用半巢式PCR检测无创性标本诊断卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究

郭增柱；张怿；姜洪杰；安亦军

关键词：卡氏肺孢子虫, 聚合酶链反应, 半巢式, 肺炎

摘要：目的无创性诊断卡氏肺孢子虫肺炎.方法采用一对半引物进行半巢式DHFR-PCR检测实验大鼠无创性标本支气管液、血清及活检标本肺及肝脏组织中的卡氏肺孢子虫DNA.结果从59只经病理学检查证实的卡氏肺孢子虫肺炎大鼠中采集到的上述4种标本,卡氏肺孢子虫DNA的半巢式DHFR-PCR检出率分别为72.7%(32/44),37.3%(22/59),94.9%(56/59)和36.4%(8/22),而DHFR-PCR的检出率则仅为25%,13.6%,71.2%和9.1%.12只轻度感染的PCP大鼠的无创性标本中卡氏肺孢子虫DNA的检出率由0%提高至41.7%.正常鼠标本及各种病原体对照的半巢式DHFR-PCR均为阴性.结论用半巢式DHFR-PCR无创性地诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎具有敏感、特异、省时、省力等优点;本文在血和肝脏中检出卡氏肺孢子虫DNA,提示在卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型中存在虫血症和肺外卡氏肺孢子虫感染.

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犬腺病毒Ⅰ型疫苗株DNA E3区序列分析

对犬腺病毒Ⅰ型(CAV-Ⅰ)疫苗株CLL(Cannught Laboratory Limited)DNA的E3区,pVⅢ基因和部分fiber基因进行序列测定,E3区为病毒DNA复制非必需区,因而本实验结果对构建CLLE3缺失表达载体具有重要指导意义.

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弓形虫种株DNA多态性研究

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作者：史俊岩；王海鹏刊期： 1999年第03期
鹌鹑、鸡、鸭、牛的胆汁空肠弯曲菌带菌观察

国内外许多学者已经证明多种动物肠道可携带空肠弯曲菌(空肠菌),成为人类腹泻的重要传染源.我们对鹌鹑、鸡、鸭、牛的胆汁进行空肠菌分离,现将结果报告如下.

作者：刘自才刊期： 1999年第03期
肠出血性大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的制备及鉴定

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作者：潘劲草；黄志成；余文炳；李学梅刊期： 1999年第03期
弓形虫的基因研究与应用

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,所致弓形虫病多见于胎儿和免疫力低下的人群.由于弓形虫感染是导致先天性畸形的主要原因之一,还由于不少艾滋病患者和肿瘤病人死于弓形虫性脑炎,更由于弓形虫可侵犯人体各个器官系统,所致病症涉及临床各科.本文简要介绍弓形虫基因研究与应用方面的新进展.

作者：刘翠梅；欧阳颗；张铮刊期： 1999年第03期
弓形虫P30基因DNA免疫小鼠诱导的细胞免疫应答

目的用pcDNA3-P30真核表达质粒直接免疫小鼠,观察所诱导的小鼠细胞免疫应答.方法大量制备重组质粒pcDNA3-p30,经肌肉注射BALB/c小鼠,每隔3周接种1次,一共免疫3次.用MTT方法对脾脏的NK杀伤细胞率和淋巴细胞的转化率进行测定,采用免疫荧光法对CD4+、CD8+细胞进行测定.结果实验组NK细胞杀伤率为:70.0%±3.64,对照组及空白对照组分别为48.5%±6.06和47.0%±5.93,实验组NK细胞活性比对照组明显增高(P＜0.05);ConA刺激小鼠淋巴细胞转化实验,实验组与对照组及空白对照组差异无显著性(P＞0.05);对T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+进行动态分析,可见随着感染时间的延长,CD8+的数量逐渐上升,CD4+/CD8+的比率逐渐下降,实验组与对照组及空白对照有明显差异(P＜0.05).结论重组质粒pcDNA3-p30免疫BALB/c小鼠可诱导一定的细胞免疫.

作者：周永安；陈观今；郭虹；郑焕钦；吕芳丽刊期： 1999年第03期
牛ACTH受体和TGFβ1的调节作用

目的观察牛肾上腺皮质细胞ACTH受体的分布和转化生长因子β1(TGFβ1)对ACTH受体的调节作用.方法牛肾上腺皮质束、网带细胞(BAC细胞)的原代培养和125I-ACTH特异性受体结合标记等.结果在该培养条件下,BAC细胞的受体可分为高、低两种亲和力亚型.它们在每个细胞上的数目分别为3400(高)和15000(低)个.kD分别为4.90368×10-11和3.53974×10-10mol/L.TGFβ1可减少高亲和力受体至2000个,增加低亲和力受体到33000个.它们的kD也相应地发生了改变.结论 TGFβ1对受体亚型具有不同的调节作用,TGFβ1对ACTH高亲和力受体的负性调节作用和ACTH对TGFβ1受体的正性调节作用可能构成对肾上腺皮质激素生成活动调节的负反馈机制.

作者：蒋志文；夏俊；余裕民；吴华璞；程光亮；陶明飞刊期： 1999年第03期
不同地点疟疾媒介对溴氰菊酯敏感性的比较观察

湖北省从1990年开始先后在疟疾复媒区的15个县(市),共4.0万km2的范围内开展了溴氰菊酯浸帐灭蚊.为了解蚊虫对溴氰菊酯的敏感性和考核浸帐灭蚊的质量,常需要在现场采集蚊虫进行生物测定.为寻找既适合生测需求,又能反映实际情况的按蚊来源,我们于1996年6月底对应城市人房、牛栏二种按蚊的敏感性进行了比较观察,结果如下.

作者：余品红；张华勋；明桂珍；陈红安；徐博钊刊期： 1999年第03期
三峡库区湖北段钉螺孳生环境研究

目的探索三峡库区湖北段有无血吸虫病传播的危险因素.方法采用回顾性调查法、类比法和模拟生态实验等方法.结果与结论进一步证实三峡库区湖北段无钉螺生长,但调查表明三峡库区存在着与血吸虫病疫区相似的气候环境、相似的土壤容重和相同的钉螺能吃的植物.说明三峡库区湖北段存在着生长钉螺的基本环境条件.其不生长钉螺的原因尚须进一步研究.

作者：何昌浩；张爱华；常汉斌；郭胜兰；邓伟文；韩家俊刊期： 1999年第03期
广州奶牛隐孢子虫感染调查

隐孢子虫病是一种人兽共患寄生原虫病,是引起人和多种动物腹泻的重要病原体之一.有许多动物可以感染隐孢子虫.特别是奶牛隐孢子虫感染,因其与人关系密切是人感染隐孢子虫的重要传染源.1995年4～12月我们选择广州3个奶牛场进行了奶牛隐孢子虫感染调查,现将调查结果报告如下.

作者：郭步平；连德润刊期： 1999年第03期
幽门螺杆菌感染对胃窦粘膜TNF-α和PDGF水平的影响

检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)感染胃炎患者胃窦粘膜体外培养上清液中肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和血小板源生长因子(Platelet-derived Growth Factor,PDGF)水平.结果表明,Hp阳性胃炎患者胃窦粘膜TNF-α含量和PDGF活性均明显高于Hp阴性患者和正常对照组,合并活动性胃炎患者胃窦TNF-α含量和PDGF活性也明显高于非活动性胃炎.

作者：张国安；刘小朋；张信；陈紫榕；施水兰；史玉波刊期： 1999年第03期
表现为白塞氏病的艾滋病1例

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的获得性免疫缺陷综合征.其发病率在全球呈急剧上升之势,且预后差、死亡率高,引起广泛关注.我们于1998年7月发现1例表现为白塞氏病的AIDS,现报告如下.

作者：管利民；毛玲群；王赓歌；蔡修熙刊期： 1999年第03期
广东省部分地区虫媒病毒血清流行病学调查

广东省地处亚热带,蚊虫分布广、密度高,孳生和叮咬活动季节长,是我国虫媒病毒自然繁衍的主要地区之一.我们对该省内广州市、佛山市、沙湾镇、坪石镇这4个发生过登革热流行的地区进行了11种虫媒病毒的人群血清抗体检测,以对当地人群血清虫媒病毒抗体分布情况有所了解,为预防虫媒病毒感染流行尤其是登革热流行提供参考.

作者：彭翼飞；陈唯军；陈翠华；方美玉；马玉海；林立辉；田小东；蒋廉华；刘建伟；徐春华刊期： 1999年第03期
血吸虫病中度流行区加大对耕牛化疗力度的效果评价

世界银行贷款中国血吸虫病控制项目对中度流行区的目标是控制发病.我省实施项目工作以来,到1994年通过全省疾病监测点的监测结果显示在中度流行区人群粪检阳性率1993年仅比1992年下降28.8%,其效果远不如高度流行区的理想(高度流行区下降49.1%).原因是多方面的,主要可能因为耕牛化疗覆盖率不高.按世行项目的技术实施细则,我省在中度流行区每年只对35%的耕牛治疗1次,这样可能由于对主要传染源牛的控制力度不够而影响防治效果.为探讨在中度流行区防治策略,特以加大对牛的化疗覆盖率,比较牛的化疗强度与控制发病效果的关系.

作者：徐兴建；杨先祥；陈柳燕；任润香；戴裕海；王文梁；蔡宗大；何其林；施昌夫；谢绪发刊期： 1999年第03期
肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗低年龄组儿童安全性及免疫效果观察

肾综合征出血热由于缺乏特异的治疗药物和大面积有效灭鼠措施的困难,疫苗预防就显得尤为重要.自WHO提出开发有效的肾综合征出血热灭活疫苗以来,无论是国外的鼠脑纯化疫苗,还是国内的沙鼠苗,地鼠苗和鼠脑苗都显示了良好的安全性和理想的防病效果.但从目前有关疫苗应用的资料报道均为大年龄组的青壮年,而对低年龄组(1～6)儿童的安全性及免疫效果未见报道.为探讨低年龄组接种肾综合征出血热疫苗的安全性及免疫效果,给肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗的应用提供科学依据,现将试验结果报告如下.

作者：郑贵明；冯学灵；阮孝连；李伟；李莉；王磊；徐伟刊期： 1999年第03期
我国南方蜱样本中发现犬埃立克体DNA

目的调查我国南方蜱样本埃立克体感染情况.方法用已发表的埃立克体16SrRNA基因的属特异引物和自行设计的犬埃立克体种特异引物,对广东、广西和海南部分地区采集的蜱样本进行PCR检测,并将阳性PCR产物克隆测序,结果通过Internet提交到美国国立医学图书馆/国家健康研究所的站点,利用BLAST对核酸数据库进行同源性检索.结果从广东采集的血红扇头蜱和广西采集的微小牛蜱样本中扩增出埃立克体452bp特异片段和犬埃立克体的555bp特异片段.测序和检索结果证实这些片段均为犬埃立克体,并且两种蜱中的埃立克体DNA片段有至少4bp差异.结论这是首次在我国发现犬埃立克体病原线索.微小牛蜱也能携带犬埃立克体.表明我国极有可能存在该病的自然疫源地,有必要进行深入研究.

作者：潘华；陈香蕊；马玉海；孙洋；于强；佟世德；张雪颍；牛华；张永国；Jacqueline Dawson 刊期： 1999年第03期
斜管虫属纤毛虫寄生于人体血液1例

患者,女,33岁,农民.以畏寒、发热、咽痛及全身酸痛1月余而就诊安徽省五河县人民医院.入院前曾在当地用青霉素、先锋霉素等治疗,疗效不佳.

作者：张耀娟；张耀兰；章子豪刊期： 1999年第03期
流行性出血热后遗腺脑垂体功能减退症1例

流行性出血热是具有多脏器广泛损害为特征的一种传染性疾病,其损害严重的是肾脏、右心室、脑垂体前叶及腹膜后组织,大多病理改变是可复的,且不留永久后遗症,但我们在该病的病后随访工作中,曾发现有极少数的患者病后劳动力不能恢复,而表现出无力、食欲不振、精神抑郁、毛发脱落、性机能低下等临床现象,对这种病例做进一步的随访和检查工作,现将一例较为完整的资料整理报告如下.

作者：李世清；罗兆庄；王以银；俞正楚；李传斌刊期： 1999年第03期
弓形虫非同源性不同地理株的GRA1基因体外扩增片段的鉴定及比较研究

目的对弓形虫人源性RH株、人源性ZS2株、猪源性CN株3个不同地理株的GRA1基因片段鉴定并比较异同.方法采用PCR技术和限制性内切酶技术,分别对弓形虫3株的GRA1基因片段进行体外扩增.扩增的目的基因片段分别用3种内切酶HindⅢ、HpaⅡ、TaqⅠ进行单酶切鉴定、比较.结果从弓形虫3个分离株RH株、ZS2株、CN株基因组DNA中扩增出785bp的GRA1基因片段.3个株的GRA1基因分别用3种内切酶酶切后,酶切片段与理论值相符.结论实验所用不同来源弓形虫分离株的GRA1基因扩增片段基本相同,且3种限制性内切酶酶切图谱基本一致,表明这3个分离株的GRA1基因高度保守.

作者：贾雪梅；郭虹；陈观今；郑焕钦刊期： 1999年第03期