姚海林;刘绍珍;黄金平;胡绍红
生物芯片(biochip)的设想起始于80年代中期,包括基因芯片、蛋白芯片及芯片实验室三大领域[1].随着人类基因组计划(humangenomeproject,HGP)的发展与完成[2],以功能研究为核心的人类后基因组计划时代已经到来,建立新型、高效、快速的检测和分析技术已势在必行,这些高效的分析与测定技术已有多种,如DNA质谱分析法,荧光单分子分析法,杂交分析等,其中以生物芯片技术为基础的许多新型分析技术发展快也具发展潜力.1996年美国affymertrix公司创造了世界上第一块基因芯片;1998年,美国开发成功世界上第一块蛋白质芯片;2003年,我国南京大渊生物技术工程有限责任公司成功开发了大渊ToRCH蛋白芯片和大渊蛋白芯片检测系统.目前世界上有数千家大公司在从事生物芯片的研究和开发工作,这将给生命科学、医学、化学、新药开发、生物武器战争、司法鉴定、食品与环境监督等众多领域带来巨大的革新甚至革命.本文就生物蛋白芯片技术及其在ToRCH综合症诊治中的应用与展望作如下综述.
作者:乐爱平;万腊根 刊期: 2004年第05期
目的检测4种结缔组织病患者血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平,并探讨其意义.方法115例患者中,类风湿关节炎(RA)40例,系统性红斑狼疮(SLE)30例,多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)25例,系统性硬化症(SSc)20例,正常对照30例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了血清中的VEGF(ng/L)的含量.结果血清VEGF水平(单位ng/L)分别为RA 558.58±348.45,SLE244.63±87.44,PM/DM355.12±258.56,SSc362.72±177.52,类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、多发性肌炎/皮肌炎、系统性硬化症患者血清VEGF水平均明显高于正常对照(P<0.01,P<0.05).结论血清VEGF水平的测定对结缔组织病病情监测可能具有非常重要意义.
作者:龙武彬;吴晓丹;朱静;刘建;周彬 刊期: 2004年第05期
丙氨酸氨基转移酶(ALT)是临床评价肝功能的常用检测项目之一.20世纪80年代初,由于对献血者中非甲非乙型肝炎缺乏特异性检测方法,许多国家把对ALT的检测作为筛查这类肝炎的替代试验[1,2],我国自1984年起将ALT列为献血者必检项目.随着第二代、第三代抗-HCV检测试剂的应用,其检出HCV抗体与ALT水平升高的时间接近[1,3],目前美国等一些国家已不做或不规定做ALT检测.本文试从单纯ALT升高的无偿献血者复查情况探析检测ALT的作用.
作者:左祝华;高尚峰;孙晓鸣 刊期: 2004年第05期
毛滴虫引起咽部感染极其少见.我们应用生理盐水湿片法于2003年7、8月间在两位患者口腔扁桃体假膜分泌物中检出毛滴虫,现报告如下.病例1女,53岁,因受凉后气管炎复发,咽部痒、咳嗽、不适,自服感冒药及消炎药物.后经中药调理,仍未见好转.于2003年7月底来我院皮肤科就诊.查体:右侧扁桃腺充血,水肿,其上覆有一层白色假膜状物,呈点、片状,不易擦除,口腔粘膜无溃疡.用无菌和生理盐水湿片镜检,结果镜检找到滴虫,随即取患者白带镜检未找到滴虫.细菌培养结果无致病菌生长.诊断:口腔滴虫病,治疗:给予甲硝唑0.2g口服,每天3次,连服7天,并辅以甲硝唑注射液清洁口腔,经治疗,不适症状全部消失.
作者:高锦伦;黄佳;谭又吉;陶亦帆 刊期: 2004年第05期
伤寒发病率在我国占有相当的比例,因此伤寒病人的尽早发现、明确诊断,及时治疗,合理的使用药物,对病人预后十分重要.现将我科血培养中检测的60株伤寒沙门菌和药敏试验报告如下.
作者:董明 刊期: 2004年第05期
目的自制血清蛋白电泳的质控品,用于全自动血清蛋白电泳系统的内部质量控制,并评价该电泳系统的稳定性.方法混合新鲜正常人血清,灭活、离心、加入叠氮钠防腐,分装,低温保存.分析质控品的TP,ALB以及电泳结果的OCV和RCV.结果贮存于-70℃自制的血清蛋白电泳的质控品复溶后电泳ALB和γ球蛋白的变异低于5%,且电泳计算的ALB和实际测定的ALB无显著性差别(P>0.05,r=0.915).但α1,α2和β的变异较大,Hydrasys-hyrys电泳系统具有较稳定的系统和良好的重复性.结论自制血清蛋白电泳的质控品基本上符合临床使用的要求,是良好的室内质量监测的质控品.
作者:牟秀萍;王伶;牟华红;谢爱民;冯伟;姚全良 刊期: 2004年第05期
目的通过对类风湿关节炎(RA)患者血浆血栓调节蛋白(plasma thrombomdulin,PTM)、肿瘤坏死因子(TNFα)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的检测分析,旨在探讨PA患者四项指标水平变化特点及临床意义.方法采用ELISA法检测RA患者活动期(n=42)、缓解稳定期(n=30)及正常对照组(n=55)中上述各项指标的含量并进行分析.结果RA患者活动期四项指标含量水平明显高于正常对照组和稳定期患者(P<0.01);RA患者稳定期四项指标含量水平与正常对照组无明显差异(P>0.05);RA患者四项指标之间均呈正相关.结论RA患者四项指标水平变化特点与患者病情相关,各因子协同作用共同参与RA患者的炎症过程,联合动态监测有助于临床观察RA患者病情变化和治疗效果.
作者:樊有龙;徐建民;王外梅 刊期: 2004年第05期
目的通过芯片技术检测肺癌细胞株基因差异表达探讨肺癌的发病机制,并尝试寻找可能用于肺癌的预防、诊断和治疗的基因.方法对四株肺癌细胞(PGCl3、PAa、H1299、NiS成瘤)作肺癌相关基因的芯片检测,分析其与对照组永生化细胞株(16HBE)之间的表达差异.从检测结果中选取了三个基因作RT-PCR鉴定.结果H1299有89个基因表达改变,PAa有59个基因表达改变,PGCL3有93个基因表达改变,NiS成瘤有78个基因表达改变.经RT-PCR鉴定的三个基因:L6A在各肿瘤细胞株中呈高表达,RXRB在各肿瘤细胞中呈低表达,vimentin除在无恶性转移株PAa中无显著差异外,在其他肿瘤细胞株中均呈高表达,结果与芯片结果一致.结论肿瘤的发生发展是多基因多阶段相互作用的结果,L6抗原可能作为肿瘤的特异性标记物,vimentin可能与肺肿瘤的转移有关,RXRB的表达水平可能与肿瘤细胞的分化相关.
作者:宋春林;陈耀勇;邹东霆;李冰;葛曰萍 刊期: 2004年第05期
目的探讨TRFIA法测定HBV-M在临床中的应用价值.方法用MEIA法和TRFIA法同时测定104份随机样本乙肝五项标志物.结果两种方法测定HBsAg、HBsAb、HBeAg结果符合率分别为98.1%,96.2%,99.0%,经配对资料卡方检验,无显著差异,P>0.05,HBeAb结果符合率为90.9%,x2=4.0,P<0.05,有显著差异.TRFIA法用1:30稀释血清检测HBcAb,而MEIA法是用原血清,故结果无可比性.结论TRFIA法检测乙肝五项标志物,除HBeAb诊断特异性稍欠佳外,其余四项指标结果令人满意.
作者:雷秀霞;陈英姿;徐邦牢;黄国华 刊期: 2004年第05期
目的探讨新的稳定偶氮肿Ⅰ试剂,用于测定血清镁的含量.方法采用贝克曼CX5全自动生化分析仪,终点法测定,并与UVP 2450分光光度计,原子吸收法测定结果相比较.结果①测定波长,570nm为主波长,700nm为次波长;②稳定性,显色后30分钟内稳定;③线性范围,在0.25~2.41mmol/L之间线性良好,回归方程Y=1.006X+0.03,r2=0.9971:④回收率,98~101%之间;⑤精密度,批内3.1%,批间1.1%;⑥方法学比较,与原子吸收法测定结果相比较,Y=1.05X-0.06,r2=0.9900,相关良好.⑦在钙离子浓度为0.80~6.40mmol/L范围内,不受干扰;⑧稳定性,开盖后至少稳定3天.结论应用新的稳定偶氮肿Ⅰ试剂进行血清镁的全自动分析测定,其抗干扰性、络合镁特异性、反应的灵敏度、精密度均良好.且试剂安全、稳定,适合于临床应用.
作者:姚海林;刘绍珍;黄金平;胡绍红 刊期: 2004年第05期
目的探讨超敏C反应蛋白(HSCRP)含量与冠心病(CHD)的关系.方法用相关的试剂检测血清中超敏C反应蛋白的浓度.结果冠心病组的TG,apoB,LDLC,LP(a)较对照组显著增高,apoAI,HDLC较对照组减少P<0.05,TC亦较对照组增高但差异无显著意义(P>0.05).冠心病组的HSCRP较正常对照组显著增高(P<0.01),其它疾病组的HSCRP也增高(P<0.05).结论病人血清中HSCRP的测定可作为冠心病的早期检测指标.
作者:吴瑜霞;黄志锋 刊期: 2004年第05期
目的用生物素亲和素定量酶联免疫吸附法(Biotin-Auidin system ELISA简称BAS-ELISA)测定血清总甲状腺素(Total Thyroxine TT4)和总三碘甲腺原氨酸(lotel 3,5,3'Triodothy ronineTT3),以对该方法进行统计学评价.方法以临床血清标本为检测标本,用BAS-ELISA法测定血清中的TT3和TT4,观察其灵敏度,线性试验及线性范围,精密度、回收率、干扰率,并与放射免疫法(Radioimmunoassay RIA)对比.结果TT3,TT4的灵敏度分别为0.3mmol/L,25.7nmol/L.线性范围0.3~8.0nmol/L,25.7~411.3nmol/L.二种浓度的TT3和TT4的批内变异系数分别为5.0%,4.O%和4.0%,3.5%;批间变异分别为6.9%,5.4%和5.9%,4.7%.回收率TT3为92.20~106.50%,平均为98.62%;TT4为95.62~103.84%,平均为99.22%.脂血、肌酐、高胆红素三种物质对TT3和TT4测定的干扰率分别为10.1%,2.4%,3.2%和11.6%,2.8%,2.9%.与RIA法比较,其相关系数TT3O 0.956,P<0.01,TT4为0.977,P<0.01.结论该方法有较高的灵敏度,重复性好,特异性强,结果准确可靠,与RIA呈高度正相关.
作者:周海涛;华连生 刊期: 2004年第05期
胆汁酸(TBA)是胆固醇在肝脏的代谢产物,是肝脏清除胆固醇的主要方式,血清TBA水平是反映肝实质损伤的一个重要指标,其升高甚至早于肝活检组织学所见[1].我们对本院248例肝病患者和100例健康成人进行了血清TBA及四种酶的检测,并对结果进行了分析比较,报告如下.
作者:蒙松年;江世良 刊期: 2004年第05期
肝脏是一个不同发育时期的多细胞的集合体.现已普遍认为肝脏中存在干细胞.肝脏在维持自身的损伤和修复中保持极好的平衡.有3种水平的细胞参与成体肝脏的更新与修复.第一类是处于分化终点的成熟肝细胞或胆管细胞,在肝脏轻度受损时,成熟肝细胞经过1~2次有丝分裂,使肝脏的体积与功能得以恢复,肝脏的这种修复能力是有限的.第二类是内源性肝干细胞,在肝严重受损而肝再生受到抑制时,肝前体细胞(肝卵圆细胞)大量增殖并分化为肝细胞和胆管上皮细胞,从而使肝脏修复.但是,肝前体细胞属于短暂增殖细胞,其修复能力有一定限度.这就需要第三类细胞--外源性肝干细胞,这类细胞可能来源于胚胎、骨髓和胰腺的干细胞或唾液腺祖细胞等,这类细胞的数量极少,但有强大的增殖能力,可定向或横向分化为多种组织细胞或组织前体细胞.文章就三类细胞的一般特征、来源、活化及其临床应用前景综述如下.
作者:车媛梅;张一 刊期: 2004年第05期
1临床资料患者,李某,男59岁.以反复腹痛一年,再次发作四天为主诉入院.曾于多家医院诊治未见好转.无发热、无恶心、呕吐、无返酸、无腹胀、无尿频、尿急、尿痛.
作者:孟虎山 刊期: 2004年第05期
铜绿假单胞菌在自然界广泛分布,属于条件致病菌,是医院感染的主要病原菌之一[1].铜绿假单胞菌在临床上引起的感染日趋增多,老年人群因机体、机能的下降,免疫力低,呼吸系统慢性病较为多见,因而较易引发感染.本文对我院老年患者临床标本分离出的1 99株铜绿假单胞菌的分布、耐药谱及多重耐药生进行初步分析.
作者:江志兰;周少雄;王晓玲;李婉霞 刊期: 2004年第05期
一、A型题1.临床实验室管理的核心是( )A.质量管理 B.人力资源管理 C.信息管理 D.经济管理 E.营销管理2.以质量为中心,让用户满意并达到长期成功通过什么管理途径来达到( )A.质量控制 B.质量保证 C.质量体系 D.质量检查E全面质量管理3.ISO/DIS 15189:2001的文件名称是( )
作者:秦晓光 刊期: 2004年第05期
母婴血型不合,母体血清中IgG血型抗体经胎盘进入胎儿,是引起新生儿溶血病的主要原因之一.因此,产前定期测定孕妇血清IgG血型抗体效价,以尽早采取预防措施,降低新生儿溶血病的发生极有意义.目前,临床上对IgG血型抗体效价>1:64的孕妇已足够重视,如定期检查及药物治疗以降低其抗体效价,而对≤1:64的孕妇则不够重视,一般在孕16周左右检测一次就不再检查.本文对512对夫妇血型不合的抗体效价为1:64或1:32的O型孕妇血清IgG血型抗体进行定期检测,以观察其抗体效价的动态变化,现将结果报告如下.
作者:朱碎永;林甲进 刊期: 2004年第05期
目的对Rh系统除RhD以外的其它抗体引起的溶血进行检测.方法(1)对新生儿溶血(黄疸)的病人进行筛检;(2)对Rh系统所引起的溶血进行区分.结果共筛查出了3例是由除RhD以外的其它抗体所引起的溶血.结论除RhD以外,其它抗E、抗e、抗C、抗c抗体均可引起溶血.
作者:周根水;王启新;陈桂荣;闵亮 刊期: 2004年第05期
目的为了更好地配合临床监测糖尿病、高血压、脑血栓,冠心病病人的血小板聚集指标,为临床提供参考依据.方法比浊法测定血小板聚集功能.结果脑血栓、糖尿病、高血压、冠心病病人的血小板聚集率和聚集坡度都增高.结论实验室血小板聚集实验的检测对临床脑血栓、糖尿病、高血压、冠心病四种疾病的辅助诊断治疗有指导意义.
作者:文宁 刊期: 2004年第05期