邢杰；李玉芬；罗海英；延正红；葛立本
目的 探讨维生素A对小鼠免疫调节功能的影响.方法 人工制备低维生素A、正常维生素A、高维生素A3种饲料,分别按常规饲养3组小鼠5周,应用微量荧光法测定血清维生素A浓度,三色流式细胞术测定CD4+ T细胞内细胞因子IL-4和IFN-γ水平.结果 3组小鼠血清维生素A浓度差异有显著意义,低维生素A组IFN-γ水平(28.60%±10.82%)明显高于正常对照组(20.13%±6.39%);高维生素A组IL-4水平(5.31%±2.04%)明显高于正常对照组(2.80%±1.37%),差异有非常显著意义(均P＜0.01).随着维生素A水平的提高,IFN-γ表达率降低,Th1免疫应答减弱,IL-4表达率增高,Th2免疫应答增强.结论 维生素A对小鼠Th1/Th2免疫应答影响显著.
作者：邢杰；李玉芬；罗海英；延正红；葛立本 刊期： 2006年第06期
目的 评价HIV抗原/抗体联合检测快速法(VIDAS HIV Duo Quick)和超敏法(VIDAS HIV Duo Ultra)试剂的特异性及敏感性.方法 用这2种试剂和HIV抗体参比试剂,分别检测287份HIV感染或疑似感染者样品、1 240份非HIV感染者血清/血浆样品,对与参比试剂检测结果不一致样品,进行抗体的确认及HIV p24抗原和RNA的检测,并比较其特异性和敏感性.用这2种试剂和HIV-1 p24抗原参比试剂,分别检测3株病毒培养上清的系列稀释样品,并比较其检测 p24抗原敏感性的差异.结果 共检测1 277份HIV抗体阴性样品和250份HIV抗体阳性样品,与参比试剂相比,快速法试剂的特异性为99.45%,敏感性为100%,而超敏法试剂的特异性为99.14%,敏感性为99.20%.两种试剂检测病毒株培养上清的敏感性均不低于HIV-1 p24抗原参比试剂,且能检出HIV感染窗口期样品.结论 这2种试剂在增加HIV p24抗原检测的情况下,对HIV抗体检测的特异性和敏感性均没有明显降低,并且能检测出HIV感染窗口期样品.
作者：许四宏；宋爱京；李秀华；李敬云；鲍作仪；貌盼勇；赵擎；胡燕；王佑春 刊期： 2006年第06期
本文对近年来倍受关注的抗激素、抗卵细胞透明带和抗精子疫苗的安全性、有效性及作用机理的研究进展作一综述.
作者：邢冬红；白虹 刊期： 2006年第06期
目的 用自制的快速层析介质对人血浆白蛋白进行分离纯化.方法 低温离心去掉冷沉淀后的人血浆,在不同淋洗条件下,经过两步弱阴离子交换和一步弱阳离子交换层析分离,并经凝胶过滤层析柱进一步纯化.结果 经3步层析后,所得含白蛋白组分的纯度已达到98.44%,回收率为91.40%.4步层析后,白蛋白纯度可接近于100%.结论 所采用的分离纯化方法和介质适用于人血浆白蛋白的纯化.
作者：赵彦鼎；杨博；李凯锋；陈学忠；刘萍；郭立安 刊期： 2006年第06期
目的 研究重组人干扰素α2a(rhIFNα2a)凝胶对动物体内单纯疱疹病毒(HSV)感染的疗效.方法 建立HSV-1型豚鼠皮肤感染模型和HSV-2型小鼠阴道炎模型,考察rhIFNα2a凝胶抗HSV作用.将模型豚鼠与小鼠各自分为3个试验组,分别用3×105、2×105和1×105 IU/g的rhIFNα2a凝胶治疗,并设平行对照(阿昔洛韦)与空白对照(未治疗)组.评价各组的疗效.结果 与空白对照组比较,rhIFNα2a凝胶2×105和3×105 IU/g剂量组可明显减少豚鼠皮肤组织中病毒含量,降低小鼠的死亡率,延长生存期.rhIFNα2a凝胶与阿昔洛韦的疗效差异无显著意义.结论 rhIFNα2a凝胶具有抑制HSV-1致皮肤病变作用,可缩短病程,对HSV-2所致小鼠阴道炎有较好疗效.
作者：张淑子；李凡；易世红 刊期： 2006年第06期
目的 建立稳定的干扰素脂质体质控体系.方法 采用电子显微镜、粒度分析仪、气相色谱仪以及酶标仪等仪器和检测手段,对干扰素脂质体的形态、粒径、包封率、有机物的残留量以及稳定性等进行分析.结果 干扰素脂质体透射电镜下观察为圆形,直径50～350 nm,粒径呈正态分布,平均粒径为200～210 nm,跨距为0.80～1.10,包封率达到90%以上.有机物残留量低于《中国药典》二部(2005版)规定的标准.在2～8℃下保存6个月,渗漏率不高于20%,而总活性基本不变.结论 该干扰素脂质体的质控体系的检测项目比较全面,检测结果稳定,可用于产品的质量控制.
作者：李云富；张水华；李久立；杨虹；易艳蓉；王妍 刊期： 2006年第06期
目的 研制荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物.方法 采用液体表面膜培养方法培养荚膜组织胞浆菌,培养液经盐析和弱酸沉淀法纯化,再经透析和除菌,制成荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物原液,并进行豚鼠的皮肤反应试验和安全性检测.结果 荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物的蛋白纯度达80%以上,其1μg/ml的浓度诱导的豚鼠皮肤反应与国外同类制品等效,且具有良好的安全性.结论 荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物可作为体内诊断制品,用于检查人体荚膜组织胞浆菌的感染以及荚膜组织胞浆菌病的临床诊断.
作者：陈保文；沈小兵；苏城；王国治 刊期： 2006年第06期
目的 比较地鼠肾细胞、Vero细胞和2BS细胞乙型脑炎纯化疫苗的免疫原性和热稳定性.方法 对3种细胞制备的病毒原液和冻干疫苗分别进行小鼠免疫原性试验和热稳定性试验.结果 2BS细胞制备的病毒原液和疫苗小鼠效力均高于地鼠肾细胞和Vero细胞;Vero细胞和地鼠肾细胞制备的病毒原液和疫苗小鼠蚀斑减少中和试验抗体效价均高于2BS细胞.3种细胞制备的疫苗在37℃保存4周,中和抗体效价损失均小于5%.结论 3种细胞制备的病毒原液及冻干疫苗均具有良好的免疫原性及热稳定性.
作者：过琴媛；王辉；张月兰；钟书声；张颖 刊期： 2006年第06期
目的 研究用毕赤酵母菌表达SARS病毒S2蛋白亚单位.方法 依据GenBank中SARS基因组序列,采用人工合成的方法合成SARS病毒刺突蛋白S3亚单位的基因(1 590 bp),再与CTL表位基因(195 bp)重组后,将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-S2,转化毕赤酵母GS115,并经MD和MM平板筛选及PCR鉴定,得到阳性重组酵母工程菌GS115/pPIC9K-S2.经诱导、表达,并对表达产物进行分析、鉴定.结果 所构建的重组质粒pPIC9K-S2正确,在毕赤酵母中可高效表达,其表达产物与阳性SARS血清产生特异性反应.结论 SARS病毒刺突蛋白S2亚单位可在毕赤酵母中高效表达,产物具有良好的抗原特异性.
作者：王瑞琳；金宁一；赵博；贾雷立；金洪涛；金明兰；屈勇刚 刊期： 2006年第06期
目的 建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,探讨以重组蛋白作为抗原在诊断H.pylori感染中的价值.方法 将从临床分离菌株中获得的HpaA基因在大肠杆菌中表达,用Ni2+ -NTA柱纯化表达的HpaA作为抗原,建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,与诊断标准比较评价其应用的可行性.结果 经超声破碎后,用SDS-PAGE分析显示,HpaA蛋白主要存在于上清中,纯化抗原检测临床标本中HpaA抗体的敏感性和特异性分别为100.0%和90.1%.结论 以重组蛋白为抗原初步建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法敏感性、特异性高,为制备商品化的试剂盒奠定了基础.
作者：吴利先；王国富；白丽；王晶；潘云华；郭利军 刊期： 2006年第06期
目的 建立一种半定量检测甲型肝炎病毒(HAV)RNA的RT-PCR-ELISA方法.方法 将5'端磷酸化的特异性探针包被在氨基化的微孔板上,以生物素标记的探针为引物,提取样品中的HAV RNA,反转录并扩增HAV DNA,变性后的PCR产物与探针杂交,并被捕获在微孔板上,再与酶标亲和素结合,显色测定.结果 所建立的方法结果判断客观,灵敏度比凝胶电泳法高一个数量级,分析不同时间检测结果,差异无显著意义.结论 已建立了半定量检测HAV RNA的RT-PCR-ELISA方法.
作者：吴星；毛群颖；张华远 刊期： 2006年第06期
目的 研制安全有效的预防猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组鸡痘病毒活载体疫苗.方法 将PRRSV长春株的GP5和GP3基因插入到含有猪IL-18基因的鸡痘病毒转移载体pUTAL复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL-IL-18-GP5-GP3.将该重组质粒与鸡痘病毒(FPV)282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组.通过3次BrdU加压筛选,经PCR、RT-PCR和IFA方法鉴定重组病毒.结果 从重组鸡痘病毒基因组和总RNA中扩增出340 bp的目的基因片段,感染重组病毒的CEF细胞与特异性荧光抗体发生阳性反应,表明目的基因在重组鸡痘病毒中得到表达.结论 已成功构建1株重组鸡痘病毒,并可正确表达PRRSV ORF5/ORF3基因.
作者：沈国顺；金宁一；秦晓光；庄天中；尹荣兰；马鸣潇 刊期： 2006年第06期
目的 构建含白细胞介素-2(IL-2)基因的乙型肝炎病毒DNA疫苗,并考察免疫效果.方法 将微小病毒内部核糖体进入位点(Internal ribosomal entry site,IRES)基因克隆到质粒pVAX1载体多克隆位点处,再将乙肝病毒表面抗原(HB-sAg)基因和IL-2基因分别连接在IRES基因的两侧,构建出乙肝病毒DNA疫苗pHII.将pHII转染COS-7细胞,进行瞬时表达.大量提取质粒后,按0、2、4周程序免疫BALB/c小鼠,以pVAX1质粒为阴性对照,pVAX/HBsAg质粒为阳性对照.第1针免疫1周后开始眼眶采血,检测血清中HBsAg和HBsAb含量.第1针免疫13周后处死小鼠,用流式细胞仪检测其脾脏T细胞表面CD4+、CD8+分子数量.结果 在转染pHII质粒的COS-7细胞上清液中检测到HBsAg和IL-2的表达.实验组和阳性对照组小鼠分别于第1针免疫2、4周后,在血清中检测出HBsAb,但阴性对照组未测出.以上3组均未检测出HBsAg.实验组与阳性对照组相比,产生抗体的时间提前2周,抗体阳转率提高2.5倍,产生抗体的量也提高了近3倍.实验组CD4+分子数量和CD4+/CD8+值均高于阳性对照组.结论 乙肝病毒DNA疫苗pHII成功诱导出小鼠的免疫应答,其免疫效果明显优于不含分子佐剂的乙肝DNA疫苗.
作者：吴晓娟；赵大鹏；冷梅；崔颖杰；张岩；汪春义；戚凤春；郭新；陈云波；何伟；徐建国；付学奇 刊期： 2006年第06期
新生小牛血清是生物制品生产中的一种重要原材料,其质量的好坏直接影响到制品的质量,尤其是活疫苗的生产.为提高疫苗的质量,我们用3种大肠杆菌宿主菌,采用增殖法对新生小牛血清进行了大肠杆菌噬菌体检测.现将结果报道如下.
作者：李福安；李玉凡；杨平学；潘丽静 刊期： 2006年第06期
目的 验证酶联法检测流感疫苗中卵清蛋白含量的试剂盒的质量.方法 选取卵清蛋白标准品及20批全病毒流感灭活疫苗,对北京天坛生物制品股份有限公司生产的卵清蛋白ELISA试剂盒(简称天坛试剂盒)进行验证,确定该试剂盒的佳检测区间、精密度、准确度及稳定性,并与德国Seruzym试剂盒进行比较,确定二者之间是否有相关性.结果 天坛试剂盒的佳检测区间为2.5～20 ng/ml,试验间精密度分别为0.37%～9.79%、1.25%～5.57%和0.70%～5.51%,均小于10%;试验内精密度为1.28%;配制5、10和20 ng/ml 3个浓度的标准品,由同一实验人员分别进行9次准确度验证,回收率分别为105.67%、108.61%和98.67%;37℃放置3 d与4℃保存的试剂盒检测结果之间差异无显著意义(t=2.075,P=0.051 8);与进口试剂盒检测结果之间存在正相关关系(r=0.989,t=24.56,P＜0.000 1)和直线回归关系(b=0.629,F=602.97,P＜0.000 1),直线回归方程为(y)=0.629x-13.77.结论 天坛试剂盒具有较好的精密度、准确度及稳定性;检测结果与进口试剂盒存在正相关和直线回归关系,可以用于卵清蛋白的常规检测.
作者：田博；施彤；王晋；冯素英；董小曼；张国强 刊期： 2006年第06期
目的 构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化.方法 应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变.以栝楼基因组DNA为模板,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Ni-NTA层析纯化.结果 目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白.结论 已成功构建了TCS突变体基因,并获得高效表达.
作者：安群星；穆士杰；张献清；陈蕤；夏爱军；张清平；陈晨；雷迎峰；黎志东；徐志凯 刊期： 2006年第06期
本文从狂犬病疫苗的质量、暴露后免疫的特殊性、疫苗中的各抗原组分的免疫作用、免疫佐剂的选择、保护剂及疫苗质量控制等方面进行分析,以期进一步提高狂犬病疫苗质量,大限度发挥疫苗免疫作用,从而降低我国的狂犬病发病率.
作者：李光谱；俞永新 刊期： 2006年第06期
目的 建立高表达抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体的工程细胞株.方法 将构建的抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体基因真核表达载体转染CHO细胞,并采用DHFR/MTX基因扩增策略,经反复加压和克隆筛选,提高抗体的表达量.用ELISA、Western blot和体外中和试验分析比较抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体与鼠亲本单抗的特性.结果 获得的表达抗人TNF-α嵌合抗体的转染细胞系2F5,在静止培养4 d后工程抗体的表达量约80 mg/L.所表达的工程抗体优于鼠亲本单抗F7/2,并具有良好的特异性和中和活性,其相对亲和力约为2.1×10-10mol/L.结论 已成功建立了高表达的嵌合抗体工程细胞株,其抗体具有潜在的临床应用前景.
作者：聂艳桃；何太平；谢荣麟；葛永红；容新宗；陶昆蓉；刘宇虹；王琰；Sendi Montanie；Vladka Curin-Serbec 刊期： 2006年第06期
猪链球菌2型的毒力因子主要包括荚膜多糖(CPS)、溶菌酶释放蛋白(MRP)、细胞外因子(EF)、溶血素(HLY)以及多种具有毒性作用的蛋白片段.荚膜多糖是猪链球菌2型抵抗巨噬细胞吞噬的重要物质,也是猪链球菌进行分型的标志.溶菌酶释放蛋白和细胞外因子多出现于高致病力的毒株中,MRP和EF阳性菌株一般具有较高的毒力.溶血素具有较强的细胞毒性作用,其对微血管内皮细胞的破坏作用有利于细菌在组织内的扩散.其他多种毒力因子虽也具有致病作用和免疫原性,但还有待于进一步研究.由于猪链球菌2型致病机理复杂,毒株表型多样,尚未发现可区分毒力株、弱毒力株和无毒力株的标志性因子.对猪链球菌2型的毒力因子进行深入研究,对于阐明猪链球菌2型的致病机理,寻找到快速有效的诊断治疗方法以及疫苗的构建都有重要意义.
作者：高尚庆；雷连成；韩文瑜 刊期： 2006年第06期
目的 利用水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE糖蛋白基因鉴别水痘减毒活疫苗.方法 以提取的病毒DNA为模板,PCR扩增gE糖蛋白基因.经琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果 水痘减毒活疫苗Oka株VZV(病毒滴度≥2.0 lgPFU/ml)通过琼脂糖电泳均可见特异性的条带.使用同样的方法检测麻疹减毒活疫苗、麻疹-腮腺炎联合疫苗、风疹减毒活疫苗以及Ⅰ、Ⅱ型单纯疱疹病毒(病毒滴度≥4.2 lgCCID50/ml),结果均为阴性.结论 gE糖蛋白基因可以作为VZV的特异性指标,进行病毒鉴别试验.
作者：金于兰；陈哲文；瞿爱东；杨忠东 刊期： 2006年第06期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
