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脑缺血后大鼠前脑NOS神经元与FOS蛋白表达的研究

晋光荣;刘钟;黄艳军;刘俊华;花菊兰

关键词:前脑, 脑缺血, 一氧化氮合酶, c-fos原癌基因蛋白, 大鼠
摘要:目的:观察大鼠全脑缺血再灌注后前脑NOS阳性神经元分布和FOS蛋白表达时程变化,探讨其相互间的变化关系及其在脑缺血损伤机制中的可能作用.方法:采用四血管闭塞模型、运用NADPHd组化反应、FOS免疫组化反应及两者的双重反应技术,对全脑缺血30 min再灌注2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h进行研究.结果:缺血组前脑NOS阳性神经元数目和染色强度增加,FOS蛋白表达随再灌注时程而变化,并可见有约10~15%NOS/FOS双染细胞.结论:全脑缺血再灌注损伤过程中,前脑NOS阳性神经元的分布与FOS蛋白表达密切相关.
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    生物芯片(biochip)是指采用微量点样等方式,将核酸片段、多肽分子、组织切片和细胞等生物样品有序地固定于支持物(如玻片、硅片、尼龙膜等载体)的表面,组成密集二维阵列,然后与已标记的待测生物样品中的靶分子进行杂交、或用免疫组织化学、原位杂交等技术使待检分子可视化,后通过特定的仪器如激光共聚焦扫描仪或电荷偶联摄影像机(CCD)对可视化信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的相对数量.

    作者:向正华;吕军;蒋平;陈鸣;焦炳华 刊期: 2002年第04期

  • 神经特异型基因c-src产物pp60c-src(+)在突触形成中的表达

    目的:为了探索神经特异型基因c-src产物pp60c-src(+)在突触形成中的作用机制.方法:用免疫细胞化学方法检测pp60c-src(+)在初代培养鸡胚脊神经节细胞体、突起和生长端内的分布特征.结果:培养24小时的生长端丝状伪足不断运动改变生长端的形态,pp60c-src(+)的免疫反应活性分布在神经细胞的核周体、神经突起、生长端部分领域和丝状伪足;培养48小时的生长端接近靶细胞,丝状伪足的活泼性和运动性明显减弱以至消失,在伸长的突起上有pp60c-src(+)免疫反应活性较强的串珠样膨体,在生长端体部的部分区域和丝状伪足免疫反应活性明显减弱.结论:(1)在生长端向突触前部分化的过程中,pp60c-src(+)免疫活性曾发生一过性的减低或消失,它具有时空特异性;(2)pp60c-src(+)对突触发育具有重要的调控作用.

    作者:翟秀岩;马文锋;热海佐保子 刊期: 2002年第04期

  • 大鼠坐骨神经受压和解压后背根节和脊髓内神经元nNOS表达的变化

    目的:观察坐骨神经受压及解压后大鼠腰段背根节和脊髓内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化,借以探讨外周神经源性痛的发病和影响机制.方法:大鼠随机分为压迫组、解压组和对照组,采用聚乙烯管压迫坐骨神经的动物模型,用免疫细胞化学方法并结合计算机图像分析进行研究.结果:与对照组比较,压迫组和解压组腰4-6背根节中nNOS的表达显著增加,相应节段脊髓背角的表达则明显降低;解压组与压迫组比较,背根节中nNOS的表达明显减少,而脊髓背角的已经下调的nNOS表达则回升,但仍然低于对照组水平.结论:NO可能与神经源性痛时在中枢和外周的痛觉敏感性形成和神经系统长时程改变有关.

    作者:赵忠球;潘艳春;王劼;刘才栋;彭裕文 刊期: 2002年第04期

  • 尾壳核在形态学定量分析时的定位取点

    尾壳核(caudate putamen CPu)是鼠脑内大的核团,但并非一均质结构,在许多实验研究中表现出明显的区域差别,这可能与CPu的细胞、受体、神经递质以及纤维联系等诸多分布差异有密切关系[1~4],所以在进行实验分析时必须全面考虑、区别对待才能正确客观地反映实验结果.本文在参考他人对大鼠CPu分区分析的基础之上[5 ],介绍一种简便准确的形态学定量分析用部位选取法,可客观方便地应用于计算机图像分析或镜下细胞记数.

    作者:陈幽婷;唐放鸣 刊期: 2002年第04期

  • 支配肺的心内神经节一氧化氮能阳性神经元的研究-神经追踪与组织化学结合法

    目的:探索大鼠支配肺的心内神经节细胞是否含有递质一氧化氮.方法:以荧光追踪剂/一氧化氮合酶组织化学结合技术将快兰(fast blue,FB)注入大鼠肺内,在心内神经节区切片进行一氧化氮合酶组织化学染色反应.结果:发现部分FB标记的心内神经节细胞含递质一氧化氮(nitrogen monoxide,NO).6只动物发现FB/NO双阳性神经细胞128个,占NO阳性神经细胞的3.5±1.8%,散在分布于心内神经节.细胞多为卵圆及梭形.以中、小型为主.讨论:本实验证实支配肺的部分心内神经节细胞以NO为递质,实现对肺的调节.

    作者:李光千;李莉 刊期: 2002年第04期

  • 脑缺血后大鼠前脑NOS神经元与FOS蛋白表达的研究

    目的:观察大鼠全脑缺血再灌注后前脑NOS阳性神经元分布和FOS蛋白表达时程变化,探讨其相互间的变化关系及其在脑缺血损伤机制中的可能作用.方法:采用四血管闭塞模型、运用NADPHd组化反应、FOS免疫组化反应及两者的双重反应技术,对全脑缺血30 min再灌注2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h进行研究.结果:缺血组前脑NOS阳性神经元数目和染色强度增加,FOS蛋白表达随再灌注时程而变化,并可见有约10~15%NOS/FOS双染细胞.结论:全脑缺血再灌注损伤过程中,前脑NOS阳性神经元的分布与FOS蛋白表达密切相关.

    作者:晋光荣;刘钟;黄艳军;刘俊华;花菊兰 刊期: 2002年第04期

  • 下睑眼袋应用解剖

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    作者:楼佳庆;孙豪;瞿涛;姚建民;杨天鹏 刊期: 2002年第04期

  • 联合应用生长激素和谷氨酰胺对短肠大鼠小肠粘膜上皮细胞凋亡发生分布的影响

    目的:探讨联合应用生长激素和谷氨酰胺对短肠大鼠小肠粘膜上皮细胞凋亡发生分布的影响.材料和方法:选用40只手术成功的SD短肠大鼠,按2×2析因实验设计随机分为四组,分别给予常规全肠外营养(STD组,n=10)、附加谷氨酰胺(Gln组,n=10)、附加生长激素(GH组,n=10)及附加谷氨酰胺和生长激素全肠外营养(GG组,n=10),持续6天,取8只正常大鼠模拟手术后第一天处死,作为基础对照组(Control组,n=8).应用原位末端标记方法对比观察残留小肠粘膜上皮细胞凋亡的发生和分布.结果:凋亡细胞主要位于肠绒毛的顶部.STD组小肠粘膜上皮细胞凋亡指数较对照组明显高增高(P<0.01);GH组和Gln组凋亡指数明显低于STD组(P<0.01);而GG组凋亡指数又显著低于GH组和GLN组(P<0.01).结论:联合应用生长激素和谷氨酰胺能够减少小肠粘膜上皮细胞的凋亡,从而防止小肠粘膜萎缩的发生.

    作者:谢建新;顾岩;赵淑民;罗宝国;陈丽链;吴肇汉;左焕琛 刊期: 2002年第04期

  • 左腘窝异常小肌一例

    在解剖一成年女尸时,发现左腘窝浅筋膜下有-异常小肌.此变异肌为二头肌,外侧头以肌腱起自股二头肌的肌腹,内侧头以肌腱起自半腱肌的肌腹,两头在腘窝合并成一个肌腹,以一个腱止于腓肠肌内、外侧头会合处止腱全长36.25cm,变异肌外侧头起点至股二头肌长头起点长16.25 cm;变异肌内侧头起点至半腱肌起点长19.38 cm;变异肌外侧头长4.64cm,宽0.13 cm,厚0.05 cm;内侧头长1.34 cm,宽0.21 cm,厚0.06 cm;肌腹长12.30cm,宽0.94 cm,厚0.21cm.

    作者:韩玉华;王福;张树彬 刊期: 2002年第04期

  • 心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸纳米粒子的形态学实验

    目的探讨心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸(polylactic-polyglycolic acid,PLGA)纳米粒子的形态学机理,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据.方法:将制备的PLGA纳米粒子加入生理盐水中,超声振荡成注射用纳米粒子悬浮液后,注射至活体家兔心肌组织内,48小时后取材切片、电镜下观察.结果:心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子,并且出现了PLGA纳米粒子被吸收、降解的迹象.结论:心肌细胞完全可以通过吞噬方式大量摄取;PLGA纳米粒子,将PLGA纳米粒子作为向心肌细胞内转运某种药物或基因的载体是完全可行的.

    作者:张晓东;王冬;杨菁;李若凡;程效东;韩晔华;周梦玲;宋存先 刊期: 2002年第04期

  • 猪丘脑、小脑和延髓内Leptin长形受体mRNA的分布定位

    目的:研究猪丘脑、小脑和延髓内leptin长形受体(long form leptin receptor,Ob-Rb)mRNA的分布定位,比较长白猪和眉山猪上述脑区内Ob-RbmRNA分布的差异.方法:原位杂交法.结果:在丘脑内,Ob-RbmRNA标记神经元几乎见于所有核团,在中线核、丘脑室旁核和丘脑前核内出现大量的Ob-Rb mRNA标记神经元,其余核团内Ob-RbmRNA标记神经元分布较少.在小脑皮质三层中均有Ob-RbmRNA标记神经元,以梨状神经元层和颗粒层分布较密集.在延髓下橄榄核、孤束核、迷走神经背核和舌下神经核有Ob-RbmRNA标记神经元出现.结论:猪丘脑、小脑和延髓内均有Ob-Rb mRNA分布,其分布定位在长白猪与眉山猪未见明显的差异.

    作者:雷治海;王红星;樊明欣;武枫林;施玉萍 刊期: 2002年第04期

  • 伴有高血压的糖尿病大鼠主动脉的结构重建

    目的:观察伴有高血压的糖尿病(SHRDM)主动脉结构重建的规律,并探讨高血糖、高血压对其影响.方法:STZ诱导SHR大鼠建立SHRDM实验动物模型,.观测主动脉血管壁中膜结构成分的改变.结果:SDDM(有高血压的糖尿病)大鼠自4周始主动脉中膜平滑肌相对含量和核密度、胶原纤维相对含量均大于SD组,弹性纤维相对含量少于SD组.SHRDM组主动脉平滑肌相对面积、C/E值大于SD和SHR组,但SMC核数少于SDDM,多于SHR.结论:糖尿病早期已出现主动脉结构重建,以平滑肌增生为主;高血压使平滑肌细胞肥大为主,因而SHRDM增生、肥大共存.高血压、高血糖均显著影响主动脉结构重建,高血压影响大于高血糖.

    作者:张传森;陈尔瑜;姜宗来;徐瑞生;陶凯忠;杨向群;刘波;蔡国君 刊期: 2002年第04期

  • 宁夏回族青少年足型的研究

    目的:了解回族青少年足型及发育规律.方法:采用人体测量方法,测量了宁夏固原地区1 658名回族7~17岁学生的足长、足宽,并按足长宽指数分型,并将足长、足宽数据和足型与畲族、哈萨克族和汉族比较.结果:回族青少年的足长、足宽均随年龄增长而增长.足长与足宽存在正相关关系,足型以中间型多.结论:回族青少年足型与其他民族比较存在差异,足长与足宽发育随年龄增长而增加.

    作者:何仲义;戴波;牛建国;文玉军 刊期: 2002年第04期

  • 外源性谷氨酸致新生鼠脑兴奋毒性神经变性的形态学研究

    目的:探讨外源性谷氨酸对新生鼠脑细胞的兴奋毒性作用.方法:新生7天SD大鼠,背部皮下注射单钠谷氨酸(MSG)2 mg/g,在2 h、6~8 h、24~28 h分别光镜和电镜观察脑细胞的形态改变.结果:光镜下,2 h未见明显异常,此后可见多处脑细胞肿胀,进而细胞固缩.电镜着重观察海马神经元,变化-为神经元胞体和树突巨大膨胀,伴随着内质网膜的空泡化及线粒体由早期的浓缩到巨大膨胀,轴突基本正常,核染色质由簇状集聚于核膜下呈钟面排列到向中央积聚成轮廓不规则的团块;变化二为胞浆和胞核均浓缩,胞奖中有大小不等的空泡.结论:外源性谷氨酸能引起未成熟脑细胞的死亡,为某些食品添加剂对儿童脑细胞的影响的相关研究提供一定的形态学基础.

    作者:章惠英;何正瑞;易静;顾峻;刘文超;陈黎华 刊期: 2002年第04期

  • 人胚胎干细胞体外培养并分化为心肌细胞

    目的:体外培养并鉴定人胚胎干细胞(EG细胞),在不添加细胞因子的条件下,观察细胞集落分化情况.方法:取4~6周人胚胎生殖嵴、肠背系膜和中肾嵴,进行组织块培养,利用组织化学和免疫组织化学技术对培养的细胞进行鉴定.结果:培养7~8小时,在组织块周围出现成纤维细胞;5~7天后,在成纤维细胞上出现EG细胞集落,集落内细胞表达阶段特异性胚胎表面抗原SSEA-1和SSEA-3,并表达碱性磷酸酶(ALP)活性;培养18天后,有6个集落分化为有节律跳动的心肌细胞,这些细胞集落在继续培养15天后,仍能有节律收缩.此时集落内细胞ALP表达呈阴性,但仍有少量细胞表达SSEA-1和SSEA-3.结论:体外培养人胚生殖嵴、肠背系膜和中肾嵴组织块,以内源性的成纤维细胞作为饲养层,可以分离得到EG细胞集落,一些EG细胞集落可以自发地分化成心肌细胞.

    作者:陈曦;刘斌 刊期: 2002年第04期

  • 不同发育阶段大鼠齿状回nNOS的表达

    目的:研究nNOS在生后不同发育阶段大鼠齿状回的表达.方法:免疫组化ABC法及图象分析.结果:nNOS免疫阳性细胞面数密度:2周龄组高,其次为1周龄组,2周以后随着年龄的增加逐渐下降,3周龄组和4周龄组之间差异不显著;其余各组间差异均显著.nNOS免疫阳性细胞IOD值:2周龄组高,2周以后随着年龄的增加逐渐下降,1周组IOD与3月组相近.结论:不同发育阶段大鼠齿状回的nNOS表达的表现出明显的动态变化特征,提示NO与齿状回的发育及功能具有密切关系.

    作者:何玲;窦肇华;高梅;王典瑞;梁兆祥 刊期: 2002年第04期

  • 高脂血症大鼠蓝斑多巴胺-β-羟化酶免疫阳性神经元的变化

    目的:观察高脂血症大鼠蓝斑和蓝斑下核多巴胺-β-羟化酶(dopamine-β-hydroxylase,DβH)免疫阳性神经元的变化.方法:用ABC免疫细胞化学方法显示DβH免疫阳性神经元.结果:对照组大鼠各时期蓝斑和蓝斑下核DβH免疫阳性神经元的数量未见明显变化;高脂组大鼠7 d,蓝斑和蓝斑下核DβH免疫阳性神经元与对照组比较无明显改变,但随着饲喂高脂饮食有逐渐增多的趋势,30 d明显增多,特别是高脂饮食90 d后,DβH免疫阳性神经元的数量增多明显,且着色较深.蓝斑与蓝斑下核DβH免疫阳性神经元的变化具有明显的一致性,均随着饲喂高脂饮食时间延长而增多;定量分析显示,DβH免疫阳性神经元的数量在30 d和90 d与对照组相比均明显增多(P<0 01),同组内30 d和90 d均较7 d明显增多(P<0.01).结论:脑内NE能神经系统的功能活动增强可能与动脉粥样硬化的发生有关.

    作者:郭国庆;沈伟哉 刊期: 2002年第04期

  • 大鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核间接纤维联系的超微结构观察

    目的:研究孤束核-臂旁核-中央杏仁核间接纤维联系方式,并对臂旁核内一氧化氮的作用途径进行了探讨.方法:利用直流电损毁孤束核顺行溃变,结合中央杏仁核注射辣根过氧化物酶逆行追踪技术,在超微结构水平上,观察大鼠臂旁核内溃变终末及逆行标记结构的形态分布及其相互关系.结果:分布于臂旁核内孤束核的轴突终末,可与投射至中央杏仁核的神经元及其他结构形成十分密切的并列关系.结论:臂旁核内的突触并列结构可能是一氧化氮发挥有效生物信使与信息分子作用的结构基础.

    作者:肖明;丁炯;左国平;戴晓章 刊期: 2002年第04期

  • 转化生长因子在人膜增生性肾小球肾炎中蛋白和mRNA基因表达

    原发性肾小球肾炎是危害人类健康的慢性病、多发病,有多种病理类型.其中,膜增生性肾小球肾炎( membranoproliferative glomerulonephritis)可发生于儿童和成人,预后较差,50%的病例在10年内出现慢性肾功能衰竭.因此,早期预测并采取措施阻止其硬化的发生和进展,是当今肾脏病研究、治疗的重要课题.

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  • 心脏血液流通标本的制作方法

    心脏的血流在解剖学教学中较难理解.为配合教学,使学生能在实物上加深对心脏血液流通的理解和记忆,我们制作了心脏血液流通标本,受到了教师和同学们的赞誉.

    作者:张蓓;赵琛;杨成杰;贾方华 刊期: 2002年第04期

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