学术投稿

地高辛标记的cDNA探针检测 IL-6mRNA表达的方法

姜蓉;王莎莉;王亚平;郑敏;王勇

关键词:地高辛, 标记, 探针检测, 基因转录水平, 基因表达与调控, 原位杂交技术, 血小板减少症, 白细胞减少症, 肿瘤转移, 治疗, 异常表达, 细胞因子, 细胞培养, 细胞分泌, 随机引物, 实验技术, 抗白血病, 基础, 活性检测, 核酸分子
摘要:IL-6(interleukin-6)是一种由多种细胞分泌的细胞因子,在血液病及心、脑疾病时有异常表达.IL-6被认为是目前治疗各种血小板减少症的佳药物,在治疗白细胞减少症及抗白血病、抑制肿瘤转移及骨髓移植方面也有重要作用.迄今,IL-6的检测多采用以细胞培养为基础的生物学活性检测,该方法不仅难以反映IL-6基因转录水平,而且特异性和灵敏度均受到限制.本文采用随机引物法对人IL-6cDNA探针进行地高辛标记,核酸分子原位杂交技术,建立了在转录水平上直观检测IL-6mRNA表达的实验技术,为研究IL-6的基因表达与调控奠定了基础.
解剖学杂志相关文献
  • 扬子鳄胆囊的组织学研究

    目的:通过对扬子鳄胆囊组织结构的观察,探讨其胆囊的功能.材料与方法:用组织学及细胞化学染色法,在光镜和电镜下对4例成年扬子鳄胆囊进行了观察.结果:胆囊及胆囊管壁均由粘膜层、粘膜下层、肌层及浆膜层组成.胆囊粘膜表面较平整,粘膜上皮由单层高柱状细胞构成,细胞中含大量透明的分泌颗粒,PAS反应呈强阳性.胆囊管粘膜具许多规则的皱襞,粘膜上皮由单层柱状细胞构成,细胞顶部PAS反应阳性并含少数透明的分泌颗粒,粘膜下层有大量色素沉积.结论:扬子鳄胆囊及胆囊管除吸收作用外,还能分泌粘液.

    作者:华田苗;陈士超;陈壁辉;汪仁平;王朝林 刊期: 2001年第02期

  • 配色硅玻璃胶在心肺肝等多管道铸型标本中的应用

    作为建筑和装饰材料用的硅玻璃胶,已有作者将其应用于支气管树、内耳以及心肺等单一管道铸型,具有成型快、铸型饱满、收缩率低(0.5%)、韧性好等特点[1-5].但硅玻璃胶铸型标本的支撑力较差,往往不能维持标本的自然形态,又因采用原色灌注或铸型后上色,而大大地影响了其在某些铸型标本尤其是在多管道铸型中的应用,为此,我们改进了操作方法,将硅玻璃胶配成各种颜色,结合过氯乙烯、自凝牙托材料等填充剂的性能特点,多种填充剂配合使用,收到了很好的效果,铸型标本既有弹性和韧性,也有刚性.

    作者:石瑾;李忠华;王兴海;傅群武;刘畅;洪辉文;黄铁牛 刊期: 2001年第02期

  • 踝、距下关节外侧韧带的计算机三维重建

    目的:对踝、距下关节外侧韧带进行计算机三维重建.方法:用生物塑化技术制作1.2mm厚的薄层断面标本,在SGI工作站上,对踝、距下关节骨骼及外侧区韧带进行了三维重建.结果:重建结构均能单独显示、任意搭配显示或总体显示,可在三维空间位置上绕任意轴旋转任意角度,并且,所有结构在任意方向上的径线和角度,均可适时测量.结论:由于采用了先进的的断面标本制作技术和contours+marching cubes算法,较之以往的三维重建研究,图像显示效果更好,较清晰地反映了各结构的解剖关系.

    作者:沙勇;张绍祥;刘正津;谭立文;王欲;邓俊辉;唐泽圣 刊期: 2001年第02期

  • 大鼠颈椎关节突关节神经的来源--HRP逆行追踪法

    目的:研究交感神经与支配颈椎关节突关节的初级感觉神经元分支的关系,探讨椎孔外颈神经受压产生颈肩痛和头面部症状的机制.方法:选用8只Wistar大白鼠,右侧为实验侧,左侧对照,用微量注射器在右侧C5/C6颈椎关节突关节囊上注射30%HRP 5μl,对照侧注射0.9%的生理盐水5μl作为对照.动物存活48小时后经升主动脉灌流杀死,切取双侧C1~T1颈部脊神经节(Dorsal root ganglion,DRG)、双侧颈交感神经节和双侧三叉神经节,冰冻切片后利用TMB法进行显色反应,观察切片内HRP标记细胞的情况,并应用图像分析系统对实验侧DRG和交感神经节内标记细胞进行分类和计数.结果:颈中、下交感神经节和C5~C7DRG内发现HRP标记细胞,标记细胞以中型和小型细胞为主,其中颈中神经节和C6DRG内标记细胞的平均面积和及平均光密度较高(P<0.01),而对照侧和双侧三叉神经节未发现标记细胞.结论:颈椎关节突关节主要受相邻三条颈神经的感觉支和颈交感神经分支支配,可能与椎孔外颈神经卡压产生颈肩痛及头面部症状有关.

    作者:王金武;陈德松;王劼;方有生;顾玉东 刊期: 2001年第02期

  • 血压不稳定引起的大鼠血管重构

    目的:观察去窦弓神经大鼠引起的血管重构.方法:10周龄SD大鼠行去窦弓神经术或假手术,术后4、8、16和32周采用组织病理学和计算机图像分析技术对大鼠各级动脉连续切片进行观察和比较.结果:与假手术组相比,去窦弓神经大鼠大动脉的重构主要以血管中层平滑肌细胞肥大和基质改变为主;中动脉的重构在血管中层平滑肌细胞肥大的同时可能有轻度的增生;小动脉主要以血管平滑肌细胞增生为主.结论:大鼠去窦弓神经后各级动脉均可发生重构.

    作者:陶霞;张树辉;缪朝玉;楚正绪;苏定冯 刊期: 2001年第02期

  • 不同免疫状态下穹窿下器的一氧化氮合酶细胞的变化

    目的:实验通过对不同免疫状态下的穹窿下器处的一氧化氮合酶细胞变化的研究,以期证明穹窿下器可能参与脑内的免疫调节.方法:应用还原型尼克酰胺腺瞟呤二核苷酸脱氢酶组化方法.结果:(1)穹窿下器的一氧化氮合酶阳性细胞的面密度值较高,明显高于一般脑区;(2)一氧化氮合酶细胞的表达即可随着大肠杆菌内毒素剂量的增大而增多,也可随着地塞米松剂量的增大而增多.结论:提示穹窿下器可能为血携免疫信息进入脑内的部位之一;一氧化氮可能是脑内免疫状态的双向调节介质.

    作者:朱望东;马常升;曹翠丽;扬天祝 刊期: 2001年第02期

  • 经颈前路螺钉内固定治疗齿突骨折的应用解剖

    目的:通过齿突的观测,为颈前路螺钉直接内固定治疗齿突骨折提供应用解剖学依据.方法:测量50例枢椎干燥标本的枢椎的高度、齿突基底部的外径和基底部皮质厚度.结果:枢椎的高度为38.32±2.11mm,齿突基底部横径和矢径分别为10.51±0.83mm和11.65±0.92mm,齿突基底部前、后及左、右侧的皮质厚度分别为1.62±0.42mm、1.55±0.31mm、1.91±0.23mm和2.16±0.24mm.结论:96%齿突不适合两枚直径3.5mm的螺钉固定,建议用直径4.5mm螺钉以35~45mmm的深度和后倾10°角度固定.

    作者:章军辉;宋跃华 刊期: 2001年第02期

  • 家猪房室结组织学观察和定量分析

    目的:研究家猪房室结的组织学和细胞特征,为探讨房室结的传导和心律失常发生机制提供解剖学资料.方法:利用家猪含房室结组织块的连续切片,光镜观测和图像分析.结果:家猪房室结位于冠状窦口前方,大小为7.02×2.65×1.29mm3,形态前后径略长的铁饼形,传导细胞分两类:(1)心肌样细胞,此类细胞多位于结上部和前部;(2)典型的移行细胞,这种细胞多位于结的后部和下部.图像分析表明:心肌样细胞>一般心肌细胞>T细胞.有2例的房室结左前方存在副房室结.结论:家猪房室结的位置比其它哺乳动物低;结上部和前部细胞主要为心肌样细胞,典型的P细胞少见,纤维细胞明显多于传导细胞.

    作者:郭志坤;徐振平;赵炳泉 刊期: 2001年第02期

  • 人体头面部测量项目相关分析

    目的:研究人头面部测量项目之间的内在关系.方法:利用宁夏回族群体体质调查资料,对人类头面部16项测量项目进行了相关分析.结果:(1)头长与头水平围、额小宽、两眼外角宽、形态面高与容貌面高相关;(2)头水平围与头面部很多项目都相关;(3)头面部及五官的宽度项目彼此间密切相关,而与高度项目相关不显著;(4)头面部及五官的高度项目彼此间存在一定程度的相关.(5)头长与头宽之间、鼻高与鼻宽之间并不相关.结论:人类头面部测量项目间相关较为密切.与男性相比,女性头面部项目间相关更为多见.

    作者:栗淑媛;郑连斌;陆舜华;李咏兰 刊期: 2001年第02期

  • 地高辛标记的cDNA探针检测 IL-6mRNA表达的方法

    IL-6(interleukin-6)是一种由多种细胞分泌的细胞因子,在血液病及心、脑疾病时有异常表达.IL-6被认为是目前治疗各种血小板减少症的佳药物,在治疗白细胞减少症及抗白血病、抑制肿瘤转移及骨髓移植方面也有重要作用.迄今,IL-6的检测多采用以细胞培养为基础的生物学活性检测,该方法不仅难以反映IL-6基因转录水平,而且特异性和灵敏度均受到限制.本文采用随机引物法对人IL-6cDNA探针进行地高辛标记,核酸分子原位杂交技术,建立了在转录水平上直观检测IL-6mRNA表达的实验技术,为研究IL-6的基因表达与调控奠定了基础.

    作者:姜蓉;王莎莉;王亚平;郑敏;王勇 刊期: 2001年第02期

  • 大鼠腮腺内神经肽Y免疫组织化学观察

    目的:观察大鼠腮腺内神经肽Y的分布.方法:免疫组织化学ABC方法.结果:腮腺纹状管和小叶间导管上皮细胞呈神经肽Y免疫反应阳性,免疫反应物分布于胞质,胞核为阴性反应.结论:大鼠腮腺导管上皮细胞内含有神经肽Y,其存在对调节腮腺分泌活动及局部血流具有一定意义.

    作者:贾雪梅;陈晓宇;齐威琴 刊期: 2001年第02期

  • 神经生长因子/胶源性神经营养因子基因修饰神经前体细胞单独和联合移植促进阿尔茨海默病模型鼠海马胆碱能纤维网的重建

    目的:观察神经生长因子(Nerve growthfactor,NGF)/胶源性神经营养因子(Glial oell line-derived neurotrophicfactor,GDNF)基因修饰神经前体细胞(Neural progenitor cell,NPC)单独和联合移植对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型鼠海马胆碱能纤维网的促重建作用.方法:将NGF/GDNF基因修饰的NPC单独和联合移植入FF切断的大鼠侧脑室内.移植后三周取海马切片进行AchE纤维组织化学染色.结果:CA1区和齿状回的NGF组、GDNF组和NGF+GDNF组的AchE纤维数分别为32%和50%、18%和24%、24%和58%,明显高于损伤组(4%和6%)和NPC组(7%和9%),P均<0.01;NGF组也高于GDNF组(P<0.05和P<0.01).结论:NGF/GDNF基因修饰的NPC单独和联合移植均能不同程度地促进AD模型鼠海马胆碱能纤维网的重建,其中NGF组和NGF+GDNF组作用大于GDNF组.

    作者:阮奕文;王传恩;徐杰;姚志彬 刊期: 2001年第02期

  • 视网膜中央动脉和睫状后动脉的应用解剖

    目的:为视神经鞘减压术和视神经周围区手术提供视网膜中央动脉和睫状后动脉的解剖学资料.方法:采用显微解剖学技术对60侧成人视网膜中央动脉和睫状后动脉进行观察.结果:(1)视网膜中央动脉多发自眼动脉角(21.7%),内侧睫状后动脉(20.0%),眼动脉第一段(18.3%).(2)视网膜中央动脉发起后在视神经下方弯曲前行,其起始部在眶内视神经后1/3段与眼外直肌之间者占85.0%.(3)入鞘点在视神经的正下方者68.3%,内下方者占21.7%,外下方者占10.0%.结论:视网膜中央动脉及睫状后动脉的起点、走行变化较大,视神经鞘减压术和视神经周围区手术时应保护好这些动脉,以免引起视神经等结构缺血.

    作者:曹焕军;鞠学红;冷志敏;朱世杰 刊期: 2001年第02期

  • 视神经的观测

    1 材料与方法为补充国人视神经的一些解剖学数据,本文在21例(男13,女8)正常成人头颅标本上,开颅后去除大脑半球,打开眶顶,保留视神经管下壁.在10倍手术显微镜下,解剖观测了视神经眶段、视神经管段和颅段的走行、长度和外径.

    作者:纪荣明;周晓平;许家军;曹鹏;黄章翔;汪志军;张煜辉;党瑞山 刊期: 2001年第02期

  • 嗅神经、嗅球和嗅束的应用解剖

    目的:填补国人嗅神经、嗅球和嗅束的形态学资料,为鼻腔顶、颅前窝手术提供保护病人嗅觉功能的解剖学依据.材料和方法:正常成人头颅标本,在手术显微镜下解剖观测嗅神经、嗅球和嗅束.结果:上鼻甲内侧面的嗅丝密度高于鼻中隔上部.上鼻甲外侧列嗅丝数6~12条.硬膜、蛛网膜包裹嗅丝至鼻腔顶部呈囊状者为10%.嗅球前端距大脑额极19.33mm,嗅球中部、嗅束中部、嗅束后端的内侧缘距大脑眶面内侧缘依次为3.64mm、6.58mm、8.96 mm.结论:提供国人嗅神经、嗅球和嗅束的一些解剖学数据,提示鼻腔或经鼻腔至颅前窝人路的手术,应尽量保护上鼻甲内侧面粘膜,应在一定范围内向上轻拉额叶眶面,保护嗅球和嗅束.

    作者:纪荣明;周晓平;许家军;张煜辉;曹鹏;黄章翔;汪志军;程林发;党瑞山 刊期: 2001年第02期

  • 无心畸胎一例

    作者在收集胚胎标本时,发现一例无头颈畸胎,胎龄约5个月,女性,体重310 g,体长190 mm伴随孪生的另一个正常胎儿,女性,体重410 g,体长260 mm,发育良好.1、外形特征胎儿无头颈,全身皮肤呈水肿状态,在胸的上部正中,相当于颈部的部位,有5 mm×5 mm呈漏斗形的凹窝,窝深8 mm,表面有长短不一的四片皮瓣,长的皮瓣6mm,凹窝底与胸膜腔不相通.左、右上肢长均为80mm,臂、前臂比例不正常,臂长50 mm,前臂长20 mm,手掌比例小,左、右手各只有4指,手指发育异常,呈指芽状.左、右下肢各长为90 mm,大、小腿的发充育情况极不相称,大腿相对粗大,长约50 mm,小腿上粗下细,长约30mm,两小腿呈内收状.腹部有20mm×20mm的脐疝

    作者:王一飞 刊期: 2001年第02期

  • 血管壁切应力变化对动脉内皮细胞间连接的影响

    目的:探讨动脉血流受阻后血管壁切应力变化对动脉内皮细胞间连接的影响.方法:60只实验兔建立颈总动脉血流减少模型,在术后0至30天8个不同时相点,制作血流减小后的颈总动脉超薄切片,透射电镜下观察内皮细胞间连接和细胞形态学变化.结果:动脉内皮细胞间连接结构及稳定性随血管壁切应力的变化而发生相应改变.3天后,在部分细胞间近腔面出现间隙;细胞间紧密连接不象正常对照那样完好而致密,胞质内未见微丝附着;可见部分动脉壁内皮细胞脱离基底膜或完全脱落入管腔.在血管壁切应力递增阶段,近腔面内皮细胞间隙消失,可见窄而短的闭锁带.结论:血管壁切应力的降低可导致动脉内皮细胞间连接结构发生改变,细胞稳定性减小.提示低血流的切应力变化可能破坏动脉内皮细胞屏障的完整性.

    作者:陈卫军;应大君 刊期: 2001年第02期

  • 桡骨下端骺线与骺软骨板的观测

    为积累国人桡骨下端骨成熟情况的年龄变化资料,作者在成都地区拍摄的108个正常人左侧手腕部后前位X线片上,对桡骨下端的骺线与骺软骨板进行了观测.结果:1.骺软骨板完整,即尚未形成骺线者,男:18岁15.38%,17岁46.43%;女:18岁4.17%,17岁6.67%.已形成骺线者,男:18岁65.39%,17岁28.57%;女性:18岁91.67%,17岁80.00%.2.全部骺线的内侧端都是位于桡骨的尺切迹关节面内.3.骺线至桡骨腕关节面的垂直距离,男平均为7.05mm,女为5.88mm.4.同性别的18岁组与17岁组比较,各项测量结果均无显著性差异(P>0.05);男和女比较,各项测量结果均有高度显著性差异(P<0.005),且都是男大于女.

    作者:张光鹏;伍家农;李瑞祥 刊期: 2001年第02期

  • 实验性隐睾术后大鼠睾丸生精上皮酶的动态变化

    目的:研究热作用对睾丸生精过程影响中AKP、ACP和SDH活性的变化,探讨其生物学意义,为男性抗生育提供形态学资料.方法:人工隐睾术后1~70天取出大鼠睾丸,冰冻切片,显示AKP、ACP和SDH活性,光镜观察.结果:术后曲细精管界膜AKP活性减弱,直到晚期仍较弱;支持细胞术后1~10天酶增强,随后减弱,50天始为微弱反应;各级生精细胞反应不一.术后界膜ACP阴性;支持细胞酶增强,晚期仍较强;生精细胞酶反应不一.术后界膜SDH为阳性;支持细胞早期反应较强,3天始减弱,到晚期仍较弱;生精细胞酶减弱,15天始为阴性.结论:隐睾术后热作用影响生精过程,使AKP、ACP和SDH有明显变化,因各级生精细胞对热作用的反应性与耐受性不同,使以上三种酶反应强弱不一.

    作者:高佩安;孟文;王新成;李亚鲁 刊期: 2001年第02期

  • 支气管肺段的分色铸型法

    支气管肺段铸型标本的分色显示多采用按段喷染法制作(李忠华,人体铸型标本的设计和制作,华南理工大学出版社,1992.64~65).我们在对支气管肺段铸型标本的研制中,采用了按段分色灌注铸型法.1 制作器械和材料输液管、塑料注射器、手术用小圆针和1号细丝线、血管钳等器械;自凝牙托粉、自凝牙托水、邻苯二甲酸二丁(辛)酯、5~10种色的油画颜料及502胶等材料.

    作者:邵正仁;陈士文;訾刚;王小标 刊期: 2001年第02期

解剖学杂志

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