张琴；苏占营；吴成亮；辜敏；巢时斌
目的 本研究旨在构建针对高表达真核翻译延长因子1A2(eEF1A2)的原发性肝细胞癌(HCC)BEL-7402细胞株的eEF1A2-RNAi的细胞模型,为从基因沉默基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用的功能奠定实验基础.方法 通过针对eEF1A2基因的shRNA与线性化的GV115-GFP载体进行连接转化,对获得的重组子(GV115-GFP-eEF1A2-shRNA)进行PCR和测序鉴定.采用慢病毒载体系统将pHelper 1.0载体、pHelper 2.0载体与GV115-GFP-eEF1A2-shRNA共转染293T细胞,包装成eEF1A2-RNAi-LV,并感染高表达eEF1A2的BEL-7402细胞.采用Real time PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平验证eEF1A2-RNAi-LV对BEL-7402细胞eEF1A2表达的抑制作用.结果 成功构建了重组真核表达载体GV115-GFP-eEF1A2-shRNA,并通过慢病毒载体系统包装成eEF1A2-RNAi-LV;将eEF1A2-RNAi-LV转染至BEL-7402细胞后,细胞eEF1A2 mRNA和蛋白的表达水平分别下降了84.1%和64.5%,与阴性对照组相比较具显著性差异(P<0.01),表明转染后的BEL-7402细胞eEF1A2基因被特异性沉默.结论 成功构建了eEF1A2-RNAi的BEL-7402细胞模型,为进一步从基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用奠定了良好的实验基础.
作者：陈敦雁；黄毅；邱福南；伍严安；黄肖利；李峰；吴文冰 刊期： 2017年第02期
目的 探讨测定妊娠期糖尿病(GDM)患者糖化血红蛋白(HbA1c)的临床意义.方法 对正常妊娠组(对照组)220例及妊娠期糖尿病患者(GDM组)136例分别进行空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPBG)和糖化血红蛋白(HbA1c)测定,并进行比较.结果 妊娠期糖尿病患者组相关指标,明显高于正常妊娠组,两组间相比较具有明显统计学意义(P<0.05).结论 检测糖化血红蛋白对于妊娠期糖尿病的诊断具有重要价值.
作者：黄茉瑛；董瑶佳；郭卉 刊期： 2017年第02期
目的 建立一种具有分裂相多、分散度好、带纹清晰、长度适中等特征的骨髓染色体G带制作方法.方法 在含9.6%胎牛血清的RPMI1640培养基中加入一定量的人淋巴瘤细胞系培养物,接种骨髓细胞后培养24h,然后加入终浓度为30μg/ml的溴化乙锭和0.06μg/ml的秋水仙胺作用1h.结果 通过方法改良,骨髓标本培养成功率约为传统方法的1.59倍,异常染色体检出率比传统方法提高了51%.结论 改良后的方法可以制作出个数更多、分散度更加良好、带纹更加清晰、染色体更长的中期分裂相,因而异常染色体检出率更高,诊断结果更加可靠.
作者：唐永华；程建兵 刊期： 2017年第02期
目的 探讨miR-320a在人结肠癌细胞中的生物学行为,并初步阐明miR-320a对癌基因FOXQ1的靶向调控机制.方法 采用qRT-PCR检测结肠癌细胞中miR-320a和FOXQ1的表达;用miR-320a mimics转染结肠癌细胞株HTC-116;采用CCK-8法、克隆形成试验检测miR-320a对结肠癌细胞增殖的影响,采用Transwell小室分析miR-320a对结肠癌细胞侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因和Western Bloting验证miR-320a对FOXQ1的靶向调控作用.结果 QRT-PCR结果显示miR-320a mimics明显上调miR-320a在HCT-116细胞中的表达;CCK-8法和克隆形成试验显示上调miR-320a表达显著抑制结肠癌细胞增殖;Transwell试验表明上调miR-320a可抑制HCT-116结肠癌细胞侵袭;蛋白印迹实验显示上调miR-320a降低FOXQ1蛋白在结肠癌细胞中的表达,双荧光素酶报告基因试验进一步确认miR-320a可以调控FOXQ1的表达.结论 过表达miR-320a可以抑制结肠癌细胞增殖、侵袭,这种抑制作用是通过靶向调控FOXQ1来实现的.
作者：汤增秋；熊小亮 刊期： 2017年第02期
目的 回顾性分析社区获得性肺炎(CAP)患儿肺炎支原体(MP)感染状况,为临床防治工作提供依据.方法 采用ELISA法对275例CAP患儿进行血清肺炎支原体抗体(MP-IgM)检测,并对实验数据进行统计分析.结果 共检测275例患儿,MP-IgM阳性84例,阳性率为30.5%(84/275).MP感染以夏季阳性率高(40.2%),其次为春季(28.8%),学龄前儿童为主要感染人群(43.1%).结论 MP在不同季节和不同年龄段患儿中均有感染,尤其要加强春夏季学龄前儿童MP感染的预防.
作者：夏厚才；罗小兵；彭惠轩 刊期： 2017年第02期
目的 调查江西地区人群人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)DRB1的基因多态性及其分布特点,为江西地区提供完整准确的遗传学数据.方法 应用PCR-SBT(polymerase chain reaction sequence-based typing,聚合酶链反应-直接测序)法对江西地区汉族人群中1002名健康、 无关个体进行HLA-DRB1基因高分辨分型.结果 1002份样本中检出HLA-DRB1的基因型191个,基因型比例高为DRB1*0901/DRB1*1501,占样本量的4.391%;检出等位基因27个,比例高的等位基因及对应频率分别为:DRB1*0901(11.028%).结论 江西地区汉族人群HL A-DRB1基因具有中国汉族人群共有的遗传特征,但也有本地区自身的分布特点.
作者：沈冰；何华庆；肖莉；刘强；吴红；熊莉；周小英；唐绮；李国良 刊期： 2017年第02期
目的 探讨系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清中白介素17(Interleukin-17,IL-17)、白介素23(Interleukin-23,IL-23)、高迁移率蛋白1(High mobility group box-1,HMGB1)的表达水平及临床意义.方法 选取我院风湿免疫科收治的67例SLE患者为本研究观察组,同期选取22例体检健康志愿者为对照组,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测所有受试者血清中IL-17、IL-23、HMGB1表达水平,分析三者表达与SLE临床指标之间的关系.结果 观察组患者血清中IL-17、IL-23以及HMGB1水平均高于对照组,差异均显著,且具有统计学意义(P<0.05),其中SLE活动组中IL-17、IL-23以及HMGB1水平均高于稳定组(P<0.05),肾炎组HMGB1水平明显高于非肾炎组(P<0.05),肾炎组IL-17、IL-23水平与非肾炎组比较无显著差异(P>0.05);观察组IL-17水平与抗ds-DNA抗体水平、抗Sm抗体水平、补体C3、C4、IgM、IgG、CRP均无显著相关性(P>0.05),与SLEDAI呈正相关(r=0.703,P<0.05);IL-23水平与抗ds-DNA抗体水平、抗Sm抗体水平均无显著相关性(P>0.05),与SLEDAI、IgM、IgG、CRP呈正相关(r=0.621、0.317、0.432,P<0.05),与补体C3、C4呈负性相关(r=-0.456、-0.378,P<0.05);HMGB1水平与抗Sm抗体水平、补体C4、CRP均无相关性,与SLEDAI、抗ds-DNA抗体水平、IgM、IgG呈正相关(r=0.000,P<0.05),与补体C3呈负性相关(r=0.000,P<0.05).结论 血清IL-17、IL-23及HMGB1在SLE患者中显著高表达,且与疾病活动性密切相关,这些指标可能对揭示SLE发病机制或控制病情有一定的作用.
作者：陶鹏辉 刊期： 2017年第02期
目的 探讨恶性血液病患者化疗前后TBNK淋巴细胞亚群检测的临床意义.方法 采用流式细胞仪对两组患者进行外周血TBNK淋巴细胞亚群检测,分析化疗前后的变化,观察组患者的免疫功能变化及其与病情进展之间的联系和病情的变化及预后.结果 分析发现,观察组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD16+56+指标均低于对照组,且急性患者的CD4+/CD8+低为(0.97±0.32).随着病情的缓解,指标都在升高并恢复至正常水平,缓解后各项指标和对照组比较,并无显著差异,无统计学意义(P<0.05).从观察组的40例患者治疗前后的TBNK淋巴细胞比较,治疗后的恶性血液病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD16+56+指标有明显的提高,前后差异显著有统计学意义(P<0.05).结论 化疗前,恶性血液病患者的TBNK各项指标异常,化疗后得到有效的缓解,表明通过检测TBNK淋巴细胞亚群有助于了解患者的免疫功能和病情的变化情况,值得推广应用.
作者：吴琼；刘昭贵；王小中 刊期： 2017年第02期
目的 检测不同类型肿瘤患者凝血功能变化,探讨其临床意义.方法 对70位肿瘤患者及20位健康体检者进行凝血功能检测,包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)等指标.结果 对于PT、APTT、TT三项凝血指标,肿瘤患者与健康人群之间对比,差异无统计学意义,不同肿瘤患者之间对比,差异亦无统计学意义;血浆AT-Ⅲ含量,不同肿瘤患者组与健康对照组比较都具有统计学意义(P<0.05);肝癌组与肺癌组及白血病组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);而肺癌组与白血病组比较,AT-Ⅲ活性差异没有统计学意义(P>0.05).对于Fg含量,各肿瘤组与正常对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);各肿瘤组之间相比,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 肿瘤患者血浆中AT-Ⅲ及Fg活性及含量与肿瘤损伤程度相关,定期检测AT-Ⅲ及Fg活性及含量对肿瘤患者血栓形成的评估有参考价值.
作者：何琨仪；赵莹；麦霓薇；喻聪；韩泽平 刊期： 2017年第02期
目的 探讨儿童脂肪肝患者血清白介素18(IL-18)表达水平与肝损伤的关系与作用机制.方法 选取门诊和住院儿童患者,经B超和CT诊断后,分为肥胖伴脂肪肝组(轻、中、重)78例、单纯肥胖组76例、对照组70例.联合检测身体质量指数(BMI)、血脂、IL-18、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST),分析血清IL-18与各临床指标的相关性,脂肪肝组与对照组及不同组间上述指标的变化.结果 肥胖伴脂肪肝组相对于对照组和单纯肥胖组,BMI、胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及低密度脂蛋白(LDL-C)明显升高(P<0.05);肥胖伴脂肪肝组的IL-18、ALT、AST明显高于单纯肥胖组和对照组(P<0.05);随着患儿脂肪肝病情的加重血清IL-18、ALT及AST水平显著升高(P<0.05).结论 检测IL-18浓度对反映肝细胞损害程度和判断脂肪肝患儿病情有一定的临床意义.
作者：詹忠明；江永青；胡志坚；詹志义 刊期： 2017年第02期
目的 探讨丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性,为丙型肝炎的防治提供参考.方法 选取2015年6月-2016年6月期间诊治的80例丙型肝炎患者,以ABI3500dx基因测序仪对基因分型进行测序,确定基因分型,以化学发光法检测抗HCV浓度,计算测定值/临界值(S/CO)比值,采用荧光定量PCR技术检测HCV-RNA浓度.结果 患者基因分型主要为1b、1c、2a分别有48例、14例、8例,占60.00%、17.50%、10.00%,其中1型共62例、非1型18例,分别占77.50%、22.50%;抗HCV阳性者79例、HCV-RNA阳性者53例,阳性率分别为98.75%、66.25%;基因型1型的患者抗HCV(S/CO)比值、HCV-RNA浓度分别为(13.27±3.33)、(6.54±1.24)×106 copies/ml均高于非1型患者(11.28±3.25)、(5.86±1.03)×106 copies/ml,比较差异有统计学意义(P<0.05);HCV-RNA阳性患者抗HCV(S/CO)比值为(13.33±4.39)高于阴性患者(9.74±3.84),比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a,不同基因型时抗HCV、HCV-RNA浓度不同,基因分型与抗HCV、HCV-RNA的之间存在一定相关性.
作者：冀敏 刊期： 2017年第02期
目的 比较不同实验方法检测丙型肝炎诊断的准确性,并观察丙型肝炎抗体与HCV-RNA病毒载量及ALT异常之间的相关性.方法 对118例高敏化学发光法(CIA)检测丙肝抗体初筛结果呈阳性(S/Co>1)的标本,并对其进行荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)进行HCV-RNA病毒载量检测及应用贝克曼全自动生化仪丙氨酸转氨酶(ALT)指标.结果 118例丙肝抗体初筛阳性患者中,HCV RNA阳性率为46.6%(55/118)不同HCV抗体检测值在不同区间HCV-RNA检测阳性率不全相同,差异有统计学意义(χ2=62.745,P<0.05);在55例HCV-RNA阳性(HCV RNA>103 copies/ml)的样本中,有43例ALT结果异常,ALT异常率为78.1%(43/55),其ALT异常率随着HCV RNA含量的增高而升高,即呈正相关(r=0.96,P<0.01).结论 化学发光法检测血清HCV抗体诊断HCV与荧光PCR检测方法均可能存在假阳性或假阴性情况;荧光PCR检测结果阳性率低于CIA检测结果;在临床诊断中丙肝抗体的检测应与荧光定量聚合酶链反应一起使用,可以降低漏诊,应联合丙肝抗体、HCV-RNA、ALT检测为临床抗病毒提供有效评估提供依据.
作者：林晓渊 刊期： 2017年第02期
目的 探讨溶血、脂肪血、保存温度和保存时间对HCV RNA检测的影响,确认用于核酸检测的标本正确采集、处理及保存的关键控制点.方法 应用实时荧光PCR法,采用混样检测+单检的检测模式,对在不同浓度的血红蛋白或甘油三脂下以及在不同温度条件下保存不同时间后的HCV RNA标本进行检测,对检测的Ct值进行分析.结果 小于7.93mmol/L的不同浓度甘油三脂对HCV RNA检测没有影响(P>0.05),血红蛋白浓度为97g/L、34g/L、17g/L以及8g/L时,其对HCV RNA检测均有影响(P<0.05),当血红蛋白浓度小于5g/L时,其对HCV RNA检测均无影响(P>0.05);保存温度在-30℃下4周内,其检测Ct值差异均无统计学意义(P>0.05).在低于37℃条件下,4h内保存的HCV RNA标本检测Ct值差异均无统计学意义(P>0.05).在4℃的条件下保存72h内,HCV RNA标本检测Ct值差异无统计学意义(P>0.05),25℃的条件下能保存48h(P>0.05).结论 甘油三脂浓度小于7.93mmol/L对HCV RNA的检测没有影响,血红蛋白浓度大于8g/L时会影响HCV RNA的检测,用于HCV RNA检测的标本在4℃保存时好在72h内完成检测.
作者：庄养林；熊丽红；张鹏飞；王芳；陈丹；施桥发 刊期： 2017年第02期
目的 评价联合检测胱抑素C(Cys-C)、β2-微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白(m-ALB)对早期2型糖尿病肾病诊断的价值.方法 选择47例单纯2型糖尿病(T2-DM)确诊的患者,83例糖尿病肾病(DN)患者,62例健康体检者,分别检测3组血清Cys-C、β2-MG和尿m-ALB的临床指标,同时检测血清尿素氮(BUN),肌酐(CRE)的临床指标和全血糖化血红蛋白比率(GHB%).结果 DN组血清Cys-C、β2-MG和尿m-ALB检测结果明显高于单纯T2-DM组和健康体检对照组,具有统计学意义(P<0.05),BUN、CRE三组结果无统计学意义(P>0.05).结论 联合检测血清Cys-C,β2-MG,尿m-ALB,可以较早的筛查出2型糖尿病肾病患者,为临床判断病情,治疗疾病提供依据,具有重要的临床意义.
作者：王俊杰 刊期： 2017年第02期
目的 分析过敏性患者的血清过敏原结果,为临床的治疗和预防提供参考.方法 采用酶联免疫法(ELISA)检测过敏性患者血清中的过敏原特异性IgE抗体.结果 吸入组过敏原阳性率为55.49%,常见的为屋尘螨/粉尘螨(34.15%)、狗毛皮屑(20.73%)和点青霉/烟曲霉/交链孢霉(13.82%).食物组过敏原阳性率为25.58%,常见的为牛奶(12.16%)、大豆(9.13%)和蛋清/蛋黄(8.23%).结论 惠州地区的主要吸入性过敏原为屋尘螨/粉尘螨,食物性过敏原占相当的比例.过敏原特异性IgE抗体的检测,有助于过敏性疾病的诊断和预防.
作者：朱利明；周潇；邓宇伟；朱钜铭；高裕城；吴琼 刊期： 2017年第02期
目的 探讨滤白监测系统在成分制备中实现适时性、真实性、监控性、有价值性、可追溯性、易操作性等多重目的,使得整个血液制备过程形成一个无缝式链接环路,提高了输血安全和有效性.方法 收集血站2016年3月15日至2016年8月15日无偿献血3944人份(200ml规格),其中手工滤白操作1440袋,滤白监测仪辅助手工2504袋.采用在线滤器联袋的方式通过传统的手工滤白和使用滤白监测仪来完成血液的去除白细胞过程.比较滤白监测法与手工法制备的滤白全血在Hb含量、白细胞残留量、产品重量、制备时间监测、母袋与子袋条形码的关联性、操作者的电子记录等方面的差异.结果运用滤白监测系统制备的滤白全血与手工法比较,可以监测制备时间与产品重量,发现重量不合格的有45例,滤白红细胞Hb含量差异有统计学意义(P<0.05),白细胞残留量差异有统计学意义(P<0.05),贮存末期溶血差异无统计学意义(P>0.1).另外可以记录母袋与子袋条形码的关联性及操作者的电子记录.结论 无论是从去白细胞血液质量,还是规范制备流程的操作和记录整个过程,滤白监测系统都起到一定的实效.
作者：黄辉；万仁英；杜忻；司江倩 刊期： 2017年第02期
目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者检测乳酸脱氢酶(LDH)以及β2-微球蛋白(β2-MG)的临床价值.方法 回顾分析2011年5月至2013年5月德安县人民医院收治的126例NHL患者的临床资料.结果 血清LDH水平与NHL患者年龄、临床分期、KPS评分、B症状、受侵部位数、病灶侵袭性显著相关(P<0.05),与性别无显著相关(P>0.05).血清β2-MG与NHL患者年龄、临床分期、KPS评分、B症状、受侵部位数显著相关(P<0.05),与性别、病灶侵袭性无显著相关(P>0.05).血清LDH正常组患者1年生存率、3年生存率均显著高于血清LDH异常组,差异具有统计学意义(P<0.05).血清β2-MG正常组患者1年生存率、3年生存率均显著高于血清β2-MG异常组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 血清LDH和β2-MG水平与NHL多种病理因素相关,并可作为NHL预后的评估指标.
作者：舒本富；燕长花；罗焱梅 刊期： 2017年第02期
大肠埃希菌是感染性腹泻常见的病原菌,由于抗生素的滥用,使大肠埃希菌的耐药性越来越严重,其耐药谱也不断发生变化,对临床合理使用抗生素提出了更高和更为迫切的要求.本文就大肠埃希菌耐药状况及耐药机制等方面的研究作一综述.
作者：虞春华；丁岚；柯慧；马嫚；高建华 刊期： 2017年第02期
目的 探讨深圳市龙岗区横岗镇例行产检的孕妇HbA1c数值水平与参考区间.方法 使用ADAMSTMA1c HA-8160自动糖化血红蛋白分析仪,对2015年4月至2016年7月来该院产科门诊就诊的1223例孕妇进行HbA1c的检测,分析其中HbA1c<6.5%的数值(1217例),并给予数据进行95%置信区间统计参考区间.结果 1217例产科门诊孕妇的HbA1c数值符合正态分布,均值为(5.22±0.34)%,95%置信区间为4.6%~5.9%.按年龄将统计样本分三组:A组(小于或等于25岁的孕妇)、B组(26~35岁的孕妇)、C组(大于或等于35岁的孕妇).HbA1c数值水平:A
作者：魏伟华；黄文瑶；林城 刊期： 2017年第02期
目的 评价乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附实验(ELISA)检测试剂的技术性能.方法 统计分析2011年至2015年5年间湖南省HBsAg项目室间质量评价(EQA)的数据,评价本省实验室使用的HBsAg ELISA检测试剂的基本技术性能指标:分析敏感性、阴性符合率、阳性符合率、室间精密度.结果 七种HBsAg ELISA检测试剂(六种国产试剂,一种进口试剂)EQA数据统计总体样本阴阳性符合率无统计学差异;0.5、0.3、0.2IU/ml三个低浓度样本的检测符合率无明显差异,但这三个浓度的样本检测符合率高于浓度为0.1IU/ml(《中国药典》第3部(2010版批批检HBsAg检测灵敏度)的样本检测符合率,其差异有统计学意义;进口试剂检测符合率明显好于其他试剂,在浓度为0.1IU/ml的样本时尤为明显;各种试剂检测的S/CO值其室间精密度值差异与《中国药典》第3部(2010版)中对精密性的要求是CV≤15%的标准相比,只有进口试剂E7 P>0.05无差异;其它六种国产试剂与之相比较,其P<0.05,均有显著性差异,其数据有统计学意义.结论 我省当前实验室使用的6种ELISA国产主流检测试剂基本技术性能相近,其主要差异体现在浓度为0.1IU/ml附近样本的检出符合率和精密度.进口HBsAg ELISA试剂各个性能指标均优于国产HBsAg ELISA试剂.
作者：杨丽华；张裕；彭萍；焦芳艳 刊期： 2017年第02期
实验与检验医学杂志
主管:江西省卫生厅
主办：江西省医学会
