学术投稿

大鼠皮肤中青藤碱的HPLC测定

朱谷晶;郑杭生;王肖龙;陶建生

关键词:青藤碱, 大鼠皮肤, HPLC, 定量测定
摘要:目的 建立一种皮肤中青藤碱测定的HPLC方法.方法 采用ODS柱,以甲醇-水-乙二胺(55:45:0.225)混合液为流动相,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长为265 nm.样品处理过程包括皮肤匀浆、液-液萃取、氮气吹干有机层以及以少量流动相复溶残留物后进样分析.盐酸昂丹司琼作内标.结果 皮肤中的内源性物质对测定无干扰;取样皮肤(1 cm2)中药物含有量在1.02 ~ 20.4μg范围内与药物和内标物峰面积之比呈良好的线性关系(R=0.9983,n=6);日内、日间精密度良好(RSD≤7.2%);准确度(相对回收率)为92.6% ~ 104.6%,提取回收率为73.9% ~ 87.9%,复溶的供试品溶液在24 h内稳定(相对回收率为97.9%~111.5%),皮肤样品冷冻-解冻循环3次测定结果稳定(相对回收率为96.0% ~ 107.4%).结论 该方法的精密度、准确度、稳定性均符合生物样本测定要求,可用于皮肤中青藤碱测定.
中成药杂志相关文献
  • 黄芩苷对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及相关机制

    目的 体外观察黄芩苷对人肺腺癌细胞株A549凋亡的影响及其可能机制.方法 采用0、0.625、1.25、2.5、5.0、10.0 mg/L黄芩苷作用于A549细胞24、48、72 h,MTT法检测药物对A549细胞的抑制率;RT-PCR法检测1.22mg/L黄芩苷处理A549细胞24 h Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达情况.结果 不同质量浓度的黄芩苷呈时间、剂量依赖性地抑制A549细胞的生长,1.22 mg/L黄芩苷作用A549细胞24 h后,Bax、Caspase-3 mRNA表达水平显著升高,Bcl-2 mRNA表达显著下降,Bcl-2/Bax比值显著降低(均P<0.01).结论 黄芩苷体外能诱导A549细胞凋亡,与上调Bax、Caspase-3表达,下调Bcl-2表达有关.

    作者:郑海峰;王英妹;武铁军;李庆祥;张健;段国辰 刊期: 2012年第11期

  • 藿香正气水致不良反应/不良事件101例分析

    目的 探讨藿香正气水致不良反应/事件的特点与规律,为安全合理用药提供参考.方法 检索国内医药数据库,下载有关藿香正气水致不良反应/事件的病例报告原文,进行统计与分析.结果 共检索到藿香正气水致不良反应/事件病例报告58篇101例.其致不良反应/事件的规律与特点是:少年儿童患者占比较高(55例,占比54.46%);不良反应/事件以全身性损害(28.28%)、神经系统损害(23.91%)、皮肤及其附件损害(17.84%)和循环系统损害(17.51%)占比较高;过敏性休克占比较高(15例,占比14.85%).病例报告中存在剂量偏大与适应症选择不当的问题.1例静脉滴注藿香正气水40 min内死亡.结论 加强藿香正气制剂管理与规范应用已是当务之急.

    作者:雷光远;雷招宝 刊期: 2012年第11期

  • 秦皮乙素诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制研究

    目的 探讨秦皮乙素诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制.方法 不同浓度秦皮乙素(1.12、2.24、4.48 mmol/L)处理人肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞仪检测线粒体膜电位,分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性,蛋白印迹法和免疫荧光法检测Bax、Bcl-2、Caspase-9蛋白的表达.结果 秦皮乙素显著降低SMMC-7721细胞线粒体膜电位,提高Caspase-3、Caspase-9的活性,而对Caspase-8的活性无显著影响;升高Bax/Bcl-2比例,进而活化Caspase-9,并呈良好的剂量依赖关系.结论 秦皮乙素可通过线粒体途径,启动下游的效应Caspase,诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡.

    作者:王晶;伟忠民 刊期: 2012年第11期

  • 温度对黄连不同炮制品中生物碱的影响研究

    目的 探究温度对烘黄连、酒黄连和胆黄连中生物碱成分的影响.方法 采用高效液相色谱法测定黄连不同炮制品在不同炮制温度下生物碱含有量的变化.结果 黄连不同炮制品中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含有量随着温度的升高呈降低趋势.不同温度下,4种炮制品中巴马汀含有量差别不明显.120℃和140℃时,12.5%酒润烘干品中生物碱总体上高;160℃和180℃时,60%酒润烘干品中生物碱总体上高.结论 与胆汁相比,黄酒更能促进对黄连中生物碱的溶出.

    作者:沈晓庆;杨彦华;张凡;降雪;曲胜军;贾天柱 刊期: 2012年第11期

  • 淫羊藿黄酮药代动力学研究进展

    淫羊藿为我国临床常用补益中药,在心血管和癌症的治疗方面有着广泛应用.本文从淫羊藿的单一成分、提取液以及复方药三个方面首次对淫羊藿黄酮代谢产物研究和药物动力学模型研究的研究近况进行总结,分析淫羊藿药代动力学研究的问题以及解决方案,为其进一步研究提供参考.

    作者:贾晓斌;钱浅;孙娥;崔莉 刊期: 2012年第11期

  • 总有机碳法用于复方丹参装囊滴丸清洁验证的可行性研究

    目的 证实总有机碳法确实可以应用于中药产品的清洁验证,并建立总有机碳(TOC)中药产品清洁验证方法.方法 测定复方丹参装囊滴丸总有机碳量,结合方法学验证数据与检测实例评价总有机碳法用于清洁验证的效果.结果 总有机碳法方法学验证结果符合人用药物注册技术要求国际协调会(ICH)关于方法学实验的相应指导原则的(Q2B)方法学验证要求.总有机碳法与超高效液相色谱法实例对比,检测结果更为准确.结论 总有机碳法可以用于复方丹参装囊滴丸这一中药产品的清洁验证,并据此推论,总有机碳法可以用于部分中药的清洁验证.

    作者:周庆凯;孙巍;曹凤兰;杭太俊 刊期: 2012年第11期

  • 多指标正交实验优选旋覆代赭汤佳煎煮工艺

    目的 优选中药汤剂旋覆代赭汤的佳煎煮工艺.方法 对影响中药汤剂煎煮的关键因素浸泡时间、加水量、煎煮时间、煎煮次数进行正交实验设计,以旋覆代赭汤中的绿原酸、甘草酸、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1五种主要活性成分含量以及汤剂的浸出物得率作为评价指标,采用多指标综合评分优选佳煎煮工艺.结果 佳煎煮工艺为:浸泡15 min,煎煮3次,每次10倍量水煎煮30 min.结论 优选得到的煎煮工艺重现性好,稳定可行.

    作者:汪斌;秦昆明;姚仲青;蔡宝昌 刊期: 2012年第11期

  • 益气散聚方的水提醇沉工艺研究

    目的 优化益气散聚方的提取和醇沉工艺.方法 采用正交试验对提取、醇沉工艺进行优选,以黄芪甲苷转移率,干浸膏得率为指标,考察提取时间、提取次数、加水倍数对提取工艺的影响,终确定益气散聚方的佳水提工艺;考察药液相对密度、醇沉时间、醇沉浓度对提取工艺的影响,终确定益气散聚方的佳醇沉工艺.结果 佳提取条件为8倍量的水,提取3次,每次2 h.佳醇沉条件为药液相对密度1.15,醇沉浓度为80%,醇沉时间为8h.结论 经过正交优化的益气散聚方提取醇沉方案,黄芪甲苷转移率大于60%,干浸膏得率能控制在11%左右,该方案稳定可行.选择君药中的有效成分为主要指标,又加入浸膏得率这一指标,兼备中药复方成分复杂的特点,可以更合理反映提取纯化的效果.

    作者:李天辰;沈侃;韩伟 刊期: 2012年第11期

  • 灵芝多糖联合5-氟尿嘧啶对LoVo细胞增殖及凋亡的影响

    目的 探讨灵芝多糖(Canoderma lucidum polysaccharide)联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌LoVo细胞体外增殖及凋亡的影响.方法 采用MTF法测定单用灵芝多糖、5-氟尿嘧啶和两药合用对人结肠癌LoVo细胞的协同抑制作用,应用联合指数法分析两药物之间相互作用,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测灵芝多糖联合5-氟尿嘧啶对LoVo细胞周期的和凋亡抑制率的变化.结果 MTF结果显示灵芝多糖和5-氟尿嘧啶单独用药均能显著抑制LoVo细胞增殖.低质量浓度灵芝多糖(<14.70 mg/mL)和5-氟尿嘧啶(<0.29 mg/mL)联用组呈协同效应(CI<1),与5-氟尿嘧啶单独用药组相比有极显著差异(P<0.01),并呈时间依赖性.FCM结果显示联合用药组作用24 h后其凋亡率(14.42%)高于5-氟尿嘧啶单独用药组(11.37%);作用48 h后其凋亡率(28.92%)高于5-氟尿嘧啶单独用药组(23.29%).低浓度联合用药组可使LoVo细胞阻滞于S期,高浓度联合用药组使LoVo细胞阻滞于G2/M期和S期.结论 低浓度灵芝多糖与5-氟尿嘧啶联用具有协同抑制人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期.

    作者:梁曾恩妮;易有金;郭雨桐;王仁才;熊兴耀 刊期: 2012年第11期

  • 参芍口服液对冠状动脉粥样硬化大鼠主动脉IL-8、VCAM-1和ICAM-1表达的影响

    目的 观察参芍口服液(丹参、黄芪、赤芍、当归、川芎、桃仁、红花、水蛭、地龙、半夏)对冠状动脉粥样硬化模型大鼠主动脉IL-8、VCAM-1和ICAM-1表达的影响,完善参芍口服液治疗冠状动脉粥样硬化的作用机制.方法 采用高脂饮食+维生素D3制作冠状动脉粥样硬化模型大鼠,50只SD大鼠(鼠龄3个月)随机分为空白对照组、模型组、参芍口服液高剂量、参芍口服液低剂量和辛伐他汀组.正常组常规饲养,模型组和治疗组大鼠给予高脂饮食+维生素D3腹腔注射.喂饲4周后,灌胃给药8周,处死.ELISA法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C).取主动脉行免疫组化及免疫印迹,观察白细胞介素8(IL-8)、血管间细胞黏附分子(VCAM-1)和白细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,治疗组血清TC、TG、LDL下降,差异均有统计学意义(均P<0.05).与模型组比较,治疗组冠状动脉粥样硬化组织IL-8、VCAM-1及ICAM-1的表达下降,且参芍口服液高剂量优于参芍口服液低剂量.结论 参芍口服液可通过改善血脂指标,降低IL-8、VCAM-1和ICAM-1的表达,缓解组织炎症,治疗冠状动脉粥样硬化性疾病.

    作者:薛忠文;董天崴;张琦;徐丁洁;王晨;尚小明 刊期: 2012年第11期

  • 银翘解毒丸特征图谱初步研究

    目的 建立银翘解毒丸的特征图谱,从整体评价银翘解毒丸质量.方法 采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6mm × 250 mm);DAD检测器;柱温30℃;甲醇和0.2%磷酸为流动相,1 mL/min的体积流量梯度洗脱,对银翘解毒模拟丸进行特征图谱测定.采用中药指纹图谱计算软件进行计算,建立模拟丸的特征图谱,在此基础上探索银翘解毒丸样品的特征.结果 银翘解毒模拟丸特征图谱有14个共有峰,其精密度、重复性、稳定性试验中各共有峰的相对保留时间的RSD均小于0.1%,相对峰面积的RSD均小于3.15%.模拟丸的图谱相似度较好,银翘解毒丸样品的图谱存在较大差异.在已建立特征图谱基础上,归属了3个特征色谱峰及1个组峰作为金银花、牛蒡子、连翘、甘草四味药材的样品特征峰.结论 方法重复性较好,为进一步控制银翘解毒丸质量提供研究基础.

    作者:罗曼;周兰;申璀;熊慧林 刊期: 2012年第11期

  • 大鼠皮肤中青藤碱的HPLC测定

    目的 建立一种皮肤中青藤碱测定的HPLC方法.方法 采用ODS柱,以甲醇-水-乙二胺(55:45:0.225)混合液为流动相,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长为265 nm.样品处理过程包括皮肤匀浆、液-液萃取、氮气吹干有机层以及以少量流动相复溶残留物后进样分析.盐酸昂丹司琼作内标.结果 皮肤中的内源性物质对测定无干扰;取样皮肤(1 cm2)中药物含有量在1.02 ~ 20.4μg范围内与药物和内标物峰面积之比呈良好的线性关系(R=0.9983,n=6);日内、日间精密度良好(RSD≤7.2%);准确度(相对回收率)为92.6% ~ 104.6%,提取回收率为73.9% ~ 87.9%,复溶的供试品溶液在24 h内稳定(相对回收率为97.9%~111.5%),皮肤样品冷冻-解冻循环3次测定结果稳定(相对回收率为96.0% ~ 107.4%).结论 该方法的精密度、准确度、稳定性均符合生物样本测定要求,可用于皮肤中青藤碱测定.

    作者:朱谷晶;郑杭生;王肖龙;陶建生 刊期: 2012年第11期

  • HPLC法测定金匮肾气丸中马钱苷、芍药苷、毛蕊花糖苷和丹皮酚

    目的 建立同时测定金匮肾气丸(山茱萸、牡丹皮、车前子、地黄等)中马钱苷、芍药苷、毛蕊花糖苷和丹皮酚的定量测定方法.方法 采用HPLC法;Thermo Hypersil BDS C18色谱柱;乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相;体积流量为1 mL/min;检测波长0~17 min,237 nm; 18 ~ 25 min,233 nm; 25 ~ 40 min,330 nm; 40 ~ 55 min,275 nm.结果 根据回归方程,4种成分线性范围分别为马钱苷0.075 6 ~ 0.945 5 μg,r=0.999 7;芍药苷0.1070~1.338 1μg,r=0.999 9;毛蕊花糖苷0.153 0~1.912 7 μg,r=0.999 8;丹皮酚0.129 4~1.617 5μg,r=1.000 0;平均回收率分别为马钱苷99.2%,RSD为0.44%(n=6);芍药苷99.0%,RSD为0.84%(n=6);毛蕊花糖苷99.2%,RSD为0.37%(n=6);丹皮酚99.6%,RSD为0.28%(n=6).结论 该方法操作简便,准确、重复性好,可用于金匮肾气丸的质量控制.

    作者:林林;刘广桢;尹宁宁 刊期: 2012年第11期

  • 定心藤总黄酮的提取及抗氧化活性的研究

    目的 研究微波辅助提取定心藤总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性.方法 通过正交试验设计确定了定心藤总黄酮微波辅助提取的佳条件,用DPPH·法研究定心藤总黄酮对自由基的清除作用.结果 微波辅助提取定心藤总黄酮的佳提取条件为微波功率处于中高火、含乙醇量65%、微波作用时间2 min、固液比1:40;抗氧化实验表明定心藤总黄酮对DPPH·有较好的清除作用,且清除能力随浓度的增加而增强,IC50值为0.000 663 (mg/mL),优于合成抗氧化剂BHA的抗氧化活性.结论 微波辅助提取定心藤总黄酮的工艺便捷、效率高;定心藤总黄酮对DPPH·有较强的清除能力,具有明显的抗氧化活性.

    作者:黄琼;田玉红;蒲香 刊期: 2012年第11期

  • 不同商品等级羌活中有机酸和香豆素类化合物的测定

    目的 比较同一产地不同商品等级羌活中主要有机酸和香豆素类化合物的含有量.方法 采用HPLC-DAD法同时测定不同商品等级羌活中绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷、补骨脂素、佛手柑内酯、欧前胡素、羌活醇和异欧前胡素.色谱柱为C18 TSK gel ODS-80Ts QA(250 mm ×4.6 mm,5μm).流动相为甲醇(A)-0.3%的冰醋酸水溶液(B),梯度洗脱;体积流量0.6 mL/min,进样量10μL,柱温30℃.结果 8种活性成分在80 min内达基线分离,线性关系良好(R2≥0.9992);平均加样回收率为96.27% ~ 102.44%,RSD≤4.15%.绿原酸和阿魏酸的含有量与传统等级划分方法基本一致,但紫花前胡苷、佛手柑内酯、羌活醇和异欧前胡素的含有量与传统的以外观形态论品质的判断标准有一定的差异.补骨脂素和欧前胡素在所测样品中均未检测出.结论 该方法灵敏、准确、可靠、重复性好,可用于羌活药材的质量评价.

    作者:刘卫根;王亮生;徐文华;杨路存;朱满兰;周国英 刊期: 2012年第11期

  • 乌灵胶囊治疗伴抑郁状态的老年轻度认知功能障碍患者的临床疗效观察

    目的 探讨乌灵胶囊治疗伴抑郁状态的老年轻度认知功能障碍(MCI)患者的临床疗效.方法 50例伴抑郁症的MCI患者予以乌灵胶囊治疗,随访1年,观察治疗前后患者自觉症状、汉密顿抑郁量表(HAMD)、简易精神状况检查表(MMSE)得分和临床疗效的变化.结果 与治疗前比较,治疗后患者自觉症状明显改善(P<0.01),HAMD总分降低(P<0.05),其中焦虑/躯体性症状和睡眠障碍改善为明显(P<0.05和P<0.01).MMSE总分明显升高(P<0.01),其中注意力和计算力、延迟记忆力改善为明显(P<0.05和P<0.01).治疗12个月后总有效率达92%,明显优于3个月的治疗(P<0.01).结论 乌灵胶囊可作为伴有抑郁症的老年MCI患者长期治疗的有效治疗药物.

    作者:王蓓芸;钟远;燕虹 刊期: 2012年第11期

  • 熊果酸自微乳给药系统的制备及质量评价

    目的 制备熊果酸自微乳制剂并对其进行质量评价.方法 通过溶解度试验、油和表面活性剂配伍试验,绘制伪三元相图,筛选熊果酸自微乳的处方组成;通过粒径分布和载药量优化熊果酸自微乳处方;并对熊果酸自微乳的理化性质及体外溶出进行了考察.结果 熊果酸自微乳处方中油相为油酸乙酯(15.0%),乳化剂为Cremophor EL(40.0%),助乳化剂为transcutol P(45%),熊果酸质量分数为10 mg/g.自微乳化后粒径为23 nm,zeta电位为-5.35 mv;体外释放结果表明熊果酸自微乳制剂能明显提高药物的溶出.结论 所制备的熊果酸自微乳粒径小、溶出快,符合良好自微乳制剂的要求.

    作者:钦富华;林杭娟;高建青 刊期: 2012年第11期

  • HPLC-ICP-MS法研究5种含雄黄中成药的可溶性砷及其形态

    目的 采用高效液相色谱-电感耦合等离子质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术分析6种不同价态砷,对雄黄及5种不同处方含雄黄复方制剂中可溶性砷的形态进行研究.方法 可溶性砷分别以不同提取溶剂和不同提取方法为37℃人工胃液恒温振荡、0.16%盐酸溶液超声、甲醇-水(1:1)超声及甲醇-水(1:1)快速溶剂萃取(ASE)等提取样品中可溶性砷,采用ICP-MS方法分析可溶性砷总量;HPLC-ICP-MS分析可溶性砷的形态.结果 雄黄及含雄黄复方制剂的酸可溶性砷总量仅占样品总含砷量的0.12%~2.70%;不同提取溶剂可溶性砷形态为3价和5价两种已知形态砷;酸可溶性砷中3价和5价砷之和与酸可溶性砷总量随中药复方制剂不同而呈现不同比例关系.结论 雄黄及其复方制剂的酸可溶性砷远远小于其总含砷量,复方制剂中其他成分的存在可能会对可溶性砷中有毒形态溶出产生抑制作用.

    作者:李丽敏;夏晶;王欣美;王枚博;王柯;季申 刊期: 2012年第11期

  • 五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺化疗的减毒作用

    目的 研究五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺(环磷酰胺)化疗的减毒作用.方法 建立H22荷瘤小鼠模型,实验小鼠接种H22后,随机分为4组,即荷瘤对照组、环磷酰胺组、环磷酰胺加五子衍宗方高剂量组(840mg/kg)、环磷酰胺加五子衍宗方低剂量组(420mg/kg).检测各组小鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数量和骨髓有核细胞数量变化,观察各组荷瘤小鼠瘤质量的变化以及抑瘤率,流式细胞术分析小鼠脾脏中CD4+、CD8+、CD19+、CD69+ CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例变化.结果 环磷酰胺化疗小鼠出现红细胞、白细胞、血小板数量下降,脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著减少,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例下降.与环磷酰胺单用组相比,五子衍宗方联合环磷酰胺组红细胞、白细胞、血小板数量明显恢复;小鼠瘤质量降低,抑瘤率升高;小鼠脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著增加,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例明显上升.结论 五子衍宗方可减轻环磷酰胺对H22荷瘤小鼠化疗的毒副作用,其机制可能与改善机体免疫功能有关.

    作者:王洪武;李守超;王光勇;余枫华;曾晓;狄国杰;徐媛青;袁丁;张长城 刊期: 2012年第11期

  • 何首乌薄层干燥模型及动力学研究

    目的 建立何首乌薄层干燥的数学模型并测定其动力学参数.方法 应用7种主要的薄层干燥模型对45、55、65、75℃条件下何首乌的干燥曲线进行拟合,采用R2、x2和RMSE作为评判拟合优劣的标准,并综合模型参数选择适宜的干燥模型;根据Fick第二定律计算干燥过程的动力学参数.结果 Midilli模型为描述何首乌薄层干燥过程的佳模型,干燥过程的有效水分扩散系数D值在4.98×10-10 ~ 7.92×10-10 m2/s之间,活化能为14.63 kJ/mol.结论数学模拟的方法可用于何首乌薄层干燥的过程.

    作者:林冰;王莹;周礼青;周英;赵致;罗春丽 刊期: 2012年第11期

中成药杂志

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