LukS-PV蛋白,为PVL免疫学检测方法的建立奠定基础.
作者:高玉录;马筱玲;沈继龙;戴媛媛;付广林;张义永;鲁怀伟;李华 刊期: 2008年第05期
目的 探讨自分泌运动因子受体(AMFR)、C-Met蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SABC方法检测80例舌鳞状细胞癌组织切片中AMFR、C-Met的表达.结果 与正常舌组织相比,AMFR在舌癌中高表达(76.25%),与TNM分期有相关性(P<0.05).C-Met蛋白的阳性表达率为83.75%,与组织学分化,TNM分期,有无淋巴结转移有相关性(P<0.05).AMFR和C-Met蛋白的表达呈正相关(P<0.05).结论 舌癌中的AMFR和C-Met蛋白高表达,对于估计舌鳞状细胞癌的生物学特性具有重要的价值,为舌鳞状细胞癌综合治疗的提供一定的理论基础.
作者:陈志;颜雨春;后军;胡超 刊期: 2008年第05期
目的 探讨重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)对体外培养的腭裂术后裸露骨面瘢痕来源的成纤维细胞生物学作用的影响.方法 制作兔腭裂术后裸露骨面瘢痕动物模型,利用体外细胞培养技术,通过MTT法、3H-TDR渗入法、流式细胞术等方法观察、分析rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,数据采用方差分析及q检验处理.结果 与对照组比较,实验组加入rhIFNα-2b后,腭裂术后瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性及被明显抑制,G1期细胞百分数明显增高.结论 rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性具有明显抑制作用,说明在防治腭裂术后裸露骨面瘢痕的形成中有一定的应用价值.
作者:胡超;丁丁;刘安东;黄擎;陈首慧;陈志;王元银 刊期: 2008年第05期
目的 探讨舌下含服硝酸异山梨酯对16层螺旋CT冠状动脉成像质量和管腔直径的影响.方法 50例临床怀疑冠心病者随机分为A(不含服硝酸异山梨酯,25例)、B(含服硝酸异山梨酯5mg,25例)两组,进行16层螺旋CT冠状动脉成像,分别观测右冠状动脉、左主干、左前降支、左旋支四个主要节段的管腔直径和14个节段的显示情况以及患者副反应.结果 B组冠状动脉4个主要血管节段直径明显大于A组;两组右冠状动脉(第1、2、3段)、左主干(第5段)、左前降支(第6、7段)、左旋支(第11段)可评价例数相同;左室后支(第14段)、左前降支(第8段)、第1、2对角支(第9、10段)、钝缘支(第12段)、左旋支(第13段)显示差异有显著性,而两组副反应差异无显著性.结论 含服硝酸异山梨酯可扩张冠状动脉,提高MSCT冠状动脉细小分支的显示率和成像质量,而不增加副反应率.
作者:许实成;程琦;程涛 刊期: 2008年第05期
目的 对一中国常染色体显性先天性粉尘状白内障家系进行β-晶体蛋白基因(cryba1、crybb1)的突变筛查.方法 对一中国先天性白内障家系进行研究,通过直接测序,筛查此家系中全部患者的cryba1基因、crybb1基因外显子以及临近的内含子的剪接位点.结果 直接测序后发现该粉尘状白内障家系cryba1基因和crybb1基因的外显子及其临近的内含子中,均未发现任何突变.结论 该表型的先天性白内障家系并非是由这两个β-晶体蛋白基因突变引起.
作者:胡继元;廖荣丰;杨森;方巧云;周伏圣 刊期: 2008年第05期
目的 研究酪氨酸磷酸酶SHP-2在放、化疗引发的骨髓毒的调节作用,初步探讨其可能的分子机制.方法 分别从野生型(Wild-type,WT)、SHP-2杂合突变型(SHP-2+/-)及SHP-2纯合突变型(SHP-2-/-)胚胎鼠(9.0~9.5 d)的卵黄囊中获取造血祖细胞,用细胞因子IL-3(Interleukin-3,0.5 ng/ml)、SCF(stem cell factor, 0.5 ng/ml)将造血祖细胞定向诱导分化为粒-巨噬造血细胞系(granulocyte-macrophage,GM).60Co γ射线及化疗药物顺铂(Cisplatin,CDDP)处理后,台盼蓝染色法观察比较三种GM细胞增殖抑制率的差异;集落形成实验(Colony-forming Units,CFU)分析比较卵黄囊造血祖细胞集落形成能力的差异;血细胞计数法检测比较WT小鼠和SHP-2+/-小鼠在照射或化疗后外周血中白细胞、红细胞及血红蛋白水平的变化;Western Blot检测Erk在WT及SHP-2-/-造血细胞中的表达与磷酸化水平.结果 在CDDP或60Co γ射线导致的细胞损伤反应中,SHP-2-/-造血细胞的生存能力较SHP-2+/-和WT造血细胞增强;相比WT小鼠,SHP-2+/-组小鼠的白细胞、血红蛋白及红细胞数量降低程度减轻;SHP-2-/-造血祖细胞克隆集落形成能力较SHP-2+/-组及WT组增强;提示SHP-2-/-突变可以减轻CDDP或60Co γ导致的骨髓毒性.Western Blot显示在CDDP损伤反应中,SHP-2-/-抑制Erk的磷酸化.结论 SHP-2参与调控放、化疗导致的骨髓毒性,其分子机制可能与SHP-2对Erk活化调节相关.
作者:张梅;李菲菲;郑红;倪芳;瞿成奎;汪思应 刊期: 2008年第05期
目的 在部分岩斜区侧方入路基础上,对耳上经岩骨嵴小骨窗入路至岩斜区进行显微解剖学研究,力求取得良好显露的同时,使手术入路更加简便、安全、实用,降低创伤,减少并发症.方法 10%甲醛固定的国人成人头颅湿标本10例,漂白的颅骨干标本10例,模拟手术操作,对入路涉及重要结构进行观察、测量、拍照.结果 在4 cm×3 cm大小骨窗范围内完成所有手术操作,入路涉及重要解剖结构包括Labbe静脉、岩骨内部结构等,可较好的显露脑干腹侧间隙、岩骨背侧及桥小脑角区.结论 耳上经岩骨嵴小骨窗入路,能取得和Kawase入路、乙状窦前入路、部分迷路切除岩骨尖(PLPA)入路等侧方入路相似或相近的显露,具有创伤小、操作简便等优点.
作者:吴德俊;万经海;冯春国;徐培坤;程宏伟;汪宇扬;张圣邦;郭致飞 刊期: 2008年第05期
斑点追踪显像技术( speckle tracking imaging,STI) 是超声医学领域内新近发展起来的一项新技术,也称二维应变超声心动图.
作者:汪太平;王其海 刊期: 2008年第05期
目的 通过研究表达在T细胞上的T-box家族成员之一(T-bet)和能与[T/A(GATA)A/G]序列结合的锌指结构家族的转录因子之一(GATA-3)这两种转录因子在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)中的表达,探讨其在EAMG发病机制中的作用.方法 密度梯度离心法分离EAMG组和对照组大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)后,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测二组大鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测 PBMCs中T-bet和GATA-3的表达.结果 对照组和EAMG组PBMCs中,T-bet的表达量分别为0.65±0.15和0.86±0.13,两组比较差异具有显著性(P<0.01);GATA-3的表达量分别为0.46±0.12和0.67±0.11,差异也具有显著性(P<0.01);血清中IFN-γ的含量,对照组(108.22±19.01)pg/ml明显低于EAMG组(230.86±41.44)pg/ml(P<0.01);对照组IL-4含量(87.33±3.50)pg/ml明显低于EAMG组(96.21±4.77)pg/ml(P<0.01);T-bet表达与IFN-γ及GATA-3表达与IL-4在对照组和EAMG组分别呈显著正相关(r=0.89,r=0.89,P<0.01;r=0.92,r=0.88,P<0.01).结论 T-bet 和GATA-3在EAMG大鼠PBMCs中表达均显著增高,这可能是EAMG大鼠细胞和体液免疫反应增强的重要原因之一.
作者:罗六一;谢娟;许文华;任明山 刊期: 2008年第05期
目的 分析安徽医科大学第一附属医院铜绿假单胞菌(PA)的感染分布、耐药性及β-内酰胺酶检测情况,为临床治疗提供依据.方法 用琼脂稀释法检测120株PA的小抑菌浓度(MIC),用2-巯基丙酸抑制试验和改良三维试验检测120株PA中的金属酶β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC酶.结果 PA在临床上的感染主要以上呼吸道为主(痰液及咽拭子),14种临床常用抗生素表现为多重耐药,耐药率达80%以上的抗生素有7种,依次为头孢曲松95.8%、头孢噻肟89.2%、加替沙星86.7%、氨曲南、庆大霉素和环丙沙星耐药率均为85%、左氧氟沙星的耐药率为83.3%.120株PA中65株产β-内酰胺酶,改良三维试验检出其中产ESBLs酶、AmpC酶、MBL酶分别为9株、4株和37株;10株同时产MBL酶和ESBLs;5株未检出β-内酰胺酶型别.结论 PA对多种抗菌药物的耐药率高,多重耐药性明显.产β-内酰胺酶复杂,以产MBL为主,临床应根据药敏试验结果及产酶情况,综合考虑合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染.
作者:夏红灯;徐元宏 刊期: 2008年第05期
目的 初步探讨白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)基因(IL-1RN)多态性与安徽地区胃癌易感性的关系,并比较不同种族和地区之间IL-1RN*2等位基因频率的分布.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测安徽地区91例胃腺癌患者及55例健康对照者IL-1RN基因多态性.结果 IL-1RN*2*2基因型频率及IL-1RN*2等位基因频率在胃癌组与对照组的比较,差异无显著性(P>0.05);在不同种族的比较中,IL-1RN*2等位基因频率在本研究人群显著低于欧洲高加索人群,不论在胃癌组还是对照组(15.4% vs 57.4%,14.5% vs 44.8%)(P<0.01);在胃癌组略高于日本人群(15.4% vs 7.7%)(P<0.05).在中国不同地区的比较中, IL-1RN*2等位基因频率在本研究人群(安徽地区)显著低于北部地区人群,不论在胃癌组还是对照组(15.4% vs 76.0%, 14.5% vs 46.0%)(P<0.01);在对照组中略高与西部地区人群(14.5% vs 3.6%)(P<0.05);与东部及南部地区比较,差异无显著性.结论 IL-1RN*2*2基因型及IL-1RN*2等位基因在胃癌高发区安徽地区与胃癌的易感性无关.
作者:张和平;张红;吴继锋;秦蓉 刊期: 2008年第05期
目的 探讨定量组织速度成像技术(QTVI)评价肥厚型心肌病(HCM)左心室整体及节段性心肌功能的临床价值.方法 应用QTVI技术检测36例HCM患者和40例正常对照者的心肌,测量收缩期峰值速度(Vs)、舒张早期峰值速度(Ve)、舒张晚期峰值速度(Va),并计算Ve/Va,心尖双平面Simpson法测量左心室射血分数.结果 HCM组Vs、Ve、Ve/Va均明显小于正常组(P<0.01),而Va与正常组的差异无显著性(P>0.05);HCM组左室射血分数呈高动力状态,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 HCM患者左心室长轴方向上收缩功能及主动松弛功能均较对照组减低.QTVI技术能定量评价HCM患者左室局部收缩功能.
作者:黄猛;张新书 刊期: 2008年第05期
目的 建立高效液相色谱法测定小鼠血浆及组织样品中的紫杉醇含量.方法 血浆及组织样品经两步萃取后,以甲醇-乙腈-水(40 ∶ 30 ∶ 30)为流动相,使用Kromasil C18色谱柱进行分离,检测波长为228 nm,地西泮为内标.结果 该法测定紫杉醇在血浆中线性范围为0.113~11.300 mg/L(n=5;r=0.999 9),在组织中线性范围为10~1 000 ng/g(n=5;r=0.999 5).低、中、高3个浓度的提取回收率>70%,日内、日间相对标准差<10.0%(n=5).结论 该方法操作简便、快速、准确,适用于生物样品中药物浓度测定及药代动力学研究.
作者:卢今;伍长娟;杨肖琳;高雷;陈礼明;金涌 刊期: 2008年第05期
目的 探讨即刻腹壁下动脉穿支游离皮瓣(DIEP)对乳腺癌改良根治术乳房重建的应用效果.方法 对20例Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者行乳腺癌改良根治术即刻DIEP皮瓣乳房重建.结果 20例再造乳腺均成功,所有病例随访2~26 个月,未见肿瘤复发和转移,未见腹壁疝和腹壁膨出发生.重建乳房外形丰满,与健侧对称性尚可,弹性良好,患者自我满意度高.结论 即刻DIEP皮瓣对乳腺癌改良根治术后乳房重建,具有皮瓣血运良好、重建乳房外形满意、腹部供区并发症少,可同时达到腹壁塑形等优点,是乳腺癌术后乳房重建的一种理想术式之一.术后综合治疗不影响皮瓣成活.
作者:颜蕴文;王本忠;张敬杰;徐晓军;许骏;徐军 刊期: 2008年第05期
目的 总结分析儿童白癜风患者的临床特点及意义,比较儿童白癜风与成人白癜风的异同点.方法 回顾性分析5年来诊治的1 315例儿童白癜风病例.结果 1 315例儿童患者中男性684例(52.02%),女性631例(47.98%)平均年龄(8.57±2.99)岁,76%(1 000例)患者在5~11岁范围内,平均病程(17.83±24.13)月,局限性白癜风多1 016例(77.26%),对照选择成人白癜风4 958例,皮损部位仍以局限性为多3 458例(69.75%);儿童神经节段型93例占6.9%,高于成人167例(3.4%).儿童有阳性家族史者95例(7.2%).结论 儿童白癜风与成人白癜风相比较有许多不同的临床特点.
作者:王红艳;王再兴;林达;李卉;杨森 刊期: 2008年第05期