学术投稿

泛素--核糖体蛋白S27a基因的克隆、测序及其原核GST融合表达和纯化

曾雪英;黄功华

关键词:泛素--核糖体蛋白S27a, 基因的克隆, 基因测序, GST融合表达, 蛋白纯化
摘要:目的:克隆泛素-核糖体蛋白S27a基因并在大肠杆菌细胞内高效表达,并纯化该蛋白.方法:从HL-60细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得泛素/核糖体蛋白S27a的编码区cDNA,将Hind Ⅲ/NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样双酶切的GST融合表达载体pGEXGST构建为融合表达质粒pGEXGST-S27a,转化感受态的大肠杆菌JM109实现质粒的扩增与纯化,经DNA测序确证后再转化感受态表达菌BL21,表达并纯化出融合蛋白.结果: (1) PCR 扩增获得长约560bp 的泛素-核糖体蛋白S27a 基因片段.(2) SDS - PAGE 证明, 泛素-核糖体蛋白S27a-GST融合蛋白的分子量为43kDa.(3)通过过柱法纯化出泛素-核糖体蛋白S27a-GST融合蛋白.结论:成功克隆出泛素-核糖体蛋白S27a的基因,并在表达菌BL21中可见GST融合表达,并纯化出该融合蛋白,为进一步研究其功能获得了候选蛋白分子.
赣南医学院学报杂志相关文献
  • 15种中草药对小鼠吞噬细胞吞噬白假丝酵母菌的影响

    目的:探讨黄芩等中草药50%乙醇提取物对小鼠中性粒细胞吞噬白假丝酵母菌的影响.方法:采用BALB/c小鼠体内吞噬实验法,设立对照组与试验组,对比观察实验组与对照组小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬百分数及吞噬指数.结果:(1)吞噬百分数均值及P值:黄芩85.1%、P<0.01,牡丹皮87.6%、P<0.01,羌活51.7%、P<0.05,大黄53.8%、P<0.05,千里光66.3%、P<0.05;(2)吞噬指数均值及P值:黄芩2.09、P<0.05,牡丹皮1.523、P<0.05;(3)知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、桑枝、海金沙吞噬百分数及吞噬指数的P值均大于0.05.结论:黄芩、牡丹皮、羌活、大黄、千里光具有增强中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬作用,知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、、桑枝、海金沙对中性粒细胞吞噬作用无明显影响.

    作者:马廉兰;张文平;刘志春;谢水祥;曾祥凤 刊期: 2005年第05期

  • 双对比造影对早期胃癌的诊断

    目的:探讨X线双对比造影早期胃癌的诊断价值.方法:收集资料完整的18例早期胃癌,对其进行X线双对比造影,分析造影所见及其病理基础.结果:早期胃癌直径大部分在0.5~4.0cm之间.其主要X线表现为局限性胃壁伸展不良,浅面凹陷和黏膜纠集等.结论:合理的X线检查能发现早期胃癌,良好的双对比造影对早期胃癌的定性诊断具有重要价值.

    作者:冷桂香;陈慧 刊期: 2005年第05期

  • 小针刀治疗不同类型颈椎病315例分析

    目的:研究小针刀治疗不同类型颈椎病的疗效.方法:本院门诊315例明确诊断为颈椎病病人,排除手术指症.小针刀治疗点根据病情、局部压痛点等选择,治疗每周1次,2次为1疗程.结果:治愈198例,显效79例,好转29例,无效9例,总有效率97.1%.结论:小针刀治疗各型颈椎病均有较好疗效,方法简单易行、安全、见效快、疗效稳定.

    作者:魏俊;杨艳莉;朱延丹 刊期: 2005年第05期

  • 单硝酸异山梨醇酯缓释片治疗冠心病心绞痛30例临床观察

    目的:观察单硝酸异山梨醇酯缓释片(索尼特)治疗冠心病心绞痛的疗效.方法:58例患者随机分为两组.治疗组(30例)给予单硝酸异山梨醇酯缓释片(索尼特)治疗;对照组(28例)给予倍他乐克、消心痛、阿司匹林等常规药物治疗.结果:治疗组心绞痛发作次数减少的显效率和总有效率分别为80%、93.33%;对照组为42.85%、64.23%.差异极显著(P<0.01).结论:单硝酸异山梨醇酯缓释片治疗冠心病心绞痛疗效显著.

    作者:邓艾平;毛德莉 刊期: 2005年第05期

  • 12例胰腺损伤诊治分析

    目的:探讨胰腺损伤的诊断和治疗方法.方法:回顾分析胰腺外伤12例临床资料,均行手术治疗.清创止血胰周引流7例,胰体尾切除2例,胰头断端缝合、Roux-y空肠袢与远端胰断端吻合1例,十二指肠憩室化1例,胰十二指肠切除1例.所有病例均放置引流管引流,术后禁食,胃肠减压,善宁0.1mg皮下注射,每日3次,补液抗感染,对症及营养支持治疗.结果:12例患者均痊愈出院.1例合并胰瘘,带管出院,无1例死亡.结论:胰腺损伤缺乏特异性症状,术前各项检查如B超、CT和血尿淀粉对胰腺损伤早期诊断价值有限.胰腺损伤,特别是严重胰腺创伤采用以手术为主的综合治疗,包括胰腺的止血、清创、恢复胰管与肠道的联系,控制胰液外渗,正确处理内脏合并损伤及血管损伤,充分引流和营养支持治疗,绝大多数可以治愈.

    作者:徐平华;李优笙;郭建华 刊期: 2005年第05期

  • 超临界流体技术及其应用研究进展

    超临界流体(SupercriticalFluid,简称SCF)是指温度和压力同时高于临界值的流体,也就是压缩到具有接近液体密度的气体.处于超临界状态时,气液两相性质非常接近,以至于无法分辨,所以称之为超临界流体.

    作者:程庚金生 刊期: 2005年第05期

  • α-干扰素栓治疗后宫颈糜烂112例分析

    目的:观察干扰素栓治疗宫颈糜烂的疗效.方法:随机分成2组,于月经干净后3天开始用药,治疗组睡前用干扰素栓1粒置阴道后窟窿部,隔日一次;对照组用复方土霉素胶囊2粒同法治疗,每日一次,两组均为10天一疗程,用药两个疗程.结果:治疗组症状较对照快,宫颈糜烂面积、宫颈糜烂深浅等治愈率也明显高于对照组.结论:干扰素栓治疗宫颈糜烂效果可靠,使用方便、安全.

    作者:凌宏兰 刊期: 2005年第05期

  • 肺弥漫性出血型钩端螺旋体病误诊分析(附2例报告)

    1 临床资料例1,某女,27岁,孕妇. 某年8月11日上午因发热、咳嗽2天,自行用感冒药治疗无好转而到某诊所就诊.体格检查:体温37.8℃,脉搏80次/分,呼吸22次/分,血压130/85mmHg,全身皮肤粘膜无黄染,眼结膜及口咽部轻度充血,两肺呼吸音稍增粗,子宫脐下1横指,胎心音140次/分.诊断:上呼吸道感染.用5%葡萄糖500ml加入青霉素G800万u静脉点滴,2小时左右滴完.滴完40分钟后病人出现高烧、胸闷、气紧、呼吸急促、咳嗽、呕吐、周身发绀、全身大汗、湿冷、口鼻出血、神志不清.

    作者:潘兆虹 刊期: 2005年第05期

  • 治疗更年期综合症应用附子的体会

    更年期综合症是妇女到达一定的年龄,卵巢功能逐渐减退,后完全停止的一个阶段,由于卵巢功能减退,从一个长期习惯的生育期内分泌环境过渡到另一个新的内分泌环境,给机体带来一系列的变化,由此而产生的植物神经功能紊乱,临床症状多种多样,其严重程度也因人而异,所以统称之为更年期综合症,中药治疗往往以补养肝肾,滋阴潜阳为主,忽视了温补肾阳,笔者在应用中药治疗时加用附子,以调和阴阳,收效较甚.

    作者:戚莎莉;朱延丹 刊期: 2005年第05期

  • 可调式多功能坐浴椅的研制与应用

    在临床上,坐浴是直肠、肛门、会阴等疾病常用的治疗方法.正确的坐浴治疗可清洁肛门,改善血液循环,促进炎症吸收,缓解括约肌痉挛,从而消除肛门、会阴部的充血、炎症、水肿和疼痛,达到促进伤口愈合的目的.目前在医疗中,常常因没有适当的坐浴器具,病人坐浴姿势不舒适而中断坐浴治疗或缩短每次坐浴时间,从而影响了坐浴效果.为了探索一种安全舒适的坐浴方法,笔者设计了可调式多功能坐浴椅,通过78例病人的临床使用,显示坐浴椅具有使用安全、方便、舒适、效果好等优点,深受病人及医务人员的欢迎,现介绍如下.

    作者:吴莲香;彭凤裘;毛君晓;曾祥福;叶新英 刊期: 2005年第05期

  • 骁悉治疗活动性狼疮肾炎的疗效观察

    目的:比较骁悉治疗活动性狼疮肾炎的疗效.方法:对照组为5例活动性狼疮肾炎患者,均接受了至少12周的强的松(1mg/kg/d)联合环磷酰胺(CTX)冲击治疗,但仍不能缓解;治疗组均为上述无缓解5例活动性狼疮肾炎患者,采用骁悉联合小剂量激素治疗,观察骁悉治疗3个月、6个月的缓解率.结果:5例患者在骁悉治疗3个月后,1例完全缓解,1例显效,2例有效,1例无效.延长至6个月时,有2例完全缓解,1例无效,完全缓解率为60%,总有效率为80%,患者的总体缓解率随着骁悉治疗时间延长明显增加.结论:骁悉联合小剂量激素是迅速控制活动性狼疮肾炎的一种有效的治疗手段,疗效优于环磷酰胺,且副反应小.

    作者:孙丽萍;董一民;刘小兰 刊期: 2005年第05期

  • 护理干预在减轻上颌穿刺冲洗患者应激反应中的作用

    目的:探讨护理干预在减轻上颌窦穿刺冲洗患者应激反应中的作用.方法:随机将112例门诊行上颌窦穿刺冲洗患者分为观察组62例、对照组50例,将两组患者行上额窦穿刺冲洗时的神志、精神状态、对疼痛描述、脉搏、呼吸、血压、出汗、恐惧、紧张程度作为观察指标,将应激反应程度按由小到大分为轻、中、重度应激反应,观察两组应激反应程度.结果:观察组应激反应程度明显小于对照组.结论:上颌窦穿刺冲洗前对患者进行恰当充分的护理干预可明显减轻患者应激反应.

    作者:刘华之 刊期: 2005年第05期

  • 201例心脏手术术后的ICU护理体会

    目的:探讨心脏手术术后ICU的护理要点.方法:对201例心脏手术后进入ICU患者进行多项基础护理外,并根据心脏手术的特点和特殊情况进行针对性护理.结果:193例患者安全渡过ICU恢复期,痊愈好转率达96.01%.结论:根据心脏手术的特点和针对患者的特殊情况进行护理,可使心脏手术患者顺利渡过心脏术后恢复期,提高痊愈好转率,降低死亡率和感染率.

    作者:姚磊;李媛媛;郑晓玲 刊期: 2005年第05期

  • 氨茶碱血药浓度监测的临床应用

    目的:用紫外分光光度法对44例静脉及口服给药氨茶碱患者血药浓度进行测定,观察临床疗效与血药浓度之间的关系.结果:有效控制哮喘发作的氨茶碱血药浓度为12.80±2.15μg/ml,其中10~20μg占68.18%,症状得到控制的有75.00%.结论:氨茶碱血药浓度监测为临床合理用药提供依据,对确保临床合理用药具有重要意义.

    作者:彭实棣;康健民;郭西梅 刊期: 2005年第05期

  • 美学视角下校园文化建设的若干思考

    美育与德育是同一层次上并列的两种教育形态,是人格完善的两个必要方面.大力建设校园文化作为新形势下加强和改进大学生思想政治教育的一个有效途径,如何发挥其重要的育人功能,是时下思想政治教育工作者研究的一个重要课题.由于校园文化在本质上是一种具有鲜明审美特征的精神文化,因此,正确理解校园文化,探析校园文化的美育功能,对加强校园文化建设具有重要的现实意义.

    作者:张捍东;王雪萍 刊期: 2005年第05期

  • ERCP及EST的术中配合及护理体会

    目的:探讨逆行性胰胆管造影及十二指肠乳头切开取石术术中配合方法及术后护理要点.方法:对48例病人进行逆行性胰胆管造影检查及十二指肠乳头切开取石术.结果:48例患者均成功完成手术.结论:术前充分做好准备及术中医护默契配合是保证手术顺利完成的重要措施.

    作者:江萌;胡祥阳;刘海丽;黄清云 刊期: 2005年第05期

  • 肿瘤化疗中运用PICC及全自动注药泵的观察与护理

    目的:为了减少肿瘤化疗中药物毒副作用,提高患者生活质量,提高化疗疗效.方法:通过10例次中晚期肿瘤患者应用经外周静脉穿刺中心静脉置管(PICC)配合全自动注药泵持续输液化疗的临床观察,总结PICC配合全自动注药泵在化疗中的应用和护理体会.结果:PICC使用全自动注药泵操作简单,便于携带,使用方便,避免了大剂量化疗药物对血管的刺激,减轻化疗药物的毒副作用,提高了化疗疗效.

    作者:曾小斌;夏晓红;钟秋明 刊期: 2005年第05期

  • 胸腔闭式引流术治疗气胸38例疗效观察

    气胸是临床上一种常见病,大多数气胸病人通过内科胸腔减压术可得到治愈,特别是应用胸腔闭式引流和负压吸引术,可减少手术机会.就我科从2001~2004年收治38例气胸病人应用胸腔闭式引流术或联合应用负压吸引术的治疗情况作一介绍,为以后提高气胸的治疗水平提供参考价值.

    作者:赖庆文;甘亚娇;赖丽萍 刊期: 2005年第05期

  • 动脉导管未闭及其合并心内畸形的超声诊断价值

    目的:探讨彩色多普勒超声在动脉导管未闭(PDA)及其合并心内畸形诊断中的价值.方法:应用彩超对99例PDA患者进行检测,其中26例经手术证实.常规测量各房室腔大小,重点观察主肺动脉和左肺动脉与降主动脉间的沟通情况,检测导管的大小、部位,分析PDA及其并发心内畸形的超声表现.结果:本组PDA经手术证实的1例漏诊.单纯性PDA者占36%(36/99),合并其它心内畸形者占63%(63/99).VSD、ASD、肺动脉狭窄是PDA为常见的并发畸形.结论:彩色多普勒超声能够准确地诊断PDA,并能检出其合并的心内畸形,具有很高的临床应用价值.

    作者:葛贻珑;叶军;陈卫华;任苓;彭凤裘;谢谨捷;凌月蓉;游宇光;肖文胜;陈燕玲 刊期: 2005年第05期

  • 胰腺炎后胰腺假性囊肿的诊治

    目的:探讨胰腺炎后胰腺假性囊肿的诊断和治疗.方法:对63例胰腺假性囊肿患者的临床资料进行回顾性分析.结果:非手术治疗15例,其中6例在B超引导下行囊肿穿刺抽液.手术治疗48例,囊肿胃吻合术5例,囊肿空肠Roux-en-Y吻合术37例.囊肿单纯切除术5例,囊肿及胰尾脾切除术1例.结论:胰腺假性囊肿可出现多种并发症,且需与多种囊性病变相鉴别,诊断及治疗尚有一定困难.囊肿空肠Roux-en-y吻合术仍不失为一种简单易行而疗效可靠的方法,影像学检查有助于设计合理的治疗计划.

    作者:茹登峰;陈坚 刊期: 2005年第05期

赣南医学院学报杂志

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